执业兽医资格考试：微生物与免疫学四色笔记

第一单元细菌的结构与生理(一)细菌的形态1.细菌的概念具有细胞壁和核质的单细胞原核细胞型微生物。无成形的细胞核，无完整的细胞器。微米为测量(二)细菌的基本结构1.细胞壁结构+菌。②磷壁酸G菌特有；其抗原性较强黏附宿主细胞。+菌类脂A(3)细胞壁的功能(4)革兰氏染色G菌+G-菌组成为脂质双层，并镶嵌有特殊功能的载体蛋白和酶类，不含胆固醇。功能①物质交换；②分泌胞外酶；③能量的产生与利用有关；④细胞生物合成的场所。由。F质粒决定细菌的致育性。R。。(三)细菌的特殊结构；。1能运动④有特异的H抗原；②性菌毛F，成分为蛋白质；与细菌的接合F质粒的转移。。(四)细菌的染色方法(1)程序草酸铵结晶紫染色1min→碘液染1min→95%乙醇脱色30s→碳酸复红1min。(2)意义鉴别细菌、选择抗菌药物。(1)抗酸染色法常用于结核杆菌、副结核杆菌的染色红色。①顺序石碳酸复红微热3—5min→3%盐酸酒精脱色→碱性美兰复红1min。(五)细菌的生长繁殖②酸碱度最适宜pH为7.2～7.6;③温度最适宜为37℃;₂;①迟缓期菌体增大，代谢活跃；分裂迟缓，细菌数增加不显著。(六)细菌的代谢(1)代谢的能量供给ATP;(2)细菌代谢活动的核心能量代谢。(3)细菌获得能量的基质糖类，贮存能量的形式高能磷酸键(ADP、ATP)。(4)细菌生物氧化的类型①发酵以有机物为受氢体。②呼吸以无机物为受氢体。其中，ab厌氧呼吸以无机物(硝酸盐、硫酸盐)为受氢体。毒素内毒素为G菌死后释放，外毒素为G'菌分泌的蛋白质。2④色素铜绿假单胞菌产绿色色素。⑤细菌素仅对近缘菌株有抗菌作用的蛋白质，如绿脓菌素。⑦维生素大肠杆菌能合成维生素B、维生素K。阳性菌产酸产气(大肠杆菌)阴性菌产酸不产气沙门氏菌肠科杆菌紫色(假单胞菌、气单胞菌)产气泡(葡萄球菌、微球菌)黑色(变形杆菌)链球菌大肠杆菌红紫色(变形杆菌)沙门菌红色(大肝杆菌、变形杆菌)红色(大肠杆菌)⑦甲基红试验(MR)产气杆菌红色(产气杆菌)大肠杆菌⑨枸橼酸盐利用试验(C)深蓝色(产气杆菌)大肠杆菌(七)细菌的人工培养1.培养基(理化性状)分为液体培养基、半固体培养基固体培养基含2%琼脂；2.培养基的分类(营养组成和用途)(1)基础培养基常用普通肉汤培养基，含蛋白胨、牛肉浸膏、NaCl、水等；常用于糖发酵试验。(2)营养培养基在基础培养基中加入葡萄糖、血液、血清、酵母浸膏等；常用血琼脂平板(链球菌)。(4)鉴别培养基加入底物及指示剂，(5)厌氧培养基(1)液体培养基生长现象①混浊生长葡萄球菌；②沉淀生长链球菌；③菌膜生长枯草杆菌。(2)半固体培养基中的生长现象沿穿刺线生长或穿刺线向四周扩散呈放射状生长。(3)固体培养基中的生长现象平板上划线后形成菌落；斜面上划线重叠形成菌苔。(一)正常菌群(1)消化道球菌、乳杆菌、棒状杆菌；①胃乳杆菌、幽门螺杆菌、八叠球菌；③小肠有消化液故细菌少；④大肠双歧菌、拟杆菌；肠球菌、大肠杆菌、乳杆菌、葡萄球菌、酵母菌；(2)呼吸道(3)泌尿生殖道3(二)细菌的致病性体(1)侵袭力②侵袭性酶。透明质酸酶、链激酶(链球菌产生)、胶原酶(梭菌、气单胞菌产)、血液凝固酶(致病葡萄菌产生)。蛋白酶细胞内逃逸(如产生过氧化氢，中和吞噬细胞中的氧自由基)。(2)毒素由G外毒素经0.3%甲醛处理，转为类毒素，刺激机体产生抗毒素；神经毒素包括破伤风毒素、肉毒毒素。