2025年人教五四新版选修3生物上册月考试卷含答案

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A.②①③B.②③①C.③①②D.①②③2、下列各组中酶的作用相似的是A.解旋酶、胰蛋白酶B.DNA聚合酶、Taq酶C.纤维素酶、脂肪酶D.DNA连接酶、限制酶3、从基因型为Aa的绿色植物某器官中获取组织；显微观察如下图。下列对该图所示细胞的叙述正确的是()。

A.若将X细胞离体培养成完整植株，此过程要涉及纤维素酶和果胶酶B.若将Y细胞离体培养成幼苗后用秋水仙素处理，目的是使其发生染色体结构变异C.X与Y两个细胞进行体细胞杂交，形成杂种细胞，发育成的杂种植株往往是不可育的D.如果X与Y细胞所含蛋白质种类有明显差异，其根本原因是信使RNA的不同4、科学家将含有人体α-抗胰蛋白酶基因的表达载体注射到羊的受精卵中，该受精卵发育的雌羊乳汁中含有α-抗胰蛋白酶。上述过程一般不会发生（）A.α-抗胰蛋白酶基因随着体细胞染色体的复制而复制B.α-抗胰蛋白酶基因在乳腺细胞中大量扩增C.RNA聚合酶识别乳腺特异表达基因的启动子D.乳腺细胞合成并分泌α-抗胰蛋白酶5、人组织纤溶酶原激活物（htPA）是一种重要的药用蛋白；可在转htPA基因母羊的羊乳中获得。流程如图所示，下列叙述不正确的是（）

A.构建重组表达载体过程中需用同种限制酶和DNA连接酶B.将重组表达载体导入受精卵常用的方法是农杆菌转化法C.采用DNA分子杂交技术检测目的基因是否已导入受体细胞D.若在转htPA基因母羊的羊乳中检测到htPA，说明目的基因成功表达6、长穗偃麦草（2n=14）是普通小麦（6n=42）的近缘属植物；因其可与普通小麦杂交，且具有突出的抗旱；抗寒、抗病及耐盐性，常用于小麦遗传改良育种研究。科学家采用下图所示的技术培育出了普通小麦—长穗偃麦草杂种植株，①、②、③代表培育过程。下列说法正确的是（）

A.长穗偃麦草与普通小麦杂交得到F1，用秋水仙素处理F1产生的萌发种子，可得到普通小麦—长穗偃麦草杂种植株B.①过程常用物理、化学和生物的方法实现人工诱导原生质体融合C.②过程和③过程培养基中生长素用量与细胞分裂素用量的比值不同D.植物体细胞杂交的原理是细胞膜的流动性7、某兴趣小组拟用组织培养繁殖一种名贵花卉，其技术路线为“取材→消毒→愈伤组织培养→出芽→生根→移栽”。下列有关叙述，错误的是A.消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又减少消毒剂对细胞的伤害B.在愈伤组织培养中加入细胞融合的诱导剂，可获得染色体加倍的细胞C.出芽是细胞再分化的的结果，受基因选择性表达的调控D.生根时，培养基通常应含α-萘乙酸等生长素类调节剂8、下列有关现代生物科技专题的叙述错误的有几项（）

①基因治疗就是把缺陷基因诱变成正常基因②卵子受精的标志是雌雄原核的融合③单克隆抗体的制备过程体现了动物细胞的全能性④胚胎移植实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移⑤限制性核酸内切酶、DNA连接酶只存在于原核生物中A.二项B.三项C.四项D.五项9、昆明滇池生态恢复成效显著，阔别数十载的鸬鹚、野鸭重新出现，滇池又重现秀美风光。下列措施与生态恢复工程原理不符的是（）A.开展“退塘、退田、退房、退人，还林、还湿、还湖”的“四退三还”工程B.开展传播绿色生态理念、巡河爱湖护山活动和植树造林美化绿化活动C.用法律手段禁止啤酒饮料、造纸、印染等产业的生产，以断绝污染源头D.建设捞鱼河等多个湿地可有效对污水、污泥进行处理评卷人得分二、多选题(共5题，共10分)10、在培育“乳腺生物反应器”的过程中，可能涉及()A.导入外源基因B.诱导细胞融合C.挑选雌性胚胎D.胚胎移植11、下列叙述能正确体现转基因生物会引发安全性问题的是（）A.目的基因(如杀虫基因)本身编码的产物可能会对人体产生毒性B.运载体的标记基因(如抗生素基因)可能指导合成有利于抗性进化的产物C.三倍体转基因鲤鱼与正常二倍体鲤鱼杂交，进而导致自然种群被淘汰D.目的基因通过花粉的散布转移到其他植物体内，从而可能打破生态平衡12、为研究多种血糖调节因子的作用，我国科学家开发出胰岛素抵抗模型鼠。为扩增模型鼠数量，科学家通过诱导优良模型鼠体细胞转化获得诱导胚胎干细胞（iPS细胞），继而利用iPS细胞培育出与模型鼠遗传特性相同的克隆鼠，具体步骤如图所示。下列叙述正确的是（）

A.诱导优良模型鼠体细胞转化为iPS细胞的过程类似于植物组织培养的脱分化B.为获得更多的双细胞胚，可对白色鼠1注射性激素达到超数排卵的目的C.胚胎移植后，重构胚进一步扩大导致囊胚腔破裂的过程称为孵化D.为确定克隆鼠培育是否成功，须对黑色鼠3进行胰岛素抵抗的相关检测13、让羊产牛奶，科学家对此做了相关的构想，过程如下图所示。下列说法不正确的是（）

