生物技术实验操作指导手册及习题集

生物技术实验操作指导手册及习题集姓名_________________________地址_______________________________学号______________________-------------------------------密-------------------------封----------------------------线--------------------------1.请首先在试卷的标封处填写您的姓名，身份证号和地址名称。2.请仔细阅读各种题目，在规定的位置填写您的答案。一、选择题1.生物技术实验操作的基本原则包括：

A.安全第一

B.精确操作

C.严谨记录

D.以上都是

2.培养细菌常用的培养基成分不包括：

A.蛋白胨

B.琼脂

C.葡萄糖

D.硫酸铜

3.DNA提取实验中，用于溶解细胞膜和细胞器的缓冲液是：

A.TrisHCl缓冲液

B.NaCl溶液

C.乙醇

D.0.1MEDTA

4.以下哪种酶在PCR反应中用于DNA复制：

A.胞嘧啶脱氨酶

B.DNA聚合酶

C.限制性内切酶

D.DNA连接酶

5.转基因植物中，常用的标记基因是：

A.绿色荧光蛋白基因

B.β半乳糖苷酶基因

C.抗生素抗性基因

D.以上都是

答案及解题思路：

1.答案：D

解题思路：生物技术实验操作的基本原则应涵盖安全、精确和记录等方面，因此选项D“以上都是”是正确的。

2.答案：D

解题思路：蛋白胨、琼脂和葡萄糖是培养细菌常用的培养基成分，而硫酸铜不是细菌生长所必需的，因此选项D是正确的。

3.答案：A

解题思路：TrisHCl缓冲液常用于调节pH值，并有助于溶解细胞膜和细胞器，因此选项A是正确的。

4.答案：B

解题思路：在PCR反应中，DNA聚合酶负责DNA的复制，因此选项B是正确的。

5.答案：D

解题思路：绿色荧光蛋白基因、β半乳糖苷酶基因和抗生素抗性基因都是常用的标记基因，因此选项D“以上都是”是正确的。二、填空题1.生物技术实验操作中，无菌操作的基本原则是防止杂菌污染，保证实验结果的准确性和可靠性。

2.DNA提取实验中，破碎细胞常用的方法有研磨法、超声波破碎法、酶解法等。

3.PCR反应的三个步骤分别是变性、复性、延伸。

4.转基因技术中，常用的载体有质粒载体、噬菌体载体、病毒载体等。

5.生物技术实验中，常用的缓冲液有TrisHCl缓冲液、磷酸盐缓冲液（PBS）、硼酸缓冲液等。

6.限制性内切酶的识别序列通常是具有特定核苷酸序列的回文序列。

7.转基因植物中，常用的标记基因是荧光素酶基因、抗生素抗性基因等。

8.生物技术实验中，常用的消毒剂有70%乙醇、碘伏、甲醛等。

9.DNA测序的原理是双链DNA分子中核苷酸序列的测定。

10.蛋白质工程中，常用的方法有定点突变、同源重组、基因合成等。

11.生物技术实验中，常用的显微镜有光学显微镜、荧光显微镜、电子显微镜等。

12.生物技术实验中，常用的电泳技术有琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳等。

13.生物技术实验中，常用的质粒提取方法有碱裂解法、酚氯仿法等。

14.生物技术实验中，常用的PCR扩增方法有常规PCR、实时荧光定量PCR等。

15.生物技术实验中，常用的细胞培养方法有悬浮培养、贴壁培养、原代培养等。

16.生物技术实验中，常用的分子标记技术有PCRRFLP、SSR、SNP等。

17.生物技术实验中，常用的基因编辑技术有CRISPR/Cas9、ZFN、TALEN等。

18.生物技术实验中，常用的基因表达调控技术有启动子替换、转录因子调控、RNA干扰等。

19.生物技术实验中，常用的基因克隆技术有粘性末端连接、同源重组等。

20.生物技术实验中，常用的基因转移技术有农杆菌介导转化、基因枪法、电穿孔法等。

答案及解题思路：

1.答案：防止杂菌污染，保证实验结果的准确性和可靠性。

解题思路：无菌操作是生物技术实验的基本要求，保证实验结果的准确性和可靠性。

2.答案：研磨法、超声波破碎法、酶解法等。

解题思路：根据DNA提取实验的需求，选择合适的细胞破碎方法。

3.答案：变性、复性、延伸。

解题思路：PCR反应的基本步骤包括这三个过程，了解每个步骤的作用。

4.答案：质粒载体、噬菌体载体、病毒载体等。

解题思路：了解转基因技术中常用的载体类型。

5.答案：TrisHCl缓冲液、磷酸盐缓冲液（PBS）、硼酸缓冲液等。

解题思路：掌握生物技术实验中常用的缓冲液类型。

6.答案：具有特定核苷酸序列的回文序列。

解题思路：了解限制性内切酶识别序列的特点。

7.答案：荧光素酶基因、抗生素抗性基因等。

解题思路：掌握转基因植物中常用的标记基因。

8.答案：70%乙醇、碘伏、甲醛等。

解题思路：了解生物技术实验中常用的消毒剂。

9.答案：双链DNA分子中核苷酸序列的测定。

解题思路：掌握DNA测序的基本原理。

10.答案：定点突变、同源重组、基因合成等。

解题思路：了解蛋白质工程中常用的方法。

11.答案：光学显微镜、荧光显微镜、电子显微镜等。

解题思路：掌握生物技术实验中常用的显微镜类型。

12.答案：琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳等。

解题思路：了解生物技术实验中常用的电泳技术。

13.答案：碱裂解法、酚氯仿法等。

解题思路：掌握生物技术实验中常用的质粒提取方法。

14.答案：常规PCR、实时荧光定量PCR等。

解题思路：了解生物技术实验中常用的PCR扩增方法。

15.答案：悬浮培养、贴壁培养、原代培养等。

解题思路：掌握生物技术实验中常用的细胞培养方法。

16.答案：PCRRFLP、SSR、SNP等。

解题思路：了解生物技术实验中常用的分子标记技术。

17.答案：CRISPR/Cas9、ZFN、TALEN等。

解题思路：掌握生物技术实验中常用的基因编辑技术。

18.答案：启动子替换、转录因子调控、