②内毒素是G菌细胞壁的脂多糖，当细菌死亡后才游离出来；产生症状发热、毒血症、休克、管内凝血、出血。。②毒血症病原菌不入血，但其产生内毒素入血，引起症状。③败血症病原菌入血，并繁殖产生毒性物质，引起中毒症状(高热、皮肤黏膜淤斑、肝脾肿大)。(三)细菌的耐药性①敏感用常用剂量时，该抗菌药物治疗有效。②中介指被测菌株的MIC与该抗菌药物常用剂量所能达到的血清和组织浓度相近。③耐药指被测菌株不能被该抗菌药物常用剂量达到的血液浓度所抑制，临床治疗无效。1.样品保存液30%无菌甘油缓冲盐水(细菌)、50%无菌甘油缓冲盐水(病毒)。。。,◎高压蒸汽灭菌法(121.3℃,15~30min)是应用最广、效果最好的方法◎煮沸法100℃30min左右，2%碳酸钠提高沸点h◎紫外线265~266表面消毒(穿透力弱),空间消毒4◎氢氧化钠(烧碱)2%水溶液杀灭繁殖体和病毒，4%溶液45min杀灭芽孢。一般配成20%的石灰乳涂刷厩舍墙壁、畜栏及地面消毒。熏蒸消毒，温度应不低于15℃,相对湿度60%~80%乙醇(75%)、碘酊(2%)季铵盐类(改变细菌细胞壁或细胞膜通透性，常用浓度0.1%左右)◎球菌链球菌，α溶血(不完全溶血)、β溶血(完全溶血)、γ溶血(完全不溶血)白僵病(白僵菌、真菌、可观察到大量的菱形结晶)、质型多角体病毒(病毒、呼肠孤病毒科)、多角体病毒(病毒、杆状病毒科)◎大肠杆菌麦康凯培养基(发酵乳糖)红色菌落；伊红美蓝琼脂黑色带金属闪光的菌落；引起的常见疾病◎沙门氏菌麦康凯培养基(不发酵乳糖)无色透明菌落；专嗜性沙门氏菌、偏嗜性沙门氏菌、泛嗜性沙门氏菌(鼠伤寒沙门氏菌);引起的常见疾病巴氏杆菌科及相关属多杀性巴氏杆菌(两极着色)、引起的常见疾病生出血性败血症巴氏杆菌；牛肺疫(牛传染性胸膜肺炎)支原体猪出血性败血症(猪肺疫)巴氏杆菌；猪传染性胸膜肺炎放线杆菌◎鸭疫里氏杆菌雏鸭传染性浆膜炎；2~3周龄雏鸭；引起的疾病病理变化与禽大肠杆菌类似(三炎)◎嗜血杆菌副猪嗜血杆菌、巧克力培养基、X因子和V因子、格氏病V因子、◎布鲁氏菌人畜共患(波浪热),病原局限于腺体组织和生殖器官(赤鲜醇)、胞内菌感染、三种检测方法(首先◎支气管败血波氏菌犬传染性气管支气管炎(幼犬窝咳)和兔传染性鼻炎、麦康凯(蓝灰色)◎产单核细胞李氏杆菌4℃可生长，易污染冷藏食品，常呈V字形排列或成对出现◎炭疽芽孢杆菌菌体最大、两端平切(竹节状)、阳性、在机体内有荚膜(无芽孢),在外界有芽孢(无荚膜)、粗◎分支杆菌属结核分支杆菌、牛分支杆菌(人畜共患)、禽分支杆菌和副结核分支杆菌◎猪痢短螺旋体猪痢疾(黑痢),特征病变在大肠，暗视野显微镜观察◎支原体(霉形体)“煎荷包蛋状”、禽类慢性呼吸道病(鸡毒支原体)、猪气喘病(猪肺炎支原体)、牛传染性胸膜肺炎/牛肺疫(支原体)、山羊传染性胸膜肺炎(山羊支原体肺炎亚种)特别注意梭菌属形成芽孢，芽胞直径多大于菌体直径，使菌体呈梭状，故名“梭状芽胞杆菌”,简称梭菌；◎产气荚膜梭菌魏氏梭菌，肠毒血症和坏死性肠炎，暴烈发酵(汹涌发酵)5嗜血支原体又叫猪附红细胞体。寄生于动物红细胞表面、血浆及骨髓内，引起猪的一种以贫血、黄疸、发热为主(1)囊膜③有的囊膜表面有纤突。囊膜+纤突=表面抗原。(2)核衣壳组成ab。(1)核酸种类DNA或RNA,不可同时存在；遗传相关。(2)蛋白质病毒的主要成分。分为结构蛋白和非结构蛋白。(3)脂质与糖类来自宿主细胞。主要是磷脂，其次是胆固醇。