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文档简介

专题5检测(A)

(时间:60分钟,满分:100分)

一、选择题(每小题2分,共40分。在每小题给出的四个选项中,只有一项是符合题目要求的)

C1.下列属于提取生物大分子基本思路的是()

A.利用空间结构的不同

B.利用分子质量的不同

C.利用物理和化学性质的不同

I).利用组成元素的不同

答案:C

C2.下列有关蛋白质和DNA的提取和分别的说法,正确的是()

A.可用蒸储水涨破细胞的方法从羊成熟红细胞中提取DNA和蛋白质

B.提取DNA时,可用不同浓度的NaCl溶液反复溶解以析出蛋白质

C.透析法分别蛋白质的依据是大分了•蛋白质不能通过半透膜

D.用玻璃棒快速搅拌有利于提取DNA

解析:哺乳动物的成熟的红细胞没有细胞核,不能提取到DNA:不同浓度的NaCl溶液反复溶解可去除

杂质,在NaCl溶液的物质的量浓度为0.14mol/L时,DNA溶解度最小;用玻璃棒快速搅拌简单使DNA

断开,不利于DNA的提取。

答案:C

匚3.下列叙述错误的是()

A.变更NaCl溶液的浓度只能使DNA溶解而不能使其析出

B.在沸水浴中,DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色

C.用电泳法可分别带电性质、分子大小和形态不同的蛋白质

I).用透析法可去除蛋白质样品中的小分子物质

解析:当NaCl溶液的物质的量浓度为0.14mol/L时可以析出DNA。

答案:A

C4.在以鸡血为材料对DNA进行粗提取的试验中,若需进一步提取杂质较少的DNA,可以依据的原

理是()

A.在物质的量浓度为0.14mol/L的NaCl溶液中DNA的溶解度最小

B.DNA遇二苯胺在沸水浴的条件下会显蓝色

C.DNA不溶于酒精而细胞中的一些物质易溶于酒精

I).质量浓度为0.1g/mL的柠檬酸钠溶液具有抗凝血作用

解析:DNA粗提取原理有DNA在物质的量浓度为0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度最小和DNA不溶于

体积分数为95%的冷酒精,进一步提取杂质较少的DNA的原理为后者。B项为DNA鉴定的原理。I)项

中柠檬酸钠的作用是防止血液凝固。

答案:C

。5.在DNA的粗提取过程中,先后两次向烧杯加入蒸储水的作用分别是()

A.稀释血液;冲洗样品

B.使血细胞裂开;降低NaCl浓度使DNA析出

C.使血细胞裂开;增大DNA溶解量

D.使血细胞裂开;提取含杂质较少的DNA

解析:第一次加入蒸做水的作用是使血细胞过度吸水而裂开,使细胞内核物质释放。其次次加入适

量蒸储水,是为了将NaCl溶液的物质的量浓度降低到0.14mol/L,使DNA因溶解度达到最小而析出。

答案:B

C,6.下列符合PCR反应条件的是()

①稳定的缓冲液环境②DNA模板③引物④四种脱氧核甘酸⑤AqDNA聚合陋⑥解旋前

⑦限制性内切酶⑧温控设备

A.①②③©©⑥

B.①②©©©⑥⑦⑧

C.③④©©©⑧

D.①②®©©⑧

解析:PCR反应应模拟生物细胞内DNA复制的条件,只是无须解旋酶(可热变性),也不须要基因工程

的工具悔(限制性内切酹)。

答案:D

匚7.已知某样品中存在甲、乙、丙、丁、戊五种蛋白质分子,其分子大小、所带电荷的性质和数

量状况如下图所示。下列有关该样品中蛋白质的分别的叙述,正确的是()

相对分子质量

丙・

•T

乙・

•戊

甲•.

