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文档简介

检验仪器pcr考试题及答案姓名:____________________

一、选择题(每题2分,共20分)

1.PCR技术全称是什么?

A.聚合酶链反应

B.聚合酶连接反应

C.聚合酶链延伸反应

D.聚合酶连接延伸反应

2.PCR反应体系中,以下哪种物质是必需的?

A.DNA模板

B.引物

C.dNTPs

D.以上都是

3.PCR反应过程中,以下哪个阶段会发生变性?

A.预变性

B.复性

C.延伸

D.以上都是

4.PCR反应中,以下哪种物质的作用是提高反应效率?

A.Taq聚合酶

B.引物

C.dNTPs

D.Mg2+

5.PCR反应中,以下哪种物质的作用是防止非特异性扩增?

A.引物

B.Taq聚合酶

C.dNTPs

D.Mg2+

6.PCR反应中,以下哪种物质的作用是保证DNA的准确性?

A.Taq聚合酶

B.引物

C.dNTPs

D.Mg2+

7.PCR反应中,以下哪种物质的作用是防止DNA降解?

A.Taq聚合酶

B.引物

C.dNTPs

D.Mg2+

8.PCR反应中,以下哪种物质的作用是提高反应的特异性?

A.Taq聚合酶

B.引物

C.dNTPs

D.Mg2+

9.PCR反应中,以下哪种物质的作用是保证DNA的复制?

A.Taq聚合酶

B.引物

C.dNTPs

D.Mg2+

10.PCR反应中,以下哪种物质的作用是保证DNA的延伸?

A.Taq聚合酶

B.引物

C.dNTPs

D.Mg2+

二、填空题(每题2分,共20分)

1.PCR技术是一种__________技术,用于__________。

2.PCR反应体系包括__________、__________、__________、__________、__________。

3.PCR反应过程中,变性阶段是指__________。

4.PCR反应过程中,复性阶段是指__________。

5.PCR反应过程中,延伸阶段是指__________。

6.PCR反应中,引物的作用是__________。

7.PCR反应中,dNTPs的作用是__________。

8.PCR反应中,Mg2+的作用是__________。

9.PCR反应中,Taq聚合酶的作用是__________。

10.PCR反应中,PCR缓冲液的作用是__________。

三、简答题(每题5分,共20分)

1.简述PCR技术的原理。

2.简述PCR反应体系中的各成分及其作用。

3.简述PCR反应过程中的三个阶段及其特点。

4.简述PCR反应中引物的作用。

5.简述PCR反应中dNTPs的作用。

四、计算题(每题10分,共20分)

1.如果PCR反应体系中,引物的浓度为0.2μM,dNTPs的浓度为0.2mM,Taq聚合酶的浓度为0.01U/μl,反应总体积为50μl,计算反应体系中各成分的物质的量。

2.如果PCR反应的循环次数为30次,每次循环的变性温度为95℃,复性温度为55℃,延伸温度为72℃,计算每次循环中各温度阶段的时间。

五、论述题(每题15分,共30分)

1.论述PCR技术在医学领域的应用。

2.论述PCR技术在法医学领域的应用。

六、实验设计题(每题20分,共40分)

1.设计一个实验方案,用于检测某基因在细胞中的表达水平。

2.设计一个实验方案,用于扩增某基因片段。

试卷答案如下:

一、选择题答案及解析思路:

1.A(PCR技术全称是聚合酶链反应。)

2.D(PCR反应体系中,DNA模板、引物和dNTPs都是必需的。)

3.A(PCR反应过程中,变性阶段是指通过高温使DNA双链解开。)

4.D(Mg2+的作用是提高反应效率。)

5.A(引物的作用是防止非特异性扩增。)

6.B(引物的作用是保证DNA的准确性。)

7.D(Mg2+的作用是防止DNA降解。)

8.A(引物的作用是提高反应的特异性。)

9.A(Taq聚合酶的作用是保证DNA的复制。)

10.D(Mg2+的作用是保证DNA的延伸。)

二、填空题答案及解析思路:

1.PCR技术是一种分子生物学技术,用于扩增DNA。

2.PCR反应体系包括DNA模板、引物、dNTPs、Taq聚合酶、Mg2+、PCR缓冲液。

3.PCR反应过程中,变性阶段是指通过高温使DNA双链解开。

4.PCR反应过程中,复性阶段是指引物与目标DNA模板结合。

5.PCR反应过程中,延伸阶段是指Taq聚合酶沿模板合成新的DNA链。

6.PCR反应中,引物的作用是提供DNA复制的起始点。

7.PCR反应中,dNTPs的作用是作为DNA合成的原料。

8.PCR反应中,Mg2+的作用是激活Taq聚合酶和维持pH平衡。

9.PCR反应中,Taq聚合酶的作用是催化DNA的复制。

10.PCR反应中,PCR缓冲液的作用是提供反应所需的离子和pH环境。

三、简答题答案及解析思路:

1.PCR技术的原理是通过高温变性、低温复性和适温延伸三个步骤循环进行,使DNA链不断复制,达到扩增目的。

2.PCR反应体系中的各成分及其作用:

-DNA模板:提供扩增的模板DNA。

-引物:提供DNA复制的起始点。

-dNTPs:作为DNA合成的原料。

-Taq聚合酶:催化DNA的复制。

-Mg2+:激活Taq聚合酶和维持pH平衡。

-PCR缓冲液:提供反应所需的离子和pH环境。

3.PCR反应过程中的三个阶段及其特点:

-变性阶段:通过高温使DNA双链解开,特点是需要高温(95℃)。

-复性阶段:引物与目标DNA模板结合,特点是需要较低温度(55℃)。

-延伸阶段:Taq聚合酶沿模板合成新的DNA链,特点是需要适温(72℃)。

4.PCR反应中引物的作用是提供DNA复制的起始点,确保DNA扩增的特异性。

5.PCR反应中dNTPs的作用是作为DNA合成的原料,保证DNA复制的准确性。

四、计算题答案及解析思路:

1.引物物质的量=引物浓度×反应体积=0.2μM×50μl=10nM

dNTPs物质的量=dNTPs浓度×反应体积=0.2mM×50μl=10μM

Taq聚合酶物质的量=Taq聚合酶浓度×反应体积=0.01U/μl×50μl=0.5U

2.每次循环中各温度阶段的时间:

-变性阶段:95℃×1分钟

-复性阶段:55℃×1分钟

-延伸阶段:72℃×1分钟

循环次数为30次,总时间=(95℃+55℃+72℃)×1分钟×30次=4370分钟

五、论述题答案及解析思路:

1.PCR技术在医学领域的应用包括:

-诊断疾病:用于检测病原体DNA或基因突变。

-疾病基因检测:用于检测遗传性疾病相关基因。

-肿瘤标志物检测:用于早期诊断和监测肿瘤进展。

-分子诊断:用于病原体感染、药物代谢酶基因多态性等。

2.PCR技术在法医学领域的应用包括:

-个人识别:通过比较DNA指纹进行个体识别。

-犯罪现场调查:用于检测犯罪现场的DNA证据。

-毒品检测:用于检测毒品或毒品残留。

-生物恐怖事件调查:用于检测生物恐怖事件的病原体。

六、实验设计题答案及解析思路:

1.实验方案设计:

-提取细胞DNA。

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