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文档简介

四川省地方标准

《猕猴桃雄花粉脱除溃疡病菌生产技术规程》

编制说明

牵头编制单位:四川农业大学

时间:2025年2月

目录

一、工作简况 1

二、标准编制原则 3

三、主要内容及确定依据 5

四、试验验证的分析、综述报告 8

五、与有关标准的关系 15

六、与有关法律、行政法规的关系 15

七、重大分歧意见的处理经过和依据 15

八、涉及专利的有关说明 15

九、实施标准的要求和措施建议 16

十、其他应予说明的事项 16

参考文献 16

1

《猕猴桃雄花粉脱除溃疡病菌生产技术规程》

地方标准编制说明

一、工作简况

(一)任务来源

根据四川省市场监督管理局2024年8月2日发出的《关于下达2024年度地方标准制修定项目立项计划(第一批)的通知》,批准由四川农业大学牵头起草地方标准《猕猴桃雄花粉脱除溃疡病菌生产技术规程》。

(二)制定背景

自2008年起,猕猴桃逐渐成为我省扶贫的重点发展产业,种植面积逐年增大,但由丁香假单胞杆菌猕猴桃致病变种(Pseudomonassyingaepv.actinidiae,Psa)引起的猕猴桃溃疡病给该产业带来了毁灭性危害。由于猕猴桃是雌雄异株果树,雌株必需充分授粉才能保证其后续果实品质和产量,而商品化猕猴桃雄花粉所携带的Psa却是猕猴桃溃疡病大范围远距离传播的主要途径之一。我省猕猴桃花粉的生产和应用目前存在突出的问题,大多果园不按雌雄配比栽种雄株,甚至不栽培雄株,由于雄株数量不平衡或选配不适、管理不当,导致亲和性差、出粉率低、活力差而影响授粉效果;果园授粉花粉来源大多是果农自制或购买的商品花粉,自制花粉流程不规范,导致花粉质量和活力较低,而市面上销售的花粉带菌率非常高,采用携带Psa的花粉人工辅助授粉,极大地加速了溃疡病的传播。

因此合理种植以及管理果园,杀灭雄花携带的Psa,同时保持花粉活力不受影响,能够从源头对猕猴桃溃疡病的传播起到防控作用。猕猴桃花粉脱除溃

2

疡病菌Psa技术规程的建立能够完善和规范猕猴桃无菌花粉的规模化生产过

程,在全省猕猴桃花粉生产区对这一标准的推广应用,对防止猕猴桃溃疡病菌通过花粉快速传播,降低其对猕猴桃产业造成的经济损失,保证我省猕猴桃产业绿色健康发展具有重要的实践指导意义。

(三)起草过程

1.编制工作组成立、资料收集查阅与实地调研

在承担“十四五”国家重点研发计划项目“重要果树溃疡病灾变机制与综合防控技术研究”(2022YFD1400200)和四川省科技厅重点项目期间,开展溃疡病流行规律及成灾关键因子研究、四川猕猴桃溃疡病绿色防控技术体系研发的期间,积累了猕猴桃花粉的带菌、传播、脱除技术等相关数据。由四川农业大学牵头,四川省农业科学院、都江堰猕哆哆农业科技有限公司、都江堰市农业农村局、广元市农业科学研究院等单位参加,从2022年起在成都、广元、雅安、乐山、德阳、绵阳等猕猴桃栽培区与相关企业、种植户及部门开展了产业发展调研工作,通过多年技术试验,已基本解决猕猴桃雄花粉脱除溃疡病菌生产技术难题。

2.标准起草

2024年8月2日,立项通知下达后,标准编制组查阅了《农药合理使用准则》(十)(GB/T8321.10)、《农药安全使用规范总则》(NY/T1276)、《猕猴桃细菌性溃疡病防治技术规程》(DB61/T1167)、《猕猴桃主要病虫害绿色防控技术规程》(DB51/T3069-2023)等相关资料,结合国家、行业相关标准及调研了解到的猕猴桃栽培管理、生产技术和近几年编制组的研究结果等材料,形成了《猕猴桃雄花粉脱除溃疡病菌生产技术规程》标准草案。

