检验仪器pcr考试题及答案

检验仪器pcr考试题及答案姓名：____________________

一、选择题（每题2分，共20分）

1.PCR技术全称是什么？

A.聚合酶链反应

B.聚合酶连接反应

C.聚合酶链延伸反应

D.聚合酶连接延伸反应

2.PCR反应体系中，以下哪种物质是必需的？

A.DNA模板

B.引物

C.dNTPs

D.以上都是

3.PCR反应过程中，以下哪个阶段会发生变性？

A.预变性

B.复性

C.延伸

D.以上都是

4.PCR反应中，以下哪种物质的作用是提高反应效率？

A.Taq聚合酶

B.引物

C.dNTPs

D.Mg2+

5.PCR反应中，以下哪种物质的作用是防止非特异性扩增？

A.引物

B.Taq聚合酶

C.dNTPs

D.Mg2+

6.PCR反应中，以下哪种物质的作用是保证DNA的准确性？

A.Taq聚合酶

B.引物

C.dNTPs

D.Mg2+

7.PCR反应中，以下哪种物质的作用是防止DNA降解？

A.Taq聚合酶

B.引物

C.dNTPs

D.Mg2+

8.PCR反应中，以下哪种物质的作用是提高反应的特异性？

A.Taq聚合酶

B.引物

C.dNTPs

D.Mg2+

9.PCR反应中，以下哪种物质的作用是保证DNA的复制？

A.Taq聚合酶

B.引物

C.dNTPs

D.Mg2+

10.PCR反应中，以下哪种物质的作用是保证DNA的延伸？

A.Taq聚合酶

B.引物

C.dNTPs

D.Mg2+

二、填空题（每题2分，共20分）

1.PCR技术是一种__________技术，用于__________。

2.PCR反应体系包括__________、__________、__________、__________、__________。

3.PCR反应过程中，变性阶段是指__________。

4.PCR反应过程中，复性阶段是指__________。

5.PCR反应过程中，延伸阶段是指__________。

6.PCR反应中，引物的作用是__________。

7.PCR反应中，dNTPs的作用是__________。

8.PCR反应中，Mg2+的作用是__________。

9.PCR反应中，Taq聚合酶的作用是__________。

10.PCR反应中，PCR缓冲液的作用是__________。

三、简答题（每题5分，共20分）

1.简述PCR技术的原理。

2.简述PCR反应体系中的各成分及其作用。

3.简述PCR反应过程中的三个阶段及其特点。

4.简述PCR反应中引物的作用。

5.简述PCR反应中dNTPs的作用。

四、计算题（每题10分，共20分）

1.如果PCR反应体系中，引物的浓度为0.2μM，dNTPs的浓度为0.2mM，Taq聚合酶的浓度为0.01U/μl，反应总体积为50μl，计算反应体系中各成分的物质的量。

2.如果PCR反应的循环次数为30次，每次循环的变性温度为95℃，复性温度为55℃，延伸温度为72℃，计算每次循环中各温度阶段的时间。

五、论述题（每题15分，共30分）

1.论述PCR技术在医学领域的应用。

2.论述PCR技术在法医学领域的应用。

六、实验设计题（每题20分，共40分）

1.设计一个实验方案，用于检测某基因在细胞中的表达水平。

2.设计一个实验方案，用于扩增某基因片段。

试卷答案如下：

一、选择题答案及解析思路：

1.A（PCR技术全称是聚合酶链反应。）

2.D（PCR反应体系中，DNA模板、引物和dNTPs都是必需的。）

3.A（PCR反应过程中，变性阶段是指通过高温使DNA双链解开。）

4.D（Mg2+的作用是提高反应效率。）

5.A（引物的作用是防止非特异性扩增。）

6.B（引物的作用是保证DNA的准确性。）

7.D（Mg2+的作用是防止DNA降解。）

8.A（引物的作用是提高反应的特异性。）

9.A（Taq聚合酶的作用是保证DNA的复制。）

10.D（Mg2+的作用是保证DNA的延伸。）

二、填空题答案及解析思路：

1.PCR技术是一种分子生物学技术，用于扩增DNA。

2.PCR反应体系包括DNA模板、引物、dNTPs、Taq聚合酶、Mg2+、PCR缓冲液。

3.PCR反应过程中，变性阶段是指通过高温使DNA双链解开。

4.PCR反应过程中，复性阶段是指引物与目标DNA模板结合。

5.PCR反应过程中，延伸阶段是指Taq聚合酶沿模板合成新的DNA链。

6.PCR反应中，引物的作用是提供DNA复制的起始点。

7.PCR反应中，dNTPs的作用是作为DNA合成的原料。

8.PCR反应中，Mg2+的作用是激活Taq聚合酶和维持pH平衡。

9.PCR反应中，Taq聚合酶的作用是催化DNA的复制。

10.PCR反应中，PCR缓冲液的作用是提供反应所需的离子和pH环境。

三、简答题答案及解析思路：

1.PCR技术的原理是通过高温变性、低温复性和适温延伸三个步骤循环进行，使DNA链不断复制，达到扩增目的。

2.PCR反应体系中的各成分及其作用：

-DNA模板：提供扩增的模板DNA。

-引物：提供DNA复制的起始点。

-dNTPs：作为DNA合成的原料。

-Taq聚合酶：催化DNA的复制。

-Mg2+：激活Taq聚合酶和维持pH平衡。

-PCR缓冲液：提供反应所需的离子和pH环境。

3.PCR反应过程中的三个阶段及其特点：

-变性阶段：通过高温使DNA双链解开，特点是需要高温（95℃）。

-复性阶段：引物与目标DNA模板结合，特点是需要较低温度（55℃）。

-延伸阶段：Taq聚合酶沿模板合成新的DNA链，特点是需要适温（72℃）。

4.PCR反应中引物的作用是提供DNA复制的起始点，确保DNA扩增的特异性。

5.PCR反应中dNTPs的作用是作为DNA合成的原料，保证DNA复制的准确性。

四、计算题答案及解析思路：

1.引物物质的量=引物浓度×反应体积=0.2μM×50μl=10nM

dNTPs物质的量=dNTPs浓度×反应体积=0.2mM×50μl=10μM

Taq聚合酶物质的量=Taq聚合酶浓度×反应体积=0.01U/μl×50μl=0.5U

2.每次循环中各温度阶段的时间：

-变性阶段：95℃×1分钟

-复性阶段：55℃×1分钟

-延伸阶段：72℃×1分钟

循环次数为30次，总时间=(95℃+55℃+72℃)×1分钟×30次=4370分钟

五、论述题答案及解析思路：

1.PCR技术在医学领域的应用包括：

-诊断疾病：用于检测病原体DNA或基因突变。

-疾病基因检测：用于检测遗传性疾病相关基因。

-肿瘤标志物检测：用于早期诊断和监测肿瘤进展。

-分子诊断：用于病原体感染、药物代谢酶基因多态性等。

2.PCR技术在法医学领域的应用包括：

-个人识别：通过比较DNA指纹进行个体识别。

-犯罪现场调查：用于检测犯罪现场的DNA证据。

-毒品检测：用于检测毒品或毒品残留。

-生物恐怖事件调查：用于检测生物恐怖事件的病原体。

六、实验设计题答案及解析思路：

1.实验方案设计：

-提取细胞DNA。

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