DB5329T 121-2025食品检测实验室标准培养物管理规范

ICS07.100.30CCSX015329IDB5329/T121—2025前言 2规范性引用文件 3术语和定义 4一般要求 5管理流程 附录A（资料性）标准培养物管理流程图 1附录B（资料性）附录B标准培养物管理记录 2DB5329/T121—2025本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由大理白族自治州检验检测院提出。本文件由大理州市场监督管理局归口。本文件起草单位：大理白族自治州检验检测院、大理大学、云南欧亚乳业有限公司。本文件主要起草人：郭启新、舒平、张蕾、徐幸、张妮妮、陈朋云、姜燕、彭金国、杨宋坪。DB5329/T121—20251食品检测实验室标准培养物管理规范本文件规定了大理白族自治州食品检测实验室标准培养物管理的术语和定义、一般要求和管理流程。本文件适用于大理白族自治州食品检测实验室标准培养物的管理。其他实验室标准培养物管理可参照本标准执行。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB4789.28食品安全国家标准食品微生物学检验培养基和试剂的质量要求GB19489实验室生物安全通用要求GB/T27405实验室质量控制规范食品微生物检测GB50346生物安全实验室建筑技术规范SN/T2660食品微生物实验室菌种保藏方法3术语和定义GB4789.28界定的以及下列术语和定义适用于本文件。3.1标准培养物标准菌株、标准储备菌株、储备菌株和工作菌株的统称。3.2工作菌株由标准储备菌株、储备菌株、原则上4代以内经过转接获得或标准物质/标准样品转接1代获得的同种菌株。3.3代将活的培养物接种到微生物生长的新鲜培养基中培养1次，即为1代。4一般要求4.1人员4.1.1应满足标准培养物管理工作的要求。4.1.2应具有相应的微生物教育经历或经专业技能培训，掌握微生物实验室相关的知识，能力经确认合格方可上岗，并定期进行培训考核。4.1.3操作特种压力容器，应按相应规定持证。DB5329/T121—202524.1.4有颜色视觉障碍的人员不能从事辨色的实验。4.2设施与设备4.2.1应配置与检测要求相符合的生物安全实验室，实验室要求应符合GB19489和GB50346的相关规定。4.2.2应配备与标准培养物保藏、传代、销毁等实验活动相关的设备，定期进行检定或校准、维护和保养，应有相应的记录。4.3安全防护4.3.1标准培养物的制备过程应在无菌条件下进行。4.3.2标准培养物传代和鉴定应根据其危害程度分类在相应等级生物安全实验室进行，需配置符合微生物危害等级要求的生物安全防护用品，并加贴相应安全标识。4.3.3标准培养物的保藏和领用，应有专人负责保管和发放，使用情况应进行监督。4.4转借标准培养物不能随意转借其他单位或个人。需要时，借用单位需提出书面申请，记录借用菌株名称、类型、使用目的等信息，并填写借用申请表，经标准培养物管理员审核，实验室负责人批准后，方可发放菌株并将记录归档，严格按《病原微生物实验室生物安全管理条例》管理。5管理流程5.1流程概述标准培养物管理流程包括采购、验收、保藏、制备、销毁、收集处置、记录等流程。标准培养物管理流程参见附件A。5.2采购按照计划，应从行业内广泛认可或其他有效的、经过认证的商业机构，且经评价合格的供应商采购工作需要的标准菌株或标准物质/标准样品，菌株编号应符合相应标准的要求。5.3验收应按相关规定进行验收，包括菌种发放单、菌种包装标签、证书等信息，并做好记录和归档。5.4保藏5.4.1采购的标准培养物应按供应商提供的使用说明书要求进行保藏。