3.形成标准初审稿

2024年8月-2024年11月,在广泛征求意见的基础上,标准编制组对标准

3

草案多次进行讨论和修改,进一步确认标准技术内容,将猕猴桃雄花粉脱除溃疡病菌生产技术规程分为术语、定义和具体实施过程等几个部分,最终形成了标准初审稿。

4.形成标准征求意见稿

于2024年12月12日邀请省内农业科研、管理生产、标准制定等方面的7位专家进行了初审,编制组再次根据初审意见进行了讨论和修改,2025年3月形成了征求意见稿。

5.形成标准评审稿

2025年4月,将征求意见稿面向省内农业科研、管理、生产等方面的专家和单位征求意见,通过修改,并对标准文本进行查重,最终形成了评审稿。

(四)起草单位及人员分工

单位名称

任务分工

参加人员

四川农业大学

牵头编写地方标准编制说明及地方标准主体,前期调研、相关试验示范整体设计

龚国淑、马苗苗、陈华保、姚凯凯、吴翠平、周佳佳

四川省农业科学院园艺研究所

花粉生产与加工、资料整理

涂美艳、何成勇、王玲莉

都江堰猕哆哆农业科技

有限公司

试验场所、原材料供应及花粉生产与加工

晏志强、雷彬

都江堰市农业农村局

前期调研、资料整理

唐合均

广元市农业科学研究院

前期调研

康超勇

二、标准编制原则

标准编制遵循“科学性、先进性、统一性、经济性、适用性、易操作性、一致性和规范性”的原则,在广泛调查研究和充分考虑种植户、企业等生产条件实际情况的前提下,通过多年的试验验证,参照国内外成熟技术和最新成果,按照GB/T1.1-2020给出的规则编写。

4

1.先进性原则

本文件的编制遵循先进性原则,结合国内国际商品猕猴桃雄花粉携带大量溃疡病菌,并造成溃疡病菌远距离传播及危害的实际情况,依据猕猴桃溃疡病现有防治技术水平,猕猴桃雄花粉生产行业发展现状及社会需求而制定,整体水平达国内领先水平。

2.科学性原则

本文件的编制遵循科学性原则。在对雄株园建设与管理、雄株生长期溃疡病防控、雄花蕾采集与杀菌处理、雄花粉生产、雄花粉质量及携带活溃疡病菌检测等做了充分调研和分析基础上,对主要内容和参数进行试验验证,参照了国内和国际相关最新标准制订。

3.合理性原则

本文件中有关雄株园建设与管理、雄株生长期溃疡病防控、雄花蕾采集与杀菌处理、雄花粉生产、雄花粉质量及携带活溃疡病菌检测技术指标的确定,是在充分分析、引用和验证的基础上,同时还充分考虑了目前现有猕猴桃雄花粉生产加工的实际情况和实际技术能力。

4.适用性原则

本文件的编制遵循适用性原则,内容便于实施,标准的制定充分考虑了猕猴桃雄花粉生产农户、企业技术操作的实际情况,在编制工作中充分征求了协会团体、生产企业、行政管理部门及科研院所的意见,确保标准要求可以有效适用于我省行业与市场现状及发展需要。

5.可操作性原则

规范的技术内容具备标准化条件,并且已有成功的应用实例,突出了技术内容的针对性和合理性,以便落实猕猴桃雄花粉脱溃疡病菌生产技术规程运行

5

管理的各个环节。

三、主要内容及确定依据

1.主要内容

本文件包括正文、4个规范性附录(附录A、附录B、附录C、附录D),其中正文分10个部分阐述了本文件的适用范围、规范性引用文件、术语和定义、雄株园建设、雄株园管理、雄株生长期溃疡病防控、猕猴桃雄花蕾采集与杀溃疡病菌处理、猕猴桃雄花粉生产、脱菌处理雄花粉质量检测等。资料性附录主要是对雄花粉质量及授粉要求、雄花粉活力检测方法、猕猴桃雄花粉带溃疡病菌(活菌)常规检测方法、PMA-PCR雄花粉带活菌检测相关资料等进行了规范。正文主要包含下列内容:

(1)雄株园建设

(2)雄株园管理

(3)雄株生长期溃疡病防控

(4)猕猴桃雄花蕾采集与杀溃疡病菌处理

(5)猕猴桃雄花粉生产

(6)脱菌处理雄花粉质量检测

(7)结果记录与资料保存

附录A雄花粉质量及授粉要求

附录B雄花粉活力检测方法

附录C猕猴桃雄花粉带溃疡病菌(活菌)常规检测方法

附录DPMA-PCR雄花粉带活菌检测相关资料

2.确定标准主要内容的依据

(1)目前市售商品花粉普遍携带Psa,传播溃疡病风险极高。迄今没有

6

关于猕猴桃雄花粉生产及脱除溃疡病菌的国家、行业和四川省地方标准。制定《猕猴桃雄花粉生产及脱除溃疡病菌技术规程》,对提高花粉质量、阻遏溃疡病菌传播、提高猕猴桃产量具有重要意义。

