2025年浙教版选择性必修3生物上册阶段测试试卷含答案

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A.照光处理的甲青花菜下胚轴细胞中有叶绿体，利于筛选杂种细胞B.流程中A处理可使用纤维素酶和果胶酶，B处理可使用聚乙二醇C.杂种细胞经过外源生长素和赤霉素的诱导，直接再分化成为杂种植株D.杂种植株含有控制甲青花菜优良性状的基因，并能通过父本进行传递5、DNA连接酶是重组DNA技术常用的一种工具酶。下列相关叙述正确的是（）A.E.coliDNA连接酶既能连接双链DNA片段互补的黏性末端，也能连接平末端B.DNA连接酶连接的是两条单链上的磷酸和脱氧核糖C.DNA连接酶连接的是两条链碱基对之间的氢键D.DNA连接酶可以将单个的脱氧核苷酸连接到主链评卷人得分二、多选题(共8题，共16分)6、三聚氰胺是小分子有机物；下图为采用单克隆技术制备三聚氰胺特异性抗体的过程，下列有关叙述错误的是（）

A.三聚氰胺分子经“扩容”后可激活小鼠的免疫系统B.从自然免疫的小鼠体内可获得产生该特异性抗体的B淋巴细胞C.经培养筛选后得到的杂交瘤细胞只具有产生单一抗体的特点D.在基因水平上将单克隆抗体改造为嵌合抗体可降低对人体的不良反应7、下列有关生物技术的安全性的叙述，正确的是（）A.病毒可感染动物细胞，因此诱导动物细胞融合一般不用病毒B.我国对农业转基因生物实行了严格的标识制度C.经过基因重组的致病菌可能成为生物武器D.转基因物种的迅速扩散有利于增加生物多样性8、下列说法错误的是（）A.因为土壤中各类微生物的数量不同，所以为获得不同类型的微生物，要按不同的稀释倍数进行分离B.测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释范围相同C.只有得到了3个或3个以上菌落数目在30～300的平板，才说明稀释操作比较成功，并能够进行菌落的计数D.牛肉膏蛋白胨培养基的菌落数明显大于选择培养基的数目，说明选择培养基已筛选出一些细菌菌落9、RNA经逆转录后再进行PCR扩增的技术称为RT－PCR，过程如图所示。下列相关叙述正确的是（）

A.过程①需要RN逆转录酶、引物、核糖核苷酸等条件B.真核细胞的mRNA经过程①②获得的DNA无内含子片段C.过程③PCR扩增时引物中的CG含量会影响退火温度D.RT－PCR技术可应用于新冠病毒（RNA病毒）的核酸检测10、扩展青霉常见于腐烂苹果中，其分泌的展青霉素（Pat）是一种具有致突变作用的毒素。为研究腐烂苹果中Pat的分布，进行了如图实验，其中“病健交界处”为病斑与正常部位的交界处，依据与病斑的距离不同将苹果划分为①~⑤号部位，其中⑤为剩余部分。测定病斑直径为1、2、3cm的苹果中①~⑤号部位的Pat含量，结果如下。下列说法正确的是（）

A.该实验自变量是腐烂苹果中的病斑大小和离病斑距离大小B.可向扩展青霉培养液中加入青霉素以防止杂菌污染C.病斑越大，靠近腐烂部位的果肉中Pat含量越高D.由实验结果可知，苹果去除腐烂部位后可放心食用11、下面为制备单克隆抗体过程示意图，下列相关叙述错误的是（）

A.①表示B淋巴细胞和骨髓瘤细胞均是从小鼠的脾脏中提取的B.④中的筛选是通过抗原—抗体反应进行的C.④中的筛选是为了获得能产生多种抗体的杂交瘤细胞D.⑤可以无限增殖12、下图为某个基因的部分片段，关于该结构的叙述，错误的是（）

A.①所圈定的部位是腺嘌呤B.DNA连接酶作用于②处C.限制酶作用于③处D.解旋酶作用于④处13、自生固氮菌是土壤中能独立固定空气中N2的细菌，将玉米种子用自身固氮菌拌种后播种，可显著提高产量并降低化肥的使用量。科研人员进行了土壤中自生固氮菌的分离和固氮能力测定的研究，部分实验流程如图。以下叙述正确的是（）

A.步骤①土样应取自当地表层土壤；步骤③将土壤悬浮液稀释了1000倍B.自生固氮菌是自养型生物，不可用血细胞计数板来计数土壤悬浮液中的菌体数C.步骤②需充分振荡20min，主要目的是使土壤中的微生物充分释放到无菌水中D.步骤④所用的接种工具是涂布器，该选择培养基的特点是不添加氮源评卷人得分三、填空题(共6题，共12分)14、本课题对能分解尿素的细菌进行了初步的筛选。但是，这只是分离纯化菌种的第一步。对分离的菌种作进一步的鉴定，还需要借助生物化学的方法。在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的___________将尿素分解成了_____________。氨会使培养基的________________，pH______________。因此，我们可以通过检测培养基______________来判断该化学反应是否发生。在以尿素为唯一氮源的培养基中加入_____________，培养某种细菌后，如果pH升高，指示剂将变________________。15、常用的转化方法：

将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是_______，其次还有______和______等。

将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是_______。此方法的受体细胞多是_______。

