DB34-T 4950-2024 禽白血病─通.用AJ三重PCR检测技术规程

34DB34/T4950—2024禽白血病—通用/A/J三重PCR检测技术规程Technicalregulationforgeneric/A/JtriplePCRdetectionforavianleukemia安徽省市场监督管理局发布I1NY/T541兽医诊断样品采集、保存与运DNA：脱氧核糖核酸(deoxyribonucleALV：禽白血病病毒（avianleuRT-PCR；反转录聚合酶链反应（reversetranscription-polymerase25.7DEPC水：在100mL三蒸水中加入100μLDEPC，18℃~22℃室温下过夜，121℃灭菌15min。也5.13DNA分子量标准：DL2000Marker6.2台式高速冷冻离心机（4℃,离心速度12000r/min以上）。浆，4℃,3000r/min离心15min，取上清液转入无菌的1.5mL离心管中，对样本进行编号。38.2.7倒去上清，加入置室温条件下干燥后8.5琼脂糖凝胶电泳9.1试验成立条件：阳性对照在338bp、274bp、145bp位置同时出49.6被检样本无特异性扩增条带，判定ALV5KH2PO4A.2.10.5mo1/L乙二铵四乙酸二钠(EDTA)溶液（p65'-TACTTGAGCCCTTGCGACTC-3’5'-ATGGTGAACCCGGCTCTTTC-3’5'-TTACATGGGCCAACCGTACA-3’5'-GGTGGCTCATCCCACATAGA-3’5'-AGGCCCTATGTCAACCAATCA-3’5'-GCCCTGTCCCCACAAATCAA-3’7C.1pol基因（通用）特异性扩增片段（145bp）TACTTGAGCCCTTGCGACTCAAGCACCCATCTCTGTGCATGTTGCATTATATGGACGATCTTTTACTAGCCGCCCAGGTTGGAAGCGGCAGGGGAGGAGGTTATTAGTATACTGGAAAGAGCC.2gp85基因(A亚群)特异性扩增TTACATGGGCCAACCGTACAGGCCAAACGGATTTCTGCCTCTCTACACAGTCAGCCACCTCCCCTTTTCAAACATATCCCGTCCCCTATTTCCGAAGGTGATTTTAAGGGATACGTCTCTGATAATTGCACCACCTTGGGAACTGACCGGCCAGCATTACCGGCGGCCCTGACAACAGCACCACCCTCACTTATCGAAAGGTTTCATGCTTGCTGTTAAAGCTGAAC.3gp85基因(J亚群)特异性扩增片段(338bp)AGGCCCTATGTCAACCAATCATGGACGATGGTAAGTCCAATAAACATAGAGAGTTTTTCAATAAGTCGTAGATATTGTCCAGTAACGAGACTCGTTACTATAGAGGGGACCTTTCTAATTGGTGTGGTTCAAAAAGGGGAAAATGGTCAGCGGGGTACACAAAATGTTCCAGCAACACGACGGGTTGCGGTGGTAATTGCACAACGGAATGGAA