(2)本文件条款4是猕猴桃雄花粉生产及脱除溃疡病菌生产的基础。

生产中由于猕猴桃雄株的主要作用是提供花粉,生长特性简单,相比于雌株经济效益相对较低,定植(建园)的环境相对条件较差,长期管理粗放,加之品种老旧,导致雄株园树势总体较弱,花粉质量不高,对病菌抵抗能力较弱,雄株优良品种选择规范建园标准,保障雄花蕾质量,并能有效降低园区菌源量。

(3)本文件条款5是根据目前雄株园管理现状,参照李撵等(2024)

《猕猴桃园雄株的合理配置与科学管理》提出了雄株的冬季整形修剪、生长期科学肥水管理等关键管理措施,保证植株健康生长,获得带菌量低、优质高产的雄花蕾。

(4)本文件条款6雄株生长期溃疡病防控参照农业农村部所颁布的

“2021年猕猴桃细菌性溃疡病防控技术方案”,明确了用于猕猴桃溃疡病的化学、生物药剂,注意不同作用机理的农药交替使用和合理混用,以延缓病菌产生抗性,提高防治效果。施药浓度及方式参照药剂说明书推荐用量细致喷施(枝干、叶片、花蕾及花梗)。

(5)花粉带菌主要是由于雄花基地生产加工过程中,雄花蕾及其他部位所含病菌对其造成的污染,生产中待加工雄花蕾带菌率(Psa)往往较高,主要是因为雄花蕾采前基本不用或很少用药剂降低其表面菌源量。对于已采摘的带菌猕猴桃雄花蕾,目前也并无成熟技术可以完全杀死花蕾不同部位病菌(Psa)(不显著影响花粉活力的前提下),通过田间试验确定了雄花蕾采

7

摘前田间精准防治时间。

(6)本文件条款7考虑到雄株园田间规范化管理不能完全杀灭雄花蕾所带活菌,参考李黎等(2022)《猕猴桃花粉灭菌方法比较及对果实品质的影响》,确定了花粉加工前臭氧进一步杀灭雄花蕾表面所带活菌,在试验的基础上,明确了臭氧灭菌的方法及最佳时间。

(7)本文件条款8猕猴桃雄花粉生产中器具消毒是依据,猕猴桃雄花粉传统生产加工过程,忽略了花粉生产器具消毒的重要性,前期研究中通过对比带菌器具与无菌器具所生产花粉的带活菌情况,确定了每批花粉加工前对器具消毒的重要作用。

(8)本文件条款9依据植物样品带菌检测专业领域的基本知识和操作通行做法,参照相关文献报道,提出了所生产雄花粉质量及携带活溃疡病菌检测要求,充分保障流入市场花粉的可靠性。

(9)本文件条款10依据植物样品带菌检测专业领域的基本知识和操作通行做法进行结果记录与资料保存。实验记录应包括:样品来源、种类(品种)、采集时间、检测时间、地点和结果等,主要要有检测人员、审核人员签字。检测结果需有相关结果、数据及图片等支撑,上述材料应归档并妥善保存。

(二)与现行法律、法规、标准的关系

《猕猴桃雄花粉生产及脱除溃疡病菌技术规程》在遵守现行法律、法规的基础上,参考现有标准,结合项目组的科研试验及其成果,并经同行专家严格审查后编制完成。该规程的编制具有现实需要和科学意义,该技术规程不仅具有地方特色,同时也是对现有标准的补充和完善。

1.主要指导性标准

在技术实施过程中,关于溃疡病防治、雄花粉生产及活菌(Psa)检测等

8

主要指导标准有:

(1)GB/T2828.1-2012计数抽样检验程序(第1部分)

(2)GB/T6682-2008分析实验室用水规格和试验方法

(3)GB/T8321.10农药合理使用准则(十)