将目的基因导入微生物细胞：原核生物作为受体细胞的原因是_______，最常用的原核细胞是_____，其转化方法是：先用______处理细胞，使其成为______，再将______溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。16、来源：主要是从______中分离纯化出来的。17、研究表明，转基因抗虫棉的大面积种植有效遏制了棉铃虫害，也显著地降低了化学农药的使用量｡但是，科研人员也发现，棉田中一种体型很小的盲蝽蟓却容易爆发成灾｡有人认为这与大面积种植转基因抗虫棉有关｡我们应如何看待这种观点_____？如果回答问题有困难，可以请教老师或通过互联网寻找答案。18、在日常生活中，我们还遇到哪些有关生物技术安全与伦理问题？我们能基于所学生物学知识参与这些问题的讨论吗？尝试举一个实例加以说明______。19、首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了______，方法是采用______。评卷人得分四、判断题(共1题，共8分)20、对微生物的基因改造是基因工程中研究最早、最广泛和取得实际应用成果最多的领域，是因为微生物具有生理结构和遗传物质简单、生长繁殖快、对环境因素敏感和容易进行遗传物质操作等优点。（选择性必修3P101）()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共4题，共12分)21、多发性硬化症是一种由纤维蛋白渗入大脑引发的神经系统疾病。科研人员欲应用生物工程技术治疗该病。请回答下面有关问题。

（1）研究人员将纤维蛋白作为_________注射到小鼠体内，激活了小鼠的________免疫，进而制备出抗纤维蛋白的单克隆抗体（5B8）。该项技术属于_______范畴（填写下面正确选项）。

A．基因工程B．细胞工程C．胚胎工程D．蛋白质工程。

（2）制备5B8的基本流程如下：从注射了纤维蛋白的小鼠脾脏中获取________，与小鼠的骨髓瘤细胞进行融合。然后用特定的__________筛选符合要求的杂交瘤细胞后；再通过克隆；检测、筛选、培养等环节，最终从小鼠腹水中提取到5B8。

（3）活性氧（ROS）是氧分子正常代谢的副产物；当吞噬细胞中大量产生ROS并释放时，会毒害周围神经元。NADPH氧化酶是催化细胞内产生ROS的主要酶。为研究5B8的作用机制，研究者检测了经5B8处理后吞噬细胞中NADPH氧化酶和ROS的含量，结果如图一；图二。

①作为标准参照的GADPH蛋白表达量稳定且含量丰富，可排除_________对实验结果的影响。

②综合两幅图的检测结果，通过对比_______组可知，纤维蛋白可以______________，使其对神经元产生毒害；而通过对比______组结果发现:5B8能_________。

③经临床实验证实，单克隆抗体5B8确实对多发性硬化症有明显疗效。请根据上述结果分析其具有疗效的原因____________________。22、黄粉虫可以吞食；降解塑料；利用黄粉虫肠道微生物对白色污染进行生物降解，是一种绿色环保的处理工艺。下图是从黄粉虫肠道中分离、纯化微生物的过程，回答下列问题：

(1)富集培养基按物理性质属于___________培养基，不含有_____________，但含有酵母膏、蛋白豚。酵母膏能提供所需的__________________。

(2)选择培养基中需加入_______________作为唯一碳源，稀释涂布后最后一组可能形成菌落。统计菌落数目的方法有_______________和利用显微镜直接计数。

(3)如果对白色污染进行传统填埋、焚烧容易造成二次污染，黄粉虫肠道微生物对白色污染的降解______（填“会”或“不会”）造成二次污染。23、进行垃圾分类收集可以减少垃圾处理时间；降低处理成本。科研小组欲分离及培养若干种微生物用于处理湿垃圾，如剩菜剩饭；骨头、菜根菜叶、果皮等食品类废物。请分析回答：

(1)科研小组从土壤中筛选产脂肪酶的菌株时，配制的培养基需要以__________为唯一碳源。制备固体培养基的步骤是；计算→称量→溶化→__________→__________。接种微生物最常用的方法是__________。

(2)获得产脂肪酶的菌株后，在处理含油垃圾的同时，可获得单细胞蛋白，实现污染物资源化。现获得可产脂肪酶的A、B两种菌株，并进行了培养研究，结果如图1所示。据图分析，应选择菌株__________进行后续相关研究，理由是______________________________。

(3)科研小组从土壤中筛选淀粉分解菌时，加碘液染色后，选择培养基上出现了A、B和C三种菌落（如图2所示）。若要得到淀粉酶活力最高的菌株，应选择__________（填“A”“B”或“C”）菌落进一步纯化。经检测A菌落为硝化细菌，A菌落能在此培养基上生长且没有形成透明圈的原因是____________________。

(4)在微生物分解处理垃圾的过程中，纤维素分解菌能够分泌纤维素酶，该酶可将纤维素分解为葡萄糖。纤维素酶由三种复合酶组成，其中__________酶可将纤维二糖分解为葡萄糖。24、黏多糖贮积症是由IDUA基因突变导致的遗传病。科研人员对此病的治疗进行相关研究。

(1)黏多糖贮积症患者细胞中IDUA基因由于碱基对___________造成突变，转录出的mRNA长度不变但提前出现终止密码子，最终导致合成的IDUA酶分子量___________；与正常IDUA酶的空间结构差异显著而失去活性，积累过多的黏多糖无法及时清除，造成人体多系统功能障碍。

