毒物检验在急性中毒诊治中的作用

毒物检验在急性中毒诊治中的作用毒物检验简介诊断性的目的：通过对进入体内的毒物的分离鉴定，查清毒物及中毒原因。即是否中毒，是什么毒物引起的中毒。为中毒的诊断、急救和预防提供科学的依据。通过毒检查清毒物对中毒病进行诊断，就如同通过查明虫体和微生物对寄生虫病和传染病进行诊断一样，如果查不清毒物，单凭病史、症状、病理变化等是很难对中毒病进行确诊的。

预防性的目的：主要通过食物、饮用水、所在的环境及机体的某些生理指标进行监测及早预防中毒病的发生。毒物检验的目的

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第2页,共29页，星期六，2024年，5月毒物检验简介毒物检验中的几个主要环节

由于中毒往往在短时间内造成严重后果，所以要求毒物检验既要迅速又要结果正确无误。毒物的种类很多，中毒的原因也很复杂，在进行毒检之前，要考虑以下几个问题：

（1）、有无中毒的可能，即是否为中毒？（2）、如果是中毒可能是何种毒物中毒？（3）、该取什么检材？

（4）、用什么方法进行检验。

只有这几个问题明确了，毒检工作才不致于白费力，或少走弯路。第3页,共29页，星期六，2024年，5月目录1、实验室检测的重要性2、毒物理化实验室开展项目3、实验室检测的质量保证4、理化实验室展望第4页,共29页，星期六，2024年，5月1、实验室检测的重要性♠急性中毒分析的应对流程：现场调查→现场采样→现场检测→实验室检测→中毒原因♠实验室检测结果对事件病因确定，中毒患者病因的诊断和治疗方案的确定均有重要的作用。♠患者的生物材料测定结果可直接指示中毒原因和中毒程度，是事件应对中必采的样品。第5页,共29页，星期六，2024年，5月1-1、常用临床生物样品

常用生物样品的种类、特点与采集

血浆（plasma

）♠

血样

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血清（serum

）全血（wholeblood

）♠尿液（urine

）——

用于未知样品的剂量回收、肾清除率及生物利用度的研究。※尿液未知样品浓度变化大，应测定一定时间内尿中该物质总量。※尿液与血液中未知样品的相关性。※尿中未知样品的呈现状态。第6页,共29页，星期六，2024年，5月尿样：>50ml，若不能及时测定，需4℃保存。血样：采集血清，血浆和全血时防止溶血；临时存放于4℃保存，否则须冷冻保存。盖子颜色添加抗凝剂用途红色无化学、血清学、血库紫色EDTA适用于血液常规检查、糖化血红蛋白绿色肝素钠、肝素锂、肝素胺化学黄色多茴香脑磺酸钠血培养棕色肝素钠铅测定橘红色促凝剂快速生化常用彩色真空采血容器常用生物样品的采集与保存第7页,共29页，星期六，2024年，5月

体内物质分析是借助于现代化的仪器与技术来分析其在体内数量与质量的变化，主要考虑生物样品的种类，被测定生物样品的性质和测定方法等方面的问题。 目前，用于生物样品分析的技术有很多，而利用待测组分或其化学反应生成物所表现出来的物理或物理化学特性，如光学特性、电化学特性等，应用分析仪器进行测量来计算待测组分含量的方法，即物理化学分析法为理化实验室常用方法。

1-2、生物样品的常用分析技术第8页,共29页，星期六，2024年，5月2、毒物理化实验室开展项目第9页,共29页，星期六，2024年，5月2-1、重金属毒物

重金属中毒是指重金属元素或其化合物引起的中毒，如汞中毒、铅中毒等。重金属能够使蛋白质的结构发生不可逆的改变，从而影响组织细胞功能，进而影响人体健康。

典型重金属中毒的症状：锰早期锰中毒以神经衰弱症候群和植物神经功能障碍为主，晚期有锥体外系受损的症状，有致癌致畸致突变效应。第10页,共29页，星期六，2024年，5月2-1、重金属毒物

