2025年牛津上海版选择性必修三生物上册月考试卷

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A.土壤是微生物的天然培养基，微生物X与Y均可从土壤中分离纯化B.微生物X产生的能将秸秆中纤维素分解的酶至少由三种组分构成C.糖液浓度过高时葡萄糖的产生受到抑制，这与分解秸秆的酶活性无关D.接种微生物Y后，过程③需在密闭条件下进行以保证获得产物乙醇2、如图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图．以下相关叙述；正确的是（）

A.⑤只要表现出抗虫性状就表明植株发生了可遗传变异B.③侵染植物细胞后，重组Ti质粒整合到④的染色体上C.④的染色体上若含抗虫基因，则⑤就表现出抗虫性状D.②的构建需要限制性核酸内切酶和DNA聚合酶两种酶参与3、下列有关DNA连接酶的叙述不正确的是（）

①催化具有相同的黏性末端的DNA片段之间连接。

②催化具有不同的黏性末端的DNA片段之间连接。

③催化两个黏性末端互补碱基间氢键的形成。

④催化被限制酶切开的两个脱氧核苷酸之间磷酸二酯键的形成A.①④B.③④C.①②D.②③4、在DNA提取过程中，下列浓度的NaC1溶液中能使DNA析出最彻底的是（）A.0.14mol/LB.2mol/LC.0.15mol/LD.0.3mol/L5、悬浮培养的动物细胞会因细胞密度过大、有害代谢产物积累等因素而分裂受阻。生产上常用灌流式培养避免这些现象出现。灌流式培养是在细胞培养管内，一边不断注入新鲜培养基，一边将培养液的上清液不断移出。下列相关叙述错误的是（）A.灌流式培养的细胞会贴壁生长，但不会出现接触抑制现象B.灌流是在细胞密度达到一定浓度或者营养物质低于一定浓度时进行C.过高的灌流速率会导致营养物质不能得到充分利用，造成培养基浪费D.配制灌流式培养所需培养基时应考虑细胞生存的液体环境的渗透压6、很多生活实例中蕴含着生物学原理，下列相关说法不准确的是（）A.酿酒时先来“水”后来“酒”——酵母菌先进行有氧呼吸后进行无氧呼吸B.夏天开瓶后的红酒容易变酸——醋酸菌将乙醇直接转化为醋酸C.制作泡菜时加入“老汤”——“老汤”中含纯度较高的乳酸菌，可加速发酵D.含抗生素的牛奶无法用来制成酸奶——抗生素会抑制乳酸菌生长、繁殖评卷人得分二、多选题(共6题，共12分)7、2020年7月20日，国际医学权威期刊《柳叶刀》上发表了新冠病毒疫苗II期临床试验的成果。该试验是由陈薇院士等人领衔的团队开展的研究，试验中使用的疫苗是一种腺病毒载体重组新冠病毒疫苗(基因重组疫苗)。试验结果表明，单次接种疫苗28天后，99．5%的受试者产生了特异性抗体，95．3%受试者产生了中和抗体，89%的受试者产生了特异性T细胞免疫反应。这表明，陈薇团队研发的新冠疫苗可为健康人群提供“三重保护”，将新冠病毒“拒之门外”。下列叙述正确的是（）A.该疫苗的制备需要用到限制性核酸内切酶和DNA连接酶B.受试者接受重组新冠病毒疫苗的接种后，体内能产生分泌特定抗体的效应T细胞C.主要通过检测受试者体内新冠病毒抗体的含量来评价试验的有效性D.新冠肺炎康复患者可以不注射该疫苗8、下列有关生物技术引起的安全性和伦理问题的叙述，不正确的是（）A.基因编辑制造婴儿的行为是不符合伦理道德的B.设计试管婴儿是为了治疗疾病，不会出现负面影响C.我国禁止生殖性克隆人和有关人胚胎干细胞的研究D.世界各国都应该禁止在任何情况下生产、储存和发展生物武器9、勤洗手是预防病毒感染的有效措施。某公司在防控新型冠状病毒期间推出一款新型免洗洗手凝胶。为衡量该凝胶的清洗效果；研究人员检测了用凝胶洗手前后手部细菌的含量。凝胶洗手前的检测流程见下图。下列叙述错误的是（）