(2)抑制性tRNA（sup-tRNA）与普通tRNA的结构、功能相同，但它的反密码子可以与终止密码子配对。在上述这一类突变基因的翻译过程中，加入sup-tRNA可以发挥的作用是___________；从而诱导通读获得有功能的全长蛋白。

(3)不同的sup-tRNA可以携带不同氨基酸；为比较它们的通读效果，科研人员进行了相关研究，实验结果如图。

注：“-”代表未加入。

据图分析，实验组将___________基因导入受体细胞，并采用___________技术检测导入基因的表达情况。据结果分析，携带酪氨酸的sup-tRNA能___________。

(4)科研人员利用携带酪氨酸的sup-tRNA对IDUA突变基因纯合小鼠及IDUA基因敲除小鼠进行治疗，检测肝脏细胞IDUA酶活性和组织黏多糖的积累量，与不治疗的小鼠相比较，实验结果为_____________，表明携带酪氨酸的sup-tRNA可以治疗黏多糖贮积症。评卷人得分六、综合题(共3题，共21分)25、现代生物技术已渗入我们生活的方方面面；为人类解决了许多医学和生活难题。请回答下列问题：

（1）用基因工程改良作物品种时，可从基因文库中获取目的基因，然后用PCR技术扩增，PCR扩增过程中，需加热至90～95℃，其目的是_____________________；加热至70～75℃时，互补链可在____________酶的作用下延伸。

（2）获取目的基因后，为培育转基因作物，可将作物幼叶消毒后，用______________酶混合液处理，获得原生质体，经培养形成愈伤组织，将目的基因导入愈伤组织细胞常用的方法是____________________；然后经过__________（填“脱分化”或“再分化”）形成杂种植株。该技术将植物的细胞培育成完整植株所依据的生物学原理是____________。

（3）因为单克隆抗体与常规的血清抗体相比，具有_________________的特点而被广泛地应用。

（4）生态工程是实现循环经济最重要的手段之一。在进行林业工程建设时，一方面要号召农民种树，保护环境。另一方面要考虑贫困地区农民的生活问题，如粮食、烧柴以及收入等问题，其主要体现的生态工程的基本原理是__________（只填一个）。26、近年来；研究者们发现，纸质文物的研究价值并非仅仅局限于纸上的文字图画，其表面的微生物也能提供大量的有用信息，如藏书环境中特有的微生物能帮助古籍保护研究人员追溯藏书的流通路径，一些出土文物中与人类直接相关的微生物（尤其是致病性微生物）可以提供特殊的考古信息等。从纸张中获取分离微生物需要相关生物技术。分析回答下列问题：

(1)生产纸张、印刷古籍的环境和储藏环境中的微生物会沾染到纸张上，形成最初的微生物群落。随着时间的推移，能合成________酶的微生物会在纸张上占据优势，使纸张上的微生物群落发生演替。影响群落演替的因素有：人类的活动、________（答两点）

(2)纸质文物表面微生物的通常获取方法为：

①用无菌棉拭子蘸取适量的润湿液；在纸表目标区域采集微生物样品；

②将无菌棉拭子头轻轻在培养基平板上用________法接种；

③将接种后的平板________（填“正”或“倒”）置于25～28℃环境中培养3~5天；观察长出的菌落；

④进一步分离纯化，在培养基平板上得到的________一般就是由单个微生物繁殖形成的纯培养物。

(3)过去一般采取研究哪里采集哪里的原则对纸质文物表面的微生物进行采样，即针对一块霉斑、水渍、色斑、虫蛀等区域单一采样，导致纸表正常区域的微生物常常被忽视。我们可以借鉴植物种群密度的调查，用________法对纸张进行全面取样，取样的关键是要做到________。27、水蛭是我国的传统中药材；主要药理成分水蛭素为水蛭蛋白中重要成分之一，具有良好的抗凝血作用。拟通过蛋白质工程改造水蛭素结构，提高其抗凝血活性。回答下列问题:

(1)蛋白质工程流程如图所示，物质a是_______，物质b是_______。

(2)蛋白质工程是基因工程的延伸，基因工程中获取目的基因的常用方法有________、_________和___________。

(3)将提取的水蛭蛋白经甲、乙两种蛋白酶水解后，分析水解产物中的肽含量及其抗凝血活性，结果如图所示。推测两种处理后酶解产物的抗凝血活性差异主要与肽的_____(填“种类”或“含量”)有关。

参考答案一、选择题(共5题，共10分)1、D【分析】【分析】

1；果酒的制作原理。

（1）菌种：酵母菌；其代谢类型为异养兼性厌氧。

（2）菌种来源：自然发酵过程中；来源于附着在葡萄皮上的野生型酵母菌。

（3）原理:有氧条件下；进行有氧呼吸，大量繁殖。无氧条件下，进行酒精发酵产生酒精。

2；果醋制作原理。

（1）菌种：醋酸菌；其代谢类型为异养需氧型。

（2）菌种来源：变酸酒表面的菌膜。

（3）原理：当氧气充足；糖源充足时；醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。当氧气充足、缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。