0电荷量

A.将样品装入透析袋中透析12h,若分子乙保留在袋内,则分子丙也保留在袋内

B.若用凝胶色谱柱分别样品中的蛋白质,则分子甲移动速度最快

C.若将样品以2000r/min的速度离心10min,分子戊存在于沉淀中,则分子甲也存在于沉淀中

D.若用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分别样品中的蛋白质分子,则分子甲和分子戊形成的电泳带相距最

解析:分子乙留在透析袋内,说明其相对分子质量比较大,分子丙比分子乙相对分子质量大,所以分

子丙也留在袋内;分子中的相对分子质量最小,因能进入凝胶内部通道而导致移动速度慢;分子戊比

分子甲的相对分子质量大,分子甲可能不存在于沉淀物中;SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中,电泳迁移率

完全取决于分子的大小,相对分子质量相差越大,形成的电泳带相距越远。

答案:A

C,8.下列关于凝胶色谱法的原理及操作的说法,错误的是()

A.是利用凝胶把分子大小不同的物质分别开的一种方法

B.在洗脱过程中,大分子不能进入凝胶内部而最先流出,而小分子可以进入凝胶内部而流速缓慢,最

终流出

C.凝胶内部有很微细的多孔网状结构,其孔隙大小与被分别的物质分子的大小无相应关系

D.一般状况卜,凝胶对要分别的物质没有吸附作用,因此全部要分别的物质都应当被洗脱出来

解析:凝胶色谱法是依据相对分子质量大小分别蛋白质的有效方法,凝胶是由多糖类化合物构成的,

是一些微小的多孔球体,相对分子质量小的蛋白质可以进入凝胶内部,路程较长,移动速度慢,而相

对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部,路程较短,移动速度快,因此在洗脱过程中相对分子质

量较大的蛋白质先被分别。不同的凝胶,其立体网状结构不同,孔隙大小不同,因此可分别的分子大

小也不同。凝胶一般对分别的物质无吸附作用,全部要分别的物质都应当被洗脱出来,这是凝胶色

谱法与一般层析法的不同。

答案:C

C9.下列关于红细胞的洗涤过程的叙述,正确的是()

A.低速长时间离心,如500r/min,12min,以保证达到很好的分别效果

B.离心后用胶头吸管吸出下层透亮的红色血浆

c.将卜.层暗红色的红细胞液倒入烧杯,再加入五倍体枳的蒸馀水

D.直至上清液中没有颜色,表明红细胞已洗涤干净

解析:红细胞洗涤过程中,应低速短时间离心,以避开白细胞、淋巴细胞等一同沉淀,影响血红蛋白

的提纯;离心后血浆在上层,并呈现黄色;洗涤红细胞时应用生理盐水而不用蒸僧水,否则,将导致红

细胞裂开影响试验结果。

答案:I)

C,10.下列操作中,对DNA的提取量影响较大的是()

①使鸡血细胞在蒸镭水中充分裂开,释放出DNA等核物质②搅拌时,要用玻璃棒沿一个方向轻缓

搅动③在析出DNA黏稠物时,要缓缓加蒸储水,直至溶液中黏稠物不再增多④在用酒精沉淀DNA

时,要运用冷酒精,甚至再将混合液放入冰箱中冷却

A.①②④

B.①②®®

C.①③④

D.②③④

解析:①可充分释放出细胞中的DNA分子,使进入滤液中的DNA量尽量多;③是让DNA充分沉淀,保

证DNA的量,④的道理同③。②所述的操作可以保证DNA分子的完整性,但不影响提取量。除了①

③④影响DNA的提取量外,运用塑料器皿也可以削减DNA在操作中的损失。

答案:C

。11.下列各项中,哪项不是电泳使样品中各分子分别的缘由?()

A.带电性质差异

B.分子的大小

C.分子的形态

D.分子的变性温度

解析:电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程,带电性质不同、分子的大小和形态不同

都会影响带电粒子在电场中佗迁移速度,但迁移速度与分子变性温度无关。

答案:D

。12.下列关于DNA聚合酶催化合成DNA子链的说法,正确的是()

