2025年岳麓版选择性必修3生物下册阶段测试试卷含答案

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年岳麓版选择性必修3生物下册阶段测试试卷含答案考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五六总分得分评卷人得分一、选择题(共8题，共16分)1、下列选项中能正确说明生物工程技术的是（）A.植物组织培养是指离体的植物器官或细胞进行脱分化形成新个体B.动物细胞融合技术目前的用途是培养具有双亲优良性状的经济动物C.人工诱变、细胞工程、基因工程等都能对微生物进行定向改造D.动物克隆技术的基础是动物细胞培养2、桑椹胚和囊胚的比较，以下说法正确的是（）A.囊胚期细胞分化是由于遗传物质突变引起的B.囊胚期的细胞出现了细胞分化，但遗传物质未发生改变C.桑椹胚的各细胞结构功能基本不相同D.囊胚期内细胞团和滋养层细胞差异是复制水平上的差异3、科学家在培育抗虫棉时，经过了许多复杂的过程和不懈的努力，才获得成功。起初把苏云金芽孢杆菌的抗虫基因插入载体质粒中，然后导入棉花的受精卵中，结果抗虫基因在棉花体内没有表达。然后在插入抗虫基因的质粒中插入启动子（抗虫基因首端），导人棉花受精卵，长成的棉花植株还是没有抗虫能力。科学家又在有启动子、抗虫基因的质粒中插入终止子（抗虫基因末端），导入棉花受精卵，结果成长的植株，有了抗虫能力。由以上过程推知，作为目的基因的运载体应具备的结构是（）A.目的基因、启动子B.目的基因、终止子C.目的基因、启动子、终止子D.目的基因、启动子、终止子、标记基因4、甲品种青花菜具有由核基因控制的多种优良性状，但属于胞质雄性不育品种。通过体细胞杂交，成功地将乙品种细胞质中的可育基因引入甲中。相关叙述错误的是（）

A.照光处理的甲青花菜下胚轴细胞中存叶绿体，利于筛选杂种细胞B.流程中A处理可使用纤维素酶和果胶酶，B处理可使用聚乙二醇C.杂种细胞经过外源生长素和赤霉素的诱导，直接分化成为杂种植株D.杂种植株含有控制甲青花菜优良性状的基因，并能通过父本进行传递5、2022年1月7日；马兰里医学中心成功将猪心脏移植到一名57岁的心脏病患者身上，虽然这颗心脏仅仅存活了2个月，但仍然为异种器官移植的可行性提供了可观的数据。为了降低免疫排斥反应，研究者借助CRISPR/Cas9技术对移植的猪心脏进行了基因编辑。CRISPR/Cas9系统主要由向导RNA（sgRNA）和Cas9蛋白两部分组成，sgRNA可引导Cas9蛋白到特定基因位点进行切割，其机制如图所示。下列说法错误的是（）

A.若要对一个基因进行编辑，则通常至少需要设计两个序列不同的sgRNA目标DNAmB.sgRNA可以特异性识别目标DNA分子，Cas9蛋白作用于磷酸二酯键C.有时sgRNA会因错误结合而出现“脱靶”现象，一般sgRNA序列越短，脱靶率越低D.为降低免疫排斥反应，可通过CRISPR/Cas9技术敲除相关抗原蛋白基因6、下列有关泡菜发酵过程的叙述，正确的是（）A.发酵时间越长，亚硝酸盐的含量越高B.在制作泡菜的过程中，有机物的干重和种类将减少C.发酵过程中乳酸菌可分解蛋白质和果胶D.原料装坛后马上密闭，保持温度适宜7、与啤酒、葡萄酒并称世界三大古酒的黄酒是中国特产，即墨老酒是黄酒中的珍品，按照“黍米必齐、曲糵（指发芽的谷粒）必时、水泉必香、陶器必良、湛炽（浸泡和蒸煮）必洁、火剂必得”的古代造酒六法（古遗六法）酿制而成。下列关于黄酒发酵的叙述，错误的是（）A.“黍米”中所含物质能为微生物提供碳源和能源B.“曲糵”中含有酿造黄酒所需的酵母菌，酿酒过程中酵母菌呼吸产生C.“陶器必良”的目的是防止陶器气密性不够导致黄酒变质D.“湛炽必洁”的目的是灭菌，确保发酵过程中无杂菌干扰8、下列说法正确的有几项。

①载体质粒通常采用抗生素合成基因作为筛选标记基因。

②愈伤组织是一团有特定结构和功能的薄壁细胞。

③某些癌细胞在合适条件下能逆转为正常细胞。

④细菌死亡与否可通过光学显微镜观察其细胞核的有无来确定。

⑤为了获得更多的卵母细胞，需用雌激素对雌性母体进行处理A.1B.2C.3D.4评卷人得分二、多选题(共9题，共18分)9、胎牛血清(FBS)是天然的培养基；能够在多种动物卵母细胞的成熟过程中提供足够的营养物质，起到非常好的促进效果。下表是后期胚胎培养液(CR2后液）中添加不同浓度FBS对牛核移植胚胎发育的影响情况，下列叙述正确的是。

血清的不同浓度水平对牛核移植胚胎发育的影响。组别培养液卵裂率/%囊胚率/%对照组CR2前液+CR2后液59.17±1.3413.53±2.04试验组1CR2前液+10%FBSCR2后液62.14+1.7813.78±2.77试验组2CR2前液+20%FBSCR2后液68.95±4.1526.09±2.20试验组3CR2前液+30%FBSCR2后液62.02±8.648.78±3.20A.囊胚中内细胞团发育成胎膜和胎盘B.添加20%FBS是促进核移植胚胎发育的最适浓度C.从卵巢采集的卵母细胞需在体外培育成熟D.添加不同浓度的FBS对卵裂率和囊胚率均有促进作用10、下图是快速RT-PCR过程示意图；①和②为逆转录酶催化的逆转录过程，③是PCR过程。据图分析下列说法错误的是（）