【详解】

A；选择新鲜的葡萄略加冲洗；除去枝梗后榨汁，防止先去枝梗造成污染，A正确；

B；将玻璃瓶用酒精消毒后；装约2/3满的葡萄汁，防止防止发酵旺盛时汁液溢出，B正确；

C；果酒发酵期间；根据发酵进程适时拧松瓶盖放出二氧化碳气体，防止气体过多引起发酵瓶爆裂，C正确；

D；由果酒发酵最适温度转入果醋发酵时适当调高了温度；D错误。

故选D。2、D【分析】【分析】

胚胎干细胞（1）哺乳动物的胚胎干细胞简称ES或EK细胞；来源于早期胚胎或从原始性腺中分离出来。（2）特点：具有胚胎细胞的特性，在形态上表现为体积小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。另外，在体外培养的条件下，可以增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，也可进行遗传改造。

【详解】

A；胚胎干细胞具有胚胎细胞的特性；在形态上表现为体积小，细胞核大，核仁明显，A正确；

B；胚胎干细胞分化程度低；可以分化为成年动物体内任何一种组织细胞，B正确；

C；在体外培养的条件下；可以增殖而不发生分化，可进行冷冻保存和遗传改造，C正确；

D；在功能上；具有发育的全能性，D错误。

故选D。

【点睛】

本题考查胚胎干细胞的相关知识，要求考生识记胚胎干细胞的来源、特点及相关应用，能结合所学的知识做出准确的判断，属于考纲识记层次的考查。3、A【分析】【分析】

植物组织培养技术：

1；过程：离体的植物组织；器官或细胞（外植体）→愈伤组织→胚状体→植株（新植体）。

2；原理：植物细胞的全能性。

3；条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。

4；植物细胞工程技术的应用：植物繁殖的新途径（包括微型繁殖；作物脱毒、人工种子等）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。

【详解】

A；以根尖、茎尖为材料；利用组织培养技术可获得脱病毒的新品种，利用转基因技术可获得抗病毒的新品种，A错误；

B；单倍体育种过程包括花药离体培养和秋水仙素处理两个阶段；其中的花药离体培养用到了植物组织培养技术，B正确；

C；利用组织培养技术获得人参皂甙；实现了细胞产物的工厂化生产，这是植物组织培养技术在生产中应用的实例，C正确；

D；利用植物体细胞杂交技术获得“萝卜-甘蓝”的过程；利用了植物组织培养技术，该异源多倍体的培育克服了生物远缘杂亲不亲和的障碍，D正确。

故选A。

【点睛】4、C【分析】【分析】

植物体细胞杂交技术：就是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞；并把杂种细胞培育成完整植物体的技术。诱导融合的方法：物理法包括离心；振动、电刺激等．化学法一般是用聚乙二醇（PEG）作为诱导剂。

【详解】

A；照光处理的甲青花菜下胚轴细胞中有叶绿体；原生质体融合后具备乙品种细胞质中的可育基因，在题目中的条件下只有杂种细胞能够存活下来，所以有利于筛选杂种细胞，A正确；

B；流程中A为去除细胞壁；可使用纤维素酶和果胶酶分解细胞壁，B过程为诱导原生质体融合，需要用聚乙二醇进行诱导，B正确；

C；杂种细胞经过外源生长素和细胞分裂素的诱导诱导后；需脱分化形成愈伤组织，再分化形成杂种植株，C错误；

D；甲品种控制多种优良性状的基因；为核基因，杂种植物细胞核内含有控制甲青花菜优良性状的基因，精子中具有一半核基因，能通过父本（精子）进行传递，D正确。

故选C。5、B【分析】【分析】

基因工程至少需要三种工具：限制性核酸内切酶（限制酶）；DNA连接酶、运载体。

【详解】

A；E.coliDNA连接酶只能将具有互补黏性末端的DNA片段连接起来；不能连接具有平末端的DNA片段，而T4DNA连接酶既可以“缝合”双链DNA片段互补的黏性末端，又可以“缝合”双链DNA片段的平末端，A错误；

BC；DNA连接酶是催化两个DNA片段之间形成磷酸二酯键；而不是氢键，B正确，C错误；

D；DNA连接酶连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键；DNA连接酶不能将单个的脱氧核苷酸连接到主链上，D错误。

故选B。二、多选题(共8题，共16分)6、B:C【分析】【分析】

分析题图：该图是制备三聚氰胺特异性抗体的过程。由于三聚氰胺分子量过小；不足以激活高等动物的免疫系统，制备抗体前必须对三聚氰胺分子进行有效“扩容”。

【详解】

A；根据试题的分析；由于三聚氰胺分子量过小，不足以激活高等动物的免疫系统，制备抗体前必须对三聚氰胺分子进行有效“扩容”，以激活小鼠的免疫反应，A正确；

B；三聚氰胺是小分子有机物；不会被动物的免疫细胞的受体所识别，B错误；

C；经培养筛选得到的杂交瘤细胞具有双亲的特性；既能无限增殖又能产生单一抗体，C错误；

D；通过对鼠和人控制抗体产生的基因进行拼接；实现对鼠源杂交瘤抗体的改造，能生产出对人体的不良反应减少、效果更好的鼠-人嵌合抗体，D正确。

故选BC。7、B:C【分析】【分析】

转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应；过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）．生物安全：①转基因植物扩散到种植区外变成野生种或杂草；②转基因植物竞争能力强，可能成为“入侵的外来物种”，③转基因植物的外源基因与细菌或病毒杂交，重组出有害的病原体，④可能使杂草成为有抗除草剂基因的“超级杂草”。

