TNAIA 0337-2024 葡萄和葡萄酒中15种杀虫剂的测定 高效液相色谱-串联质谱法

ICSCCSC151

T/NAIA团 体 标 准T/NAIA0337—2024葡萄和葡萄酒中15种杀虫剂的测定高效液相色谱-串联质谱法DeterminationofFifteenInsecticideResiduesinGrapeandWineHPLC-MS/MS2024-11-25发布 2024-12-01实施宁夏化学分析测试协会 发布T/NAIA0337—2024T/NAIA0337—2024II前 言GB/T1.1-20201编写。本文件由宁夏化学分析测试协会提出并归口。（国家市场监督管理总局重点实验室（及葡萄酒质量安全））、宁夏化学分析测试协会。本文件主要起草人：汤丽华、朱燕燕、吕毅、郭阳、刘竞择、杨建兴、吴明、马桂娟、张小飞。PAGEPAGE1葡萄和葡萄酒中15种杀虫剂的测定高效液相色谱-串联质谱法范围本文件规定了葡萄和葡萄酒中15种杀虫剂（吡虫啉、敌百虫、敌敌畏、苯线磷、除虫脲、丙溴磷、吡丙醚、阿维菌素、啶虫脒、毒死蜱、对硫磷、氟胺氰菊酯、氟虫脲、环虫酰肼、甲拌磷）的高效液相色谱-串联质谱检测方法。本文件适用于葡萄和葡萄酒中15种杀虫剂的测定和确证。规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和实验方法GB2763食品中农药最大残留限量术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。原理试样经乙腈超声提取，提取液经分散固相萃取净化，反相色谱柱分离，液相色谱-质谱联用仪测定，外标法定量。试剂和材料本方法所用的试剂，除另有规定外，均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。试剂乙腈：色谱纯。甲醇：色谱纯。甲酸：色谱纯。甲酸铵：色谱纯。无水硫酸镁（MgSO4）：分析纯。氯化钠（NaCl）：分析纯。石墨化碳黑（GCB）：100μm。无水硫酸镁（MgSO4）：50μm。5.1.90.02%甲酸溶液：取甲酸（5.1.3）0.2mL1000mL，摇匀。5.1.10甲酸铵-甲酸溶液（2mmo/L0.126g0.02%甲酸溶液（5.1.9溶解并稀释T/NAIA0337—2024T/NAIA0337—2024PAGEPAGE2至1000mL，摇匀。标准品吡虫啉（纯度：≥95%，CAS：105827-78-9）、敌百虫（CAS：52-68-6）、敌敌畏（CAS：62-73-7）、苯线磷（CAS22224-92-6）、除虫脲（CAS35367-38-5）、丙溴磷（CAS：41198-08-7）、吡丙醚（CAS：95737-68-1）、阿维菌素（CAS：71751-41-2）、啶虫脒（CAS：160430-64-8）、毒死蜱（CAS：2921-88-2）、对硫磷（CAS：56-38-2）、氟胺氰菊酯（CAS：298-02-2），纯度均≥95%，浓度为1.0mg/mL。标准溶液配制混合标准储备液（10.0μg/mL）：1.0mg/mL15100μL，用乙腈（5.1.1）10.0mL，于-18℃1个月。基质混合标准工作溶液：分别准确吸取混合标准储备液（5.3.1）1.0ng/mL~500.0ng/mL的标准工作液，临用现配。仪器和设备液相色谱-串联质谱仪：配备电喷雾离子源。0.1mg0.01g。涡旋混合器。9000r/min。超声波发生器。10000r/min。0.22μm，或相当者。分析步骤试样制备葡萄样品样品按照GB2763附录A中的规定进行制备。将葡萄样品混匀均一化，制备好的试样均分成2份，放入聚乙烯瓶中，密封并标明标记，于-18℃冷冻保存。葡萄酒样品取代表性样品摇匀分装，密闭常温或冷藏保存。测定步骤葡萄样品2g（50mL15mL3gMgSO4（5.1.5）2gNaCl（5.1.6），1min10min，8000r/min5min。移取上500mgMgSO4（5.1.8）50mgGCB（5.1.7）5min，8000r/min5min0.22μmHPLC-MS/MS分析。葡萄酒样品10g（0.01g50mL具塞离心管中，加入15mL乙腈（5.1.1）、3gMgSO4（5.1.5）2gNaCl（5.1.6），1min10min，8000r/min5min。移取上500mgMgSO4（5.1.8）50mgGCB（5.1.7）5min，8000r/min5min0.22μmHPLC-MS/MS分析。仪器参考条件液相色谱参考条件a）色谱柱：C18，2.1mm×100mm，粒径3.5μm或性能相当者。b）柱温：30℃。c）流动相：A：甲酸铵-甲酸溶液（2mmol/L），B：甲醇；梯度洗脱见表1。d）流速：0.3mL/min。e）进样量：2μL。表1 流动相及梯度洗脱条件时间/min流速/（mL/min）流动相A/%流动相B/%0.000.39553.000.39553.010.3505010.000.3505016.000.3307024.000.359524.010.395526.000.3955质谱参考条件a）离子源：电喷雾离子源（ESI）。b）扫描方式：正离子扫描。c）检测方式：多反应监测（MRM）d）鞘气温度：350℃。e）鞘气流速：11.0L/min。f）雾化器压力：45psi。g）喷嘴电压：500V。h）毛细管电压：3000V。i）定性离子对、定量离子对、碎裂电压、碰撞能量等参数参见附录A。定量测定7.3.17.3.2间有峰出现，则对其进行确证。15种杀虫剂标准品的多反应监测（MRM）B，采用基质溶液校准曲线外标法定量。定性测定许偏差之内（2），则可判定样品中存在对应的被测物。表2 定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差相对离子丰度＞50%＞20%至50%＞10%至20%≤10%允许的相对偏差±20%±25%±30%±50%空白试验除不加试样外，均按上述步骤进行。分析结果的表述试样中15种杀虫剂的含量按式（1）进行计算：X cV 1000式中：

m 1000

(1)X ──试样中各种化合物含量，单位为微克每千克（μg/kg）；c ──由标准曲线计算出的试样溶液浓度，单位为纳克每毫升（ng/mL）；V ──试样的最后定容体积，单位为毫升（mL）；m ──试样质量，单位为克（g）。注：测定结果用平行测定的算术平均值表示，保留两位有效数字。精密度在重复性测定条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。其他2g15mL时，吡虫啉、敌百虫、敌敌畏、苯线磷、除虫脲、丙溴磷、4.0μg/kg8.0μg/kg10g15mL1.0μg/kg3.0μg/kg。附录A(资料性15种杀虫剂的质谱参数表A.1 15种杀虫剂的质谱参数序号被测物名称母离子(m/z)子离子(m/z)碎裂电压(v)碰撞能量(ev)1吡虫啉256.1209*,1758010,102敌百虫257221*,10912010,253敌敌畏221145*,12712010,254苯线磷304.15217*,20214020,365除虫脲311158*,1418010,156丙溴磷373303*,1288015,537吡丙醚322.05227*,9612010,158阿维菌素895.5751.3*,449.220045,509啶虫脒223126*,568015,1510毒死蜱350198*,9710015,3511对硫磷292264*,2361201