原子吸收分光光度计

锌（Zn）、镉（Cd）、砷（As）等汞(Hg)血铅检测尿铅检测血汞检测尿汞检测铅(Pb)锰(Mn)尿锰检测发锰检测铜(Cu)血铜检测☞☞☞☛测汞仪：汞蒸气通过进入测汞仪的吸收池测定吸光度，根据光线减弱的程度可以测出气体中的汞含量。

第11页,共29页，星期六，2024年，5月

♠尽管锰、铜、锌等重金属是生命活动所需要的微量元素，但是大部分重金属如汞、铅、镉等并非生命活动所必须，而且所有重金属超过一定浓度都对人体有毒害作用。♠

检测方法：石墨炉原子吸收分光光度法

火焰原子吸收分光光度法♠

原理：试样经灰化或酸消解后，注入原子吸收分光光度计石墨炉/火焰管中，电热原子化/火焰原子化后吸收相应的共振线，在一定浓度范围内，其吸收值与重金属含量成正比，用标准系列定量。原子吸收分光光度计

第12页,共29页，星期六，2024年，5月2-2、气体与挥发性毒物

♠一氧化碳（CO）中毒是含碳物质燃烧不完全时的产物经呼吸道吸入引起中毒。♠CO易与血红蛋白结合，形成碳氧血红蛋白，使血红蛋白丧失携氧能力，造成组织窒息。其对全身的组织细胞均有毒性作用，尤其对大脑皮质的影响最为严重。♠检测方法：血中碳氧血红蛋白分光光度计的定量检测。♠临床意义：用于CO中毒的临床诊断，其中正常参考范围小于3%。轻度中毒血液HbCO浓度为10%～30%，中度中毒血液HbCO浓度为30%～40%，重度中毒血液HbCO浓度可高达50%。①碳氧血红蛋白（HbCO）第13页,共29页，星期六，2024年，5月碳氧血红蛋白定量检测检测原理：

分光光度法是通过双波长吸光度比值法检测血中HbCO，以碳氧血红蛋白饱和度表示血液中HbCO。利用血液中的碳氧血红蛋白吸光光谱特性在化学处理后的改变，进行定量测定。紫外-可见分光光度计第14页,共29页，星期六，2024年，5月2-2、气体与挥发性毒物

②血液中乙醇检测：气相色谱法测定混合物中乙醇的含量

气相色谱法进行血液中酒精含量的定性及定量检测分析。气相色谱中的气-液色谱法属于分配色谱，利用混合物中各组分在固定相与流动相之间分配情况不同，从而达到分离的目的。③氰化物检测：硫氰酸盐的定性检测普鲁士兰快速检验法：酸化的检样受热后，氰化物变成氢氰酸逸出，在碱性条件下与硫酸亚铁作用，生成亚铁氰络盐，用酸酸化后，与高铁离子反应，生成普鲁士蓝。气相色谱仪第15页,共29页，星期六，2024年，5月2-3、除草剂

百草枯又名杀草快、一扫光，速效触灭型除草剂，喷洒后能很快发挥作用。正常情况下对环境无危害，但对人畜具有较强毒性。其主要特点致死量低、死亡率高、预后差。中毒多为自服或误服，也可经皮肤和呼吸道吸收损害上皮组织，于肺部聚集，导致肺纤维化和呼吸衰竭。实验室检测：血、尿中百草枯进行毒物分析。临床表现：轻型-摄入量<20mg/kg，预计能够完全恢复；中到重型-摄入量>20mg/kg，多数患者死于肺功能衰竭；暴发型-摄入量>40mg/kg，1-4天内死于多脏器衰竭。♠♠♠♠第16页,共29页，星期六，2024年，5月定性检测：化学法快速检测通过颜色判断体内含量。定量检测：液相色谱法检测血液中百草枯及其衍生物的含量。百草枯检测方法液相色谱仪浓度从左至右依次递增，颜色相应加深。第17页,共29页，星期六，2024年，5月2-4、杀鼠剂毒鼠强

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俗名“三步倒”、“闻到死”。一种化学剧毒药，其毒性甚至比氰化物还要大100倍。