(4)DB51/T3069-2023猕猴桃主要病虫害绿色防控技术规程

四、试验验证的分析、综述报告

1.猕猴桃溃疡病是制约产业发展的重要因素

四川作为中国第二大猕猴桃种植省份,现有栽培面积75万亩,是全省巩固脱贫成果的支柱产业。伴随四川猕猴桃产业的快速发展,溃疡病在各产区普遍发生,据统计每年全省因溃疡病减产约7.5万吨,直接经济损失超9亿元。该病的病原为丁香假单胞杆菌猕猴桃致病变种(P.syingaepv.actinidiae,Psa),主要随花粉、苗木等进行远距离传播,严重制约猕猴桃产业的健康发展。

猕猴桃是雌雄异株果树,必须授粉才能结果,生产上猕猴桃园授粉主要依赖果农自制花粉或购买商品花粉进行人工辅助授粉,花粉需求量大,全省猕猴桃每年花粉用量可达15吨。四川现有雄株种植面积近1万亩,具有较大规模的雄花种植园和花粉加工企业但还没有满足四川区域的雄花粉脱除溃疡病菌的生产技术规程。目前,猕猴桃雄花粉生产与应用过程中存在的问题极为突出,由此造成的生产损失大(溃疡病传播与爆发),主要表现为建园不规范、生长期严重感染Psa,出花率低、加工制作过程对Psa把控不严、无花粉脱Psa相关规程,自制或市售商品花粉Psa带活菌率高。

2.商品花粉带菌(Psa)情况

从四川、陕西、重庆等地农户购买使用的花粉中抽检41份样品,经过

PMA-PCR活菌检测(表1),结果表明Psa阳性平均检出率为82.86%,活菌平均检出率为78.57%,带活菌率高。不同产地花粉的带菌情况表明,除来自四

9

川青川5份样品未检测出Psa外,其余来源地样品均检测出带有溃疡病菌,且带有活的Psa病原菌,活菌最高检出率为100%,表明商品花粉传播Psa潜力强,进行花粉带菌处理对于猕猴桃产业健康可持续发展至关重要。

表1不同来源商品花粉带Psa检测情况

生产日期

抽检地

数量

(份)

Psa阳性检出率(%)

Psa活菌检出率(%)

1

2021年4月

四川都江堰

5

100

80

2

2022年5月

陕西城固县

5

80

80

3

2022年4月

四川都江堰

5

100

100

4

2023年4月

四川都江堰

10

100

100

5

2022年4月

重庆黔江

5

100

100

6

2023年4月

四川旺苍

6

100

90

7

2023年4月

平均值

四川青川

5

0

82.86

0

78.57

3.雄株园发病情况与花粉原材料(花蕾)带菌的相关性

对发病程度不同的雄株园进行带活菌情况检测,从表2看出,雄花带菌率与雄株园发病率呈正相关关系,即发病率越高,雄花带菌越高,其中病株率为92.00%雄株园,花萼、花瓣、花蕊带菌率分别为84.00%、47.00%和13.00%。花萼、花瓣和花蕊的带菌率均随发病率增加而增加,其中最外侧花萼带菌率最高,花瓣带菌率次之,花蕊带菌率最低,仅病株率为92.00%雄株园花蕊检出活的溃疡病菌,为13.00%,其余低发病率雄株园花蕊未检出活菌,表明雄花蕾带菌情况与雄株园病株率相关,而雄花带菌主要体现为花萼和花瓣带菌。对雄株发病率与花蕾各部位带菌进行Person相关性分析(表3),结果发现花萼带菌与雄株发病率呈显著正相关,相关系数为0.962(P<0.05=0.033);花蕊带菌与雄株发病率呈极显著正相关,相关系数为0.994(P<0.01=0.006),该结果表明降低雄株园发病率,可有效减少雄花蕾(花萼、花蕊)的带菌率。

10

表2雄株园发病情况对花蕾带菌的影响

序号

雄株园发病与否

病株率(%)

花蕾活菌检出率(%)

花萼

花瓣

花蕊

1

发病园

92.00a

84.00a

47.0a

13.00a

2

发病园

10.00b

45.00b

5.00b

0.00b

3

无症园

0.00b

27.00c

13.00b

0.00b

4

无症园

0.00b

10.00c

5.00b

0.00b

注:表中同列不同小写字母表示各处理间存在差异显著(P<0.05);无症园指猕猴桃株株枝干、叶片及花无溃疡病典型症状。

表3雄株发病率与花蕾各部位带菌的相关系数

花瓣

花萼

花蕊

Pearson相关性

显著性(双侧)