A.逆转录酶具有DNA聚合酶能力B.③PCR过程只需要引物bC.RT-PCR不能检测基因表达水平D.RT-PCR可检测新冠病毒等RNA病毒11、下列就“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验的有关叙述，正确的是（）A.经高压蒸汽灭菌的培养基所倒平板和接种后培养时的平板均要倒置B.同一稀释度下至少要涂布三个平板并且要培养到菌落数稳定时计数C.在稀释度足够高时，所形成的单个菌落中所有细胞的遗传信息必定相同D.在相同培养条件下，未接种的培养基表面无菌落生长说明培养基没有被杂菌污染12、从胰岛素依赖型糖尿病患者的骨髓中分离骨髓间充质干细胞（MSC），诱导分化成胰岛样细胞，再导入该患者体内。放射性免疫分析结果表明诱导的胰岛样细胞团可以正常分泌胰岛素，患者的血糖恢复正常。下列说法正确的是（）A.培养骨髓间充质干细胞的培养液通常需加入血清B.在体外连续培养时，利用胰蛋白酶将接触抑制的骨髓间充质干细胞分开C.在功能上，骨髓间充质干细胞具有发育的全能性D.治疗成功后，康复者的血型有可能发生改变13、下图为胚胎干细胞获取及培养简图；据图示信息判断，下列相关叙述错误的是（）

A.通过③过程可定向培育人造组织器官，用于器官移植B.研究细胞分化和细胞凋亡的机理可选择图中②或③途径C.胚胎干细胞培养过程中5%CO2的主要作用是促进细胞呼吸D.②过程只能在饲养层细胞上进行，该细胞可作为干细胞的营养细胞14、微卫星DNA是广泛分布于真核生物基因组中的简单重复序列。由于重复单位的重复次数在个体间呈高度特异性并且数量丰富，因此，微卫星DNA可以作为分子标记，并有着广泛应用。根据“微卫星DNA”的特点判断，这种分子标记可应用于（）A.人类亲子鉴定B.种群遗传多样性研究C.诱导基因突变D.冠状病毒遗传物质测序15、利用胶体金检测技术检测抗原最常用的是双抗夹心法。双抗夹心法需要准备待测抗原的配对抗体；一个抗体用胶体金标记（即胶体金标记抗体）并固定在结合垫上，另一个抗体固定在NC膜的检测线（T线）上。另外，还需要准备能与金标抗体特异性结合的二抗并固定于NC膜的控制线（C线）上，如图所示。下列说法错误的是（）

A.样品中含有待测抗原时，T线和C线均会显色B.图中的抗体都需要与抗原结合C.结合垫是为了固定金标抗体D.若T线不显色说明检测结果无效16、下图为植物体细胞杂交技术流程图，其中甲和乙分别表示两种二倍体植物细胞，所含有的染色体组分别是AA和BB。据图分析错误的是（）

A.图中①过程通常用纤维素酶和果胶酶处理，目的是获得原生质层B.过程②中关键环节是原生质体的融合，可用灭活的病毒诱导C.经过②和③过程形成的c细胞的染色体组不一定为AABBD.该技术流程的目的是获得杂种植株，优点是打破生殖隔离，实现远缘杂交育种17、治疗性克隆的做法是先从需要救治的患者身上提取细胞，然后将该细胞的遗传物质植入一个去除了细胞核的卵细胞中，该卵细胞开始自行分裂，直至形成一个早期胚胎，从早期胚胎中提取胚胎干细胞后将其培养成人们所需要的各种人体器官。下列有关说法正确的是（）A.可采用开放式培养的方式，置于CO2培养箱中培养胚胎干细胞B.该早期胚胎发育始于受精卵，胚胎是由囊胚内部的细胞团不断增殖分化而来C.治疗性克隆中运用胚胎移植技术，一般不选择原肠胚进行胚胎移植D.我国不赞成、不允许、不支持、不接受任何克隆性实验评卷人得分三、填空题(共8题，共16分)18、20世纪70年代以后；以基因工程为代表的一大批生物技术成果，进入人类的生产和生活，特别是在医药和农业生产上发挥了极大的作用，但是与其他高新技术一样，生物技术也同样具有双刃剑效应。如同其他高新技术一样，转基因成果和转基因技术也需要你的理性看待。在转基因生物安全方面；

（1）你认为转基因生物有哪些优点，①____________②___________③__________。

（2）你认为转基因生物有哪些缺点，①____________②___________③__________。

（3）你对于转基因生物的态度是__________。19、重组DNA或重组质粒导入受体细胞后，筛选______的依据是______。20、第一步：______21、结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：______和______。22、在___________条件下，DNA与___________反应呈现______________，因此_____________可以作为鉴定DNA的试剂。23、细胞贴壁和接触抑制：悬液中分散的细胞很快就______，称为______。细胞数目不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面______时，细胞就会_____，这种现象称为______。24、不同国家的政府对待生殖性克隆人的态度是不同的｡我们认同我国政府对待生殖性克隆人研究的态度吗？为什么？_____。25、科学家采用定点诱变的方法构建T4溶菌酶的新蛋白质，发现其中一种新蛋白质的第9和第164位氨基酸残基被转换为半胱氨酸残基，并形成一个二硫键。这种新蛋白质的热稳定性会有什么变化？这项技术的要点是什么？_________评卷人得分四、判断题(共1题，共9分)26、利用基因工程技术建立移植器官工厂是目前基因工程取得实际应用成果非常多的领域。()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共4题，共40分)27、如图为“DNA的粗提取与鉴定”实验过程中的一些重要操作示意图；请分析回答有关问题：