A.DNA聚合酶是以DNA为模板,使DNA子链从5'端延长到3'端的一种酶

B.TaqDNA聚合酹必需在每次高温变性处理后再添加

C.DNA聚合酶能特异性地复制整个DNA的全部序列

I).TaqDNA聚合酶是从深海生态系统中发觉的

解析:在PCR扩增DNA分子的过程中,各种组分要一次性加入;DNA聚合酶不能从头起先催化合成

DNA,须要引物,所以DNA聚合前不能催化复制整个DNA的全部序列;窗d附聚合酶是从美国黄石国

家公园的一个热泉中发觉的7M细菌中分别得到的。

答案:A

C,13.PCR一般要经过三十多次循环,从其次次循环起先,上一次循环的产物也作为模板参加反应。

由引物I延长而成的DNA单钻作模板时将()

A.仍与引物I结合进行DNA子链的延长

B.无须与引物结合,在酶的作用下从头合成子链

C.同时与引物【和引物H结合进行子链延长

D.与引物II结合进行DNA子链的延长

解析:PCR扩增中,从其次次循环起先,由引物I延长而成的DNA单链作模板时将与引物I【结合进行

DNA子链的延长;由引物H延长而成的DNA单链作模板时将与引物I结合进行DNA子链的延长。

答案:D

。14.多聚酶链式反应(PCR技术)是体外酶促合成特异DNA片段的•种方法,由高温变性、低温退

火及适温延长等几步反应组成一个周期,循环进行,使目的DNA得以快速扩增,其简要过程如下图所

示。下列关于PCR技术的叙述,错误的是()

|微量DNA样品

|DNA双链分离,形成单链

循环

重复

以单链为模板合成子代DNA」

A.PCR技术是在试验室中以少量DNA制备大量DNA的技术

B.反应中新合成的DNA又可以作为下一轮反应的模板

C.PCR技术以核糖核甘酸为原料,DNA分子以指数方式扩增

D.应用PCR技术与探针杂交技术可以检测基因突变

解析:PCR技术是人工合成DNA的方法,原料是脱氧核甘酸,而不是核糖核甘酸。

答案:C

C15.PCR反应的最大特点是具有较大扩增实力与极高的灵敏性,但令人头痛的问题是易污染,极其

微量的污染即可造成假阳性结果的产生。防止污染的方法不包括()

A.将样品的处理、配制PCR反应液、PCR循环扩增及PCR产物的鉴定等步骤分区或分室进行

B.吸样枪吸样要慢,吸样时尽量一次性完成,枪头、小离心管应一次性运用,以免交叉污染

C.全部的PCR试剂都应放置于大瓶中,以削减重复加样次数,避开污染机会

I).PCR试剂、PCR反应液应与样品及PCR产物分开保存,不应放于同一冰盒或同一冰箱

解析:全部的PCR试剂都应分装放置于小瓶中,一次性用完,以避开因多次运用造成污染。

答案:C

C16.下列关于PCR引物的说法,错误的是()

A.引物是PCR过程中与模板D\A部分序列互补,并能引导模板DNA的互补链合成的核甘酸序列

B.引物常依据须要扩增的目佗DNA的碱基序列用化学合成的方法获得

C.PCR过程中只须要一种引物

D.引物的3'端具有游离的一0:T

解析:由于DNA聚合酶不能从头合成DNA链,因此引物是PCR过程中与模板DNA部分序列互补,并能

引导模板DNA的互补链合成佗核甘酸序列,A项正确;PCR扩增的DNA片段取决于两种引物的结合位

点,因此所用的引物通常是依据须要扩增的目的DNA的碱基序列用化学合成的方法获得,B项正确,C

项错误;引物的3'端具有游离的一OH,D项正确。

答案:C

C,17.SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中,加入SDS的作用是()

A.增大蛋白质的相对分子质量

B.变更蛋白质的形态

C.掩盖不同种蛋白质间的电荷差别

D.削减蛋白质的相对分子质量

解析:加入SDS的作用是使蛋白质发生完全变性,解聚成单条肽链;SDS还能与各种蛋白质形成蛋白

质-SDS复合物,SDS所带电荷量远远超过了蛋白质原有带电量,掩盖了不同种蛋白质间的电荷差别,

使电泳迁移率完全取决于分子的大小。

答案:C

C18.下列有关凝胶色谱法和电泳法的说法,正确的是()

