免疫定性实验性能验证

免疫定性实验

性能验证比对性能验证术语与定义概述目录概述免疫定性检验1、定义：免疫检验只提供两种反应结果的检测方法，即反应/无反应、阳性/阴性或者是/否的实验。2、共同特点：阳性结果只说明分析信号超过了分析阈值（检出限）或临界值（临界值的设定给出简要的敏感性和特异性组合），阴性结果则相反。

3、类型：纯定性免疫检验半定量（滴度）的免疫检验以定量方式报告定性结果的免疫检验4、主要检测项目：ELISA、免疫组化、自身免疫抗体常用的如间接免疫荧光法（IIF）、免疫印迹法（Western-blot或LIA-ANAs)、酶免疫斑点法、部分化学发光等实验。有关术语和定义1、5%95%浓度区间(C5C95interval)临界值附近的分析物浓度，在此区间之外的检测到的浓度结果始终为阴性（浓度<C5）或始终为阳性（浓度>C95）。(注：C5即仅有5%被检样本可被判断为阳性时的分析物浓度，C95即有95%被检样本可被判断为阳性时的分析物浓度。）2、诊断准确度标准是使用某一个/一类方法来判断待研究特性存在与否的当前最佳可用标准。（这类方法可以是实验室检查、影像学检测、病理学检查、随访信息在内的临床信息。）1）随着分析系统的发展，诊断准确度标准可以发生改变。2）诊断准确度标准不考虑候选方法的结果。3）诊断准确度标准可以评估指定方法组合的综合积分，进行最终的阳性/阴性分类3、检测限：由给定测量程序得到的测得量值，对于此值，在给定声称物质中存在某成分的误判概率为α时，声称不存在该成分的误判概率为β。【术语“分析灵敏度”有时代表检测限，但这样的用法现在不鼓励】。

检出限主要包括：检测低限：是具有定性含义的检测低限(lowerlimitofdetection，LLD)。是基于零浓度基础上，用于区分从无到有的分析能力，即用于评价一个检测系统测定原本体内不存在的物质的分析能力。如一些病毒和药物浓度的测定。生物检测限：是具有定量含义的生物检测限，它更真实地反映实际检测限浓度水平样本的不确定度。功能灵敏度：功能灵敏度是反映方法能可靠测定的最低浓度，对肿瘤标志物等检测有重要意义。4、临界值：

鉴别样品，作为判断特定疾病、状态或被测量存在或不存在的界限的量值。5、分析灵敏度：

测量示值变化除以相应的被测量值变化所得的商（有的定义为：检测系统可检测出的最低分析物浓度）6、分析特异性：测量系统的能力。用指定的测量程序，对一个或多个被测量给出的测量结果互不依赖也不依赖于接受测量的系统中的任何其它量。

7、诊断灵敏度：

体外诊断检验程序可以识别与特定疾病或状态相关的目标标志物存在的能力（在目标标志物已知存在的样品中也定义为阳性百分数）。诊断灵敏度=100×TP/（TP+FN）

TP:真阳性值数

FN:假阴性值数8、诊断特异性：体外诊断检验程序可以识别特定疾病或状态相关的目标标志物不存在的能力。诊断特异性=100×TN/（TN+FP）

TN:真阴性值数

FP:假阳性值数9、测量重复性（批内重复性试验）在一组测量条件下的测量精密度，包括相同测量程序、相同操作者、相同测量系统、相同操作条件和相同地点，并且在短时间段内对同一或相似被测对象重复测量。10、测量再现性（日内重复性试验）在包括了不同地点、不同操作者、不同测量系统的测量条件下对同一或相似被测对象重复测量的测量精密度。11、中间测量精密度（天间重复性试验）在一组测量条件下的测量精密度，这些条件包括相同的测量程序、相同的地点并且对相同或相似的被测对象在一长时间段内的重复测量，但可包含其它相关条件的改变。12、预测值亦称预告值，它是表示试验能作出正确判断的概率。有阳性预测值和阴性预测值之分。