（1）正确的操作顺序是_______________________（用字母和箭头表示）。

（2）图中C、E步骤都加入了蒸馏水，但其目的不同，分别是_______________________和_______________________。

（3）为鉴定图中A步骤中所得到的丝状物的主要成分为DNA，可将其溶解后，滴加________________试剂后沸水浴加热，如果出现___________________；则证明该丝状物的主要成分为DNA。

（4）图中A步骤的目的是_________________________________________。28、氧化硫硫杆菌（T．t）通过将单质硫与还原态硫氧化为硫酸以获得能量进行化能合成作用。科学家欲通过实验探究硫酸锌对T．t产酸量的影响。

实验材料：氧化硫硫杆菌（T．t）菌液；蒸馏水；100mg/L和1000mg/L的硫酸锌溶液，配制好的氧化硫硫杆菌（T．t）液体培养基(含单质硫)，恒温摇床等。

请分析并回答以下问题：

（1）氧化硫硫杆菌的代谢类型为______________，培养氧化硫硫杆菌（T．t）的液体培养基中的碳源是___________，该培养基从功能上属于______________培养基。

（2）实验前，科学家发现氧化硫硫杆菌（T．t）菌液已被杂菌污染，于是在配制好的氧化硫硫杆菌（T．t）液体培养基中加入____________，用______________法接种并进行纯化培养；得到了氧化硫硫杆菌菌落。

（3）实验步骤：

第一步：对配制好的培养基再次进行______________灭菌处理；以防止杂菌污染影响实验结果。

第二步：取三个锥形瓶（编号A、B、C）分别加入等量培养基后，再依次分别加入____________________________；

第三步：往A、B、C三组中接种______________后放入恒温摇床中培养7天。

第四步：每天测定并记录各组的硫酸含量。

（4）实验结果：如图所示；据图分析实验结论：

实验结论：________________________________________________________。29、被称为“水中小白鼠”的斑马鱼是一种体长4厘米左右的热带淡水鱼；与人类基因同源性高达87%，并有相似的器官；生理功能和信号通路。由于发育周期短、费用低、体外受精、透明等优点，斑马鱼现在越来越广泛地应用于毒性检测、疾病模型创制、药物筛选等领域中。

研究人员欲通过使胰岛素基因表达受阻从而构建糖尿病模型斑马鱼。吗啉反义寡核苷酸是一种RNA剪接抑制剂；通过将其注入斑马鱼受精卵可阻碍相关基因的表达。针对其作用原理，现有两种假说：

假说1：吗啉反义寡核苷酸导致RNA前体上内含子2的对应序列不能被剪切。

假说2：吗啉反义寡核苷酸导致RNA前体上内含子2和外显子3的对应序列同时被剪切。

为了验证上述假说；研究人员进行了如下实验：

(1)从受精卵发育了3天的实验组和对照组的细胞中提取总RNA，再通过逆转录获得cDNA。若假说1成立，选择上图所示引物2和引物3进行PCR后的结果为______（填字母）。A．实验组有杂交带B．实验组无杂交带C．对照组有杂交带D．对照组无杂交带(2)若要证明假说2成立，进行PCR时，需要选择上图所示引物有____________。

(3)采用PCR技术扩增DNA需要引物的原因是__________________。

(4)为了获取大量斑马鱼胚胎干细胞用于药物筛选，可加入__________________，用于分散斑马鱼囊胚中的__________________。再取分散细胞作为初始材料进行______培养，然后分瓶继续培养。培养瓶中添加输卵管上皮细胞作为______细胞，以提高斑马鱼胚胎干细胞的数量。30、已知番茄的红果(Y)对黄果(y)为显性；二室(M)对多室(m)为显性，控制两对相对性状的基因分别位于两对同源染色体上。育种工作者利用红果多室(Yymm)番茄植株，采用不同的方法进行了四组实验。请据图回答问题：

(1)以上四种育种实验都主要应用了________的原理，培育中发生了脱分化的过程有________。

(2)用番茄植株的花粉随机进行有关实验，得到幼苗B直接移栽，发育成的番茄植株的基因型和表型分别是________、________，如果植物体C仅是花粉两两随机融合得到的，则植物体C的基因型及其比例是____________。

(3)图中________大部分细胞中染色体数量最少，要保证植物体B可以用于生产，培育中④过程可使用__________________处理幼苗。

(4)图中植物体________少数细胞中染色体数量最多，培育该植物体的过程称为________育种法，植物体D能表现出两个亲本的一些性状，根本原因是___________________________________________。

(5)植物体A只表现红果多室，原因是_______________________________。评卷人得分六、综合题(共3题，共12分)31、核酸疫苗是将编码某种抗原蛋白的外源基因（DNA或RNA片段）导入动物体细胞内；通过宿主细胞的表达系统合成抗原蛋白，诱导宿主产生对该抗原蛋白的免疫应答，以达到预防或治疗相应疾病的一类新型疫苗。研究表明核酸疫苗不仅具有良好的免疫原性与安全性，且由于核酸更易于修饰与改造，较以往蛋白疫苗具有更大的灵活性和更广阔的应用前景。请回答：

（1）研发DNA疫苗时，构建含有病原体抗原基因表达载体的过程中需要用到的工具酶有_____________。

（2）图中所用的载体是_____，构建基因表达载体的目的是_____，基因表达载体中，驱动病原体抗原基因转录的结构为_____。

（3）mRNA疫苗可以由计算机设计、制造并通过高速机器大批量生产。目前用于制造疫苗的RNA有两种，非复制型mRNA和自我扩增型mRNA，从图中可以看出自我扩增型mRNA的优点是可在细胞内_____。mRNA常被包裹在脂质体颗粒中注射到相关人员的手臂肌肉，脂质体颗粒的作用是_____。

