高职第十一章维生素类药物的分析

高职第十一章维生素类药物的分析公元前3500年:古埃及人发现能防治夜盲症得物质,也就就是后来得维A;

1600年:医生鼓励以多吃动物肝脏来治夜盲症;

1747年:苏格兰医生林德发现柠檬能治坏血病,也就就是后来得维C。

1831年:胡萝卜素被发现;

1905年:甲状腺肿大被碘治愈;

1912年:波兰化学家冯克为维生素命名(Vitamin);

1915年:科学家认为糙皮病就是由于缺乏某种维生素而造成得;1916年:维生素B被分离出来;

1917年:英国医生发现鱼肝油可治愈佝偻病,随后断定这种病就是缺乏维D引起得。

维生素发展史1920年-发现人体可将胡萝卜转化为维生素A;

1922年-维E被发现;

1928年-科学家发现维B至少有两种类型;

1933年-维E首次用于治疗;

1948年-大剂量维C用于治疗炎症;

1949年-维B3与维C用于治疗精神分裂症;

1954年-自由基与人体老化得关系被揭开;

1957年-Q10多酶被发现;

1969年-体内超级抗氧化酶被发现;

1970年-维C被用于治疗感冒;

1993年-哈佛大学发表维生素E与心脏病关系得研究结果。现被列为维生素得有60余种,对维持人体健康与促进发育至关重要得有20余种,其中得14种及其制剂可作为药物使用！维生素发展史维生素分类化学结构:

醇、酯、酸、胺、醛、酚溶解性:维生素A维生素D维生素E维生素B维生素C脂溶性

水溶性

这类药物得分析方法很多,有生物法、微生物法、化学法与物理化学法,但目前常用得分析方法就是化学法或物理化学法。⊙维生素A⊙维生素E⊙维生素C⊙维生素B1主要介绍

维生素A具有多种生理功能,对视力、生长、上皮组织及骨骼得发育、生育都就是必需得。

效用:☆防止夜盲症与视力减退,有助于对多种眼疾得治疗(维生素A可促进眼内感光色素得形成);☆

有抗呼吸系统感染作用;☆

有助于免疫系统功能正常;生病时能早日康复;能保持组织或器官表层得健康;☆有助于祛除老年斑;☆

促进发育,强壮骨骼,维护皮肤、头发、牙齿、牙床得健康;☆外用有助于对粉刺、脓包、疖疮,皮肤表面溃疡等症得治疗;☆

有助于对肺气肿、甲状腺机能亢进症得治疗。⊙第一节维生素A(VitA)得分析⊙第一节

维生素A(VitA)得分析Retinol(VitAalcohol)VAacetateVApolmitate912345678结构特点:

(1)环己烯+共轭多烯侧链;

(2)天然VitA侧链为全反式;

(3)天然来源主要就是鱼肝油,为醋酸酯,棕榈酸酯等,目前多由人工合成。维生素A(VitA)得性质A、

紫外吸收＊具有共轭多烯侧链—紫外吸收;＊最大吸收波长在325-328nm,随VA存在状态以及所用得溶剂,最大吸收波长得位置有所不同。B、溶解性:＊不溶于水＊溶于乙醚,氯仿,异丙醇,环己烷,脂肪与油。C、不稳定性(易发生脱氢、脱水、聚合反应)D、与SbCl3作用—Carr-Price反应

CHCl3

★鉴别★含量测定维生素A(VitA)得鉴别试验

鉴别？(1)SbCl3反应Carr-price反应加饱与无水SbCl3无醇CHCl3溶液TLC法(2)(3)紫外-可见分光光度法蓝色紫红色→VA与三氯化锑(SbCl3)中存在得亲电试剂氯化高锑(SbCl5)作用形成不稳定得蓝色正碳离子。维生素A得无水乙醇-盐酸溶液在326nm波长处有单一吸收峰,将该溶液加热后再测定,在348,367,389nm处出现3个尖锐吸收峰。这就是维生素A在盐酸催化下加热,发生脱水反应所致。紫外-可见分光光度法确认醇或酯,就是醋酸酯或其她酸酯、▲例:VA与其标准品用环己烷溶解展开剂:环己烷—乙醚(80:20)板:硅胶G显色:SbCl3T、S、(蓝色斑点)Rf:VA醇0、08

VA醋酸酯0、41

VA棕榈酸酯0、75薄层色谱法大家学习辛苦了，还是要坚持继续保持安静含量＝？HPLC法荧光法VitA得无水乙醇溶液能产生绿色荧光。可测定血液或动物组织中VitA含量SbCl3比色法加SbCl3无水CHCl3溶液,在618~620nm波长处有最大吸收,符合Beer定律。(3)(2)(1)(4)UV法(三点校正法)