阳性预测值：是指真阳性人数占试验结果阳性人数的百分比，表示试验结果阳性者属于真病例的概率。阳性预测值=真阳性／（真阳性十假阳性）×100%

阴性预测值：是指真阴性人数占试验结果阴性人数的百分比，表示试验结果阴性者属于非病例的概率。阴性预测值=真阴性／（真阴性十假阴性）×100%13、似然比(LR)表达的是患某种疾病的患者所测定不同结果范围中，患该病与不患该病的比值。在只有阳性、阴性结果时，一般分阳性似然比及阴性似然比两种。

阳性似然比：真阳性率(TPR)与假阳性率(FPR)的比值即为阳性似然比(+LR)。可用以描述当某就诊者的该诊断性试验结果为阳性时，其患病与不患病的机会比。显然阳性似然比的值越高，检验结果阳性时，诊断为某病的概率越大，该检测方法确诊疾病的能力就越强。其阳性似然比的计算公式为：阳性似然比=真阳性率／假阳性率=灵敏度／（1-特异度）阴性似然比：假阴性率(FNR)与真阴性率(TNR)的比值即为阴性似然比(-LR)。可用以描述当某就诊者的该诊断性试验结果为阴性时，其患病与不患病的机会比。显然阴性似然比越小，则检验结果阴性时，患某病的概率越小，该检测方法排除疾病的能力就越好。其阴性似然比的计算公式为：阴性似然比=假阴性率／真阴性率=（1-灵敏度）／特异度性能验证实验室进行性能验证的时机新检验程序常规应用之前任何严重影响检验程序分析性能的情况发生后，仪器启用前（包括但不限于仪器主要部件故障、搬迁、设施和环境的严重失控等）任一要素发生变更（如试剂升级、仪器更新、校准品溯源性改变等）常规应用期间，定期对检验程序分析性能进行评审性能验证的合格标准及验证人员试剂盒说明书指标（先决条件！）国际和／或国内标准性能实验验证只能由本实验室人员在自己的场地、使用自己的检测系统进行，厂家的数据、外单位的实验室测定结果、学术刊物发表论文结论、科技成果等均不能替代，只可做参考。评价前的准备实验室工作人员的培训熟悉待评价的试剂或系统掌握样本和试剂的处理和存储过程按厂商的要求进行，注意基质效应定性实验需进行阴性和阳性质控物测定定性试验性能验证的主要内容性能验证指标的选择应满足该项目的预期用途，临床免疫学定性检验程序的分析性能参数一般包括：符合率、精密度（重复性）、检出限、临界值、抗干扰能力、血清与血浆结果一致性等。实验室应根据不同检验项目的预期用途，选择对检验结果质量有重要影响的参数进行验证。

目前行业内对检验项目性能验证及其临床用途均有要求。如原卫生部《医疗机构临床实验室管理办法》（2章7条）规定“医疗机构临床实验室提供的临床检验服务应当满足临床工作的需要”。2011版三级综合医院评审标准中“临床检验管理与持续改进”的4．16．1．3（B）规定应对检验项目“进行恰当的方法学验证以保证准确度、精密度、灵敏度、线性范围、干扰及参考范围设定等各项技术参数均能符合临床使用需求”。1、符合率

——（1）诊断符合率验证

1)验证要求：

当诊断和被检测物的结果明确（即用金标准进行检测，且满足诊断准确度标准时），可采用评估诊断灵敏度和诊断特异性的方法来验证诊断符合率。1、符合率

——（1）诊断符合率验证

2)验证方案：当诊断和被检物结果明确时，选取：20份阴性样本（包含至少10份其他标志物阳性的样本）20份阳性样本（包含至少10份弱阳性样本，1份极高值阳性样本）注：弱阳性样本浓度在CUT-OFF值和2-4倍CUT-OFF之间

随机盲号法重新分号，检测样本，将所有检测结果汇总入表。

1、符合率——（1）诊断符合率验证候选实验金标准（诊断准确度标准）疾病非疾病a(+，阳性)b(+，阳性)a+bc(-，阴性)d(-，阴性)c+dn1n2n诊断符合率计算：诊断灵敏度=[a/n1]×100%诊断特异性=[d/n2]×100%诊断符合率=[（a+d）/n]×100%1、符合率