A.图中涉及的细胞工程技术有动物体细胞核移植、胚胎移植、胚胎分割和动物细胞培养等B.进行G操作时应选择发育良好、形态正常的囊胚或原肠胚C.若研究发现羊N细胞中线粒体基因的表达产物丰富，故它的产奶率高，则小羊a会有这一优良性状D.通过上述技术得到小羊a和b的过程为有性生殖14、生物圈的稳态是人类社会和经济可持续发展的基础。为了维持生物圈的稳态，下列思路和做法可取的是（）A.落实科学发展观，大力发展生态农业，建设社会主义新农村B.全民开展节能减排，实现能源的清洁生产，努力开发新能源C.建立“原料—产品—废料”的生产模式，实现物质的循环利用D.环境效益比经济效益更为重要，必须把保护环境放在优先地位评卷人得分三、填空题(共8题，共16分)15、生物学家利用基因工程技术通过生物反应器生产人的血清蛋白。请根据相关知识回答下列问题：

（1）在基因工程的操作中的“分子手术刀”是_______________________________

（2）在基因工程的操作中的“分子缝合针”是________

（3）基因工程中最常用的运载体是______

（4）人的基因在牛体内能表达，说明人和牛______16、自然条件下；奶牛的繁殖率非常低，一般一头奶牛一年只能繁殖一头牛犊。通过胚胎工程技术可以快速繁育优良个体，其主要步骤如图所示。回答下列问题：

（1）从供体奶牛获得的精子，需对其进行___________处理才具有受精能力。

（2）通常奶牛每次只排出一枚卵母细胞，为使其超数排卵常使用____________激素处理；采集到卵母细胞后，在体外将其培养到___________期；使其成熟。

（3）步骤甲、乙分别指___________、___________。为筛选出具有优良性状的母牛，步骤乙之前应鉴定胚胎中与___________有关的基因。

（4）进行步骤乙时，受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生___________，这为胚胎在代孕母牛体内的存活提供了可能。17、基因治疗：基因治疗是指用正常基因_______或______患者细胞中有缺陷的基因，从而达到治疗疾病的目的。18、根据课本知识填空：

（1）神经元的轴突末梢经过多次分支；最后每个小枝末端膨大，呈杯状或球状，叫做________。

（2）抗体可以与病原体结合；从而抑制病原体的繁殖或___________________________。

（3）要检测目的基因是否转录出了mRNA；可以用____________________________做探针。

（4）所谓人工种子就是以植物组织培养得到的________________________（写出2个即可）等为材料；经过人工薄膜包装得到的种子。

（5）胰岛素能促进组织细胞加速_______________葡萄糖。19、今年年初；爆发了全球性新型肺炎疫情。初步研究表明，新型冠状病毒通过其表面的S-蛋白与人细胞膜上的ACE2相互识别，感染人的呼吸道上皮细胞。请分析回答问题：

（1）新型冠状病毒表面的S-蛋白作为_________剌激淋巴细胞，使机体产生_________性免疫反应，人细胞膜上的ACE2的化学本质是_________。

（2）感染病毒后，免疫系统对肺细胞强烈攻击引发肺炎，此时可通过适度使用_________对病人进行治疗；使其免疫功能下降，以避免肺部严重受损。

（3）科学家采集了感染新型冠状病毒并已康复的甲、乙两人的血液，检测相关抗体的水平，结果如图1。据此分析，应选取_________的B淋巴细胞用以制备单克隆抗体（单抗）。

（4）将制备的多种单抗分别与病毒混合，然后检测病毒对宿主细胞的感染率，结果如图2。据此分析，对病毒抑制效果最好的单抗是__________号。

（5）患者康复后一段时间，若再次受到该病毒的攻击，机体内相应的__________细胞迅速增殖分化，产生大量的浆细胞和细胞毒性T细胞。20、下图表示哺乳动物精子和卵细胞发生和成熟的示意图。请据图回答下列问题：

（1）③过程中精子头部的顶体是由__________发育来的；④过程在__________内完成。

（2）在④过程中发生顶体反应；释放顶体酶，溶解卵丘细胞之间的物质和透明带。为了阻止多精入卵，会发生__________反应和__________反应。

（3）精子的发生开始的时期是__________；雌性动物卵泡的形成的时期是__________。

（4）初级卵母细胞进行Ⅰ过程是在__________时期完成的，Ⅱ过程是在__________过程中完成的。21、请写出基因工程的概念：_________________。请写出胚胎移植的概念：_____________________。请分别写出植物组织培养和动物细胞培养的原理_________。22、自然条件下；奶牛的繁殖率非常低，一般一头奶牛一年只能繁殖一头牛犊。通过胚胎工程技术可以快速繁育优良个体，其主要步骤如图所示。回答下列问题：

（1）从供体奶牛获得的精子，需对其进行___________处理才具有受精能力。

（2）通常奶牛每次只排出一枚卵母细胞，为使其超数排卵常使用____________激素处理；采集到卵母细胞后，在体外将其培养到___________期；使其成熟。

（3）步骤甲、乙分别指___________、___________。为筛选出具有优良性状的母牛，步骤乙之前应鉴定胚胎中与___________有关的基因。

（4）进行步骤乙时，受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生___________，这为胚胎在代孕母牛体内的存活提供了可能。评卷人得分四、判断题(共5题，共30分)23、一般情况下一个卵细胞只能由一个精子发生融合形成受精卵()A.正确B.错误24、精子入卵后形成雄原核；同时卵子完成减数分裂Ⅱ，排出第二极体后，形成雌原核()A.正确B.错误25、受精包括受精前的准备阶段和受精阶段，在自然状态下，哺乳动物的受精在子宫内完成。（选择性必修3P56）()A.正确B.错误26、下图表示哺乳动物发育过程的几个阶段；请判断下列题的叙述是否正确？

