培养基质量保证与质量控制

培养基质量保证与质量控制培养基和试剂的质量要求(GB/T4789.28)简介微生物检测的定义在特定的环境下（无菌），采用适当的方法对样品中目标微生物进行增殖和培养，并对经放大后的目标微生物进行感官、生理、生化等方面的特性分析和判定，以确定样品中目标微生物的量和/或质的特性的过程。培养基的质量保证与质量控制质量保证

qualityassurance

为使人们能确信某个产品(这里只培养基)能满足规定的质量要求所必须执行的有计划的和系统的活动提出质量要求并制定系统的质量控制计划质量控制qualitycontrol

为达到质量要求所采取的操作技术和活动为达到质量要求所采取的具体的技术操作培养基质量要求：GB/T4789.28GB/T4789.28-2013(2014年6月1日实施)规定了食品微生物学检验用培养基和试剂的质量要求。适用于食品微生物学检验用培养基和试剂的质量控制。辅助标准：SN/T1538SN/T1538.1-2005(2005年7月1日实施)第1部分:实验室培养基制备质量保证通则提出要求并制定系统的控制计划属于质量保证的范围SN/T1538.2-2007(2007年10月16日实施)第2部分:培养基性能测试实用指南为保证提出的质量要求所需要采取的技术操作属于质量控制的内容GB/T27405-2008.实验室质量控制规范食品微生物检测[S].标准的作用为培养基质量保证和质量控制标准体系，有利于对培养基的标准化管理，提高实验室检测质量。GB4789.28-2013修订后的主要内容1、范围；2、术语和定义；3、培养基及试剂质量保证；4、质控菌株的保藏及使用；5、培养基和试剂的质量要求；6、培养基和试剂性能测试方法；7、测试结果的记录；＊附录。6、培养基和试剂性能测试方法6.1生产商及实验室自制培养基和试剂的质量控制的测试；6.1.1～6.1.2分离和计数固体培养基（非选择性和选择性)-目标菌生长率定量测试法。6.1.1～6.1.2选择性分离和计数固体培养基-非目标菌选择性半定量测试法。6.1.1～6.1.2选择性分离和计数固体培养基-非目标菌特异性定性测试法等。6.2实验室使用商品化培养基和试剂的质量控制的测试6.2.1非选择性分离和计数固体培养基-半定量测试法。6.2.2

选择性分离和计数固体培养基-半定量测试法。6.2.3非选择性增菌培养基、选择性增菌培养基和选择性液体计数培养基-定性测试法6.2.4

悬浮培养基和运输培养基-定性测试法。6.2.5、6.2.6、6.2.7Mueller-Hinton血琼脂、鉴定培养基、实验试剂的测试方法、-定性测试法。培养基测试方法定量测试方法半定量测试方法定性测试方法几种方法的使用原则通常使用半定量或定性测试方法就能满足实验室对培养基性能测试的要求评价新的培养基或新的供应商的产品时，应采用定量测试方法采用定量方法时，必须使用参考培养基进行对照；采用半定量和定性方法时，使用参考有助于结果解释。参考培养基必须是从近期批次中选出的已知质量良好的培养基。介绍几种常用的质控方法Miles-Misra法(定量方法)改进的平板划线法(半定量方法)平板接种观察法(定性方法)上述均为固体培养基测试方法,液体培养基定量和半定量测试方法也要通过固体培养基菌落计数技术才能得到结果。改良Miles-Misra法操作方法测试菌株过夜培养物10倍稀释测试平板和参照平板划分为4个区域并标记从最高稀释度开始

，分别滴一滴稀释液于试验平板和对照平板标记好的区域将稀释液涂满整个1/4区域，37°C培养18hr。对易计数的区域计数，按公式计算结果改进的划线法接种法模式图计算计算生长指数G：每条有菌落生长的划线记作1分，每个仅一半的线有菌落生长记作0.5分没有菌落生长或生长量少于划线的一半，则记作0如：菌落在A区和B区全部生长，而在C区有一半线生长则G

为10目标菌在培养基上应呈现典型的生长，而非目标菌的生长应部分或完全被抑制

目标菌的生长指标G大于6时，培养基可接受结果解释定性测试方法

用3mm接种环取测试菌培养物，在测试培养基表面划平行直线。可同时在一个平板上接种多个菌株，但划线不能交叉按标准中规定的培养时间和温度对接种后的平板进行培养

结果解释培养后按以下方法计分：0表示无生长1表示微弱生长2表示生长良好目标菌得分应为2，并有典型的菌落外观、大小和形态非目标菌的生长应部分或全部被抑制

质控菌株要求标准菌株：来自国际/国家菌种保藏中心(本标准要求为ATCC菌株)或经ISO9002认证的经销商提供的菌株(有资质)制备储备菌株和工作菌株时一次制备多份，每株菌原则上不能重复使用通常工作菌株不能再传代，但处理得当可再次使用标准储备菌株(Referencestock)标准菌株在实验室经过一次传代获得的一组完全相同的菌株传代菌株应当完全具备标准菌株的所有性状传代时要保证一定的量(减少传代次数)每株菌株尽量避免多