——（1）诊断符合率验证

3)可接受标准：

通过验证——实验室计算得出的诊断灵敏度、诊断特异性和诊断符合率不低于厂商检验方法声明；

未通过验证——低于厂商检验方法声明，应寻找原因或更换检验方法。1、符合率

——（2）方法符合率验证临床免疫学定性检验程序当诊断准确度标准不明确时，可采用评估方法符合率的方式来实现符合率的验证。

包括：1、用候选方法评估已知能力验证或室间质评的样本；2、用不同方法学或/和相同方法学在不同实验室之间的比对。

1、符合率

——（2）方法符合率验证

1)验证要求：优先选用符合以下要求的经CNAS认可的医学实验室的检测方法：

经验证性能符合设定标准的参比系统（在用检测方法）；

日常室内质控、室间质评/能力验证合格的在用检测方法。1、符合率

——（2）方法符合率验证

2)验证方案：选取：10份阴性样本（包含至少5份其他标志物阳性的样本）10份阳性样本（包含至少5份弱阳性样本，1份极高值阳性样本）

注：弱阳性样本浓度在CUT-OFF值和2-4倍CUT-OFF之间

共20份样本，随机每4份分成一组。采用参比方法和候选方法均每天按照患者样本检测程序进行平行检测一组样本。将所有检测结果汇总入表。

1、符合率——（2）方法符合率验证候选方法参比方法（非诊断准确度标准）疾病非疾病a(+，阳性)b(+，阳性)a+bc(-，阴性)d(-，阴性)c+dn1n2n阳性符合率=[a/n1]×100%阴性符合率=[d/n2]×100%总符合率=[(a+d)/n]×100%阳性似然比=阳性符合率/（1-阴性符合率）阴性似然比=（1-阳性符合率）/阴性符合率1、符合率

——（2）方法符合率验证

3)可接受标准：为所用厂商检验方法（候选方法）标准。

若无可用的厂商标准时，可根据实验室检测方法的预期用途制定实验室验证可接受标准。Anti-HBe符合率验证报告1.目的评价目前实验室Anti-HBe检测系统符合率。2.评价方案随机抽取20份已知阳性和20份已知阴性的样本，i2000SR化学发光仪检测结果（A）和STAR&FAME全自动酶免疫分析仪ELISA检测结果（B）比较,分别计算阳性符合率和阴性符合率。阴性符合率（%）=被测试剂盒测定真阴性数/阴性数*100%，阳性符合率（%）=被测试剂盒测定真阳性数/阳性数*100%。3.评价标准

阴性符合率≥80%，阳性符合率≥80%。4.测试仪器及试剂项目Anti-HBeTP浓度单位S/CO测试日期2016.12.16仪器I2000SR仪器编号ISR53465质控情况良好试剂厂家雅培试剂批号64013LI00有效期2017.02.17定标品厂家雅培定标品批号61375LIOO有效期2017.04.21样本来源病人血清比对仪器STAR&FAME全自动酶免分析仪比对方法ELISA5.测试结果及评价标本检测结果A检测结果B符合性标本检测结果A检测结果B符合性10.1++符合212.87--符合20.1++符合2231.87--符合30.1++符合232.98--符合40.1++符合241.87--符合50.1++符合252.86--符合60.1++符合2649.43--符合70.1++符合271.90--符合80.1++符合283.12--符合90.1++符合292.53--符合100.1++符合301.64--符合110.1++符合313.26--符合120.1++符合3212.52--符合130.1++符合3311.26--符合140.1++符合341.64--符合150.1++符合352.09--符合160.1++符合362.34--符合170.1++符合3758.31--符合180.1++符合381.57--符合190.1++符合392.42--符合200.1++符合401.84--符合阴性符合率20/20=100%阳性符合率20/20=100%6.结论

阴性符合率=100%≥80%，合格；阳性符合率=100%≥80%，合格。评价者：

日期：

审核者：

日期：

2、精密度（重复性）

临床免疫学定性检验程序若以量值或数值形式表达定性结果，精密度验证方法可参照CNAS-GL037《临床化学定量检验程序性能验证指南》。1）验证要求：用于验证的样本应是临床标本，如使用质控品则应具有很好的稳定性和均一性。