Pearson相关性

显著性(双侧)

Pearson相关性

显著性(双侧)

病株率

0.924

0.077

0.962*

0.033

0.994**

0.006

注:*和**分别表示显著性在0.05和0.01水平下。

4.猕猴桃雄株生长期溃疡病药剂防控的效果

针对雄株园溃疡病不防治或防治不规范问题,参照农业农村部颁布的“2021年猕猴桃细菌性溃疡病防控技术方案”中所推荐的药剂,应用四川农业大学等单位研发的“猕猴桃溃疡病绿色防控技术”进行雄株园药剂防治试验,结果(表4)表明,采用溃疡病绿色防控技术后花萼、花瓣带率显著降低,其中常规管理园花萼带菌率为84.00%,花瓣带菌率为24.50%,精准施药管理园施用中生菌素后花萼、花瓣带菌率分别为3.33%和1.11%;施用四霉素后花萼、花瓣带菌率分别为6.67%和4.44%,该结果表明,精准施药管理可以有效降低花蕾不同部位带菌率。

表4雄株园依规程田间管理与普通管理花蕾带菌率

处理

中生菌素(%)

四霉素(%)

花萼

花瓣

花萼

花瓣

常规管理

84.00±5.12a

24.00±2.25a

84.00±5.12a

24.00±2.25a

依规程施药

3.33±1.00b

1.11±0.00b

6.67±0.05b

4.44±1.11b

注:常规管理指花蕾生长期不施药防治;表中同列不同小写字母表示各处理间存在差异显著(P<0.05)。

11

5.臭氧杀菌处理的作用

5.1花蕾臭氧杀菌

为避免花粉生产过程中,花萼或花瓣所含Psa对花粉污染,花粉加工前采用不同浓度臭氧对雄花蕾进一步杀灭处理。处理15-20min的结果表明(表5),当臭氧浓度为108.00mg·m-3时,花粉带活菌率为10.32%,随着臭氧浓度继续增加至320.40mg·m-3,花粉带活菌率为4.00%;当臭氧浓度为630.0mg·m-3时,花粉带活菌率为0.00%,表明浓度为630.0mg·m-3的臭氧可以有效杀灭雄花粉所携带的活Psa;当臭氧浓度为650.0mg·m-3(仪器稳定工作产生的最大浓度),处理15-20min时,花粉带活菌率为0.00%,花粉产量为5.22g/kg,花粉活力下降2.92%,与浓度为630.0mg·m-3剂量处理后效果无显著差异。当臭氧浓度为650.0mg·m-3,增加处理时间至30min,花粉带活菌率为0.00%,花粉产量为5.15g/kg,花粉活力下降10.82%,其中杀菌率和花粉产量无显著变化,花粉活力显著降低,继续增加处理时间已无实际意义。因此,雄花粉生产前

630.0-650.0mg·m-3的臭氧处理15-20min为最优处理措施。

表5不同浓度臭氧处理雄花蕾花粉杀菌效果

剂量(mg·m-3)

处理时间(min)

花粉带活菌率

(%)

花粉产量

(g/kg)

花粉活力下降(%)

108.0

15-20

10.32a

4.70a

5.48a

320.4

15-20

4.00b

5.10a

5.39a

630.0

15-20

0.00c

5.10a

2.50a

650.0

15-20

0.00c

5.22a

2.92a

650.0

30

0.00c

5.15a

10.82b

注:表中同列不同小写字母表示各处理间存在差异显著(P<0.05)

5.2花粉臭氧杀菌

对臭氧直接处理花粉灭菌效果和处理后活力影响试验,对浓度为645.55

mg·m-3的臭氧进行带菌雄花粉杀菌的结果表明(表6),相比于对照臭氧处理花粉1min后,灭菌率为35.0%,花粉活力下降7.70%;处理3min后,灭菌率为68.2%,花粉活力下降12.80%;当处理5min时,杀菌率为100.00%,但花

12

粉活力下降至30.00%以下,生产上判定该活力花粉为不合格花粉,表明再增加时间处理已对生产无参考意义。该结果表明,臭氧直接处理带菌花粉,当达到完全杀菌效果时,花粉活力不能达标,此法不可行。

表6臭氧处理时间对花粉杀菌(Psa)的影响

臭氧处理时间(min)

