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文档简介
检验仪器pcr考试题及答案姓名:____________________
一、选择题(每题2分,共20分)
1.PCR技术全称是什么?
A.聚合酶链反应
B.聚合酶连接反应
C.聚合酶链延伸反应
D.聚合酶连接延伸反应
2.PCR反应体系中,以下哪种物质是必需的?
A.DNA模板
B.引物
C.dNTPs
D.以上都是
3.PCR反应过程中,以下哪个阶段会发生变性?
A.预变性
B.复性
C.延伸
D.以上都是
4.PCR反应中,以下哪种物质的作用是提高反应效率?
A.Taq聚合酶
B.引物
C.dNTPs
D.Mg2+
5.PCR反应中,以下哪种物质的作用是防止非特异性扩增?
A.引物
B.Taq聚合酶
C.dNTPs
D.Mg2+
6.PCR反应中,以下哪种物质的作用是保证DNA的准确性?
A.Taq聚合酶
B.引物
C.dNTPs
D.Mg2+
7.PCR反应中,以下哪种物质的作用是防止DNA降解?
A.Taq聚合酶
B.引物
C.dNTPs
D.Mg2+
8.PCR反应中,以下哪种物质的作用是提高反应的特异性?
A.Taq聚合酶
B.引物
C.dNTPs
D.Mg2+
9.PCR反应中,以下哪种物质的作用是保证DNA的复制?
A.Taq聚合酶
B.引物
C.dNTPs
D.Mg2+
10.PCR反应中,以下哪种物质的作用是保证DNA的延伸?
A.Taq聚合酶
B.引物
C.dNTPs
D.Mg2+
二、填空题(每题2分,共20分)
1.PCR技术是一种__________技术,用于__________。
2.PCR反应体系包括__________、__________、__________、__________、__________。
3.PCR反应过程中,变性阶段是指__________。
4.PCR反应过程中,复性阶段是指__________。
5.PCR反应过程中,延伸阶段是指__________。
6.PCR反应中,引物的作用是__________。
7.PCR反应中,dNTPs的作用是__________。
8.PCR反应中,Mg2+的作用是__________。
9.PCR反应中,Taq聚合酶的作用是__________。
10.PCR反应中,PCR缓冲液的作用是__________。
三、简答题(每题5分,共20分)
1.简述PCR技术的原理。
2.简述PCR反应体系中的各成分及其作用。
3.简述PCR反应过程中的三个阶段及其特点。
4.简述PCR反应中引物的作用。
5.简述PCR反应中dNTPs的作用。
四、计算题(每题10分,共20分)
1.如果PCR反应体系中,引物的浓度为0.2μM,dNTPs的浓度为0.2mM,Taq聚合酶的浓度为0.01U/μl,反应总体积为50μl,计算反应体系中各成分的物质的量。
2.如果PCR反应的循环次数为30次,每次循环的变性温度为95℃,复性温度为55℃,延伸温度为72℃,计算每次循环中各温度阶段的时间。
五、论述题(每题15分,共30分)
1.论述PCR技术在医学领域的应用。
2.论述PCR技术在法医学领域的应用。
六、实验设计题(每题20分,共40分)
1.设计一个实验方案,用于检测某基因在细胞中的表达水平。
2.设计一个实验方案,用于扩增某基因片段。
试卷答案如下:
一、选择题答案及解析思路:
1.A(PCR技术全称是聚合酶链反应。)
2.D(PCR反应体系中,DNA模板、引物和dNTPs都是必需的。)
3.A(PCR反应过程中,变性阶段是指通过高温使DNA双链解开。)
4.D(Mg2+的作用是提高反应效率。)
5.A(引物的作用是防止非特异性扩增。)
6.B(引物的作用是保证DNA的准确性。)
7.D(Mg2+的作用是防止DNA降解。)
8.A(引物的作用是提高反应的特异性。)
9.A(Taq聚合酶的作用是保证DNA的复制。)
10.D(Mg2+的作用是保证DNA的延伸。)
二、填空题答案及解析思路:
1.PCR技术是一种分子生物学技术,用于扩增DNA。
2.PCR反应体系包括DNA模板、引物、dNTPs、Taq聚合酶、Mg2+、PCR缓冲液。
3.PCR反应过程中,变性阶段是指通过高温使DNA双链解开。
4.PCR反应过程中,复性阶段是指引物与目标DNA模板结合。
5.PCR反应过程中,延伸阶段是指Taq聚合酶沿模板合成新的DNA链。
6.PCR反应中,引物的作用是提供DNA复制的起始点。
7.PCR反应中,dNTPs的作用是作为DNA合成的原料。
8.PCR反应中,Mg2+的作用是激活Taq聚合酶和维持pH平衡。
9.PCR反应中,Taq聚合酶的作用是催化DNA的复制。
10.PCR反应中,PCR缓冲液的作用是提供反应所需的离子和pH环境。
三、简答题答案及解析思路:
1.PCR技术的原理是通过高温变性、低温复性和适温延伸三个步骤循环进行,使DNA链不断复制,达到扩增目的。
2.PCR反应体系中的各成分及其作用:
-DNA模板:提供扩增的模板DNA。
-引物:提供DNA复制的起始点。
-dNTPs:作为DNA合成的原料。
-Taq聚合酶:催化DNA的复制。
-Mg2+:激活Taq聚合酶和维持pH平衡。
-PCR缓冲液:提供反应所需的离子和pH环境。
3.PCR反应过程中的三个阶段及其特点:
-变性阶段:通过高温使DNA双链解开,特点是需要高温(95℃)。
-复性阶段:引物与目标DNA模板结合,特点是需要较低温度(55℃)。
-延伸阶段:Taq聚合酶沿模板合成新的DNA链,特点是需要适温(72℃)。
4.PCR反应中引物的作用是提供DNA复制的起始点,确保DNA扩增的特异性。
5.PCR反应中dNTPs的作用是作为DNA合成的原料,保证DNA复制的准确性。
四、计算题答案及解析思路:
1.引物物质的量=引物浓度×反应体积=0.2μM×50μl=10nM
dNTPs物质的量=dNTPs浓度×反应体积=0.2mM×50μl=10μM
Taq聚合酶物质的量=Taq聚合酶浓度×反应体积=0.01U/μl×50μl=0.5U
2.每次循环中各温度阶段的时间:
-变性阶段:95℃×1分钟
-复性阶段:55℃×1分钟
-延伸阶段:72℃×1分钟
循环次数为30次,总时间=(95℃+55℃+72℃)×1分钟×30次=4370分钟
五、论述题答案及解析思路:
1.PCR技术在医学领域的应用包括:
-诊断疾病:用于检测病原体DNA或基因突变。
-疾病基因检测:用于检测遗传性疾病相关基因。
-肿瘤标志物检测:用于早期诊断和监测肿瘤进展。
-分子诊断:用于病原体感染、药物代谢酶基因多态性等。
2.PCR技术在法医学领域的应用包括:
-个人识别:通过比较DNA指纹进行个体识别。
-犯罪现场调查:用于检测犯罪现场的DNA证据。
-毒品检测:用于检测毒品或毒品残留。
-生物恐怖事件调查:用于检测生物恐怖事件的病原体。
六、实验设计题答案及解析思路:
1.实验方案设计:
-提取细胞DNA。
-
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