自发性强直性脊柱炎食蟹猴解剖病理学检查规程编制说明

1《自发性强直性脊柱炎食蟹猴解剖病理学检查规程》编制说明一、工作简况（一）任务来源强直性脊柱炎（AnkylosingSpondylitis，AS）作为一种全身性自身免疫性疾病，其病因、发病机制以及治疗方法等方面的研究备受关注。自发性AS食蟹猴模型在血液学指标、影像学以及组织病理学特征等方面的异常改变均与人类AS患者具有高度相似性，是进行AS疾病研究较为的理想实验动物模型之一。由于解剖病理学检查能够捕捉反映疾病本质特征的病理学变化。因此，对AS食蟹猴模型进行深入的病理学研究，能够为AS提供更全面、更详细的疾病信息，有助于更深入地理解AS的病变特点、发病机制和病理过程。这些信息对于推动AS的科学研究、提高诊断的精确性，以及开发更有效的治疗方法都具有至关重要的意义。然而，由于AS疾病的复杂性和多样性，对AS食蟹猴的解剖病理学检查面临着挑战。目前，这一领域的研究缺乏统一的2标准和规范，这不仅影响了研究结果的准确性和可靠性，还可能遗漏重要的病理信息。考虑到食蟹猴标本的珍贵性，制定详细且统一的解剖病理学检查标准显得尤为重要。为此，我们基于广东省生物技术研究院（原广东省实验动物监测所）主持的国家自然基金项目“自发强直性脊柱炎食蟹猴模型的建立及其骨代谢调控机理研究”（编号：81941010）、号：2021YFF0702600）、国家自然基金项目“CD74+单核细胞促进CXCR4+CD8+T细胞骨髓驻留在AS食蟹猴骨髓炎症中的作用机制研究”（编号：32470567）、“自发性强直性脊柱炎食蟹猴模型的研究及应用平台”（编号：2017A070701003）、“非人灵长类自发性疾病动物筛选与评价技术平台建设”（编号：2017A070701003），开展AS食蟹猴模型研究的基础上，结合模型解剖病理学检查的实践，文献报道及参考相关的标准研究，编制了该《自发性强直性脊柱炎食蟹猴解剖病理学检查技术规程》。（二）协作单位本技术规范牵头单位为广东省生物技术研究院（原广东省实验动物监测所协作单位广东春盛生物科技发展有限公司、中山大学附属第一医院、广东省人民医院、广东药科大学、南方医科大学第三附属医院。（三）主要工作过程31.起草阶段（1）组建起草小组在2023年11月，本标准由广东省生物技术研究院（原广东省实验动物监测所）提出，并联合广东春盛生物科技发展有限公司、中山大学附属第一医院、广东省人民医院、广东药科大学、南方医科大学第三附属医院等单位的专家共同组成起草小组。起草小组涵盖了实验动物学、病理学、风湿病学等多个领域的专家。经起草小组讨论，明确了标准的制定目的、范围和内容框架。（2）资料收集与调研在起草阶段，起草小组在研究团队开展的AS食蟹猴模型的系列相关研究的基础上,进行了国内外关于强直性脊柱炎的文献资料的查阅，了解了强直性脊柱炎的发病机制、病理表现以及实验动物模型的建立和应用情况。同时，还调研了国内外相关的解剖病理学检查标准和规范，为制定本标准提供了科学依据和参考。（3）专家咨询与论证为了确保标准的先进性和科学性，起草小组于2024年5月邀请了多位国内外知名专家进行咨询和论证。专家们对标准的制定过程、内容框架、关键指标等方面进行了深入讨论和指导，提出了宝贵的意见和建议。起草小组根据专家的意见，对标准进行了多次修改和完善。4（4）标准内容制定在充分调研和专家咨询的基础上，起草小组开始制定标准的具体内容，并于2024年11月形成了标准初稿。标准内容涵盖了自发性强直性脊柱炎食蟹猴解剖病理学检查的各个方面，包括检查程序、解剖病理学检查的具体步骤和内容、检查报告的撰写要求等。在制定过程中，起草小组特别注重标准的实用性和可操作性，确保标准能够在实际应用中发挥指导作用。（5）内部审核与修改在标准内容制定完成后，起草小组于2025年1月进行了内部审核和修改工作。通过多次讨论和修改，力求标准的科学性、实用性和可操作性。同时，还考虑了标准的可读性和易懂性，最终形成了《自发性强直性脊柱炎食蟹猴解剖病理学检查技术规程》的正式稿。2.征求意见阶段2025年2月学会标委会秘书处将标准编制说明和征求意见稿通过全国团体标准平台发布公示，面向相关行业的单位和经标准起草工作组讨论，采纳？