A.统计洗手前手部细菌的数量，选择的接种方法是平板划线法B.除图中操作外，还需要设置一组未接种的空白培养基进行培养C.培养基上的一个菌落只可能来源于样品稀释液中的一个活菌D.初步判断培养基上菌种的类型，需要用显微镜观察菌体的形状10、下列关于微生物发酵的叙述，错误的是（）A.制备培养基过程中，需要在灭菌后进行pH的调节B.制作果酒时适当加大接种量可以提高发酵速率，抑制杂菌生长C.现代发酵工程选育出性状优良的菌种后即可进行发酵罐内的发酵D.醋酸菌能将乙醇变成乙醛而后变为乙酸，故夏天开瓶后的红酒容易变酸11、刚果红是一种染料，可以与纤维素形成红色复合物，当红色复合物中的纤维素被分解后红色消失。表中是筛选纤维素分解菌的培养基，利用此培养基可从土壤中筛选纤维素分解菌，结果如图。下列说法正确的是（）。培养基的成分：纤维素15gFeSO40．5gKH2PO41gZnSO40．5gK2HPO41gCaCl20．5g尿素0．5g刚果红适量MgSO40．5g琼脂20g定容1L

A.培养基中纤维素和尿素分别提供碳源和氮源B.KH2PO4和K2HPO4在提供无机盐的同时还能维持培养基的pHC.将土壤稀释液接种在平板上的方法为稀释涂布平板法D.平板上5个菌落都有透明圈，说明5个菌落都能分解纤维素12、下列关于现代生物技术的叙述正确的是（）A.从酵母菌细胞中提取到人干扰素说明相应的目的基因完成了在受体细胞中的表达B.在植物细胞与组织培养中，花药不能作为组织培养的材料C.在动物细胞培养中，用胰蛋白酶处理肝组织可获得单个肝细胞D.多种显微操作和处理技术使体外受精、胚胎移植和胚胎分割成为可能评卷人得分三、填空题(共7题，共14分)13、DNA连接酶与DNA聚合酶作用的异同:

DNA聚合酶只能将______加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接_____的末端，形成磷酸二酯键。14、转化的概念：是______进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持______的过程。15、假设PCR反应中，只有一个DNA片段作为模板，请计算在30次循环后，反应物中大约有个这样的_______个DNA片段，一共需要加入______________个引物。16、将DNA粗提取液在____________℃的恒温水浴箱中保温10—15分钟。17、对于DNA的粗提取而言，就是利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在__________方面的差异，提取DNA，去除杂质。（人教P54）18、动物细胞培养的流程：

取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用______处理分散成______→制成______→转入培养瓶中进行______培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续_____培养。19、动物细胞培养的条件：_____、_____、_____、_____等。评卷人得分四、判断题(共4题，共40分)20、理性看待转基因技术，就是听之任之，不管不问（______）A.正确B.错误21、酿酒酵母的最适生长温度为30度。()A.正确B.错误22、目前动物细胞核移植技术中普遍使用的去核方法是显微操作法。（选择性必修3P54）()A.正确B.错误23、利用基因工程技术建立移植器官工厂是目前基因工程取得实际应用成果非常多的领域。()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共4题，共20分)24、番茄果实在成熟的过程中；多聚半乳糖醛酸酶（PG）合成显著增加，以降解果胶使细胞壁破损，从而使果实变红变软，但不利于保鲜。科学家利用基因工程得到转基因番茄，大大延长果实保质期。操作流程如下，回答下列问题：

（1）利用RT—PCR技术即逆转录—多聚酶链式反应制备PG基因，最好从番茄的_____细胞中提取mRNA，此技术所需要的酶主要有_____。

（2）据图可知，转基因番茄主要通过抑制PG基因的_____过程；使PG合成量减少，从而延长果实保质期。

（3）图中的农杆菌。能够在含_____的培养基中生存，而在含_____的培养基中不能生存的即为已转化的所需农杆菌。

（4）图中将反向连接PC基因导入番茄细胞的方法称为_____。要检测感染农杆菌后的番茄细胞染色体DNA上是否插入了反向连接PC基因，_____（填“能”或“不能”）用标记的PG基因的单链作为探针进行检测，理由是_____。

（5）在将转化的番茄细胞通过植物组织培养技术形成番茄幼苗过程中，培养基_____（填“要”或“不要”）添加有机营养物质，原因是_____。25、厨余垃圾废液中的淀粉；蛋白质、脂肪等微溶性物质可以被微生物分解并利用；但由于初期有益微生物数量相对较少，存在发酵周期长、效率低等缺点，极易对环境造成污染。

（1）为探究圆褐固氮菌和巨大芽孢杆菌处理某厨余垃圾废液的最佳接种量比；用于制备微生物菌剂，研究者做了如下实验：

①将两种菌液进行不同配比分组处理；如下表所示：

。编号R0R1R2R3圆褐固氮菌∶巨大芽孢杆菌1∶00∶11∶12∶1将等量上表菌液分别接种于100mL_____中进行震荡培养。本实验中对照组的处理应为_____。

②培养3天后测定活菌数。取各组菌液采用_____法接种于基本培养基中，培养一段时间后选取菌落数在_____范围内的平板进行计数；并依据菌落的形态特征对两种菌进行区分，实验结果见图。

由实验结果可知，两种菌混合接种时有效菌落数均大于单独接种，从代谢产物角度分析，原因可能是______________。接种量比例为_____________时；废液中两菌的有效活菌数最多。