【详解】

A；诱导动物细胞可用灭活的病毒；A错误；

B；我国对农业转基因生物实施标识制度；比如由转基因大豆加工制成的大豆油，标注为“本产品加工原料中含有转基因大豆，但本产品已不再含有转基因成分”，其相关的生物学依据是大豆油属于脂肪，不含目的基因编码的蛋白质，B正确；

C；生物武器种类包括致病菌、病毒、生化毒剂以及经过基因重组的致病菌等；C正确；

D；转基因物种的无序迅速扩散可能变成野生种类或变成入侵的外来物种；威胁生态系统中其他生物的生存，甚至会破坏生物的多样性，D错误。

故选BC。8、B:C【分析】【分析】

1；从土壤中筛选目的微生物的流程一般为：土壤取样→样品的稀释→将稀释液涂布到以尿素为唯一氮源的培养基上→挑选能生长的菌落→鉴定。当样品的稀释庋足够高时；培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数来推测样品中大约含有的活菌数。

2、统计菌落数目的方法：（1）显微镜直接计数法：①原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量；②方法：用计数板计数；③缺点：不能区分死菌与活菌。（2）间接计数法（活菌计数法）：①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌．通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。②操作：a、设置重复组，增强实验的说服力与准确性；b；为了保证结果准确；一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。③计算公式：每克样品中的菌株数=（c÷V）×M，其中c代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M代表稀释倍数。

【详解】

AB；样品的稀释度直接影响平板上生长的菌落数目；土壤中各类微生物数量不同，所以为获得不同类型的微生物，要按不同的稀释倍数进行分离，A正确；B错误；

C；在同一稀释度下只要得到两个或两个以上的菌落数目在30～300的平板；就说明稀释操作比较成功，并能够进行菌落的计数，C错误；

D；验证选择培养基是否具有选择作用；需设立牛肉膏蛋白胨固体培养基作为对照，若后者的菌落数明显大于前者，说明前者具有筛选作用，D正确。

故选BC。

【点睛】9、B:C:D【分析】【分析】

PCR技术：1；概念：PCR全称为聚合酶链式反应；是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。2、原理：DNA复制。3、前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物。4、条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）5、过程：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开）；低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。

【详解】

A；过程①是由mRNA形成单链DNA的过程；表示逆转录，需要RNA、逆转录酶、引物、脱氧核苷酸等条件，A错误；

B；真核细胞中DNA的外显子部分转录的RNA拼接形成mRNA；因此真核细胞的mRNA经过程①②逆转录过程获得的DNA无内含子片段，B正确；

C；CG含量越高；氢键越多，结构越稳定，因此过程③PCR扩增时引物中的CG含量会影响退火温度，C正确；

D；新冠病毒遗传物质是RNA；RT-PCR技术可应用于新冠病毒的核酸检测，D正确。

故选BCD。

【点睛】10、A:B:C【分析】【分析】

1；据图分析可知；①号部位为病斑区域，即腐烂部位，①与②交界处为“病键交界处”，是腐烂部位与未腐烂部位交界的地方，②③④⑤均为未腐烂部位，且距离腐烂部位依次变远。

2；在曲线图中；病班部位的Pat含量最高，而距离病班部位越来越远，Pat含量就会越来越少。

【详解】

A；由曲线图可知；该实验自变量是腐烂苹果中的病斑大小和离病斑距离大小，A正确；

B；青霉素可以抑制细菌生长；可向扩展青霉培养液中加入青霉素以防止杂菌污染，B正确；

C；病斑越大；说明病斑中扩展青霉素的密度就越大，产生的Pat就越多，C正确；

D；如果只去除腐烂部位；那么未腐烂部位中的Pat仍然会对人体造成伤害，存在健康风险，故窝烂苹果去除腐烂部位后不能食用，D错误。

故选ABC。11、A:C【分析】据图分析；①过程表示获取B淋巴细胞和骨髓瘤细胞；②过程促进细胞融合，采用离心；电刺激、聚乙二醇、灭活病毒等试剂诱导，筛选出杂交瘤细胞；④过程通过专一抗体检验阳性，筛选出能够产生特异性抗体的细胞群；⑥过程表示动物细胞培养。

【详解】

A；B淋巴细胞是从小鼠的脾脏中提取的；骨髓瘤细胞不是，A错误；

B；④中筛选能产生特定抗体的杂交瘤细胞；可以通过检测抗原、抗体反应，如果有反应说明表达了抗体，B正确；

C；④中的筛选是为了获得能产生一种抗体的杂交瘤细胞；C错误；

D；⑤可以无限增殖；也能产生特异性抗体，D正确。

故选AC。12、A:C:D【分析】【分析】

题图分析：该图为某个基因的部分片段；①不但包括腺嘌呤．还包括侧链上的磷酸的脱氧核糖，为腺嘌呤脱氧核苷酸；②是磷酸和脱氧核糖之间的磷酸二酯键；③是碱基之间的氢键；④是含氮碱基和脱氧核糖之间的化学键。

【详解】

A；图示为DNA结构模式图；图中①所圈定的部位是腺嘌呤脱氧核苷酸，A错误；

B；DNA连接酶能使两个脱氧核苷酸之间的化学键②磷酸二酯键形成；B正确；

C；删去；图中没有⑤，限制酶作用于磷酸二酯键。

D；解旋酶作用于碱基对之间的氢键③处；使氢键断开，D错误。

故选ACD。

【点睛】13、A:C:D【分析】【分析】

微生物常见的接种的方法。

（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后；均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

