2.2动物细胞工程（课时1）课件-高二下学期生物人教版（2019）选择性必修3

动物细胞工程知识点1动物细胞培养1、含义：p43黑体字指从动物体中取出相关组织，将它分散成单个细胞，然后在适宜的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。1题答案：细胞增殖能力与供体的年龄有关，幼龄动物的细胞增殖能力强，有丝分裂旺盛，老龄动物的细胞则相反。所以，一般来说，幼龄动物细胞比老龄动物细胞易于培养。分化程度越低的细胞，增殖能力越强，所以更容易培养。p45知识点1动物细胞培养1、含义：p43黑体字指从动物体中取出相关组织，将它分散成单个细胞，然后在适宜的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。选材：原因：这些细胞分化程度低，分裂能力强，容易培养。动物胚胎或幼龄动物的组织、器官在进行培养之前为什么要将细胞分散成单个细胞？用什么方法分散？资料卡片：在动物组织中存在由细胞分泌物构成的的非细胞复杂聚合物网络，主要成分包括胶原蛋白、非胶原蛋白糖蛋白、蛋白聚糖和糖胺聚糖。知识点1动物细胞培养1、含义：p43黑体字指从动物体中取出相关组织，将它分散成单个细胞，然后在适宜的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。原因：常用方法：单个细胞更容易吸收营养物质和排出代谢废物，生长和分裂的速度会更快。分散成单个细胞后，细胞间的接触抑制消失，生长和分裂的速度会更快。注：接触抑制指在贴壁生长的细胞之间互相接触，发出信号让细胞停止分裂。机械方法；胰蛋白酶处理；胶原蛋白酶处理。可能对细胞造成损伤，应注意控制处理时间不宜过长。p44答案：说明细胞间的物质主要是蛋白质胃蛋白酶作用的适宜pH约为2，当pH大于6时，胃蛋白酶就失去活性，多数动物细胞培养的适宜pH为7.2~7.4，胃蛋白酶在此环境中没有活性，所以用胃蛋白酶不行。我想使用胃蛋白酶？可以嘛？知识点1动物细胞培养1、含义：p43黑体字指从动物体中取出相关组织，将它分散成单个细胞然后在适宜的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。知识点1动物细胞培养2、动物细胞培养所需满足的条件（1）p44合成培养基的含义主要是葡萄糖，不使用淀粉、蔗糖知识点1动物细胞培养2、动物细胞培养所需满足的条件（1）p44合成培养基的含义培养基中添加血清的原因血清和血浆有什么区别？培养动物细胞时为什么常添加血清？用血浆可以不？培养基类型辨析可能导致培养基凝固，且缺乏足够的生长因子，影响细胞生长。注：血清成分复杂，不仅会增加产品分离纯化的成本，还容易引起病原体污染。知识点1动物细胞培养2、动物细胞培养所需满足的条件（2）p44③添加一定量的抗生素①②：用于抑制细菌繁殖,但要注意选择抗生素的种类和剂量.分析：在培养基中加入一定量的抗生素，从培养基功能的角度分类属于什么培养基？从培养基功能的角度看属于选择培养基。湿热灭菌知识点1动物细胞培养2、动物细胞培养所需满足的条件（3）p44知识点1动物细胞培养2、动物细胞培养所需满足的条件（4）p44作用直接通空气行不行？换成95%O₂+5%CO₂的混合气体行不行？作用1.提供氧气等气体研究表明，高浓度氧气（>50%）会对大多数动物细胞产生毒性，抑制细胞增殖，甚至导致细胞死亡。氮气完全被移除，细胞无法适应。知识点1动物细胞培养2、动物细胞培养所需满足的条件（4）p44【拓展】松盖培养瓶瓶盖上有微孔或透气膜，允许气体（如O₂和CO₂）自由交换，确保细胞生长所需的气体环境。知识点1动物细胞培养2、动物细胞培养所需满足的条件（4）p44液体培养基【小结】知识点1动物细胞培养3、原理：细胞增殖4、目的：获得细胞或者细胞产物知识点1动物细胞培养3、过程：取动物组织单个细胞细胞悬液培养加培养液细胞的两种生活方式：①悬浮生长细胞：细胞能够悬浮在培养液中生长增殖②贴壁生长细胞：细胞需要贴附于某些基质(如培养瓶壁)表面才能增殖培养液中的细胞增殖曲线是“S”型？还是“J”型？后期细胞数量是否会下降？为什么？在适宜条件下机械方法；胰蛋白酶处理；胶原蛋白酶处理知识点1动物细胞培养3、过程：取动物组织单个细胞细胞悬液培养细胞有两种生活方式①悬浮生长细胞②贴壁生长细胞