（4）病毒核酸检测试剂盒通常以病毒独特的基因序列为检测靶标。PCR扩增时每一个循环分为_____三步，使靶标DNA序列呈指数增加。每一个扩增出来的DNA序列都与预先加入的一段荧光标记_____结合，产生荧光信号，扩增出来的靶标DNA序列越多，累积的荧光信号就越强。在没有病毒的样本中，因为没有靶标DNA序列扩增，所以就检测不到荧光信号增强。32、请根据有关生物工程方面的知识回答下列问题：

(1)基因工程的核心是_____，所需的工具酶有_____。从分子水平上看，基因工程得以实现的遗传学物质基础是：_____（写出两点）。

(2)将目的基因导入植物细胞最常见的方法是_____，原理是利用其菌体中质粒的T-DNA片段可_____的特点；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是_____。

(3)动物细胞工程中_____技术是其他动物细胞工程技术的基础；动物细胞工程的一项重要应用是制备单克隆抗体。

(4)胚胎工程中，胚胎移植选择受体的条件是_____，并具有健康体质和正常繁殖能力，受体对移入子宫的外来胚胎基本不发生_____，这为胚胎在受体内的存活提供了可能。33、研究人员从土壤中分离获得能分解纤维素的细菌A菌），从A菌中提取一种纤维素酶基因（CBHI，长度为1．4kbp）并进行PCR扩增，然后与高效表达载体pUT质粒（长度为11．bp）连接构建成重组质粒并导入A菌；从而获得分解纤维素能力更强的工程菌（B菌）。

。限制酶识别序列及酶切位点BglⅡA↓GATCTBstEⅡG↓GTAACCSacⅠG↓AGCTCMspⅠG↓CGGBamHⅠG↓GATCC

（1）CBHⅡ基因两端需添加相关酶切位点才能与pUT质连接，因此在扩增CBHⅡ基因时，需要在两种引物上分别添加____________序列和____________序列。PCR中需要添加引物的原因是____________。

（2）为鉴定重组质粒是否构建成功，将重组质粒导入A菌，并将其接种在含____________的培养基上培养，然后提取3个不同菌落的质粒分别进行双酶切验证将酶切片段和CHⅡ基因分别进行电泳，结果如下图2所示。据此分析，菌落____________中成功导入了重组质粒。完整的重组质粒应包括________________________（至少答出三点）。

（3）图3中B链为转录模板链，转录时mRNA自身的延伸方向为5′→3′。为了使CBHⅡ基因按照正确的方向与已被酶切的pUT质粒连接，图中酶切位点1和酶切位点2所对应的酶分别是____________，用两种限制酶切割的目的是____________。

（4）为检测B菌的纤维素分解能力，将含有20%纤维素的培养基分为三组，一组接种B菌，一组不做处理，一组接种____________，在相同条件下培养一段时间，测定培养基中纤维素含量，结果如图4所示，说明____________。预期该工程菌在处理废弃物及保护环境方面可能的应用，举一个实例。____________。

参考答案一、选择题(共8题，共16分)1、D【分析】【分析】

1；植物组织培养依据的原理为植物体细胞的全能性；即已经分化的细胞仍然具有发育成完整植株的潜能；培养过程的顺序是离体植物器官、组织或细胞（外植体）脱分化形成愈伤组织，再分化形成根、芽等器官进而形成新的植物体。

2；动物克隆为无性繁殖；其技术基础是动物细胞培养。

3；动物细胞融合也称细胞杂交；是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程，主要的用途是制备单克隆抗体。

【详解】

A；植物组织培养是指离体的植物器官或细胞进行脱分化和再分化形成新个体；A错误；

B；动物细胞融合技术的最重要用途是制备单克隆抗体；B错误；

C；细胞工程、基因工程等都能对微生物进行定向改造；人工诱变的原理是基因突变，具有不定向性，C错误；

D；动物克隆的技术基础是动物细胞培养；D正确。

故选D。

【点睛】2、B【分析】【分析】

胚胎发育过程：

（1）卵裂期：细胞进行有丝分裂；数量增加，胚胎总体积不增加；

（2）桑椹胚：32个细胞左右的胚胎（之前所有细胞都能发育成完整胚胎的潜能属全能细胞）；

（3）囊胚：细胞开始分化；其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔（囊胚的扩大会导致透明带的破裂，胚胎伸展出来，这一过程叫孵化）；

（4）原肠胚：内细胞团表层形成外胚层；下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔。（细胞分化在胚胎期达到最大限度）

【详解】

A；细胞分化的实质是基因的选择性表达；遗传物质没有发生改变，A错误；

B；囊胚期的细胞出现了细胞分化；但遗传物质未发生改变，B正确；

C；桑椹胚时期还未发生细胞分化；因此桑椹胚的各细胞结构功能基本相同，C错误；

D；囊胚期内细胞团和滋养层细胞差异不是复制水平上的差异而是转录水平上的差异引起的；D错误。

故选B。

【点睛】3、D【分析】【分析】

基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因；启动子、终止子和标记基因等。

【详解】

ABCD；一个基因表达载体的组成除了目的基因外；还必须有启动子、终止子以及标记基因等。RNA聚合酶与启动子结合，驱动基因转录出mRNA；终止子作用是终止转录；标记基因是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，ABC错误，D正确。

故选D。4、C【分析】【分析】

分析题图：该图为体细胞杂交过程；其中A为去除细胞壁，制备原生质体，可以酶解法，B为诱导原生质体融合，可以用聚乙二醇处理，融合的杂种细胞应该具备乙品种细胞质中的可育基因，甲品种的控制多种优良性状的核基因。

【详解】

A；照光处理的甲青花菜下胚轴细胞中有叶绿体；利于筛选杂种细胞，A正确；

B；根据试题分析：流程中A处理可使用纤维素酶和果胶酶；B处理可使用聚乙二醇，B正确；

C；杂种细胞经过外源生长素和细胞分裂素的诱导；先经过脱分化形成愈伤组织，再分化成为杂种植株，C错误；

D；甲品种控制多种优良性状的基因；为核基因，杂种植株细胞核内含有控制甲青花菜优良性状的基因，精子中具备一半核基因，能通过父本（精子）进行传递，D正确。

故选C。5、C【分析】【分析】

1.基因工程中的操作工具及其作用：①“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）；能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。②“分子缝合针”——DNA连接酶，E•coliDNA连接酶，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合黏性末端和平末端。③“分子运输车”——载体。