（_____）（1）从A到C的过程中有机物的含量减少。

（_____）（2）A；B时期胚胎中的细胞都是全能细胞。

（_____）（3）胚胎移植必须使用处于B或C时期的胚胎。

（_____）（4）图示过程细胞通过有丝分裂增殖，遗传物质可能会发生改变。A.正确B.错误27、在生态工程建设中，只能遵循“先污染、破坏、再治理”的发展思路______A.正确B.错误评卷人得分五、非选择题(共1题，共4分)28、基因治疗是指将外源正常基因导入靶细胞；以纠正或补偿因基因缺陷和异常引起的疾病，以达到治疗的目的。干扰素基因缺失的小鼠不能产生成熟淋巴细胞，科研人员利用胚胎干细胞细胞)对干扰素基因缺失的小鼠进行了基因治疗。请回答：

(1)为使干扰素基因在小鼠细胞中高效表达；需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入基因表达载体的_____________和_____________之间。

(2)将干扰素基因导入ES细胞的方法是_____________；采用_____________可以鉴定目的基因是否插入到受体细胞染色体DNA分子上，再将能正常表达干扰素的细胞转入到小鼠体内，这种治疗方法称为____________。

(3)干扰素基因缺失的小鼠易患某种细菌导致的肺炎；引起这种现象的原因是小鼠缺少成熟的淋巴细胞，降低了小鼠免疫系统的_____________功能。

(4)用于基因治疗的基因有三类，一类是把正常基因导入有基因缺陷的细胞中，以表达出正常性状来治疗，第二类是反义基因，即通过产生的mRNA分子与病变基因产生的_____________进行互补结合，来阻断非正常蛋白质的合成；第三类是编码可以杀死癌细胞的蛋白酶基因。评卷人得分六、实验题(共4题，共20分)29、花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病；野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化，并丧失再生能力。再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合，以获得抗黑腐病杂种植株．流程如图。

据图回答下列问题：

（1）过程①所需的酶是________________。

（2）过程②后，在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的_____存在；这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。

（3）原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是________，原生质体经过_____再生；进而分裂和脱分化形成愈伤组织。

（4）若分析再生植株的染色体变异类型，应剪取再生植株和_____植株的根尖，制成装片，然后在显微镜下观察比较染色体的_____和___________。

（5）采用特异性引物对花椰菜和黑芥基因组DNA进行PCR扩增，得到两亲本的差异性条带，可用于杂种植株的鉴定．下图是用该引物对双亲及再生植株1-4进行PCR扩增的结果。据图判断，再生植株1-4中一定是杂种植株的有___________。

（6）对杂种植株进行_____接种实验，可筛选出具有高抗性的杂种植株。30、水稻穗粒数可影响水稻产量。研究者筛选到一株穗粒数异常突变体；并进行了相关研究。

（1）农杆菌Ti质粒上的T-DNA序列；可以从农杆菌中转移并随机插入到被侵染植物的__________中，导致被插入的基因功能丧失。研究者用此方法构建水稻突变体库，并从中筛选到穗粒数异常突变体。

（2）研究者分别用EcoRⅠ；HindⅢ、BamHⅠ三种限制酶处理突变体的总DNA；用HindⅢ处理野生型的总DNA，处理后进行电泳，使长短不同的DNA片段______。电泳后的DNA与DNA分子探针（含放射性同位素标记的T-DNA片段）进行杂交，得到下图所示放射性检测结果。

①由于杂交结果中___________；表明T-DNA成功插入到水稻染色体基因组中。（注：T-DNA上没有EcoRⅠ；HindⅢ、BamHⅠ三种限制酶的酶切位点）

②不同酶切结果；杂交带的位置不同，这是由于________________。

③由实验结果断定突变体为T-DNA单个位点插入；依据是___________。

（3）研究者用某种限制酶处理突变体的DNA（如下图所示）；用_______将两端的黏性末端连接成环，以此为模板，再利用图中的引物__________组合进行PCR，___________出T-DNA插入位置两侧的未知序列。经过与野生型水稻基因组序列比对，确定T-DNA插入了2号染色体上的B基因中。

（4）研究发现；该突变体产量明显低于野生型，据此推测B基因可能_____（填“促进”或“抑制”）水稻穗粒的形成。

（5）育种工作者希望利用B基因；对近缘高品质但穗粒数少的低产水稻品系2进行育种研究，以期提高其产量，下列思路最可行的一项是（_____）

a.对水稻品系2进行60Co照射；选取性状优良植株。

b.培育可以稳定遗传的转入B基因的水稻品系2植株。

c.将此突变体与水稻品系2杂交，筛选具有优良性状的植株31、《伤寒论》中记载的芍药甘草汤是由芍药和甘草两味药物制成，具有调和肝脾，缓急止痛的作用，芍药和甘草的主要活性成分分别为芍药苷和甘草酸。科研团队通过制备抗芍药苷的单克隆抗体，将其纯化后结合在固相载体上，让芍药甘草汤流过，去除汤中芍药苷，用于探究芍药苷与芍药甘草汤对小鼠镇痛作用的相关性。回答下列问题。

(1)制备单克隆抗体依赖的生物技术有______________、_________________等。将芍药苷与蛋白质结合作为抗原，定期间隔免疫小鼠，取免疫后的小鼠脾脏，剪碎并用_____________酶处理得到小鼠脾脏细胞。

(2)图中诱导其与骨髓瘤细胞融合的试剂X是____________，经选择培养筛选出的细胞Y具有________________________特点。用多孔培养板培养细胞Y并收集上清液，利用___________________技术对上清液进行抗体阳性检测。

(3)研究人员将生理状态相同的小鼠随机分为对照组、造模组进行如下处理，造模组前期已完成冰醋酸致痛处理（冰醋酸能引起深部的、大面积且较持久的疼痛刺激，此时小鼠会出现扭体反应）。请完善实验方案。。组别前期处理后期处理对照组腹腔注射生理盐水I造模组腹腔注射冰醋酸模型组：口服生理盐水阳性药组：口服芍药甘草汤阳性药组：口服芍药甘草汤实验组：Ⅱ实验组：Ⅱ