条，不采纳？条。3.审查及报批阶段标准起草工作组将收集到的意见进行认真分析和处理，并据此对征求意见稿做出最终修订，以形成标准送审稿。随后，该送审稿由学会标委会秘书处负责安排技术审查。标准起草工5作组根据审查意见修改整理后，最终形成标准草案报批稿，提交给广东省精准医学学会进行审批。（四）起草组成员及其工作主要起草人：高洪彬、李文德、万红平、苏乔、贾欢欢、罗挺、凌雪荧。主要起草成员皆参与了本标准的研究、讨论和不同章节的二、标准编制原则和确定标准主要内容（一）标准编制原则1.合规性原则标准制定严格遵循国家和地方的相关法律、法规、方针及政策，并在广东省精准医学学会章程所规定的业务范畴内展开。该标准符合精准医学相关的技术标准制定要求，且已被纳入学会的发展规划之中。2.公正性原则标准制定遵循开放、透明、公平、公正的原则，同时，本着需要满足标准技术规范需要满足相似性、重复性、可靠性、医疗机构以及实验动物研究机构的代表共同参与团体标准的制定工作。63.先进性原则按照有利于科学合理利用资源，有利于提高经济效益、社会效益、生态效益的原则，做到技术上先进、经济上合理，有利于精准医学行业发展。4.正确性原则标准的编写严格依据国家重点研发领域的研究结果，对技术方法、评价内容等进行了核验，保证其正确性。通过使用精准的词汇与严密的语句结构，力求使标准内容清晰表达，以让不同知识背景和专业水平的人员全面理解。5.简明性原则在编写标准时注重内容的简洁明了，力求让标准内容通俗易懂。通过使用大众化的语言，确保使用者在参照本标准时能够正确理解并有效执行。本标准规定了自发性强直性脊柱炎食蟹猴解剖病理学检本标准适用于强直性脊柱炎食蟹猴的解剖病理学检查。（二）标准主要内容本标准由范围、规范性引用文件、术语和定义、缩略语、检查程序、解剖病理学检查和检查报告共7部分组成。三、主要试验（或验证）的分析、综述报告，技术经济论证，预期的经济效果国内目前没有强直性脊柱炎食蟹猴解剖病理学技术规范7相关的国家法规，也没有相应的行业标准或地方标准等。本标准编制的相关单位在国家重点研发项目国家自然基金项目“自发强直性脊柱炎食蟹猴模型的建立及其骨代谢调控机理研究”（编号：81941010）、“十四五”项目“特色动物代谢性疾病模型的创建及开发”（编号：2021YFF0702600）、国家自然基金项目“CD74+单核细胞促进CXCR4+CD8+T细胞骨髓驻留在AS发性强直性脊柱炎食蟹猴模型的研究及应用平台”（编号：2017A070701003）、“非人灵长类自发性疾病动物筛选与评价技术平台建设”（编号：2017A070701003）等项目开展期间，完成了多次AS食蟹猴的解剖病理学检查实践，结合国内外强直性脊柱炎的最新研究动态，建立了《自发性强直性脊柱炎食蟹猴解剖病理学检查技术规程》标准草案。本标准的编制，经过专家咨询与论证，确保了其科学性与先进性。通过统一和规范自发性强直性脊柱炎食蟹猴的解剖病理学检查标准，能够减少因缺乏统一标准而导致的重复实验和资源浪费，降低科研成本。同时，该标准的实施有望促进强直性脊柱炎发病机制和治疗方法的研究进展，为新药研发和治疗手段的创新提供有力支持，从而带来显著的社会经济效益。预期的经济效果包括提升科研成果的转化效率，加速新药上市进程，以及为患者提供更有效的治疗方案，减轻社会医疗负担。为确保标准的科学性和实用性，我们进行了多项试验和验8证。以下为项目开展过程中，根据标准相关内容AS食蟹猴外观检查实施例根据《自发性强直性脊柱炎食蟹猴解剖病理学检查规程》操作人员之间进行外观检查，得到了一致的观察结果。外观检查情况如下：（1）毛发和皮肤局部毛发脱落，特别是在脊柱两侧区域（图2，三角号）。其余2只AS食蟹猴毛发均未见明显异常。皮肤：观察到毛发有异常改变的AS食蟹猴，脱毛部位的皮肤表面光滑，未见溃烂或皮肤病变等。但在背部和腰部皮肤上可见轻微的擦伤痕迹，可能由于动物活动受限所致。体表温度正常，无全身性或局部发热现象。其余2只AS食蟹猴皮肤均未见明显异常。（2）脊柱：3只AS食蟹猴脊柱均呈现明显的畸形变化，背部弯曲较为明显，出现明显的“后弯”（图2，箭头），表明脊柱的强直性变形。脊柱部位触摸时表现出僵硬感。