2.移植的器官会被人的免疫系统视作抗原加以攻击；使用免疫抑制剂可以减轻免疫排斥反应。

【详解】

A；若要对一个基因进行编辑；由于基因含有两条互补的单链，因而通常至少需要设计两个序列不同的sgRNA与目标DNA的两条链进行配对，A正确；

B；由于DNA和RNA之间可进行碱基互补配对；因而sgRNA可以特异性识别目标DNA分子，Cas9蛋白作用于磷酸二酯键进而可以将目标基因剪切下来，B正确；

C；sgRNA序列越短；DNA分子上与其互补的特定序列会越多，错误结合概率越高，脱靶率越高，C错误；

D；为降低免疫排斥反应；可通过CRISPR/Cas9技术敲除相关抗原蛋白基因，进而可避免免疫排斥反应发生，为异体器官抑制提供保障，D正确。

故选C。6、D【分析】【分析】

参与泡菜制作的微生物是乳酸菌；泡菜制作的原理：

（1）乳酸菌在无氧条件下；将糖分解为乳酸。

（2）利用乳酸菌制作泡菜的过程中会引起亚硝酸盐的含量的变化。

【详解】

A；泡菜发酵过程中；亚硝酸盐的含量先增加后下降，A错误；

B；在制作泡菜的过程中；乳酸菌的分解作用使有机物的含量减少，种类增多，B错误；

C；乳酸菌不分解蛋白质和果胶；蔬菜保持脆嫩而不软化腐败，C错误；

D；乳酸菌进行无氧呼吸产生乳酸；因此在制作泡菜的过程中要隔绝空气，原料装坛后马上密闭，并保持适宜温度，D正确。

故选D。7、D【分析】【分析】

果酒的制作离不开酵母菌；酵母菌是兼性厌氧型生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，在无氧条件下，酵母菌进行酒精发酵。温度是酵母菌生长和发酵的重要条件，20℃左右，酒精发酵时，一般将温度控制在18~25℃，在葡萄酒自然发酵过程当中，主要作用的是附着在葡萄皮上的野生酵母菌。

【详解】

A；“黍米”富含有机物；其中所含物质能为微生物提供碳源和能源，A正确；

B、在黄酒制作过程中需要酵母菌，在酿酒过程中，酵母菌先进行有氧呼吸，大量增殖，后进行无氧呼吸，产生酒精，酵母菌呼吸过程均有产生；B正确；

C；“陶器必良”的目的是防止陶器气密性不够导致好氧杂菌大量繁殖；从而使黄酒变质，C正确；

D；“湛炽必洁”的目的是消毒；D错误。

故选D。8、A【分析】试题分析：抗生素合成基因不在质粒上；载体质粒通常采用抗生素抗性基因作为筛选标记基因，①错误；愈伤组织是排列疏松而无规则；高度液泡化、呈无定形状态的薄壁细胞，②错误；基因突变是不定向的，某些癌细胞在合适条件下发生基因突变后可能逆转为正常细胞，③正确；组成细菌的原核细胞中没有细胞核，④错误；为了获得更多的卵母细胞，需用促性腺激素对雌性母体进行处理，⑤错误。综上所述，A项正确，B、C、D三项均错误。

考点：基因工程、植物组织培养、基因突变、原核细胞的结构、胚胎工程二、多选题(共9题，共18分)9、C【分析】囊胚中内细胞团将来发育成胎儿的各种组织，滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘，A错误；表中信息显示：添加20%FBS的试验组2，其卵裂率和囊胚率都高于对照组和其它试验组，说明促进核移植胚胎发育的最适浓度范围在为20%FBS左右，但20%FBS不一定是最适浓度，B错误；从卵巢采集的卵母细胞不具有受精能力，需在体外培育成熟后，才能与获能的精子受精，C正确；表中信息显示：各试验组的卵裂率均高于对照组，说明添加不同浓度的FBS对卵裂率均有促进作用，试验组1、2的囊胚率高于对照组，试验组3的囊胚率低于对照组，说明在一定浓度范围内，随添加的FBS浓度的升高对囊胚率均有促进作用，但超过该浓度范围却起抑制作用，D错误。10、B:C【分析】【分析】

据图可知，逆转录酶可以催化以RNA为模板合成cDNA，还可催化以cDNA为模板合成其互补DNA；RT-PCR过程中需要a、b两种引物。

【详解】

A；逆转录酶催化合成DNA；所以具有DNA聚合酶的能力，A正确；

B、③PCR过程需要引物a、b；因为后续的模板链序列既有与靶RNA一致的，也有与cDNA一致的，B错误；

C；RT-PCR可检测基因的转录情况从而推知基因的表达水平；C错误；

D；通过设计RNA的特异性引物进行RT-PCR检测新冠病毒等RNA病毒；D正确。

故选BC。11、A:B:D【分析】【分析】

土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验中；需要使用以尿素为唯一氮源的选择培养基，计数的关键是经梯度稀释后的倍数要合适，计数时通常选择菌落数在30-300之间的实验组平板进行计数。

【详解】

A；倒置培养的原因是可以防止培养皿盖上凝结的水珠落入培养基中造成污染；经高压蒸汽灭菌的培养基所倒平板和接种后培养时的平板均要倒置，以防止杂菌污染，A正确；

B；为使实验结果更准确；同一稀释度下可以多涂布几个平板，至少要涂布三个平板并且要培养到菌落数稳定时计数，求平均值，B正确；

C；细菌在分裂生殖中也会产生基因突变；虽然一个菌落是由一个活菌繁殖而来，但是个菌落中所有细胞的遗传信息不一定相同，C错误；

D；证明选择培养基没有被杂菌污染的方法是对培养基进行空白培养；即选取未接种的培养皿与接种样品的培养皿同时培养，在相同培养条件下，未接种的培养基表面无菌落生长，说明培养基没有被杂菌污染，D正确。