①表中I的处理是_____________、Ⅱ的处理_______________。

②结果与分析：

若前期处理后，造模组小鼠扭体次数显著__________对照组，表明致痛处理成功。后期处理结束后测定各组小鼠扭体次数，若结果为______________________，则表明芍药苷是芍药甘草汤中发挥镇痛作用的重要成分之一。32、单克隆抗体在防治H7N9型禽流感上具有显著疗效。下图是科研人员制备H7N9病毒的单克隆抗体X的过程。回答下列问题：

（1）上图中B淋巴细胞是取自______________的动物或人。融合的M细胞先用选择培养基进行筛选，再进行克隆化培养和_______________以得到符合要求的N细胞，N细胞的名称是______________。

（2）为了进一步研究H7N9病毒的单克隆抗体X（以下简称抗体X）的效果及作用机制；科学家开展了如下实验：

实验一：在体外将抗体X与HA蛋白（H7N9病毒表面的一种蛋白）混合，检测抗体X对HA蛋白的亲和力。实验结果如下表所示。（注：KD值越小，抗体和HA蛋白的亲和力越高；机体Y为一种已知的H7N9病毒的抗体。）。抗体种类KD抗体X5．32×10-9M抗体Y1．95×10-9M

实验二：以一定浓度的H7N9病毒感染小鼠；一天后向小鼠腹腔分别注射一定剂量的抗体X；Y；14天后测定小鼠存活情况和体重变化。实验结果表明：抗体X的体内治疗效果优于抗体Y。

①实验一结果表明：对H7N9病毒HA蛋白亲和力更高的抗体是__________。

②分析实验一和实验二的结果差异，研究人员提出假说：抗体除了中和病毒活性之外，还可以通过和巨噬细胞表面的受体相结合，从而增强巨噬细胞的吞噬作用，进而清除被病毒感染的靶细胞。请以巨噬细胞、感染了H7N9病毒的肺上皮细胞、细胞培养液、抗体X、抗体Y和无关抗体等为材料，设计实验验证上述假说。写出实验思路__________。参考答案一、选择题(共9题，共18分)1、C【分析】女性生殖系统主要包括卵巢、输卵管、子宫、阴道等。③卵巢能产生卵细胞并分泌雌性激素；①输卵管的作用是输送卵细胞，也是受精作用的场所；②子宫是胚胎发育的场所；阴道是精子进入女性体内和婴儿出生的通道。2、B【分析】解旋酶作用于氢键，胰蛋白酶作用于肽键，A错误；DNA聚合酶、Taq酶都作用于磷酸二酯键，B正确；纤维素酶和脂肪酶分别作用于纤维素和脂肪，C错误；DNA连接酶催化形成磷酸二酯键，而限制酶切割磷酸二酯键，D错误。3、D【分析】【分析】

【详解】

A；将X细胞离体培养成完整植株；为植物组培技术，需要用生长素和细胞分裂素诱导脱分化和再分化过程，不需要用纤维素酶和果胶酶去壁。A错误。

B；用秋水仙素处理幼苗；会使染色体数目加倍，B错误。

C；X与Y两个细胞取自同一植物；进行体细胞杂交获得的杂种细胞基因型为AAaa，发育成的植株可育。C错误。

D；X与Y细胞所含蛋白质种类不同；是基因进行了选择性表达，转录的信使RNA不同。D正确。

故选D4、B【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

A；由于α-抗胰蛋白酶基因整合到宿主细胞染色体DNA上；因此会随着体细胞染色体的复制而复制，A错误；

B；乳腺细胞已经高度分化；不再分裂，因此α-抗胰蛋白酶基因不能在乳腺细胞中大量扩增，只能在乳腺细胞中大量表达，B正确；

C；RNA聚合酶识别乳腺特异表达基因的启动子；并与之结合进而启动转录过程，此过程也会发生，C错误；

D；α-抗胰蛋白酶是目的基因表达的产物；因此乳腺细胞可以合成并分泌α-抗胰蛋白酶，此过程发生，D错误。

故选B。

【点睛】5、B【分析】【分析】

DNA重组技术至少需要三种工具：限制性核酸内切酶（限制酶）；DNA连接酶、运载体；将目的基因导入植物细胞；采用最多的方法是农杆菌转化法，其次还有基因枪法和花粉管通道法等；将目的基因导入动物细胞最常用的方法是显微注射技术，此方法的受体细胞多是受精卵。为检测目的基因是否导入受体细胞，常用的检测方法有：①检测转基因生物DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。

【详解】

A.htPA基因与载体需要用同种限制性核酸内切酶切割；形成相同的黏性末端，然后再通过DNA连接酶连接，以构建重组表达载体，A正确；

B.将重组表达载体导入受精卵常用的方法是显微注射法；B错误；

C.采用DNA分子杂交技术可检测目的基因是否已导入受体细胞；C正确；

D.若在转htPA基因母羊的羊乳中检测到htPA，说明目的基因成功表达，D正确。6、C【分析】【分析】

分析图示可知；①过程为原生质体融合形成杂种细胞，②过程为植物组织培养过程中脱分化，③过程为再分化过程。

【详解】

A、长穗偃麦草（2n=14）是普通小麦（6n=42）的近缘属植物，不属于同种生物，所以长穗偃麦草与普通小麦存在生殖隔离，故二者杂交得到的F1不育，所以不能产生种子，可用秋水仙素处理F1幼苗；A错误；