A.它们都是分别蛋白质的重要方法

B.它们的原理相同

C.运用凝胶色谱法须要运用缓冲溶液而电泳法不须要

D.以上说法都正确

解析:凝胶色谱法和电泳法都是分别蛋白质的重要方法,但它们的原理不同,凝胶色谱法是依据相府

分子质量的大小分别蛋白质的方法,而电泳利用了待分别样品中各种分子带电性质的差异以及分子

本身的大小、形态的不同,使带电分子产生不同的迁移速度,从而实现样品中各种分子的分别。这

两种方法都须要缓冲液。

答案:A

C19.从细胞中提取某种特定的蛋白质比提取DNA难度大,其缘由不包括()

A.蛋白质对温度、盐浓度、pH等条件更敏感,更易失活

B.蛋白质的空间结构多样,理化性质各不相同,使得蛋白质的提取没有统一的方法

C.提取某种特定蛋白质时需依据其特性摸索提取的程序

D.提取血红蛋白程序可分为样品处理、粗分别、纯化和纯度鉴定四大步

解析:提取蛋白质比提取DNA的难度大,是因为与DNA相比,蛋白质对温度、盐浓度、pH等条件更敏

感,更简单失活;并且蛋白质的空间结构多样,理化性质各不相同,使得蛋白质的提取没有统一的方

法,只能依据特定蛋白质的特性摸索提取的条件,设计特定的方法;血红蛋白这种位于红细胞内的含

Fe?的蛋白质,其分别和提取程序大致为样品处理、粗分别、纯化和纯度鉴定,但这一点不是提取蛋

白质难度大的缘由。

答案:D

。20.下列关于DNA复制和PCR技术的比较,描述正确的是()

A.两个过程都是边解旋边复制

B.两个过程都是随时都能进行

C.两个过程都须要相同的酶催化

D.两个过程都遵循碱基互补配对原则

解析:DNA复制是边解旋边复制,而PCR中DNA解旋与复制分开、循环进行。DMA复制发生在细胞有

丝分裂间期和减数第一次分裂前的间期,而PCR只要反应条件合适随时可以进行。DNA复制须要解

旋酶、DNA聚合酶等,而PCR只须要耐高温的T^yDNA聚合酹,不须要解旋睡。

答案:D

二、非选择题(共60分)

匚21.(12分)下图是“DNA粗提取与鉴定”相关试验步骤,请据图分析并回答问题。

2mol/L的

冷却的体积分数为

NaCl溶液

95%的酒精溶液

b

(1)鸡血细胞是进行该试验较好的试验材料,这是因为,

从鸡血细胞中释放出核物质佗处理方法是

(2)图a表示释放核物质后进行过滤的过程,过谑后取.进行下一步试验。

⑶图b表示的相关操作过程中,加入物质的量浓度为2mol/L的NaCl溶液的作用

是.