杀菌率(%)

花粉活力(%)

0(对照)

0.00a

50.00a

1

35.00b

42.30a

3

68.20c

37.20b

5

100.00d

26.60c

7

100.00d

18.20d

15

100.00d

0.00e

30

100.00d

0.00e

注:表中同列不同小写字母表示各处理间存在差异显著(P<0.05)

6.PMA检测活菌灵敏度

PMA对不同比例活、死菌检测结果如图1和表7所示,当活菌与死菌的比例为1:1时,PMA-PCR检测结果条带较亮,当活菌与死菌的比例为1:99时,

检测结果仅微弱可见,进一步降低活菌比例(1:999),几乎不见检测条带,当活菌与死菌比例为0:1时,检测条带完全消失,表明PMA用于检测不同比例活菌与死菌混合体系结果可靠。

比较了PMA-PCR、常规PCR、平板涂布计数法测定Psa死菌的可靠性(表9),用于检测Psa死菌的浓度为101cfu·mL-1~107cfu·mL-1,常规PCR检测的最低限度为103cfu·mL-1,而PMA-PCR与平板涂布分离均未检测出活菌,表明PMA-PCR检测技术可以有效避免死菌的检出,具有灵敏、准确的活菌检测能力。

图1不同比例活菌PMA-PCR检测结果

注:1~5依次为活菌和热致死菌按照1:1、1:9、1:99、1:999和0:1的混合体系,6为清水对

13

照。

表7不同检测方法测定Psa死菌的比较

菌液浓度/cfu·mL-1

常规PCR

PMA-PCR

平板涂布计数/cfu

107

+

-

0

106

+

-

0

105

+

-

0

104

+

-

0

103

+

-

0

102

-

-

0

101

-

-

0

注:“+”代表PCR检测结果为阳性,“-”代表PCR检测结果为阴性。

7.技术规程所生产花粉抽检情况

以市售商品花粉和常规技术生产的花粉为对照,分别对脱除溃疡病菌技术规程所生产的花粉进行抽样检测(不同处理每次抽检10份)(表8),对各处理花粉进行Psa带活菌率检测,抽检结果表明对照(市售商品花粉)活菌检出率为78.00%,常规技术生产花粉的活菌检出率为74.00%,而依规程所生产花粉的活菌检出率为0.00%,极显著小于对照和常规技术处理花粉。

对各处理花粉活性检测结果表明,对照(市售商品花粉)萌发率为68.42%,采用常规技术进行花粉生产,花粉萌发率为77.50%,采用脱除溃疡病菌技术所生产花粉的萌发率为78.43%,不同处理间花粉产量、花粉萌发率均无显著差异。该结果表明采用脱溃疡病菌技术进行花粉生产,会显著降低花粉带Psa活菌率,但不影响花粉产量及花粉活力。

表8不同处理花粉抽检情况

处理

第一批次

Psa活菌抽检率(%)

第五批次

活菌平

均检出率(%)

花粉平均萌

发率(%)

第二批次

第三批次

第四批次

依规程生产花粉

0.00

0.00

0.00

0.00

0.00

0.00a

78.43±11.45a

常规技术

80.00

80.00

60.00

100.00

50.00

74.00b

77.50±12.35a

对照(市售

商品花粉)

80.00

100.00

50.00

80.00

80.00

78.00b

68.42±10.24a

注:表中同列不同小写字母表示各处理间存在差异显著(P<0.05)

8.技术规程所生产花粉田间应用效果

为验证脱除溃疡病菌技术所生产花粉在生产中应用可靠性,本研究以市售

14

商品花粉为对照,对比了采用该技术所生产花粉的田间授粉效果。按田间常规花粉用量(20g/亩)进行授粉,不同时期统计结果表明(表9),脱除溃疡病菌技术生产花粉授粉后的田间座果率为94.55%,可溶性固形物含量、硬度及干物质含量分为14.80%、5.74kg/cm2和18.98%,平均单果重为90.42g,商品性均价为14元/kg;市售商品花粉授粉后的田间座果率为95.60%,可溶性固形物含量、硬度及干物质含量分为16.25%、5.20kg/cm2和18.45%,平均单果重为88.65g,商品性均价为14元/kg,脱除溃疡病菌技术所生产花粉授粉后对座果率、果实品质、平均单果、商品性均价均无显著影响。

表9脱溃疡病花粉田间授粉效果

处理

座果率(%)