B；诱导植物原生质体融合常用物理和化学诱导方法；不用生物诱导法，B错误；

C；生长素用量与细胞分裂素用量的比值不同将会影响脱分化和再分化过程；所以②过程和③过程培养基中生长素用量与细胞分裂素用量的比值不同，C正确；

D；植物体细胞杂交是形成杂种植株；其原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性，D错误。

故选C。7、B【分析】【详解】

植物组织培养过程为：离体组织脱分化形成愈伤组织，再分化长出丛芽，诱导生根，然后移栽形成完整植株。植物组织培养中要求无菌操作，以防止细菌感染，消毒时既要杀死材料表面的微生物，又要尽量减少消毒剂对细胞的伤害。因此A对；出芽是细胞再分化的结果，分化的实质是基因的选择性表达，受基因选择性表达的调控。因此C对；在诱导生根的过程中，需要生长素和细胞分裂素的共同作用，生长素与细胞分裂素比值高时，有利于根的分化，因此生根时，培养基中会含有α-萘乙酸等生长素类似物等调节剂，因此D对；B选项中，由于植物细胞有细胞壁，植物细胞的融合必须首先破坏细胞壁，再利用细胞膜的流动性加以融合，如果在愈伤组织培养中直接加入细胞融合的诱导剂，不能导致细胞融合，因此B选项错误，选B。8、C【分析】【分析】

1；基因工程的工具：限制酶、DNA连接酶和运载体。

2；单克隆抗体的制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应；之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。

【详解】

①基因治疗是把正常基因导入病人体内有缺陷的细胞中；使该基因的表达产物发挥功能，从而达到治疗疾病的目的，①错误；

②卵子受精的标志是在卵细胞膜和透明带之间观察到两个极体；②错误；

③单克隆抗体的制备过程得到的是单克隆抗体；并没有形成个体，因此不能体现动物细胞的全能性，③错误；

④胚胎移植实际上是生产胚胎的供体和孕育胚胎的受体共同繁殖后代的过程；实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移，④正确；

⑤限制性核酸内切酶、DNA连接酶主要存在于原核生物中，某些病毒中也存在，例如T4DNA连接酶存在于T4噬菌体中；⑤错误。

故选C。9、C【分析】【分析】

生态工程的基本原理：

（1）物质循环再生原理：物质能在生态系统中循环往复；分层分级利用；

（2）物种多样性原理：物种繁多复杂的生态系统具有较高的抵抗力稳定性；

（3）协调与平衡原理：生态系统的生物数量不能超过环境承载力（环境容纳量）的限度；

（4）整体性原理：生态系统建设要考虑自然；经济、社会的整体影响；

（5）系统学和工程学原理：系统的结构决定功能原理：要通过改善和优化系统结构改善功能；系统整体性原理：系统各组分间要有适当的比例关系；使得能量；物质、信息等的转换和流通顺利完成，并实现总体功能大于各部分之和的效果，即“1+1＞2”。

【详解】

A；开展“退塘、退田、退房、退人；还林、还湿、还湖”的“四退三还”工程是针对昆明滇池的生态恢复工程，符合生态工程的基本原理，A正确；

B；开展传播绿色生态理念、巡河爱湖护山活动和植树造林美化绿化活动遵循整体性原理、协调与平衡原理；B正确；

C；用法律手段禁止啤酒饮料、造纸、印染等产业的生产；一方面会严重阻滞经济的发展，另一方面也不能达到断绝污染源头的目的，C错误；

D；建设捞鱼河等多个湿地可有效对污水、污泥进行处理体现了整体性原理、协调与平衡原理；D正确。

故选C。二、多选题(共5题，共10分)10、A:C:D【分析】【分析】

【详解】

由上图分析可知；在培育“乳腺生物反应器”的过程中，涉及基因工程技术；早期胚胎培养、挑选雌性胚胎、胚胎移植等技术，ACD正确，B错误。

故选ACD。11、A:B:D【分析】【详解】

试题分析：目的基因本身编码的陈武可能会对人体产生毒性；A正确；载体的标记基因有些是抗性基因，由于自然选择，可能会出现有利于抗性进化的产物，B正确；三倍体转基因鲤鱼在减数分裂过程中，染色体联会紊乱，不能产生正常的配子，因此三倍体转基因鲤鱼与正常鲤鱼没有后代，也就不会导致自然种群被淘汰，C错误；目的基因通过花粉的散步转移到其他植物体内，从而可能打破生态平衡，D正确。

考点：本题考查基因工程存在的安全性问题，意在考查学生能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断的能力。12、A:C:D【分析】【分析】

哺乳动物胚胎干细胞是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞；胚胎干细胞的细胞核一般较大；核仁明显，而细胞质相对较少；在功能上具有发育的全能性。

植物组织培养的脱分化：让已经分化的细胞；经过诱导后，失去其特有的结构和功能而转变成未分化细胞的过程。

【详解】

A；优良模型鼠体细胞在诱导因子的作用下转化为iPS细胞的过程与植物组织培养中的脱分化过程类似；是组织细胞恢复分裂能力的过程，A正确；

B；用促性腺激素处理；使其排出更多的卵子，而非注射性激素，B错误；

C；囊胚进一步扩大；会导致透明带的破裂，胚胎从其中伸展出来，这一过程叫做孵化，C正确；

D；据图示；最终得到了黑色鼠3个体，实验最终目的为“开发出胰岛素抵抗模型鼠”，故为确定克隆鼠培有是否成功，须对黑色鼠3进行胰岛素抵抗的相关检测，D正确。

故选ACD。13、B:C:D【分析】【分析】

分析图解：图中A表示目的基因导入受体细胞，B表示受精卵通过早期胚胎培养、胚胎移植等技术获得转基因羊N，C表示羊N的体细胞中取核，D表示羊O的卵母细胞取核，E表示细胞核移植，F表示早期胚胎培养，再进行G胚胎分割再通过胚胎移植获得小羊ab。

【详解】

A、图中A表示目的基因导入受体细胞，B表示受精卵通过早期胚胎培养、胚胎移植等技术获得转基因羊N，C表示羊N的体细胞中取核，D表示羊O的卵母细胞取核，E表示细胞核移植，F表示早期胚胎培养，再进行G胚胎分割再通过胚胎移植获得小羊ab；故图中涉及的现代生物技术有动物体细胞核移植；胚胎移植、胚胎分割和动物细胞培养等，A正确；