5.4.2其他标准培养物的保藏方法根据实验室条件参照SN/T2660执行。5.4.3记录标准培养物保藏条件、期限等信息并归档。5.5制备5.5.1制备要求a)每一支培养物应进行标识，标识内容应包括名称、类别、代数、菌种号、菌种保藏位置、接种日期等信息。DB5329/T121—20253b)标准储备菌株不应用来制备标准菌株；储备菌株不应用来制备标准储备菌株和标准菌株；工作菌株不应用来制备储备菌株、标准储存菌株和标准菌株。c)标准储备菌株和储备菌株解冻使用后不能再次冻融。d)储备菌株和工作菌株制备时若需验证，可按照5.5.3进行。e)从标准菌株到标准储备菌株、储备菌株和工作菌株传代次数一般不超过5代，除标准方法规定外，或实验室能够提供文件化证据证明其相关特性没有变化。f)从质控样中分离标准培养物，仅可作为工作菌株使用。5.5.2复苏和分离纯化按照供应商提供的使用说明书要求对标准菌株（第0代）进行复苏，如需培养，复苏液中菌株是第1代，复苏后采用非选择性平板对复苏后的标准菌株进行分离、纯化。5.5.3验证菌株活化后、保藏前均需对平板分离出的菌落进行存活性、纯度及实验室中所需要的其他关键特征指标（生化试验、血清试验、分子生物学试验等）验证。验证符合后，方可进行制备，如验证不符合，应及时反馈供应商、灭菌销毁和处置。5.5.4期间核查需要时，应结合检测工作的实际按照计划，对标准菌株的保藏条件、有效期及标签完好等信息核查；标准储备菌株、储备菌株和工作菌株还应核查其存活性、纯度及生化试验、血清试验等符合性指标。5.5.5由标准菌株制备标准储备菌株和工作菌株挑取标准菌株分离、纯化的菌落按适当方法分装保藏，即得到标准储备菌株(第1代或第2代)。挑取纯菌落接种于斜面培养基进行培养，即得到工作菌株(第2代或第3代)。5.5.6由标准储备菌株制备储备菌株和工作菌株取标准储备菌株，迅速解冻后在非选择性平板上涂布接种培养后验证其存活性和纯度，验证合格后，挑取纯菌落进行分装保藏，即得到储备菌株(第2代或第3代)。同时，挑取纯菌落接种于斜面培养基进行培养，即得到工作菌株(第3代或第4代)。5.5.7由储备菌株制备工作菌株取储备菌株，迅速解冻后在非选择性平板接种培养后验证其存活性和纯度，验证合格后，在合适斜面培养基上培养即得到工作菌株（第4代或第5代）。5.6销毁5.6.1应在监督员的监督下销毁。5.6.2将需要销毁的菌株和使用后带菌试剂、耗材按GB/T27405规定处理。需要销毁的菌株包括但不限于以下内容:a)使用后的标准菌株、标准储备菌株、储备菌株、工作菌株及传代次数大于5代工作菌株；b)经验证不符合的菌株；c)超过保藏期限的菌株；d)其他需销毁的菌株。DB5329/T121—202545.7收集处置无害化处理后的危险废物应按国家有关规定交有依法取得危险废物经营许可证的单位集中处置，执行危险废物处置管理相关规定。5.8记录应对标准培养物管理进行记录并按相关要求归档留存，标准培养物记录表参见附录B，记录内容包括(但不限于)以下内容：a)标准菌株采购、验收、保藏、领用和期间核查结果；b)制备过程中菌株标签、验证使用的培养基、培养条件、革兰氏染色、菌落形态、生化试验、血清试验等结果；c)菌种保藏条件、期限和位置；d)销毁条件、时间、日期和销毁人；e)危害废弃物处置交接记录。DB5329/T121—20251（资料性）标准培养物管理流程图图A.1标准培养物管理流程制定计标准菌株获得、验收和保存（0代）复苏、分离和纯化验证不符符不符制备标准储备菌株（1代）否在合适培养基上分离培养（2代）否反馈生产商符是制备储备菌株或工作菌株（2代）执行采购合同在合适培养基上分离培养（3代）否符是工作菌株（3代）在合适培养基上分离培养使用测试菌株销毁处置DB5329/T121—20252