果实品质

平均单果重

(g)

商品性

均价/(元/kg)

可溶性固形物含量(%)

硬度

(kg/cm2)

干物质含量

(%)

依规程生产花粉

96.55±7.00a

16.80±2.62a

5.74±0.95a

18.98±5.00a

90.42±15.00a

14.00

商品花粉

(对照)

95.60±5.25a

16.25±3.20a

5.20±1.24a

18.45±4.20a

88.65±14.02a

14.00

注:表中同列不同小写字母表示各处理间存在差异显著(P<0.05)

综合上述结果,猕猴桃雄花粉中Psa来源主要为花粉生产加工过程中花蕾(花萼及花瓣)表面Psa的接触污染,种植端雄株园规范建设,生长期合理整形、修剪、施肥和溃疡病防控可提高雄花蕾产量和质量,同时也可显著降低花蕾表面带菌率。花粉加工前采用浓度为630.0-650.0mg·m-3的臭氧处理15-20

min,可避免所生产雄花粉带活菌(Psa),结合PMA-PCR活菌快速检测技术保障了无菌(Psa)花粉的生产。

9.预期的经济效益、社会效益和生态效益

(1)社会效益

本文件制定发布后具有重要的社会效益,采用该技术脱除雄花粉携带溃疡病菌,有效阻断了溃疡病菌以花粉为介体进行远距离传播,避免了无菌栽培区

15

因花粉带菌而导致溃疡病严重危害的潜在风险;推动了猕猴桃雄花粉产业高质量和猕猴桃产业多元化发展进程;促进了农业标准化生产以及绿色发展,为巩固脱贫攻坚成果和助力乡村振兴做了重要贡献。

(2)经济效益

本文件的制定,为猕猴桃雄花粉生产及脱除溃疡病菌提供依据。其中雄株建设、管理,生长期溃疡病防控,雄花蕾采集与杀菌处理等措施实施提升了雄花粉产量和质量,相比于传统方法所生产的雄花粉,依规程生产花粉授粉后亩产增加30%以上,每亩4000元左右的产值。

(3)生态效益

本文件的实施,规范了猕猴桃雄株园防治措施,减少了因过量施用农药防治溃疡病而引起的水体和环境污染。同时本文件的制定,为猕猴桃雌雄株分园管理提供了科学依据,节约土地用于雌株种植,提高了单位面积的猕猴桃产量。

五、与有关标准的关系

本文件首次制订,与本行业现有的其它标准协调配套,无冲突。

六、与有关法律、行政法规的关系

本文件符合现行的法律法规要求,符合《农作物病虫害防治条例》法律、法规要求。

七、重大分歧意见的处理经过和依据

本文件在制定过程中未出现重大分歧意见。

八、涉及专利的有关说明

未发现本文件涉及专利问题。

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九、实施标准的要求和措施建议

建议标准发布后,及时组织开展宣传和培训;通过在主产区布设示范点,尤其与主要生产加工经营主体(猕猴桃雄株种植合作社及花粉生产加工企业)等合作,加大示范和宣传力度,加快推进本文件的实施。

十、其他应予说明的事项

参考文献

[1]T/DJYMHT0001-2023猕猴桃雄花粉生产与质量控制技术规程.

[2]T/DJYMHT0001-024猕猴桃雄花粉脱除溃疡病菌生产技术规程.

[3]龚国淑,李庆,张敏,等.猕猴桃病虫害原色图谱与防治技术[M].北京:科学出版社.2020.

[4]涂美艳,祝进.图说红肉猕猴桃丰产优质高效栽培技术[M].北京:中国农业科学技术出版社.2022.

[5]李黎,冯丹丹,潘慧,等.猕猴桃花粉灭菌方法比较及对果实品质的影响[J].园艺学报,2022,49(4):769-777.

[6]胡月,陈航,杨巽喆,等.酶联免疫吸附反应对猕猴桃溃疡病菌效应子Hopz5多克隆抗体的特性分析[J].生物技术通报,2018,34(1):84-89.

[7]肖妍,刘芸宏,高贵田,等.PMA-qPCR方法检测陕西猕猴桃溃疡菌优势病原菌活菌的研究[J].食品与机械,2019,35(4):48-53+59.

[8]StefaniEandGiovanardiD.DisseminationofPseudomonassyringaepv.actinidiaethroughpollenand

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