【详解】

A；自生固氮菌是需氧型生物；步骤①土样应取自表层的土壤，步骤③中的稀释梯度分别为10，100，1000倍，所以土壤悬浮液稀释了1000倍，A正确；

B；自生固氮菌是异养型生物；可用血细胞计数板或稀释涂布平板法来计数土壤悬浮液中的菌体数，B错误；

C；步骤②需充分振荡20min；主要目的是使土壤中的微生物充分释放到无菌水中，C正确；

D；步骤④为稀释涂布平板法接种；所用的接种工具是涂布器，该选择培养基的特点是不添加氮源，利用的是空气中的氮气，D正确。

故选ACD。三、填空题(共6题，共12分)14、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】脲酶氨碱性增强升高pH的变化酚红指示剂红15、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】农杆菌转化法基因枪法花粉管通道法显微注射技术受精卵繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少大肠杆菌Ca2+感受态细胞重组表达载体DNA分子16、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】原核生物17、略

【分析】【详解】

生物之间存在（种间）竞争多关系，该区域的棉铃虫与盲蝽蟓之间共同以棉花为食，种植转基因抗虫棉后，棉铃虫不能存活，盲蝽蟓的食物等资源充足，故大量繁殖，爆发成灾。【解析】该区域的棉铃虫与盲蝽蟓之间存在竞争关系，种植转基因抗虫棉后，棉铃虫不能存活，盲蝽蟓大量繁殖18、略

【分析】【详解】

在日常生活中；我们遇到的有关生物技术安全与伦理问题有：生殖性克隆人伦理问题；试管婴儿与设计试管婴儿伦理问题、转基因产品的安全性与伦理问题和生物武器的安全性等。

例如转基因产品的安全性：转基因技术的安全性的争议；主要集中在两个方面，一是对人是否安全，二是对环境的影响。

对人的安全方面；支持转基因技术的人认为投放市场的转基因作物都是经过充分实验的，被改变的基因仅限于增加作物的抗病；抗灾害能力，并且在北美地区转基因食品已经使用的很多年，可以说现在美国加拿大20岁左右的年轻人从小就是吃转基因食品长大的；反对转基因技术的人认为转基因食品有害，他们的证据主要是一位科学家的实验证明，用转基因食品喂养的小白鼠癌症发病率明显升高，但问题是这个实验只成功过一次，后来别的科学家在相同的条件下都没能再现这个实验结果。

在环境方面对转基因技术的争议是最大的；也是欧洲人反对转基因技术的重要依据，反对人持有的观点是，通过改良基因创造出抵抗病虫害和其他灾害的植物，这种技术如果失去控制可能会把农作物改造成适应性极强的超级植物，自然平衡使任何生物都不可能占绝对优势地位，但转基因技术产生的超级植物可能会打破自然平衡而泛滥成灾。

伦理问题：由于转基因技术创新打破了物种界限,使不同物种间的基因可以进行前所未有的新组合,其可能造成的危害难以预见,这就使转基因技术创新呈现前所未有的复杂性,并不可避免地会引发很多全新的社会伦理问题,引出种种有关生物科学家的道德责任和学术自由的哲学争论。在转基因植物技术创新中,功利主义的预设和学术自由的主张必须以人类的价值、尊严和社会公正为前提条件。相关领域的科学家必须担当起必要的道德责任,把握好伦理横杆,以促使转基因植物技术创新沿着科学的轨道健康发展。【解析】在日常生活中；我们遇到的有关生物技术安全与伦理问题有：生殖性克隆人伦理问题；试管婴儿与设计试管婴儿伦理问题、转基因产品的安全性与伦理问题和生物武器的安全性等。

例如转基因产品的安全性：转基因技术的安全性的争议；主要集中在两个方面，一是对人是否安全，二是对环境的影响。

对人的安全方面；支持转基因技术的人认为投放市场的转基因作物都是经过充分实验的，被改变的基因仅限于增加作物的抗病；抗灾害能力，并且在北美地区转基因食品已经使用的很多年，可以说现在美国加拿大20岁左右的年轻人从小就是吃转基因食品长大的；反对转基因技术的人认为转基因食品有害，他们的证据主要是一位科学家的实验证明，用转基因食品喂养的小白鼠癌症发病率明显升高，但问题是这个实验只成功过一次，后来别的科学家在相同的条件下都没能再现这个实验结果。

在环境方面对转基因技术的争议是最大的；也是欧洲人反对转基因技术的重要依据，反对人持有的观点是，通过改良基因创造出抵抗病虫害和其他灾害的植物，这种技术如果失去控制可能会把农作物改造成适应性极强的超级植物，自然平衡使任何生物都不可能占绝对优势地位，但转基因技术产生的超级植物可能会打破自然平衡而泛滥成灾。

伦理问题：由于转基因技术创新打破了物种界限,使不同物种间的基因可以进行前所未有的新组合,其可能造成的危害难以预见,这就使转基因技术创新呈现前所未有的复杂性,并不可避免地会引发很多全新的社会伦理问题,引出种种有关生物科学家的道德责任和学术自由的哲学争论。在转基因植物技术创新中,功利主义的预设和学术自由的主张必须以人类的价值、尊严和社会公正为前提条件。相关领域的科学家必须担当起必要的道德责任,把握好伦理横杆,以促使转基因植物技术创新沿着科学的轨道健康发展。19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】目的基因DNA分子杂交技术。四、判断题(共1题，共8分)20、A【分析】【详解】

