常用培养基的制备总结

常用培养基的制备总结一、液体培养基1、四硫磺酸钠煌绿增菌液（TTB）（1）基础培养基：胨5克，胆盐1克，碳酸钙10克，硫代硫酸钠（含水）30克，蒸馏水1000毫升。（2）碘溶液：碘片6克，碘化钾5克，蒸馏水20毫升。（3）制法：将基础培养基的各种成分加入蒸馏水中，加热溶解，根据需要分装成瓶，分装时应随时振摇，使其中的碳酸钙混匀。121℃高压灭菌15分钟备用。临用时每100ml基础液加入碘溶液2ml，0.1％煌溶液1ml。2、营养肉汤培养基（1）成分：营养肉汤（市面有售）。（2）制法：称取营养肉汤3克/100ml，根据需要可分装成多种规格，加热溶解，包装灭菌，15磅压力，30分钟。3、缓冲蛋白胨水（BP）（1）成分：蛋白胨10克，氯化钠5克，磷酸氢二钠9克（无水3.57克），磷酸二氢钾1.5克；蒸馏水1000ml。（2）制法：将上述成分混匀，加热溶解，校正PH为7.2，分装灭菌，15磅压力下灭菌20分钟，临用时以无菌操作分装试管或瓶中。4、0.9％氯化钠溶液（1）成分：氯化钠90克，蒸馏水1万毫升。（2）制法：称取氯化钠90克，倒入装有1万毫升蒸馏水的溶液，搅拌溶解。用氢氧化钠调PH7.0，分装入瓶在15磅压力下灭菌20分钟。5、蒸馏水溶液将蒸馏水用氢氯化钠调PH7.0，分装入瓶，在15磅压力下灭菌20分钟。6、磷酸盐缓冲液（PBS）（1）成分：氯化钠8克，氯化钾0.2克，磷酸二氢钾0.2克，磷酸氢二钠1.15克。（2）制法：将上述物质混于水中，加热溶解，混匀后分装入瓶，10磅压力，灭菌20分钟备用。7、保存液（1）成分：葡萄糖20.5克，柠檬酸钠8.0克，柠檬酸0.55克，氯化钠4.2克，蒸馏水1000毫升。（2）制法：将上述各种物质混于水中，加热溶解，混匀后分装入瓶，10磅压力灭菌10分钟，放冰箱备用。8、饱和盐水（1）成分：氯化钠、蒸馏水。（2）制法：在烧杯内装入氯化钠（1000ml水中加入约400克氯化钠）用水煮沸。直到食盐不再溶解为止，在室温下冷却，装瓶备用，如溶液中出现结晶沉淀，为饱和溶液。9、清洁液（弱）泡反应板用（1）成分：重酪酸钾1500克，硫酸2500毫升，水20公斤。（2）制法：先用1公斤水热水，将重酪酸钾溶解后，然后放入温水19公斤即可。10、清洁液（强）泡玻璃器皿用（1）成分：重酪酸钾1500克，硫酸15瓶（2500ml/瓶），开水3700毫升。（2）制法：先用开水3700毫升，将重酪酸钾充分溶解，再缓缓的将硫酸倒入，边倒边搅匀，然后放入较为坚固耐溶器内。加入1m的氢氯化钠摇动至PH值为7.4，溶至1000ml即可。二、固体培养基1、营养琼脂培养基（1）成分：营养琼脂培养基（市面有售）。（2）制法：称得22.50克营养琼脂，放入500ml的三角瓶中，混匀加热溶解，15磅压力下灭菌30分钟。取出后放水浴锅中待冷至50－55℃，倾注平板，凉后倒置备用。2、血液琼脂培养基（1）成分：荣立感应培养基100ml，脱纤维绵羊血液10毫升。（2）制法：取灭菌营养琼脂培养基100毫升，加热溶化，待冷至50℃时，以无菌手续加入脱纤血10毫升，轻轻摇匀，倾注于灭菌平皿中，经无菌检查后，即可放入冰箱中保存备用。注意：琼脂温度以50℃左右为宜，若温度过高，血液变成暗褐色；温度过低，琼脂易凝固成块。此外加入血液后，要轻轻摇匀，防止产生气泡。3、麦康凯琼脂（1）成分：麦康凯琼脂（市面有售）。（2）制法：按5.2克/100ml比例，加入到蒸馏水中，混匀，加热溶解。10磅压力下灭菌20分钟，待冷至50－60℃时，倾注平板。4、沙门氏菌志贺氏菌琼脂（SS琼脂）（1）成分：SS琼脂（市面有售）6.5克，蒸馏水100毫升。（2）制法：将SS琼脂放蒸馏水，混匀，加热100℃，使其全部溶解。冷却到60℃左右即可倾入平板凝固后，保存于冰箱备用。注意：用前倒置温箱中约1小时，使表面水分干燥，便于划线分离。本培养基均匀高压灭菌或加热时间过长。5、三糖铁琼脂（1）成分：三糖铁琼脂（市面有售）6.4克，蒸馏水1000ml。（2）制法：将上述成分混匀，加热溶解，分装试管5－7毫升，8磅压力，灭菌20分钟，趁热制成使底层成柱状，上层斜面，凝固后使用。6、高盐甘露醇琼脂（1）成分：蛋白胨10克，牛肉膏1克，氯化钠75克，甘露醇10克，琼脂20克，蒸馏水1000毫升，0.1％酚红溶液25毫升。（2）制法：将蛋白胨、牛肉膏、氯化钠、琼脂和蒸馏水混合后加热溶解，校正PH至7.4±0.1，趁热加入甘露醇及酚红溶液，充分混匀，分装于三角瓶中，10磅灭菌15分钟，待冷至55℃左右，倾注平板，凝固后冷藏备用。7、葡萄糖琼脂（1）成分：市售葡萄糖琼脂3.6，蒸馏水100ml。（2）制法：将3.6克葡萄糖琼脂放入100ml蒸馏水中，加热溶解，10磅压力下灭菌20分钟，待冷至55℃左右倾注平板。8、磷酸盐琼扩板(PH=7.2)（1）成分：磷酸氢二钠3.41克（有水8.6克），磷酸二氢钾1.27克，琼脂5.5克，氯化钠40克，1％硫柳汞5ml。蒸馏水500毫升。（2）制法：先将琼脂粉加入蒸馏水中，加热溶解。趁热放入磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、氯化钠，校正PH为7.2，加入1％硫柳汞，搅拌均匀，冷至55℃－60℃，倾注平板。每板厚为3mm，20ml。9、磷酸盐缓冲液板（PH=6.47）（1）成分：磷酸氢二钠2.1克，磷酸二氢钾48克，氯化钠40克，琼脂粉4克（即0.8％），蒸馏水500毫升，1％硫柳汞5ml。PH为6.47。制法：先将琼脂粉放入蒸馏水中加热溶解。趁热放入磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、氯化钠、1％硫柳汞5ml，搅均后待冷至60℃倾注平板，每板20毫升，厚为3mm。10、硼酸盐琼脂板（BBS）（1）成分：四硼酸钠4.4克，硼酸2.33克，琼脂粉5克，1％硫柳汞5ml，PH值8.6。（2）制法：先将琼脂粉放入蒸馏水中，加热溶解。趁热放入四硼酸钠、硼酸、硫柳汞，搅均后待冷至60℃倾注平板，每板20ml，厚为3mm。三、生化用培养基4、尿素培养基（1）成分：蛋白胨0.5克，葡萄糖0.5克，氯化钠2.5克，磷酸二氢钾1克