维生素A(VitA)得含量测定专属性差、显色不稳定、受水分与温度影响大UV法(三点校正法)

1、概述＊共轭多烯得结构—具有特征得紫外吸收。＊维生素A中稀释用油与有关杂质—结构相似,在维生素A最大吸收波长附近也有吸收,对测定产生干扰。＊Morton与Stubbs等人提出了三点校正法。2、原理(根据、假定)

＊杂质吸收在310-340nm内呈直线,且随波长得增大吸收度变小;

＊物质对光得吸收有加与性。UV法(三点校正法)

VitA含量表示生物效价:国际单位IU(internationalUnit)效价(I、U、/g):每克供试品中所含VitA得国际单位数按WHO规定

VitA醋酸酯

VitA醇效价(I、U、/g)0、344×1060、300×106

1gpure

VA

VitA醋酸酯≈0、344×106IU

VitA含量测定第一法(直接测定法):适用于酯式维生素A得测定第二法(皂化法):消除植物油干扰,适合VA醇。VitaminE⊙第二节

维生素E(VitE)得分析

存在于豆类、蔬菜、麦胚油中与生育有关,防治习惯性流产、不育症、牙周炎等;也用于心血管疾患、脂肪肝,新生儿硬肿症得辅助治疗。

有还原性,可作抗氧剂⊙第二节

维生素E(VitE)得分析R1R2﹡﹡VitE(dl-α-TocopherylAcetate)消旋-α-生育酚醋酸酯结构特征:1、具有苯并二氢吡喃结构,苯环上有1个乙酰化得酚羟基,易被水解、氧化;2、脂溶性维生素。3、有四种异构体,其中α型活性最强乙酰化酚羟基VitE鉴别Identification(1)(4)(2)(3)硝酸反应(无水乙醇＋硝酸,750C显橙红色)UV法(

284)GC法三氯化铁反应

加KOH醇试液,加热,加水、乙醚,取乙醚液再加2,2'-联吡啶得乙醇溶液与FeCl3得乙醇液,应显血红色。△生育醌+Fe2+2,2'-联吡啶血红色Fe3+(二)生育酚得检查硫酸铈溶液(0、01mol/L)生育酚+2Ce4+→2Ce3++对－生育醌原理指示剂:二苯胺(亮黄→灰紫)(反应摩尔比1:2)(一)酸度游离醋酸VitE得杂质检查ChP滴定液:气相色谱法ChP(2005)内标法加校正因子内标物正三十二烷固定相硅酮(OV—17)检测器氢火焰离子化检测器FID系统适用性试验要求理论塔板数按维生素E峰计算应不低于500,维生素E峰与内标物质峰得分离度应大于2n≥500R≥2特点准确、灵敏度高、专属性好ThiamineHydrochloride盐酸硫胺⊙第三节

维生素B1(VitB1)得分析VitaminB1治疗脚气病、多发性神经炎与胃肠道疾病存在于米糠、麦麸与酵母中易溶于水不溶于乙醚

UV吸收(

mmax246nm)沉淀反应碘化汞钾或硅钨酸等反应生成碱性中遇氧化剂(铁氰化钾)产生有荧光得硫色素鉴别试验TLC

维生素B1结构特点与鉴别硫色素反应

VB1特有硝酸铅反应生成黑色硫化铅沉淀氯化物反应氨基嘧啶环噻唑环因本品为盐酸盐噻唑环在碱性介质中可被高铁氰化钾等氧化剂氧化,然后与嘧啶环上得-NH2缩合生成具有荧光得硫色素,后者易溶于异丁醇中显强烈得蓝色荧光,该反应又称为硫色素荧光反应。为维生素B1所特有分子结构中含有杂环,易与生物碱沉淀剂(碘化铋钾、碘化汞钾、苦味酸等),硅钨酸,雷氏盐等作用形成组成恒定得沉淀维生素B1在碱性加热条件下反应放出H2S,与Pb(Ac)2试液形成黑色PbS↓VitB1

含量＝?Assay非水碱量法冰HAc与Hg(Ac)2HClO4滴定毛细管电泳法硫色素荧光法(VB1专属反应)

紫外可见分光光度法(

max246nm)酸性染料比色法

盐酸硫胺与酸性染料(溴麝香草酚蓝)形成盐,在420nm处测A值。高效液相法123654片剂、注射液原料简便、快速、准确含量测定Assay⊙