(1)实验动物培养法；(2)鸡胚培养法最好是SPF鸡胚。(3)细胞培养法。原代细胞、二倍体细胞株传代细胞系。。等。2.包含体是某些病毒感染细胞出现的特征性的形态变化，可通过染色后在光学显微镜下检测。如氏体(狂犬病毒产生);病毒胞浆(痘病毒产生);猫头鹰眼(疱疹病毒产生)。3.空斑将病毒接种吸附于单层细胞，原先感染病毒的细胞及病毒扩散的周围细胞会形成一个近似圆形的斑点，类病毒克隆将获得的单个空斑制成悬液，梯度稀释后再做空斑，最终可获得只含一个病毒颗粒及其子代的空斑，。(1)潜伏感染病毒不复制，查不出病毒；；(3)慢发病毒感染可检出病毒；潜伏期长；症状出现逐渐加重，最后死亡；(4)迟发性临床症状的急性感染病毒复制与病程无关；不能分离出病毒。6(一)病毒的采集与准备①取适宜的组织病料、分泌物和粪便等，充分研磨，加入青链霉素，4℃冰霜处理2～4小时或过夜，离心取上②咽喉拭子即用棉试子蘸取，浸泡入含有2%犊牛血清和含青链霉素的汉格氏液中，充分涮棉试子，反复冻融(二)病毒的分离鉴定细胞培养(三)病毒感染单位的测定(1)ID₅半数感染发病(鸡胚或动物);(2)RD50体温半数反应(数)量；(四)病毒感染的血清学诊断2.血凝抑制试验(HI)(五)病毒感染的分子诊断。3.DNA芯片技术。(一)痘病毒科③核酸由DNA组成；③症状为眼结膜炎、特征性“狮子头”;体温42℃;④诊断检查感染细胞中的胞浆内包含体。(二)非洲猪瘟病毒科①有囊膜，衣壳20面体对称；基因组由单分子线状双股DNA组成；②是唯一已知核酸为DNA的虫媒病毒，由软蜱传播；③症状全身出血、呼吸障碍、神经症状；死亡率高。(三)疱疹病毒科,7；①即牛疱疹病毒1型，病毒呈球状，衣壳20面体对称，有囊膜和纤突。基因组为线状双链DNA;；。①即禽疱疹病毒2型，衣壳20面体对称，基因组为线状双股DNA;②特征导致肿瘤、外周神经肿大、两肢麻痹；③4种类型内脏型、神经型、皮肤型、眼型；④病毒不经卵传播，靶细胞为T淋巴细胞。①即禽疱疹病毒1型，有囊膜；③症状咳出血样粘液，白喉样变，发病率100%,死亡率50%。①即鸭疱疹病毒1型，只有一个血清型；②症状肠炎、脉管炎广泛局灶性坏死，产蛋率可下降25%、发病率5%～100%;。(四)腺病毒科；;④症状肝、肾、脾、肺的严重出血、坏死；康复期出现“蓝眼”;感染犬经尿、粪、唾液排毒。;③症状褪色蛋、软壳蛋，输卵管上皮细胞坏死且可见核内包涵体；④主要传染源蛋。(五)细小病毒科;③诊断可用荧光抗体检测病毒；检测血清抗体价值不大。;VP2；③特征呕吐、腹泻、白细胞减少、出血性肠炎、严重脱水；④诊断用;。4.猫泛白细胞减少症即猫瘟热，感染后5天可测到中和抗体，抗体滴度与免疫保护成正比。8①即貂细小病毒；特征急性肠炎和白细胞减少；②诊断常用HA-HI实验。;②症状慢性消耗性、超敏感性、自身免疫性疾病；③引起肝炎、关节炎、肾小球肾炎、贫血、死亡；碘凝集实验。(六)圆环病毒科;。(七)反转录病毒科形，②特征雏鸡肿瘤，病毒血症，淋巴细胞增多症；。②为慢性病毒属成员，感染率可达80%;③特征2～4月龄发生脑脊髓炎；12月龄多发性关节炎；病毒可通过吃初乳感染；,②特征发热、贫血黄疸、死亡率达80%;。(八)呼肠孤病毒科;VP2。③特征高热、舌部发绀、唇部水肿。坏疽性鼻炎；④诊断必须临床症状与病毒分离才能确认，病毒应取急性发热期的全血。