任务点滴菌种大有作为液体菌种制备技术课件

任务

点滴菌种，大有作为蛹虫草制种技术主讲人：王千慧----液体菌种制备技术课程衔接益生菌/非致病菌接种、分离、纯化、培养环境消毒；耗材试剂灭菌蛹虫草制种技术液体菌种制备技术抑菌活力测定生物发酵制品生产蛹虫草，又称北虫草，属于真菌门、子囊菌纲、肉座菌目、麦角菌科、虫草属；目前大量研究表明北虫草富含虫草酸、虫草素、小分子肽等多种生物活性成分，是极具价值、应用广泛的药食同源用菌；辽宁是我国野生蛹虫草最早发现地，也是规模化栽培技术发源地和传播地，更是我国蛹虫草原料的最大集散地；目前全省北虫草栽培总量达7300万盆，生产蛹虫草干品6580吨，产值达4.2亿元；蛹虫草简介沈阳农户种植栽培北虫草辉山生物所蛹虫草生产技术培训班师生合影至上世纪80年代开始，前后多位辽宁地区专家在野生蛹虫草驯化、选育、栽培工艺改革与推广方面做出卓越贡献；北虫草作为辽宁特色地标产品，开发其高端商品、提升附加值为振兴东北虫草产业、带动区域经济发展起到至关重要的作用。漫漫十三年，结核杆菌经过了230代的驯化，终于被卡尔梅特与介朗研制成预防结核病的疫苗；为了纪念两位不屈不挠的科学家，这种疫苗就被称为“卡介苗”风雨五十载，在多位科学家与企业家的共同努力下，蛹虫草从”野生“走向规模化栽培，从”稀世珍宝“走向寻常百姓家液体菌种特点制种时间短、菌丝浓密、成本低分散性好，萌发点多菌丝生长快、覆盖面料早发菌周期短，显著缩短生产周期出草产量高，易于人工控制，便于大规模工业化生产在食用菌生产中，液体生产菌种相当于种子，其品质直接影响食用菌产品质量与产量，关系到亿万菇农的切身利益。以大赛点燃理想、以技术助乡村振兴了解液体菌种在实际生产中的重要意义及其特点；掌握液体菌种生产流程及注意事项；能熟练运用相应仪器设备并独立、标准完成液体菌种制备；对接“菌类园艺工”岗位实际工作内容，规范职业行为，提升药食用菌菌种保藏、培养等职业技能；激发创新创业思维，以现代科技为蛹虫草种质资源发展赋能；胸怀祖国、服务人民；勇攀高峰、敢为人先；追求真理、严谨治学的科学家精神课程目标知识储备技能训练素质提升菌类园艺工职业资格证书实训物品实训主要试剂、耗材蛹虫草试管斜面菌种、沙保罗培养基、蛋白胨、葡萄糖、锥形瓶、接种铲等实训主要仪器、设备电子天平、高压蒸汽灭菌锅、超净工作台、培养箱、摇床等目录一液体菌种生产工艺二液体培养基配制三接种四培养与检查五二级液体生产种制备与应用液体菌种生产工艺壹液体菌种生产工艺一液体培养基配置二三五四接种培养与检查一级液体菌种二级液体菌种（生产种）液体培养基配制贰试剂名称试剂用量马铃薯200g葡萄糖20g磷酸二氢钾3g硫酸镁1.5g微生物B150mg蛹蚕粉10g水1000ml按配方称好各种原料，将马铃薯去皮去芽眼，称取200g并切成3～5mm厚的薄片，与蚕蛹粉（或其它配方中的玉米粉、大豆粉、豆粕粉等农产品原料）一起放入锅中，文火煮沸20～30min，用8层纱布过滤，滤液用开水补足至1000ml，再依次加入其它成分，搅拌溶解，然后装入玻璃瓶中，液体装量不宜超过容器总容积的2/5，瓶口用聚丙烯塑料薄膜和乳胶圈封口。培养基配方培养基分装、包扎、灭菌，灭菌条件：121℃,30min液体培养基配制多样的培养基配方：2.称取蛋白胨10g、葡萄糖20g,溶于1000ml纯化水中1.沙氏葡萄糖液体培养基30g溶于1000ml纯化水中；3.查阅文献，探索其他培养基配方高压蒸汽灭菌锅培养基灭菌自制土法灭菌棚大容量灭菌柜高校院所实验室蛹虫草栽培农户工厂规模化生产接种叁1菌种选择菌丝长满基质斜面；菌苔粉末状或短绒毛状，呈橘黄色或橘红色，薄厚均匀一致；无明显白色绒毛状气生菌丝；无杂菌；菌苔底部呈黄色；2环境灭菌实验前应提前摆放所需物品并对实验室与超净工作台进行紫外照射灭菌30min以上3接种无菌操作，采用接种铲在菌丝生长旺盛的中间部分切去0.2mm移入液体培养基中关键技术要点培养与检查四22℃培养24h，利于菌丝恢复生长静置培养122-24℃、120-160rpm/min振荡培养，培养6-7天振荡培养2关键技术要点目测法检查1培养2-3天期间，将有杂色、过分浑浊、有异味怪味的培养瓶取去除2优质液体菌种：菌丝球均匀分布，菌球直径1mm左右；培养液呈淡黄色或橙黄色；发酵液澄清有虫草菌特殊香味，菌球与菌丝占菌液总量80%以上3一级液体种制备完成，可直接用于生产；若制备二级液体生产种，需尽快进行下步操作项目拓展二级液体生产种制备与应用一级液体菌种接种至发酵罐中项目拓展——二级液体生产种制备与应用二级液体生产种制备按5%-10%体积比例将一级液体菌种接种至发酵罐中培养条件同一级菌种二级液体生产种批量接种项目小结了解工厂化液体菌种制备工艺与常用仪器设备1围绕培养基配制、接种、培养与检查四大方面重点学习北虫草液体菌种制备