故选ABD。12、A:B【分析】【分析】

动物细胞培养的原理利用的是细胞的增殖；培养过程需要无毒无菌的环境；充足的营养、适宜的温度和pH以及适宜的气体环境。

【详解】

A；细胞体外培养所需的营养物质与体内基本相同；需要加入血清，以补充培养基中缺乏的物质，A正确；

B；在体外连续培养时；常采用胰蛋白酶或者胶原蛋白酶将细胞分开，B正确；

C；骨髓间充质干细胞可以分化成胰岛样组织细胞；但没有发育成一个完整的个体人，不能说明其具有发育的全能性，C错误；

D；由于导入的是胰岛样细胞；与血型无关，治疗成功后康复者的血型不可能发生改变，D错误。

故选AB。13、B:C:D【分析】【分析】

1；胚胎干细胞具有胚胎细胞的特性；在形态上表现为体积小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。另外，在体外培养的条件下，可以增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，也可进行遗传改造。

2；识图分析可知；图中①为早期胚胎的囊胚阶段，②为胚胎干细胞在体外培养的条件下，可以增殖而不发生分化，如在饲养层细胞上培养，③表示在胚胎干细胞体外诱导，分裂、分化形成各种组织和器官，培育出各种人造组织器官的过程。

【详解】

A.图中③过程为干细胞的诱导分化；通过该过程可定向培育人造组织器官，用于器官移植，解决供体器官不足和移植后免疫排斥的问题，A正确；

B.图中途径②没有发生细胞分化；所以研究细胞分化和细胞凋亡的机理可选择图中③途径，B错误；

C.细胞培养过程中，5%CO2的主要作用是调节培养液的pH；C错误；

D.②过程胚胎干细胞只分裂而不分化的培养；可在饲养层细胞上进行，饲养层细胞可作为干细胞分裂；增殖的营养细胞，也可在添加抑制因子的培养液中培养，使干细胞只分裂而不分化，D错误。

故选BCD。14、A:B【分析】【分析】

微卫星DNA是真核生物基因组中的简单重复序列；由于重复单位的重复次数在个体间呈高度特异性并且数量丰富，可以作为分子标记应用于人类亲子鉴定；种群遗传多样性研究。

【详解】

AB；微卫星DNA是真核生物基因组中的简单重复序列；且重复单位的重复次数在个体间呈高度特异性，因此可用于人类亲子鉴定、物种间亲缘关系鉴定、物质和遗传多样性的研究等，AB正确；

C；诱导基因突变的因素有物理因素、化学因素和生物因素；与微卫星DNA的特性无关，C错误；

D；冠状病毒的遗传物质是RNA；其测序与微卫星DNA的特性无关，D错误。

故选AB。15、B:D【分析】【分析】

T线和C线处同时显示横杠；即阳性，若样品中不含病毒，样品经过结合垫时由于不存在病毒抗原，则不存在抗原抗体特异性结合，显色组分仍会随样品继续向前运动，由于不存在病毒抗原，抗体不能与待测抗原结合，故在T线不会显色。

【详解】

A；分析题图可知；若有抗原存在，T线上的抗体能够结合抗原（该抗体经过结合垫时已经与胶体金抗体结合），则T线显色，过量的胶体金抗体会移动到C线处与二抗结合，C线也会显色，故样品中含有待测抗原时，两条线均会显色，A正确；

B；题图中过量的胶体金抗体没有结合抗原；而是与二抗结合，B错误；

C；据题意可知；样本中含有某种抗原，就会首先被结合垫上的胶体金标记抗体结合，形成“抗原—金标抗体”复合物，所以结合垫中固定了金标抗体，C正确；

D；若T线不显色；说明样品中没有抗原，D错误。

故选BD。16、A:B【分析】【分析】

植物体细胞杂交的过程：

其原理是植物细胞具有全能性和细胞膜具有流动性。植物体细胞杂交技术可以可以克服远缘杂交不亲和的障碍；培育作物新品种方面所取得的重大突破。

【详解】

A；植物细胞壁主要成分是纤维素和果胶；因此①过程通常用纤维素酶和果胶酶处理除去细胞壁获得原生质体，不是原生质层，A错误；

B；过程②表示诱导原生质体融合；常使用聚乙二醇作为诱导剂，B错误；

C；经过②和③过程形成的c细胞的染色体组不一定为AABB；也有可能为AAAA或BBBB，C正确；

D；两个物种具有生殖隔离；不能杂交产生可育后代，通过植物体细胞杂交技术可以打破生殖隔离，实现远缘杂交育种，D正确。

故选AB。17、C【分析】【分析】

治疗性克隆是指利用克隆技术产生特定细胞和组织（皮肤；神经或肌肉等）用于治疗性移植。中国政府的态度是禁止生殖性克隆人；不反对治疗性克隆。

【详解】

A；开放式组织培养一般是指使组织培养脱离严格无菌的操作环境；在自然、开放的有菌环境中进行操作。，动物细胞一般不能采用这种方式，A错误；

B；胚胎是由整个受精卵发育而来的；囊胚内部的细胞不能发育为完整的胚胎，B错误；

C；胚胎移植技术；一般采用桑椹胚或囊胚进行移植，C正确；

D；我国不赞成、不允许、不支持、不接受任何形式的生殖性克隆；但是不反对治疗性克隆，D错误。

故选C。三、填空题(共8题，共16分)18、略

【分析】【分析】

基因工程是指按照人们的愿望；进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋子生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫做DNA重组技术。