（3）尾部：3只AS食蟹猴尾部均表现为不同部分之间明显分段和硬化，尾部椎体之间出现竹节样改变（图2），触摸时表现出僵硬感。9尤其是靠近腰部和脊柱连接的区域。四肢的肌肉群及其他部位肌肉群均未见明显萎缩。（5）其它骨关节：3只AS食蟹猴髋部关节、四肢外周关节等其它骨关节均未见隆起、膨胀或畸形等异常改变。（6）眼球：3只AS食蟹猴眼球均无明显的充血或水肿，角膜透明，虹膜颜色正常，巩膜未见水肿等异常改变。图2.AS食蟹猴外观检查。AS食蟹猴整体毛发较为AS食蟹猴大体剖检实施例根据《自发性强直性脊柱炎食蟹猴解剖病理学检查规程》操作人员之间进行大体剖检，得到了一致的剖检结果。大体剖检情况如下：（1）脊柱脊柱形态：脊柱呈现出明显的后凸（驼背）畸形，尤其是在胸椎和腰椎部分。在腰椎和胸椎部分观察到明显的骨质增生，椎体表面出现了不规则的骨质增生性突起，骨间隙明显变窄，部分椎体已呈现融合现象。椎间盘高度降低，部分椎间隙几乎消失，提示病变可能已经导致骨性融合。脊柱活动度评估：在尝试对脊柱进行轻微的弯曲和旋转时，脊柱的活动度严重受限，腰部、背部难以进行屈伸、侧屈、旋转等运动。脊柱周围软组织：脊柱周围肌肉显示出明显的纤维化和萎有的位置质地变软。韧带增厚、硬化，部分韧带区域有钙化现象。脂肪垫未见明显异常。（2）骶髂关节未观察到骶髂关节明确的骨质增生或侵蚀等形态学改变，其周围软组织未观察到粘连、增厚或萎缩现象。（3）外周关节、眼球、肠道、心脏、肾脏、肺脏、肝脏、胸腺、淋巴结大体剖检未见明显病理性改变。AS食蟹猴组织病理学检查实施例根据《自发性强直性脊柱炎食蟹猴解剖病理学检查规脊柱、骶髂关节进行制片，并在不同的病理专业人员之间进行阅片和诊断，得到了一致的组织病理学观察结果。组织病理学检查结果如下：附着点：观察到脊柱韧带与骨骼连接部位的局部炎症，病灶部位可见较大量的以淋巴细胞为主的炎症细胞浸润、聚集，其间可见较大量新生血管，伴随轻微水肿。韧带：脊柱韧带出现了变性、坏死、新生血管形成以及炎症细胞浸润和聚集，在坏死及炎症病灶中可观察到钙化以及异位骨化（图3）。此外，部分韧带可观察到纤维化，从而表现为韧带增厚。椎体：椎体边缘可见新生骨质形成，从而导致椎体边缘骨质的增厚，并与发生骨化的椎间盘连接形成骨桥。表现出典型的骨质融合现象。椎体内部骨小梁变细，数量减少，骨髓腔内可见炎症细胞浸润、聚集，免疫组化及原位杂交染色显示了CD8+T淋巴细胞的阳性表达（图4）。椎体骨髓腔内脂肪细胞的数量增加并沿着异位骨化灶聚集分布。椎间盘：椎间盘出现了明显的退变，纤维环变性、断裂和纤维化。纤维化区域可见较大量的新生血管以及炎症细胞浸润，纤维组织内可见新生血管，其周围可见炎症细胞浸润（图5）。在纤维组织中可见异位骨化的发生，异位骨化的组织分化成熟，具有典型的骨小梁与骨髓腔结构（图6）。在后期，椎间盘异位骨化的骨组织与周围椎体内的骨组织具有相同的组织形态学特征，从而导致了上下相邻两个椎体的融合及骨桥的形成。脊柱旁肌肉：脊柱旁肌肉表现出明显的萎缩，局部有炎症细胞浸润，部分肌纤维坏死并可见脂肪浸润和纤维化改变。脊柱旁脂肪垫：脂肪垫区域有脂肪坏死现象，部分区域可见新生血管形成，周围组织有炎症细胞浸润。（2）骶髂关节韧带：骶髂关节周围的韧带表现出明显的炎症，且部分韧带区域出现钙化和骨化现象。韧带附着的骶骨和髂骨：骨髓腔内观察到炎症细胞浸润、聚集以及病灶内的血管新生等现象。关节间隙：可观察到关节间隙变窄或增宽。以上试验结果表明，所制定的检查程序和检查方法科学合理，在不同操作人员之间的适用性好，能够准确反映自发性AS食蟹猴的病理变化。图3.AS食蟹猴脊柱韧带异位骨化。AS食蟹猴脊上韧带内图6.AS食蟹猴脊柱椎间盘异位骨化。在AS食蟹猴脊柱椎间盘纤维环位四、标准涉及的相关知识产权说明1.没有违反相关法律法规及强制性标准，目前暂无相关的国家标准、行业标准或地方标准等。2.参考的相关标准，与制定的团体标准不冲突。T/CALAS108-2021《实验动物骨与关节疾病食蟹猴模型评价规范》DB53/T293.1-2009《实验动物病理学检测第1部分：实验动物处死方法》T/CALAS109-2021《实验动物2型糖尿病食蟹猴模型评价规DB