样本浓度应包括阴性、弱阳性和阳性水平。2、精密度（重复性）2）验证方案：（检验程序以量值或数值形式表达定性结果的验证方法）a）样本：

阴性样本2份（至少1份其他标志物阳性）样本

阳性样本3份（包含至少1份浓度在cut-off值和2-4倍cut-off值之间的弱阳性，1份极高值阳性）样本

共5份样本，按照患者样本检测程序进行检测。b）验证过程：阳性样本参照CNAS-CL02-GL037《临床化学定量检验程序性能验证指南》。阴性标本跟随阳性样本同时检测。2、精密度（重复性）3）可接受标准：为所用厂商检验方法声明的标准。

若无可用的厂商标准时，实验室可根据临床诊疗的质量要求确定可接受标准。定性实验重复性验证纯定性实验重复性验证1）目的

提供样本浓度接近临界值时的精密度结果，用来确立被评价方法的临界值，并进一步确立临界值±20%的样本浓度范围是否在该方法临界值的95%区间内。2）步骤①先确立方法的临界值：②在临界值基础上准备出±20%浓度的样本；③样本分别测定20次，记录阴性及阳性结果数；3）结果分析3）结果分析当实验结果表明“临界值”样本的阴性结果和阳性结果不是各占50%时，原因可能是：被评估的临界值浓度不准确、结果数据不充足、方法学剂量反应曲线在临界值处是非线性的。当实验结果表明+20%浓度的样本产生阳性结果数≥95%和-20%浓度的样本产生阴性结果数都≥95%，说明临界值±20%浓度范围等于或超出临界值的95%区间。对于被测物浓度在临界值±20%浓度范围以外的样本，实验方法将给出稳定的结果。当阳性和（或）阴性结果数<95%时，应另外准备不同浓度的实验样本，重新进行评价。定量或量值化实验（如酶免、化学发光定性等）的重复性验证1）基本内容：测量重复性（批内重复性试验）测量再现性（日内重复性试验）中间精密度（日间重复性）总的不精密度2）基本方法

测量重复性（批内重复性试验）：在相同条件下（同样方法、相同试剂同样仪器、在同一实验室、由同一人操作）对同一标本在尽可能短时间内进行多次计算其均值(X)、批内标准差(s)和变异系数(CV)。

测量再现性(日内)：在一天内对一个或数个标本做数批重复测定，计算其均值（X）和日内标准差(s)。因在一天内重复测定数批，日内重复性试验所受影响因素比批内大，所得日内标准差可能比批内大一些。

中间精密度（日间）：将同一标本每天一次随机插入常规标本中测定，连续测定20个工作日，计算其均值(X)和标准差(s)。这样得到的CV值比上述批内和日内大，适用于实际工作中患者标本测定的精密度评价。总的不精密度：总的不精密度包括了日内和日间的不精密度。精密度试验标本选择标准液简便易得，可制成不同浓度，干扰因素少，可作为评价随机误差的最佳样品。冻干质控血清稳定、使用方便，适用于进行日间重复性试验。患者标本或混合血清常用于短时间内完成的试验。分析物浓度的选择-在医学上具有决定性意义的浓度水平。试验样本数量在试验周期内至少做20个样本的检测试验条件要尽量在相同的条件下。常用性能可接受性判断计算得到的标准差符合试剂盒申明的指标将计算得到的标准差与CLIA‘88规定的总允许误差进行比较，判断其不精密度是否可接受。它们应符合下列分析质量指标：

检测系统批内CV<1/4CLIA'88允许误差；检测系统日间CV<1/3CLIA'88允许误差；追求质量目标<1/6CLIA‘88允许误差。二、HBsAg批内精密度验证报告1.目的在相同检测条件下对同一待测物连续测量结果的接近程度（批内精密度），评价仪器检测系统的随机误差。2.评价方案选择高低值新鲜混合血清标本各一份，同一批次内检测20次，评价HBsAg的重复性。3.评价标准评价标准：各浓度样本重复试验CV值小于厂家声明（11.9%）。4.测试仪器及试剂项目HBsAg浓度单位