①为双链RNA病毒科；无囊膜，20面体，双链双节段RNA;VP2为保护性抗原；②有两个血清型，无交叉保护，1型只感染鸡，2型无致病性；③症状3～6周龄鸡最易感；断用(十)副黏病毒科9①即禽副黏病毒1型，OIE通报疫病；③有两种纤突血凝性神经氨酸酶HN、融合蛋白F,它们的裂解与活化决定病毒的毒力；④只有一个血清型，通过⑤诊断必须作病毒分离及血清学实验；即接种鸡胚尿囊腔分离病毒，再做HI实验；当病毒对1日龄雏鸡脑内接种的致病指数ICPI>0.7,必须向OIE申报疫情。；；④症状口腔溃疡坏死，回、盲、结、直肠严重出血；⑤诊断病料接种绵羊细胞，特点是出现多核细胞；再进行病毒中和试验；；③最常见的急性型特征为双相热，且第二阶段伴有白细胞减少症；④诊断盲传数代后，可出现典型CPE出现放射状细胞及形成合胞体。(十一)弹状病毒科①病毒为子弹状，有钉状纤突，有囊膜，螺旋对称，单股分子负链单股RNA;②传播途径咬伤；④诊断需作脑组织切片，检测Negri氏包含体。；③症状40℃以上，呼吸急促，全身虚弱，发病100%,死亡10%。(十二)正黏病毒科;③为甲型流感病毒属，单负股RNA,分8个阶段，易发生抗原性漂移(基因点突变)和抗原性转移(基因重组);④有两种纤突血凝素HA和神经氨酸酶NA,HA具有血凝性和免疫原性；⑤传播野鸭；⑥诊断从泄殖腔取样，接种于尿囊腔，取尿囊液用鸡红细胞作HA-HI试验。⑦高致病性毒株的OIE标准将含有病毒的鸡胚尿囊液1:10稀释，接种4周龄鸡8只，死亡≥6只；。(十三)冠状病毒科,S；③症状1～4周龄鸡最易感，呼吸抑制，产蛋下降。形，,10②免疫特点与呼吸道冠状病毒、猫传染性腹膜炎病毒、犬冠状病毒有抗原相关性；母源IgA抗体使仔猪产生被动免疫；仔猪血清中的的体躯发痒，病程长达1~6个月，最终死亡。为甚至狂暴，病程2~3周，长者可达1年，最终死亡。诊断：用(一)猪的免疫球蛋白猪的免疫球蛋白分为IgG、IgM、IgA、IgE和IgD。猪IgG有5个亚类，包括IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3和IgG4。猪IgG是主要的血清免疫球蛋白，约占总量的85%;IgM约占12%;二聚体IgA约占血清免疫球蛋白的3%。猪有2个亚类，即IgAl和IgA2,IgAl的绞链区含12个氨基酸，而IgA2的绞链区仅由2个氨基酸构成。猪有4种同种异型，有1种同种异型。此外，新生仔猪可能有一类无轻链的5SIgG。猪与人的免疫球蛋白(二)牛的免疫球蛋白牛的免疫球蛋白分为、、、和。牛有3个亚类，即IgG1。lgG2和IgG3,IgG2可能还有IgG2a和IgG2b两个亚类。IgG1占血清的50%,也是牛奶中的主要免疫球蛋白。IgG2的水平在牛个体之间的变异很大。牛的巨噬细胞和中性粒细胞具有独特的免疫球蛋白受体，其结构与其他动物的受体不同，仅与IgG2结合。IgG2有2种同种异型(G2A1和G2A2)。IgG1有1种同种异型(G1A1)。某些牛的轻链有同种异型B1,(三)绵羊的免疫球蛋白绵羊的免疫球蛋白分为IgG、IgM、IgE和1gD。绵羊IgG有3个亚类，即IgG1、IgG2和IgG3,IgGla可能属于同种异型。有2个亚类(IgA1和IgA2)。(四)马的免疫球蛋白和IgG1(IgGa)IgG2(IgGc)、IgG4(1gGb)、IgG5、IgG6|lgG(BT)]和IgG7。IgG3曾被命名为IgG(T),最初被认为是IgA的同源物，T是指(五)鸡的免疫球蛋白鸡的免疫球蛋白有、、IgA,无IgE,已鉴定出禽类的同源区，但未确证的存在。