基因工程的原理是基因重组；其优点是打破了生殖隔离。但由于科学发展水平的限制，目前科学家对基因的结构；基因间的相互作用以及基因的调控机制等都了解得相当有限；再加上转移的基因虽然是功能已知的基因，但不少却是异种生物的基因；同时，由于外源基因插入宿主基因组的部位往往是随机的，因此在转基因生物中，有时候会出现一些人们意想不到的后果。

【详解】

（1）转基因生物具有以下优点：

作物产量高；能解决粮食短缺问题；利用基因工程生产的抗虫作物能够减少农药使用，减少环境污染；利用基因工程培育的生长迅速；营养品丰富的生物，能增加食物营养，提高附加值；利用基因工程培育微生物，能够生产稀缺的生化药物。

（2）转基因生物受限于科学发展水平；可能会产生以下问题：

转基因生物与同种生物杂交；可能产生重组病菌；重组病毒或超级杂草；导入转基因生物的外源基因有可能与感染转基因生物的某些细菌或病毒杂交，从而重组出对人类或其他生物有害的病原体，可能使疾病的传播跨越物种障碍。

（3）转基因技术取得了巨大的成果；但科学技术是把双刃剑，面对转基因技术的利弊，正确的做法应该是趋利避害，而不能因噎废食。

【点睛】

本题考查转基因生物的安全性问题，意在考查学生对转基因生物安全性问题的识记与理解。【解析】解决粮食短缺问题减少农药使用，减少环境污染增加食物营养，提高附加值能产生有毒蛋白或新过敏原可能产生重组病菌、重组病毒或超级杂草可能使疾病的传播跨越物种障碍趋利避害不能因噎废食19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】含有基因表达载体受体细胞标记基因是否表达。20、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】目的基因的获取21、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】黏性末端平末端。22、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】沸水浴二苯胺蓝色二苯胺23、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】贴附在瓶壁上细胞贴壁相互抑制停止分裂增殖细胞的接触抑制。24、略

【分析】【详解】

对待生殖性克隆人的研究，我国政府一再重申四不原则：不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验。因为生殖性克隆（也就是克隆人），违反人类繁衍的自然法则，损害人类作为自然人的尊严，会引起严重的道德、伦理、社会和法律问题。所以，现阶段生殖性克隆绝对不可以应用于人类本身。【解析】认同。因为生殖性克隆（也就是克隆人），违反人类繁衍的自然法则，损害人类作为自然人的尊严，会引起严重的道德、伦理、社会和法律问题。所以，现阶段生殖性克隆绝对不可以应用于人类本身。25、略

【分析】【详解】

蛋白质形成二硫键，使蛋白质的结构更加稳定，因此T4溶菌酶的热稳定性会提高。这项技术属于蛋白质工程技术，其步骤为从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获得所需的蛋白质。【解析】会提高T4溶菌酶的耐热性。这项技术属于蛋白质工程技术，该技术的要点是从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获得所需的蛋白质。四、判断题(共1题，共9分)26、B【分析】【详解】

基因工程技术可以使建立移植器官工厂的设想成为现实；说明并未开始实际应用。

故错误。五、实验题(共4题，共40分)27、略

【分析】【分析】

1；利用动物细胞进行DNA的粗提取与鉴定的实验原理：①DNA在氯化钠溶液中的溶解度；是随着氯化钠的浓度变化而改变的．当氯化钠的物质的量浓度为0.14mol/L时，DNA的溶解度最低．利用这一原理，可以使溶解在氯化钠溶液中的DNA析出；②DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液．利用这一原理，可以进一步提取出含杂质较少的DNA；②DNA遇二苯胺（沸水浴）会染成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。

2；利用动物细胞进行DNA的粗提取与鉴定的实验步骤是：①制备鸡血细胞液；②提取鸡血细胞和物质，③细胞核物质中DNA的溶解，④析出含有DNA的粘稠物，⑤过滤获取纱布上的粘稠物，⑥DNA的再溶解，⑦加冷却酒精使DNA析出，⑧二苯胺鉴定DNA分子。

【详解】

（1）DNA的粗提取和鉴定步骤是：加入蒸馏水；破碎细胞→过滤，获取含DNA的滤液→去除滤液中杂质→DNA的析出→鉴定．所以正确的操作顺序是C→B→E→D→A。

（2）C加入蒸馏水的目的是使鸡血细胞吸水涨破；释放细胞核物质；E步骤甲蒸馏水是降低NaCl溶液的浓度，使DNA析出。

（3）鉴定A中所得到的丝状物的主要成分为DNA；可滴加二苯胺试剂，在沸水浴加热的条件下如果出现蓝色则该丝状物的主要成分为DNA。

（4）图中A步骤的目的是获取含杂质较少（或较纯净）的DNA。

【点睛】

本题结合图解，考查DNA的粗提取和鉴定，要求考生识记DNA粗提取和鉴定的原理、操作步骤、实验中采用的试剂及试剂的作用等，再结合所学的知识准确答题，难度适中。【解析】C→B→E→D→A使鸡血细胞吸水涨破，释放出细胞核物质降低NaCl溶液的浓度，使DNA析出二苯胺蓝色提取含杂质较少（或较纯净）的DNA28、略

【分析】【分析】

微生物接种常用的两种方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

（1）

结合题意“氧化硫硫杆菌通过将单质硫与还原态硫氧化为硫酸以获得能量进行化能合成作用”可知，氧化硫硫杆菌的代谢类型为自养需氧型；由于该菌可以进行化能合成作用，可以利用液体培养基中的无机碳或CO2；可以其作为液体培养基中的碳源；该培养基中含有单质硫，对生长的菌类具有选择作用，在功能上属于选择培养基。