IU/ml测试日期2016.12.13仪器I2000SR仪器编号ISR53465质控情况良好试剂厂家雅培试剂批号65216FN00J有效期2017.06.09定标品厂家雅培定标品批号63564FN00有效期2017.08.26样本来源病人混合血清5.测试结果及评价Level1Level2编号测定结果编号测定结果编号测定结果编号测定结果145.781144.2410.18110.20242.561246.1620.19120.19346.531343.1630.20130.20445.341445.3440.21140.21542.561545.6350.19150.19644.141645.4260.20160.20746.571744.5370.19170.18843.311844.3180.21180.19945.361943.6590.18190.211044.462045.62100.19200.20Mean(IU/mL)44.73Mean(IU/mL)0.20SD(IU/mL)1.23SD(IU/mL)0.01CV(%)2.76%CV(%)5.11%6.结论本次实验两个浓度样本CV<11.9%，检测系统批内精密度可接受。

评价者：

日期：

审核者：

日期：

三、HBsAg中间精密度验证报告1.目的不同操作条件下，在同一仪器上运用相同检测系统对检测项目HBsAg的结果评价。2.评价方案取连续20天的室内质控值（高值、低值）计算CV、SD，评价HBsAg的中间不精密度。3.评价标准评价标准：各浓度样本重复试验CV值小于厂家声明（11.9%）。4.测试仪器及试剂项目HBsAg浓度单位

IU/ml测试日期2016.11.01仪器I2000SR仪器编号ISR53465质控情况良好试剂厂家雅培试剂批号65216FN00J有效期2017.06.09样本来源雅培定标品批号63564FN00有效期2017.08.26样本来源雅培质控品5.测试结果及评价Level1Level2编号测定结果编号测定结果编号测定结果编号测定结果10.26110.251171.8011180.0420.26120.252159.9312176.3030.24130.243165.6813182.6840.25140.244169.9414164.3850.23150.255162.4615166.5160.26160.266161.4216175.1870.23170.277175.5117166.7480.23180.238170.7418154.7490.27190.259167.8419160.52100.26200.2410160.2220163.01Mean(IU/mL)0.25Mean(IU/mL)167.78SD(IU/mL)0.01SD(IU/mL)7.40CV(%)5.27%CV(%)4.41%6.结论

本次实验两个浓度样本CV<11.9%，检测系统中间精密度可接受。

评价者：

日期：

审核者：

日期：

3、检出限1）验证要求：以下情况应进行检出限验证：所用检验程序在厂商试剂使用说明书等有检出限声明时；有标准物质时；或以定量形式表达定性结果时。

选用定值标准物质如国际参考品、国家参考品、厂商参考品进行检出限验证。3、检出限2）验证方案：使用定值标准物质的样本梯度稀释至厂商声明的检出限浓度，在不同批内对该浓度样本进行测定（如测定5天，每天测定4份样本），样本总数不得少于20个。稀释液可根据情况选用厂商提供的稀释液或阴性血清，该阴性血清除被验证的目标物必须阴性外，其对应的相关物质（如抗原或抗体）也必须阴性，且试剂说明书上申明的干扰物质必须在允许范围之内。3）可接受标准：如果≥95%的样本检出阳性，检出限验证通过。检出低限检测步骤试验样品一般制备两种不同类型的样品。

(1)空白样品：不含有待分析物的样品，常使用系列校准品中的“零标准”作为空白，理想的空白样品应和所检测的患者样本具有相同的基质。

(2)检测限样品：在空白样品中加入一定量的分析物配成检测限样品，使其浓度达预期或厂家推荐的检测限浓度，通常在预期检测限度附近制备几份不同浓度的检测限样品。测定次数通常测定10

20次，多比少好。试验时间如从空白样品的重复性了解检测低限，常做批内重复性或短期试验；如从检测限样品的重复性了解检测低限，推荐做较长时间（10天）的重复性试验来评价日间的检测性能。