B；进行G操作时应选择发育良好、形态正常的囊胚；因囊胚期细胞未分化，而原肠胚已经分化，不能进行胚胎分割，B错误；

C；通过图解分析可知；小羊只获得了羊N的细胞核，其细胞质中的基因不会遗传给小羊，C错误；

D；上述核移植技术得到克隆动物；属于无性生殖，D错误。

故选BCD。14、A:B:D【分析】【分析】

生态工程建设的目标是使人工控制的生态系统具有强大的自然再生产和社会再生产的能力。在生态效益方面要实现生态再生；使自然再生产过程中的资源更新速度大于或等于利用速度，在经济效益方面要实现经济再生，使社会经济再生产过程中的生产总收入大于或等于资产的总支出，保证系统扩大再生产的经济实力不断增强，在社会效益方面要充分满足社会的要求，使产品供应的数量和质量大于或等于社会的基本要求，通过生态工程的建设与生态工程技术的发展使得三大效益能协调增长，实现高效益持续稳定的发展。

【详解】

A、落实科学发展观，大力发展生态农业，实现物质的循环再生，能量的多级利用，建设社会主义新农村，A正确；

B、全民开展节能减排，实现能源的清洁生产，努力开发新能源，减少二氧化碳的排放，减弱温室效应，B正确；

C、建立原料一产品一原料”的生产模式，建立无废料生产体系，实现物质的循环利用，C错误；

D、要维持生物圈的稳态，达到可持续发展，在发展经济、制定政策上，首先要考虑环境效益，把保护环境放在优先地位上，D正确。

故选ABD。三、填空题(共8题，共16分)15、略

【分析】（1）在基因工程的操作中的“分子手术刀”即切割DNA的是限制核酸内切酶简称限制酶；

（2）在基因工程的操作中的“分子缝合针”是DNA连接酶；

（3）基因工程中最常用的运载体是质粒；

（4）人的基因在牛体内能表达；说明人和牛共用一套遗传密码。

【考点定位】基因工程的基本工具【解析】限制酶DNA连接酶质粒共用一套遗传密码16、略

【分析】【分析】

胚胎移植：

1；胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎；或者通过体外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其它雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术，其中提供胚胎的个体称为“供体”，接受胚胎的个体称为“受体”。(供体为优良品种，作为受体的雌性动物应为常见或存量大的品种)，如转基因、核移植，或体外受精等任何一项胚胎工程技术所生产的胚胎，都必须经过胚胎移植技术才能获得后代，是胚胎工程的最后一道“工序”。

2；胚胎移植的意义：大大缩短了供体本身的繁殖周期；充分发挥雌性优良个体的繁殖能力。

【详解】

（1）体外受精前要对精子进行获能处理；使其具有受精能力。

（2）要使动物超数排卵；利用促性腺激素；需将卵子培养到MII中期后进行体外受精。

（3）步骤甲是人工受精；将受精卵移入受体母牛，进行的操作叫做胚胎移植（乙）；胚胎移植之前应鉴定胚胎中与有关的优良基因。

（4）胚胎移植实现的前提是受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生免疫排斥反应。

【点睛】

胚胎移植的实质：早期胚胎在生理状态相同的条件下空间位置的转移。【解析】精子获能促性腺MⅡ中期人工受精胚胎移植优良性状受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生免疫排斥反应。17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】取代修补18、略

【分析】【分析】

1；神经元由细胞体和突起两部分组成；突起又分为树突和轴突，树突短而多，轴突长而少。神经元的轴突末梢经过多次分支，最后每个小枝末端膨大，呈杯状或球状，叫做突触小体。

2；目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

3；人工种子就是以植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料；经过人工薄膜包装得到的种子，在适宜条件下同样能够萌发长成幼苗。

【详解】

（1）神经元由细胞体和突起两部分组成；突起又分为树突和轴突，树突短而多，轴突长而少；轴突末端的多次分支后，每个小枝末端膨大的部分称为突触小体。

（2）抗体可以与病原体结合；从而抑制病原体的繁殖或对人体细胞的黏附。

（3）检测目的基因是否转录出mRNA可采用分子杂交技术。

（4）人工种子就是以植物组织培养得到的胚状体；不定芽、顶芽、腋芽为材料；经过人工包膜包装得到的种子，可以在适宜条件下同样能够萌发长成幼苗．植物体细胞杂交技术的优点就是克服远缘杂交不亲和的障碍，或者是打破了生殖隔离。

（5）胰岛素能促进组织细胞加速摄取；利用和储存葡萄糖；从而使血糖水平降低。

【点睛】

本题考查教材基础知识，旨在考查考生的理解、记忆能力，要求考生熟记关键语句，并能运用专业术语准确作答。【解析】突触小体对人体细胞的黏附放射性同位素）标记的目的基因胚状体、不定芽、腋芽、顶芽摄取、利用和储存19、略

【分析】【分析】

分析图1：表示多年前感染EV并已康复的甲；乙两人的血液中抗EV-GP抗体的水平。根据曲线图可知；多年前感染EV并已康复的甲的血液中抗EV-GP抗体水平明显高于乙和对照组。