鸡性质独特，被称为IgY,功能与哺乳动物相似；分子质量为200ku,有3个亚类(IgG1、和IgG3)。鸡主要存在于分泌液中，以二聚体形式存在。鸡主要是在初次免疫反应中产生，并含有J链。鸡胚尿囊液和1日龄雏鸡体内含有单体，可能来自母鸡的输卵管分泌液。鸡免疫球蛋白至少有5种同种异型，其中2个位于的CH1区，2个位于重链，还有1个位于轻链。(六)鸭的免疫球蛋白鸭的免疫球蛋白称为IgY,有2类(7.8S和5.7S)。鸭的和均来自。卵黄中主要含7.8SIgG,是唯。鸭胆汁中含有IgA,黏膜免疫系统中也有。鸭血清中含有。尚未发现鸭有IgD。(一)抗原11(1)抗原凡是能刺激机体产生抗体和效应性淋巴细胞，并能与之结合引起特异性免疫反应的物质。(2)抗原性包括免疫原性与反应原性。(1)抗原分子的特性。①异源性；②分子大小；③化学组成与结构；④物理状态；⑤对抗加工和递呈的易感性。(2)宿主生物系统。(3)免疫剂量与免疫途经。不同免疫途经的免疫效果皮内>皮下>肌注>腹腔注射>静注。3.抗原决定簇即抗原表位，指抗原分子中与淋巴细胞特异性受体和抗体结合，具有。(1)组成蛋白质抗原由5～7个氨基酸残基组成；多糖抗原由5～6个单糖组成；核酸抗原由5～8个核苷酸残基(2)分类T被T(1)依据性质半抗原只有反应原性，而缺乏免疫原性的物质。如。(2)依据来源。④异嗜性抗原与种属特异性无关，存在于人、动物、植物及微生物之间的共同抗原。T大(二)抗体(4)CH3与B细胞、巨噬细胞的FC受体结合的部位；是K；(4)IgE亲细胞性抗体可与肥大细胞、嗜碱性粒细胞结合。I型过敏反应、抗寄生虫反应。3.(1)单克隆抗体指由一个B细胞分化增殖的子代细胞产生的针对单一抗原决定簇的抗体。(2)多克隆抗体采用传统的免疫方法，将抗原物质经不同途径注入动物体内，经数次免疫后果取动物血液，分(三)免疫系统12(1)骨髓是动物最重要的造血器官，是各种免疫细胞发生和分化的场所；产生的抗体主要为IgG;是再次免疫应(2)胸腺是T细胞分化成熟的中枢免疫器官。(3)法氏囊即腔上囊，为禽类所特有；是诱导B细胞分化与成熟的场所；可作为外周淋巴器官，能捕捉抗原和合。(2)脾脏红髓生成红细胞，捕获抗原；白髓滞留(4)黏膜部淋巴小结构成重要的黏膜免疫系统。3.T细胞的重要表面标志T。4.B细胞的重要表面标志B细胞抗原受体BCR、FCR、CR、有丝分裂原R。植物排斥反应、清除自身的凋亡细胞。当靶细胞与相应的IgG抗体结合，K的Fc6.NK细胞即自然杀伤细胞，是ADCC作用；主要作用非特异杀伤肿瘤细胞、抵抗感染、排斥骨髓细胞的移植。7.抗原递呈细胞即辅佐细胞、A细胞；包括即8.巨噬细胞(1)概念存在于正常动物和人血清中的一组不耐热、具有酶活性的球蛋白。含量稳定，与抗原刺激无关；补体可(2)补体激活作用细胞溶解、细胞粘附、调理作用、免疫调节、炎症反应、病毒中和、免疫复合物的溶解。(一)概念与种类1.细胞因子是指有免疫细胞和某些非免疫细胞合成和分泌的一些高活性多功能蛋白质多肽分子。主要介导和调节(1)白细胞介素IL在白细胞间起免疫调节作用的因子。(2)干扰素IFN-γ由抗原刺激T细胞产生；有免疫调节功能。(3)肿瘤坏死因子TNF是重要的促炎因子和免疫调节分子。(4)集落刺激因子CSF促进造血细胞增殖、分化、成熟。(二)特性与生物学作用(1)具有激素样活性作用；(2