结果计算与判断检测低限：更多反映空白样本测定的不确定度

95%可能性LLD=均值空白+2s空白样本

99.7%可能性LLD=均值空白+3s空白样本生物检测限：更真实反映实际检测限浓度水平样本测定的不确定度

95%可能性BLD=LLD+2s检测限样本

99.7%可能性BLD=LLD+3s检测限样本功能灵敏度：指重复测定变异系数为20%的检测限样本浓度-即在预期检测限附近的几份不同浓度样本重复性试验测定结果中，变异系数CV为20%的检测限样本浓度；或某个样本最先出现(均值-3s)大于空白样品(均值+3s)的浓度。它反映方法能可靠测定的最低浓度。一、Anti-HBe最低检出限的验证报告1.目的验证厂商提供的Anti-HBe的检出低限（厂商提供的检出底限S/CO值为1）。2.评价方案采用康彻斯坦Anti-HBe参考品作为定值样本（浓度为4NCU/ml），用生理盐水做一系列稀释（1:2,1:4,1:6,1:8,1:10），采用I2000SR全自动免疫分析仪依次检测稀释样本，选取本稀释度S/CO值大于1，但下一稀释度S/CO值小于1的稀释度，再将该稀释度样本作20次重复测试，如果95%以上S/CO值小于1，则该稀释度对应样本的浓度即为Anti-HBe的检出低限。3.评价标准以95%以上S/CO值小于1的该稀释度对应样品的浓度作为Anti-HBe的检出低限。4.测试仪器及试剂Anti-HBeTP浓度单位S/CO测试日期2016.12.16仪器I2000SR仪器编号ISR53465质控情况良好试剂厂家雅培试剂批号64013LI00有效期2017.02.17定标品厂家雅培定标品批号61375LIOO有效期2017.04.21样本来源HCV参考品。5.测试结果及评价康彻斯坦Anti-HBe参考品系列稀释OD值记录稀释度1:21:41:61:81:10浓度(NCU/ml)2.001.000.660.500.25S/CO1.451.211.120.870.49以Anti-HBe参考品1:8稀释度样品做20次重复性检测记录及评价表编号结果(S/CO)编号结果(S/CO)编号结果(S/CO)编号结果(S/CO)10.8760.78110.87160.8420.7970.83120.92170.8130.8380.81130.90180.8640.8390.85140.85190.8550.86100.82150.90200.85阳性率20/20=100%6.结论1:8稀释度样品20次重复性检测结果显示，95%以上S/CO>1，所以Anti-HBe的检出低限为0.50NCU/ml。

评价者：

日期：

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日期：4、临界值1）验证要求：依据制造商临界值确定方案进行验证对于以临界值（cutoffvalue；C50）来判断阴阳性的检测方法，应在实验室现有检测条件下，可参照WS/T505和WS/T494标准评价临界值，评价（临界值-20%）至（临界值+20%）的浓度范围是否包含于、位于或者超出这种方法的95%区间。候选方法的厂商说明书有时会指定分析物的临界值。如果有提供临界值，则在以下实验中可将其作为代替C50的近似值。如果没有提供临界值，则可以从阳性样本中进行系列稀释，并且重复检测稀释度样本，以估计产生50％阳性和50％阴性结果的浓度，对应于该稀释度浓度即为C50。4、临界值2）验证方案：a.当临界值是基于阴性样本或阴性人群确定时，选择40例健康人的新鲜血清样本，检测结果用“1/3”原则来排除离群值，即将疑似的离群数据与其相邻数据之差D除以数据全距R，若D/R≥1/3则为离群值，检测过程中将发现的离群值舍弃，并用新的健康体检人群个体代替，最终确保40例检测结果都不含有离群值。若40例样本检测均小于说明书提供临界值或仅有不多于2例样本超出说明书提供临界值，则本次验证通过。b.选择健康人和其他标志物阳性的患者新鲜血清样本各30份，分3~5批，3~5天进行检测，计算平均值M和标准差SD。临界值验证值为M+3SD，若该验证值不大于说明书提供临界值（或者在说明书提供临界值±20%内），则验证通过。4、临界值2）验证方案：c.当临界值同时基于阴性样本或阴性人群和阳性样本或阳性人群确定时，除了上述方案外，还需增加阳性样本的验证。选择弱阳性（浓度均匀分布在临界值±20%内）的新鲜血清或质控血清样本共60例，分3～5批3～5天进行检测，计算平均值M和标准差SD，临界值验证值为M-3SD。若验证值与说明书提供的临界值接近（或者在说明书提供临界值±20%内），则验证通过。4、临界值2）验证方案：d.制备足够40次重复检测的3个样本：分别为处于临界浓度、高于临界浓度20%和低于临界浓度20%的样本；重复检测样本40次，确定每一份样本结果为阳性和阴性的百分比。