分析图2：表示单抗与病毒混合后病毒对宿主细胞的感染率。根据柱形图可知；单克隆抗体和病毒混合，加入单抗Ⅲ；Ⅴ后，病毒对宿主细胞的感染率明显低于其他组别。

【详解】

（1）由题意可知；新型冠状病毒表面的S-蛋白作为抗原刺激淋巴细胞，使机体产生特异性免疫反应，人细胞膜上的ACE2的化学本质是蛋白质。

（2）免疫系统对被新冠病毒感染后肺细胞强烈攻击引发肺炎；此时可通过适度使用免疫抑制剂对病人进行治疗，使其免疫功能下降，以避免肺部严重受损。

（3）由图1可知；多年前感染EV并已康复的甲的血液中抗EV-GP抗体水平明显高于乙和对照组，故应选取甲的B细胞用以制备单克隆抗体。

（4）由图2可知；单克隆抗体和病毒混合，加入单抗Ⅲ后，病毒对宿主细胞的感染率较低。因此抑制效果最好的单抗是Ⅲ。

（5）患者康复后一段时间；若再次受到该病毒的攻击，机体内相应的记忆细胞迅速增殖分化，产生大量的浆细胞和细胞毒性T细胞。

【点睛】

本题结合图解，考查病毒、单克隆抗体的制备等，要求考生识记病毒的结构，明确病毒没有细胞结构；识记单克隆抗体的制备过程，掌握其优点及相关应用，能结合图中信息准确答题【解析】①.抗原②.特异③.糖蛋白（或蛋白质）④.免疫抑制剂⑤.甲⑥.Ⅲ⑦.记忆20、略

【分析】【分析】

1；分析题图：①表示染色体复制；②是减数分裂，③是精细胞变形为精子过程，④是受精作用；

2；哺乳动物精子和卵子发生的不同点：（1）精子的减数两次分裂是连续的；场所唯一（MⅠ和MⅡ的场所都是睾丸）；而卵子的两次分裂是不连续的，场所不唯一，（MⅠ场所在卵巢，MⅡ场所在输卵管中）；（2）精子和卵子发生的时间不同：精子的发生是从初情期一直到生殖机能衰退；多数哺乳动物卵子的形成和在卵巢内的贮备是胎儿出生前完成的；MⅠ是在雌性动物排卵前后完成的，MⅡ是在受精过程中完成的。

【详解】

（1）精子变形③过程中精子头部的顶体是由高尔基体发育来的；④过程是受精过程，在输卵管内完成。

（2）在④过程中发生顶体反应；释放顶体酶，溶解卵丘细胞之间的物质和透明带，透明带反应和卵细胞膜反应是阻止多精入卵的两道防线。

（3）雄性动物精子产生的时期是初情期；雌性动物卵泡细胞的形成是在胚胎期性别分化以后完成的，这是精子和卵子在发生上的重要区别。

（4）初级卵母细胞进行减数第一次分裂是在排卵前后时期完成的；减数第二次分裂是在受精作用过程中完成的。

【点睛】

本题考查卵细胞的形成过程和受精作用等相关知识，意在考查学生识记相关细节和解决问题的能力。【解析】高尔基体输卵管透明带反应卵细胞膜反应初情期胚胎期性别分化以后排卵前后受精作用21、略

【分析】【分析】

动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织；将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。植物组织培养又叫离体培养，指从植物体分离出符合需要的组织；器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在无菌条件下接种在含有各种营养物质及植物激素的培养基上进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。

【详解】

1；基因工程又称基因拼接技术和DNA重组技术；是以分子遗传学为理论基础，以分子生物学和微生物学的现代方法为手段，将不同来源的基因按预先设计的蓝图，在体外构建杂种DNA分子，然后导入活细胞，以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品的遗传技术。

2；胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎；或者通过体外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其它雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术。

3；动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织；将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖，其原理是细胞增殖。

4；植物组织培养又叫离体培养；指从植物体分离出符合需要的组织、器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在无菌条件下接种在含有各种营养物质及植物激素的培养基上进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性。

【点睛】

本题考查基因工程概念、胚胎移植、动植物细胞培养等相关知识，意在考察考生对知识点的理解掌握程度。【解析】①.又叫基因拼接技术或DNA重组技术②.又称受精卵移植，是指将雌性动物体内的的早期胚胎，或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状况相同的其他雌性动物体内，使之继续发育为新个体的技术③.植物细胞全能性、细胞增殖22、略

【分析】【分析】

胚胎移植：

1；胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎；或者通过体外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其它雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术，其中提供胚胎的个体称为“供体”，接受胚胎的个体称为“受体”。(供体为优良品种，作为受体的雌性动物应为常见或存量大的品种)，如转基因、核移植，或体外受精等任何一项胚胎工程技术所生产的胚胎，都必须经过胚胎移植技术才能获得后代，是胚胎工程的最后一道“工序”。

2；胚胎移植的意义：大大缩短了供体本身的繁殖周期；充分发挥雌性优良个体的繁殖能力。

【详解】

（1）体外受精前要对精子进行获能处理；使其具有受精能力。

（2）要使动物超数排卵；利用促性腺激素；需将卵子培养到MII中期后进行体外受精。

（3）步骤甲是人工受精；将受精卵移入受体母牛，进行的操作叫做胚胎移植（乙）；胚胎移植之前应鉴定胚胎中与有关的优良基因。

（4）胚胎移植实现的前提是受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生免疫排斥反应。

【点睛】

胚胎移植的实质：早期胚胎在生理状态相同的条件下空间位置的转移。【解析】精子获能促性腺MⅡ中期人工受精胚胎移植优良性状受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生免疫排斥反应。四、判断题(共5题，共30分)23、A【分析】【详解】

由于存在防止多精入卵的两道屏障，故一个卵细胞一般只能同一个精子结合，形成受精卵，这句话是正确的。24、A【分析】【详解】

受精过程为：顶体反应→穿越放射冠→穿越透明带（透明带反应）→卵细胞膜反应（卵黄膜封闭作用）→卵子完成减数第二次分裂并释放第二极体→雌雄原核的形成；核膜消失；雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂开始。精子入卵后形成雄原核，同时被激活的卵子完成减数分裂Ⅱ，排出第二极体后，形成雌原核，雄、雌原核充分发育后，相向移动，彼此靠近，核膜消失，形成受精卵，故此说法正确。