微生物具有生理结构和遗传物质简单的优点，便于研究，生长周期短，具有生长繁殖快的优点，遗传物质简单，具有容易进行遗传物质操作的优点，对环境因素敏感，因此对微生物的基因改造是基因工程中研究最早、最广泛和取得实际应用成果最多的领域，这句话是正确的。五、实验题(共4题，共12分)21、略

【分析】【分析】

单克隆抗体的制备：（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原；然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。（2）获得杂交瘤细胞。①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合；②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。（3）克隆化培养和抗体检测。（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。（6）单克隆抗体的优点：特异性强，灵敏度高，能大量制备。

【详解】

（1）抗体参与体液免疫；科研人员将纤维蛋白作为抗原注射到小鼠体内，激活体液免疫过程，制备出抗纤维蛋白的单克隆抗体（5B8）。该项技术为单克隆抗体的制备，属于细胞工程范畴，即B正确，ACD错误。

故选B。

（2）制备抗纤维蛋白的单克隆抗体5B8的基本技术流程为：先从注射了纤维蛋白的小鼠脾脏中获取的相应的B细胞（能产生特定的抗体）与小鼠的骨髓瘤细胞融合获得杂交细胞；用特定的选择培养基进行筛选；获得杂交瘤细胞；对杂交瘤细胞进行克隆和抗体检测，获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞；获得的杂交瘤细胞在体外环境或小鼠腹腔内培养；然后从细胞培养液或小鼠腹水中提取单克隆抗体5B8。

（3）①活性氧（ROS）是氧分子正常代谢的副产物；NADPH氧化酶是催化细胞内产生ROS的主要酶。由于细胞中GAPDH蛋白表达量稳定且含量丰富，在实验中可作为标准参照，排除实验操作等无关变量对结果的影响。

②对比1和2组检测结果；细胞中NADPH氧化酶和ROS的含量升高，说明纤维蛋白提高了吞噬细胞中NADPH氧化酶和ROS的含量，使其对神经元产生毒害。通过对比1；2、3组结果发现，经5B8处理后，NADPH氧化酶和ROS的含量会下降，说明5B8能减轻纤维蛋白对NADPH氧化酶和ROS的含量的影响，使两种物质含量下降。

③由第②题可知；经5B8处理后，NADPH氧化酶和ROS的含量会下降，说明单克隆抗体588与纤维蛋白结合，可以降低吞噬细胞NADPH氧化酶的量，进而降低ROS产量，从而减小对神经元的伤害，因此单克隆抗体5B8对多发性硬化症有明显疗效。

【点睛】

本题考查单克隆抗体的制备过程和抗纤维蛋白的单克隆抗体（5B8）的作用机理，意在考查考生对所学知识的理解和应用能力。【解析】抗原体液B相应的B淋巴细胞；选择培养基无关变量（如实验操作等）1和2提高吞噬细胞中NADPH氧化酶和ROS的含量1、2、3组（2、3组）减轻纤维蛋白对NADPH氧化酶和ROS含量的影响，使两种物质含量下降单克隆抗体5B8与纤维蛋白结合，可以降低吞噬细胞NADPH氧化酶的量，进而降低ROS产量，从而减小对神经元的伤害，起到治疗多发性硬化症的作用。22、略

【分析】【分析】

分离菌株的思路：

（1）自然界中目的菌株的筛选：①依据：根据它对生存环境的要求；到相应的环境中去寻找。②实例：PCR技术过程中用到的耐高温的TaqDNA聚合酶，就是从热泉中筛选出来的Taq细菌中提取出来的。

（2）实验室中目的菌株的筛选原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养温度.pH等）；同时抑制或阻止其他微生物生长。

(1)

富集培养基不含有琼脂；按物理性质属于液体培养基，其中酵母膏能提供所需的碳源和氮源，可获得数目较多的塑料降解菌。

(2)

筛选能降解塑料的微生物；需要使用以塑料为唯一碳源的选择培养基，稀释涂布后最后一组可能形成菌落。微生物的接种方法主要有平板划线法和稀释涂布平板法，其中稀释涂布平板法可以用来进行微生物的计数。

(3)

如果对白色污染进行传统填埋焚烧容易造成二次污染；黄粉虫肠道微生物对白色污染的降解不会造成二次污染。

【点睛】

本题考查微生物的分离和培养，要求考生识记培养基的种类及功能，掌握接种微生物的方法及菌种保藏方法，能结合所学的知识准确答题。【解析】(1)液体琼脂碳源和氮源。

(2)塑料稀释涂布平板法。

(3)不会23、略

【分析】【分析】

分析图1可知，菌株A的细胞密度增殖速率低于菌株B，脂肪剩余量菌株A高于菌株B。

从图2中可知，ABC三种菌株中，BC菌落周围出现透明圈，而A菌落周围未出现透明圈。

【详解】

（1）科研小组从土壤中筛选出产脂肪酶的菌株时，需设置只利于产脂肪酶的菌株生长，而其他杂菌生长受抑制的培养基，因此配制的培养基需要以脂肪为唯一碳源。制备固体培养基的步骤是：计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。微生物接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法，其次还有穿刺接种和斜面接种。