临界浓度的阳性结果于（14-26）/40（35%-65%）之间，C50验证通过。当（临界浓度+20%）阳性结果≥36/40（90%），且（临界浓度-20%）阴性结果≥36/40（90%），表明（临界值-20%）至（临界值+20%）的浓度范围位于这种方法的95%区间。4、临界值2）验证方案：e.若验证不通过，实验室需根据验证的结果评估本实验室条件下，该方法的假阴性、假阳性的可能性，并结合预期用途（筛查、诊断或确认试验等），制定本实验室的复检规则。5、抗干扰能力1）验证要求：应验证与检测对象可能存在交叉反应的物质对检测的影响。应验证说明书中涉及的干扰物质对测定的影响，这些干扰物质主要包括血红蛋白、甘油三酯、胆红素和免疫球蛋白G等。对于病原体标志物检测，还应验证与检测目标物可能存在交叉反应的病原体对检测的影响，这类病原体主要是与检测目标物可能有交叉抗原、易引起相同或相似的临床症状的病原体。宜在病原体感染的医学决定水平（弱阳性）进行验证。5、抗干扰能力2）验证方案：可参照WS/T416-2013《干扰实验指南》。5、抗干扰能力3）相关物质干扰验证试验：

a）样本准备：收集目标物分别为阴性、弱阳性、阳性不同浓度的5份样本。同时收集目标物阴性的高浓度血红蛋白、高甘油三酯、高胆红素和IgG样本。

5、抗干扰能力b）抗干扰具体方案1）将收集的高浓度血红蛋白、高甘油三酯、高胆红素和IgG样本分别加至上述选取目标物分别为阴性、弱阳性、阳性不同浓度的5份样本中，使其干扰物质浓度达到厂商说明书声称的干扰浓度。2）加入干扰物质的量应小于样本量的10%（对照组加入等量的健康人阴性血清），以上干扰物浓度可在相应的分析仪上检测。3）未添加干扰物质的阴性、弱阳性、阳性不同浓度的5份样本作为对照。4）对所有样本同时进行目标物检测，每个浓度重复检测2次，计算均值并记录。c）可接受标准加干扰物质的阳性组结果和阳性对照组结果之间符合率应≥80%；添加干扰物质的阴性组和阴性对照组结果均为阴性。5、抗干扰能力4）病原体干扰验证试验：a）样本准备：收集目标物分别为阴性、弱阳性、阳性不同浓度的5份样本。同时收集与目标物可能有交叉抗原、易引起相同或相似临床症状的病原体样本（浓度为弱阳性水平）。

5、抗干扰能力b）抗干扰具体方案1）将收集与目标物可能有交叉抗原、易引起相同或相似的临床症状的病原体弱阳性样本分别加至上述选取目标物分别为阴性、弱阳性、阳性不同浓度的5份样本中。2）加入干扰物质的量应小于样本量的10%（对照组加入等量的健康人阴性血清），以上干扰物病原体弱阳性样本可在相应的分析仪上检测。3）未添加干扰物质的阴性、弱阳性、阳性不同浓度的5份样本作为对照。4）对所有样本同时进行目标物检测，记录结果。c）可接受标准：加干扰物质的阳性组结果和阳性对照组结果之间符合率应≥80%；添加干扰物质的阴性组和阴性对照组结果均为阴性。6、血浆与血清样本结果的一致性1）验证要求：对于厂商试剂说明书上可以同时使用血清或者血浆的样本，需对不同的抗凝剂的影响进行评估。2）验证方案：分别选取血清和血浆各20份样