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不易降解，可造成二次、三次中毒，故而世界上从未正式将其作为商品灭鼠药。

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毒性极大，动物食入后，毒物未入胃便发作，每1000克体重使用0.2毫克，几分钟即可死亡。

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对人的致死量为5~12mg，人口服中毒后数分钟至半小时内发病，若不及时抢救，多于2小时内死亡，但也有中毒较轻者，2~3天后才发病。第18页,共29页，星期六，2024年，5月2-4、杀鼠剂化学名：四次甲基二砜四胺方法确证体外检材预试动物实验体内检材鉴别GCGC/MS快速定性试验：硫酸-盐酸苯肼显色测定微量毒鼠强。毒鼠强的检测第19页,共29页，星期六，2024年，5月2-5、染色体和微核微核（micronucleus,简称MCN），是真核类生物细胞中的一种异常结构，是染色体畸变在间期细胞中的一种表现形式。目前国内外不少部门已把微核测试用于辐射损伤、辐射防护、化学诱变剂、新药试验、食品添加剂的安全评价，以及染色体遗传疾病和癌症前期诊断等各个方面。

染色体（Chromosome）检查，是用外周血在细胞生长刺激因子作用下，培养、获得大量分裂细胞，固定于载玻片上，在显微镜下观察染色体的结构和数量。适用于放射性损伤、白血病及其它肿瘤患者、接触过有害物质者、生殖功能障碍者等。

第20页,共29页，星期六，2024年，5月2-6、高铁血红蛋白

亚硝酸盐的检验亚硝酸盐是一种血液毒物，进入血液循环后作为强氧化剂，迅速将血红蛋白氧化成为高铁（Fe3+）血红蛋白，使该部分血红蛋白失去携氧释氧功能，导致组织缺氧的一种急性、亚急性中毒。常态下，亚硝酸盐通常呈白色或浅黄色颗粒结晶，形似食盐，因此常因误食而中毒。临床上以黏膜发绀、血液褐变、呼吸困难、胃肠道炎症。检验方法：氰化高铁血红蛋白定量测定法。♠♠♠♠第21页,共29页，星期六，2024年，5月原理：高铁血红蛋白（methemoglobin，MetHb）为血红蛋白的氧化物，其在波长632nm处有吸收带。目前标准化的试验方法是氰化高铁血红蛋白测定法，该类方法基于弱酸性MetHb加入氰化物后形成氰化MetHb（MetHb-CN），在630nm处的特征吸收峰会消失。根据加入氰化物前后密度的变化量来计算MetHb的含量。

氰化高铁血红蛋白测定法该法是国际血液标准化委员会推荐的参考方法，具有操作简单、显色快、结果稳定可靠等优点，其致命的弱点是氰化钾试剂剧毒，应合理使用并保管。紫外-可见分光光度计第22页,共29页，星期六，2024年，5月2-7、尿δ-氨基乙酰丙酸原理：ALA+乙酰乙酸乙酯

显色液，形成红色化合物比色定量萃取液+吡咯化合物100℃PH=4.6乙酸乙酯萃取554nm

尿δ-氨基乙酰丙酸（δ-aminolevulinicacid，简称δ-ALA）检测是诊断铅中毒的指标。δ-ALA活性上升是对铅的特异性反映，作为驱铅疗效观察指标，应用于铅接触人员健康监护指标。乙酸乙酯萃取:对二氨基苯甲醛比色法第23页,共29页，星期六，2024年，5月2-8、氟氟是人体内必须的微量元素。在人体内的分布主要集中在骨骼、牙齿、指甲和毛发中，尤以牙釉质中含量最多。骨骼中以长骨的含氟量最高。

饮水占人体氟来源的65%，长期生活在高氟环境的居民主要通过饮水等摄入过量氟而引起的以氟斑牙和氟骨症为特征的全身慢性蓄积性疾病。检查方法：血氟、尿氟、水氟离子选择电极定量测定法。♠♠♠♠第24页,共29页，星期六，2024年，5月氟离子选择电极定量测定法原理：