（2）据图1分析可知，菌株B增殖速度快，且脂肪剩余比例小，降解脂肪能力强，故应选择菌株B进行后续相关研究。

（3）科研小组从土壤中筛选淀粉分解菌时，加碘液染色后，选择培养基上出现了A、B和C三种菌落，淀粉遇碘液会变蓝，而淀粉酶能够分解淀粉，则不同产酶活力的菌株周围会形成不同直径的透明圈，淀粉酶活力越强的菌株周围的透明圈越大，因此若要得到淀粉酶活力最高的菌株，应选择C菌落进一步纯化，这是因为C菌株的透明圈直径与菌落直径比值最大。经检测A菌落为硝化细菌，A菌落能在此培养基上生长且没有形成透明圈的原因是硝化细菌为自养细菌，能够利用空气中的二氧化碳合成有机物，但硝化细菌不能产生淀粉酶，所以无透明圈。

（4）纤维素酶由三种复合酶组成，即C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。

【点睛】

本题考查微生物的分离和培养，要求考生识记相关知识，意在考查学生识记所学知识要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络的能力，同时获取题图信息准确答题。【解析】(1)脂肪灭菌倒平板稀释涂布平板法和平板划线法。

(2)B该菌株增殖速度快；且脂肪剩余比例小，降解脂肪能力强。

(3)C硝化细菌为自养细菌；能够利用空气中的二氧化碳合成有机物，但硝化细菌不能产生淀粉酶，所以无透明圈。

(4)葡萄糖苷24、略

【分析】【分析】

基因突变是指DNA分子中发生碱基对的替换；增添和缺失；而引起的基因结构的改变。翻译是指在核糖体上，以mRNA为模板、以氨基酸为原料合成蛋白质的过程，该过程还需要tRNA来运转氨基酸。

密码子由位于mRNA上决定一个氨基酸的三个相邻的碱基组成。终止密码子的作用是终止翻译过程。

基因工程中检测目的基因在受体细胞内是否成功表达可以用抗原-抗体杂交技术。

【详解】

（1）由题干信息可知；黏多糖贮积症患者细胞中IDUA基因突变后，转录出的mRNA长度不变，说明其没有发生碱基对的增添和缺失，因为这两者改变会导致转录出的mRNA长度改变，因此推测其基因突变是由于碱基对替换。由于终止密码子提前出现，导致翻译提前终止，肽链变短，IDUA酶分子量变小，空间结构改变而失活。

（2）由题干可知；抑制性tRNA（sup-tRNA）可以最终诱导核糖体通读mRNA上的遗传信息合成具有功能的全长蛋白，并且抑制性tRNA（sup-tRNA）与普通tRNA的结构；功能相同，据此推测该抑制性tRNA可以携带氨基酸至核糖体并与终止密码子碱基配对使翻译过程继续。

（3）本实验目的是比较携带不同氨基酸的sup-tRNA的通读效果；需要保证实验组细胞含有突变IDUA基因，即其不能合成具有正常功能的IDUA酶（防止正常IDUA酶对实验结果产生干扰），同时保证在不同的实验组细胞中可以转录出携带不同中氨基酸的sup-tRNA，因此实验组中受体细胞中应该含有导入携带不同氨基酸的sup-tRNA基因和突变IDUA基因。若要判断各个实验组细胞中携带不同氨基酸的sup-tRNA是否成功诱导了具有功能的IDUA酶，可以采用该酶的特异性抗体对其进行检测，即进行抗原-抗体杂交。分析题图可知，与对照组（含正常IDUA基因的组）相比，含携带酪氨酸的sup-tRNA的受体细胞中表达的全长IDUA蛋白量比其他实验组都多，说明其能有效恢复细胞中全长IDUA蛋白的合成，且效果最好。

（4）由以上实验可知，携带酪氨酸的sup-tRNA能有效诱导核糖体对突变IDUA基因转录出的mRNA进行通读，进而产生具有正常功能的IDUA酶，因此利用携带酪氨酸的sup-tRNA对IDUA突变基因纯合小鼠进行治疗，与不进行治疗的IDUA突变基因纯合小鼠相比，治疗组小鼠的IDUA酶活性高，组织黏多糖积累量少；同时，利用携带酪氨酸的sup-tRNA对IDUA基因敲除小鼠进行治疗，与不进行治疗的IDUA基因敲除小鼠相比，由于二者都不含有IDUA基因，则其细胞内都没有相应mRNA，因此携带酪氨酸的sup-tRNA无法发挥作用，最终导致治疗组与不治疗组的IDUA酶活性与组织黏多糖积累量无明显差异。【解析】(1)替换减少。

(2)识别终止密码子并携带氨基酸至核糖体使翻译过程继续。

(3)携带不同氨基酸的suptRNA基因和变IDUA抗原一抗体杂交恢复细胞中全长IDUA蛋白的合成；且效果最好。

(4)IDUA突变基因纯合小鼠IDUA酶活性高，组织黏多糖积累量少；IDUA基因敲除小鼠IDUA酶活性与组织黏多糖积累量无明显差异六、综合题(共3题，共21分)25、略

【分析】【分析】

1；PCR原理是利用DNA双链复制；在PCR时需要提供模板、原料、引物、热稳定DNA聚合酶/Taq酶等条件。

2；将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同；导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方