（2）

培养微生物应用固体培养基进行培养；故应在配置好的液体培养基中加入琼脂；对微生物进行纯化培养的方法有平板划线法或稀释涂布平板法。

（3）

第一步；对培养基的灭菌方法为高压蒸汽灭菌；

第二步；由于本实验的目的是通过实验探究硫酸锌对T．t产酸量的影响，则实验的自变量为硫酸锌的有无及其含量，实验应遵循对照与单一变量原则，故本步骤应在三个锥形瓶中分别加入等量的蒸馏水；100mg/L和1000mg/L的硫酸锌溶液；

第三步；遵循无关变量一致原则，故往A；B、C三组中接种等量的氧化硫硫杆菌（T．t）后放入恒温摇床中培养7天。

（4）

据图分析；与对照（蒸馏水组）相比，低浓度硫酸锌对氧化硫硫杆菌（T．t）产酸无明显作用，高浓度硫酸锌对氧化硫硫杆菌（T．t）产酸起抑制作用。

【点睛】

本题主要考查培养基的制作和微生物的接种方法，意在强化学生对实验室的微生物的培养的相关知识的理解与掌握。熟记相关知识并能结合术语分析作答是解题关键。【解析】（1）自养需氧型无机碳或CO2选择培养基。

（2）琼脂平板划线法或稀释涂布平板法。

（3）高压蒸汽等量的蒸馏水；100mg/L和1000mg/L的硫酸锌溶液等量的氧化硫硫杆菌（T．t）

（4）低浓度硫酸锌对氧化硫硫杆菌（T．t）产酸无明显作用，高浓度硫酸锌对氧化硫硫杆菌（T．t）产酸起抑制作用29、略

【分析】【分析】

根据题干信息分析；糖尿病模型斑马鱼的构建的原理是使胰岛素基因表达受阻，而使胰岛素基因表达受阻是通过给斑马鱼受精卵注射吗啉反义寡核苷酸实线的；吗啉反义寡核苷酸是一种RNA剪接抑制剂，其作用的机理有两种假说：可能是导致RNA前体上内含子2的对应序列不能被剪切，也可能是导致RNA前体上内含子2和外显子3的对应序列同时被剪切。

(1)

根据引物2和引物3在胰岛素基因片段上的位置；通过PCR扩增能得到内含子2的序列，若假说1成立，即吗啉反义寡核苷酸导致RNA前体上内含子2的对应序列不能被剪切，故实验组中应含有内含子2的序列，而对照组的该片段被切除了，因此用引物2和引|物3进行PCR反应，其结果为实验组中有杂交带，而对照组中无杂交带。

故选AD。

(2)

若要证明假说2成立；即RNA前体上内含子2和外显子3的对应序列同时被剪切下去，则可以选择图示引物5和引物2；引物5和引物6进行PCR，观察是否有杂交带出现。

(3)

由于DNA聚合酶不能从头合成DNA；而只能从引物3′端延伸DNA链，因此DNA复制需要引物。

(4)

用胰蛋白酶处理斑马鱼囊胚中的内细胞团；可以获得分散的斑马鱼胚胎干细胞，然后对其进行原代培养，接着分瓶继续培养。培养瓶中添加输卵管上皮细胞作为饲养层细胞，以提高斑马鱼胚胎干细胞的数量。

【点睛】

解答本题的关键是掌握基因的表达的相关知识点，明确基因转录出来的mRNA是要经过加工成为成熟的mRNA才能作为翻译的模板的，并能够根据题干提取有效信息进行答题。【解析】(1)AD

(2)5、65；2

(3)DNA聚合酶不能从头合成DNA；只能从3′端延伸DNA链，因此DNA复制需要引物。（得分点：“只能从3′端延伸DNA链”）

(4)胰蛋白酶内细胞团原代饲养层30、略

【分析】【分析】

分析题图：①⑤⑥为植物组织培养；③为花粉离体培养；幼苗B为单倍体，若过程④使用秋水仙素处理幼苗B，则植物体B为可育的纯合植株。

【详解】

（1）由图可知；图中的四种育种方法都利用了离体的植物细胞进行育种，运用了植物细胞具有全能性的原理，离体植物细胞的培育都必须运用植物组织培养技术，该过程中会发生脱分化，即①③⑤⑥。

（2）红果多室(Yymm)番茄植株的花粉基因型及比例是Ym：ym＝1：1；故花粉苗直接发育成的番茄幼苗B的基因型是Ym或ym，但其为单倍体，高度不育，故表型为无果实；而植物体C仅是花粉两两随机融合得到的，基因型及其比例是YYmm：Yymm：yymm＝1：2：1。

（3）育种过程中染色体数量最少的是由减数分裂产生的花粉及幼苗B；植物体B中只有一个染色体组；高度不育，可以使用一定浓度的秋水仙素或适当低温处理使之成为二倍体，以用于生产。

（4）植物体D是由番茄体细胞和马铃薯体细胞融合培育而来的；其染色体数量是两个物种亲本的染色体数量之和，有丝分裂中少数细胞中的染色体数量暂时加倍，染色体数量最多；植物体D具有两个亲本的遗传物质，故能表现出两个亲本的一些性状。

（5）植物体A的形成过程中没发生减数分裂，只进行了有丝分裂，没有基因重组，没发生基因突变，故完全表现亲本红果多室的性状。【解析】(1)植物细胞全能性①③⑤⑥

(2)Ym或ym无果YYmm∶Yymm∶yymm＝1∶2∶1

(3)花粉和幼苗B一定浓度的秋水仙素或适当低温。

(4)D植物体细胞杂交具有两个亲本的遗传物质。

(5)该培育过程中只进行了有丝分裂，且没发生基因突变，完全保持了亲本的遗传性状六、综合题(共3题，共12分)31、略

【分析】【分析】

1；基因工程的工具：（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列；并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。（2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。（3）运载体：常用的运载体有质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒。

2；基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

（1）构建基因表达载体的过程中需要用到的工具酶有限制性核酸内切酶（限制酶）；DN