(4)图c表示在滤液中加入冷却的体积分数为95%的酒精溶液,其目的

(5)DNA鉴定的原理是

答案:(1)鸡血细胞的DNA含量干富,材料易得(鸡血细胞易吸水涨破)向鸡血细胞中加入蒸镭水,

并搅拌

(2)滤液

(3)溶解DNA分子

(4)提取含杂质较少(或较纯净)的DNA

(5)在沸水浴条件下,DNA遇二苯胺呈蓝色

匚22.(16分)如今人类已跨入了蛋白质时代,对蛋白质的探讨和应用,首先须要获得高纯度的蛋白

质。请回答下列问题。

(1)蛋白质的提取和分别一般分为四步:、、和纯度鉴

定。

(2)假如要从红细胞中分别出血红蛋白,试验前取簇新血液要在采血容器中预先加入柠檬酸钠,这样

做的目的是。

(3)血红蛋白的提取又可以细分为红细胞的洗涤、、分别血红蛋白溶液

和。其中分别血红蛋白溶液时须要用(仪器)分别出下层红色透亮液

体。

(4)装填凝胶色谱柱时,要留意色谱柱内不能有气泡存在,一旦发觉有气泡必需重新装,这是因

(5)欲探究色谱柱的高度是否影响蛋白质分别的因素,应把作为自

变量,把作为无关变量,把

作为因变量。

答案:(1)样品处理粗分别纯化

⑵防止血液凝固

⑶血红蛋白的糕放透析分液漏斗

(4)气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序,降低分别效果

(5)色谱柱的高度变更缓冲液的用量和pH、样品的用量、温度等因素大小不同的蛋白质分子的

洗脱间距

C,23.(17分)近十年来,PCR技术(多聚酶链式反应)成为分子生物学试验室的一种常规手段,其原

理是利用DNA的半保留匆制,在试管中进行DNA的人工复制(如下图所示)。

(1)加热使DNA双链打开,这一步是打开键,称为,在细胞中该过程是在

酶的作用下进行的。

(2)当温度降低时,引物与模板末端结合,在DNA聚合酶的作用下,引物沿模板链延长,最终合成两条

DNA分子,此过程中原料是,遵循原则。

(3)PCR技术的必需条件,除了模板、原料、引物、酶以外,至少还有三个条

件,即液体环境、相宜的和。

⑷通过PCR技术使DNA分子大量复制,若将一个用,5N标记的DNA分子放入试管中,以含有“N的脱

氧核苜酸为原料,连续复制4次之后,则现标记的DNA分子占全部DNA总数的比例

为0

(5)现有一段DNA序歹I」:5*CAAGGATCC3,

3*GTTCCTAGG5,

假如它的引物1为5'GGA—0H,则引物2为。

解析:1)NA两条链之间的碱基通过氢键形成碱基对,从而将两条链连接起来,因而,要想打开DNA双链,

必需打开氢键,这一过程在细胞内是在解旋酹的作用下完成的,在细胞外(PCR)则是通过高温实现的。

合成DNA时,所用的原料是4种游离的脱氧核甘酸,更制过程遵循碱基互补配对原则。PCR技术的条

件除了模板、原料、酶、引物以外,还要有相宜的pH、温度变更以及液体环境;以含项标记的DNA

分子为模板,以含“N的脱氧核甘酸为原料,连续复制4次,共得到DNA分子数为2乜16(个),其中含

有,5N标记的有2个,占全部DNA分子总数的1/8。

答案:。)氢解旋解旋

(2)4种脱氧核甘酸碱基互补配对

(3)4“DNA聚合pH温度变更

⑷1/8

(5)5'CAA—0H

C24.(15分)下图为一种核酸的分析方法,请据图分析回答有关问题。

被分析

TGGACTTGAACGCATGCT/的材料

被标记的龙1..............「选*必右晨显血蒲,

游离璘酸基]也且机出现用被标记

^•^TGGACTTGAACGCATqCT

泳④

电泳②・®TGGACTTGAACgCATQ^T

动③

--^>0TGGACTTGAACGCATGCT

方②

不④讼TGGACTTGAACGCAfGCT

凝10)

曲在凝胶介质上,不同长度的DNA片段通过电泳

使之分离,带标记的片段白动显示所在位置

(1)被分析的材料应属于一条DNA链。假如它存在另一条互补链,该互补链的碱基序列

是:

.......................

(2)假如选择性断开的位置是碱基(;,那么随机出现的被标记片段应有种,在电泳带上被分

别的显示位置应有处,在泳动方向的最前端的片段是序列段,与图示泳动位置相

比,在同样电泳条件下该片段应位于①的(填“上方”或“下方”)。

(3)应用上述原理分析了某种未知序列核酸的一条单链,结果如右上图所示,此结果说明,该核酸的

此单链含个核甘酸,其A:T:G:O,同时也可推断其碱基序列

是,

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