故正确。25、B【分析】【详解】

受精包括受精前的准备阶段和受精阶段；在自然状态下，哺乳动物的受精在输卵管内完成。

故错误。26、B【分析】【分析】

据图分析；图中A是桑椹胚，B是囊胚，C是原肠胚。图B中1是滋养层，2是内细胞团，3是透明带，4是囊胚腔；图C中5是外胚层，6是滋养层，7是原肠腔，8是内胚层。

【详解】

（1）从A到C的过程中细胞均需要消耗能量；故胚胎中有机物的含量均减少，（1）正确。

（2）桑椹胚之前所有细胞都具有发育成完整胚胎的潜能；属全能细胞，故A时期胚胎中的细胞都是全能细胞，囊胚期时细胞出现分化，滋养层细胞不是全能细胞，（2）错误。

（3）胚胎移植必须使用处于桑椹胚或囊胚时期的胚胎；处于A或B时期的胚胎，（3）错误。

（4）图示过程细胞通过有丝分裂增殖；有丝分裂过程中可能发生突变，遗传物质可能会发生改变，（4）正确。

故分别为√、×、×、√。27、B【分析】【详解】

生态系统的恢复力稳定性是有一定限度的，导致了生态工程的局限性，使生态工程并不能解决所有的污染、破坏问题，因此不能走“先污染、破坏，后治理”的老路，故错误。五、非选择题(共1题，共4分)28、略

【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因；启动子、终止子和标记基因等。

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同；导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法；基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

（1）基因表达载体的组成包括目的基因；标记基因、启动子、终止子；而来自cDNA文库的干扰素基因是通过逆转录得到的，无启动子和终止子等，所以应该将其插入在表达载体的启动子和终止子之间才能构成完整的基因并在受体细胞内表达。

（2）将目的基因（干扰素基因）导入动物细胞（ES细胞）常用显微注射法；检测目的基因是否插入到受体细胞染色体DNA分子上；可以采用DNA分子杂交技术；基因治疗包括体外基因治疗和体内基因治疗，如将能正常表达干扰素的细胞转入到小鼠体内为体外基因治疗。

（3）根据题意分析；干扰素基因缺失的小鼠体内由于缺少成熟的淋巴细胞，导致小鼠的免疫系统的防卫功能降低，因此小鼠容易患某种细菌导致的肺炎。

（4）根据题意分析；第二类是反义基因，其通过转录形成mRNA，然后与病变基因转录形成的mRNA进行互补配对，进而阻断病变基因形成的mRNA翻译出非正常的蛋白质。

【点睛】

解答本题的关键是识记基因工程的概念、原理、操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能结合所学的知识和题干要求准确分析答题。【解析】启动子终止子显微注射技术DNA分子杂交体外基因治疗防卫mRNA六、实验题(共4题，共20分)29、略

【分析】【分析】

据图分析；过程①表示原生质体的制备，要用纤维素酶和果胶酶去掉植物细胞的细胞壁，过程②体现了生物膜的结构特点：一定的流动性，将杂种细胞培养成完整植株的过程是植物组织培养，经过脱分化形成愈伤组织，再分化形成完整植株。

【详解】

（1）过程①表示原生质体的制备，要用纤维素酶和果胶酶去掉植物细胞的细胞壁。

（2）用于融合的两个细胞，一个是黑芥苗的叶肉细胞，一个是花椰菜的根部细胞，其中供体细胞特有的结构是叶绿体，可通过观察叶绿体的有无作为初步筛选杂种细胞的标志。

（3）原生质体没有细胞壁的保护，需要加入适宜浓度的甘露醇以保证渗透压的稳定，以避免原生质体吸水或失水破坏原生质体的完整性；原生质体通过细胞壁再生形成杂种细胞，进而形成愈伤组织。

（4）分析再生植株染色体变异类型；需要将再生植株细胞染色体和黑芥苗与花椰菜细胞中的染色体制片观察进行比较染色体的形态和数目。

（5）根据图谱，花椰菜含有碱基对为300和600的DNA片段，黑芥还有碱基对为1000、1300和1500的片段，再生植株3，只含有长度为300和600的片段，与花椰菜一致，1、2、4既含有花椰菜DNA片段，又含有黑芥DNA片段，为杂种植株。

（6）对杂种植株接种黑腐病菌；能正常生长的即为具有高抗性的杂种植株。

【点睛】

本题以抗黑腐病花椰菜的培育为信息载体，综合考查了植物细胞工程、细胞分裂装片的制作观察、PCR图谱的识别等相关内容，同时也考查了考生识图获取信息的能力，解题的关键是熟悉植物体细胞杂交和植物组织培养技术。【解析】纤维素酶和果胶酶叶绿体保持原生质体完整性细胞壁双亲（或花椰菜和黑芥）形态数目黑腐病菌1、2、430、略

【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

（1）农杆菌Ti质粒上的T-DNA序列；可以从农杆菌中转移并随机插入到被侵染植物的染色体DNA中，导致被插入的基因功能丧失。

（2）电泳法是利用样品中各种分子带电性质和数量以及样品分子大小不同；产生的迁移速度不同而实现样品中各种分子的分离，所以用HindⅢ处理野生型的总DNA后，会得到不同片段的DNA，进行电泳后，长短不同的DNA片段会分离。

①分析杂交结果可知；由于杂交结果中突变体在不同限制酶处理时，均出现杂交带，野生型无条带，Ti质粒有杂交带，表明T-DNA成功插入到水稻染色体基因组中。

②由于不同限制酶处理后含T-DNA的片段长度不同；所以不同酶切结果，杂交带的位置不同。

③由于用三种不同限制酶处理都只得到一条杂交带；而野生型无杂交带，说明突变体为T-DNA单个位点插入。

（3）连接DNA黏性末端需要用DNA连接酶。由于T-DNA的插入具有随机性；通过突变体水稻基因组与野生型水稻基因组序列比对可确定插入的部位，为实