(主要类型)细胞密度大营养不足代谢废物累积接触抑制细胞凋亡、坏死导致接触抑制是指当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞通常会停止分裂增殖的现象。知识点1动物细胞培养3、过程：取动物组织单个细胞细胞悬液培养细胞有两种生活方式①悬浮生长细胞②贴壁生长细胞

(主要类型)细胞密度大营养不足代谢废物累积接触抑制细胞凋亡、坏死导致接触抑制是指当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞通常会停止分裂增殖的现象。注：癌细胞没有接触抑制现象。再不想想办法细胞全都“死翘翘”了，咋个办嘛？知识点1动物细胞培养3、过程：培养过程中易出现的问题：解决办法：原代培养：指将分瓶前的细胞培养，即动物组织经过处理后的初次培养。传代培养：指分瓶后的细胞培养。P45教材原文勾画将原代培养中贴壁生长细胞在进行进行“分瓶培养”/“传代培养”之前应该用什么方法进行处理，才更有利于后续培养？【笔记整理】动物细胞培养的过程取动物组织单个细胞细胞悬液原代培养细胞有两种生活方式①悬浮生长细胞

(次要类型)②贴壁生长细胞

(主要类型)离心法收集细胞先用胰蛋白酶处理，再用离心法收集细胞制成细胞悬液传代培养因细胞密度大、营养不足、代谢废物累积导致细胞死亡因：①细胞密度大、营养不足、代谢废物累积；②接触抑制，导致细胞死亡传代培养可以一直进行下去吗？正常细胞：传代次数有限。指细胞只能分裂一定次数，之后会停止增殖。干细胞：传代能力较强，但可能随传代次数增加而丧失增殖与分化的能力。癌细胞：理论上可无限传代，但需监控遗传稳定性。【比较】原代培养&传代培养原代培养传代培养含义分瓶之前的细胞培养分瓶后的细胞培养细胞来源直接来自生物体（如组织块或器官）来自原代培养的细胞细胞特点细胞保持较高的生物学特性，接近体内状态传至10代后就不易传下去，10-50代左右，增殖会逐渐缓慢，甚至停止。但有些细胞会克服细胞寿命的自然极限，获得不死性细胞。应用研究细胞的基本特性药物筛选等大规模细胞生产长期实验等培养条件相同初次使用胰蛋白酶处理后进行培养的细胞。第二次次使用胰蛋白酶处理后进行培养的细胞。【比较】原代培养&传代培养【基础检测】(1)原代培养：将

的细胞培养，即动物组织经处理后的

称为原代培养。(2)传代培养：将

的细胞培养称为传代培养；(3)细胞贴壁：

体外培养的细胞需要

才能生长增殖，这类细胞往往贴附在培养瓶的

上，这种现象称为细胞贴壁；(4)接触抑制：当

细胞生长到

时，细胞通常会

。答案：(1)分瓶之前

初次培养 (2)分瓶后(3)大多数

贴附于某些基质表面

瓶壁(4)贴壁

表面相互接触

停止分裂增殖p45不同相同项目动物细胞培养植物组织培养原理细胞增殖植物细胞的全能性培养前处理无菌；用机械的方法或胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理，使组织分散成单个细胞无菌、离体取材动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织植物幼嫩的部位或花药等培养基液体固体培养基成分糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、维生素和动物血清等水、矿质元素、蔗糖、维生素、植物激