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文档简介
3有机肥中大肠杆菌活菌PMA-qPCR快速测定注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法NY525-2012有机肥料3.1PMA(叠氮溴化丙锭)Propidium3.2实时定量PCR(qPCR)QuantitativeReal每个反应管内的荧光信号达到设定的阈值时所经历的4主要包括:裂解液、清洗液、洗脱液、磁珠。于室温保存(16~30℃),置于阴凉干燥6.3SYBR®PremixExTaqTM配套RoxReferenceDye或Ro以收集菌体,提取其全基因组DNA。采用微量基因拷贝数=全基×660×NA…………DNA浓度——copies/μL6.5.2B液(0.2mol/L磷酸氢二钠水溶液5PMA-LiteTMLEDPhotolysisDevice(E90002)光解仪、恒温震荡培养箱、恒温金温离心机、微型孔板离心机、漩涡震荡器、核酸提取仪、qPCR仪、超微量分光光度计等。应将样品放入0℃~4℃冰箱保存,放置时间也不宜超过24h。9检测步骤9.1样品预处理为使照射过程中不产生热量,采用Biotium公司生产的PMA-LiteTMLEDPhotolysis69.5标准曲线7然后利用清洗液去除杂质,最终由洗脱液将核酸从磁珠上洗A.2耗材A.2.1样品盘及套管A.2.2样品盘及梳子A.2.3储存8A.3仪器及设备A.4操作步骤A.4.1试剂添加A.4.2加样A.4.3启动萃取完成后,取出相应的萃取样品盘和套管/梳子。将核酸从心管保存。建议使用新鲜制备的核酸用于后续操作,若要长期保存核酸,建
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