（2）为进一步探究菌种比例对该厨余垃圾废液中蛋白质；脂肪等有机物的降解效果；测得15天内废液中蛋白质、脂肪的含量变化如下图所示：

由实验结果可知，对该厨余垃圾废液中蛋白质、脂肪的降解效果最好的两种菌接种比分别为_____、_____。

（3）固态厨余垃圾因富含粗纤维、蛋白质、淀粉等物质，可以通过蒸发、碾磨、干燥等方式进行加工，使加工后的产物在微生物的作用下形成有机复合肥等肥料；收集微生物处理后的厨余垃圾残渣，经晾晒干后制成蛋白饲料；通过以上处理可实现_____（选填选项前的符号）。

A．物质循环再生B．能量多级利用C．提高能量传递效率26、单克隆抗体技术在生物工程中有着广泛的应用；下图1是单克隆抗体制备流程图，下图2是我国科研人员为了准确筛选没有明显表型特征的某种微生物所采用的流程图，图3是某双特异性抗体作用示意图，双特异性抗体是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合。

（1）据图2分析，科研人员利用目标微生物编码膜蛋白的基因序列，构建____________________，并导入用__________处理的大肠杆菌细胞中；获取大量膜蛋白。

（2）已知细胞合成DNA有“D途径”和“S途径”两条途径，其中“D途径”能被氨基嘌呤阻断。兔子的已免疫的淋巴细胞有上述两种途径，但一般不分裂增殖；兔子的骨髓瘤细胞中只有“D途径”，但能不断分裂增殖。据此，图1所示的__________（填“HAT培养基”或“多孔板”）中添加氨基嘌呤可以达到筛选目的，其原理是______________________________。

（3）将上述带有荧光的单克隆抗体与待分离微生物群体混合，目的是______________________________。

（4）与直接使用抗肿瘤药物相比，将抗肿瘤药物与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副作用更小，原因是________________________________________，体现的是双特异性单克隆抗体在__________方面的用途。27、碰碰香叶片中的挥发油具有广泛的食用；药用等价值。为验证碰碰香挥发油对细菌的抑菌活性，进行了如下实验：

步骤一：配置LB培养基（胰蛋白胨10g；酵母浸膏5g；氯化钠10g、琼脂粉l5g、蒸馏水960mL），灭菌后倒平板，静置备用；

步骤二：制备大小相同的滤纸片；灭菌后烘干；

步骤三：将滤纸片分别浸于l0mL碰碰香挥发油提取液中处理；晾干后备用；

步骤四：用移液枪取20μL的大肠杆菌悬液加入LB培养基表面；用涂布器将其均匀涂布；

步骤五：取步骤三浸泡处理过的3个滤纸片；置于LB培养基表面，并保持相互间隔一定距离，37℃倒置培养，每天观察并记录实验结果。

请回答下列问题：

(1)可利用水蒸气蒸馏法从碰碰香叶片中提取挥发油．该方法的原理是_____________________。

(2)LB培养基中，可以为微生物提供氮源的是_________________，从物理性质分析，该培养基属于_________________培养基，对该培养基灭菌应采用_________________________法。

(3)步骤五需增设对照组，对照组的处理应把滤纸片置于_____________________中浸泡。

(4)实验结果：经碰碰香挥发油浸泡过的3个滤纸片周围都出现了抑菌圈（透明圈），其中一个抑菌圈如图所示，请分析其形成原因：________________________________。

评卷人得分六、综合题(共2题，共8分)28、［生物—选修3现代生物科技专题］

回答下列有关动物细胞培养的问题：

(1)在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面____时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的___。此时，瓶壁上形成的细胞层数是___。要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的酶是_______。

(2)随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现____现象；但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成____细胞，该种细胞的黏着性____，细胞膜表面蛋白质（糖蛋白）的量____。

(3)现用某种大分子染料，对细胞进行染色时，观察到死细胞被染色，而活细胞不染色，原因是_________。

(4)检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用细胞分裂到_____期的细胞用显微镜进行观察。

(5)在细胞培养过程中，通常在______条件下保存细胞。因为在这种条件下，细胞中______的活性降低，细胞_____的速率降低。

(6)给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，发生了排斥现象，这是因为机体把移植的皮肤组织当作_____进行攻击。29、“实时荧光定量RT—PCR”是新冠疫情防控的一把利刃；通常在1～2h内即可得到检测结果。TagpMan探针是实时荧光定量RT—PCR技术中一种常用探针（如图1），其5＇末端连接荧光基团（R），3＇末端连接淬灭剂（Q）。当探针完整时，R发出的荧光信号被Q吸收而不发荧光。在PCR扩增过程中，当Taq酶遇到探针时会使探针水解而释放出游离的R和Q，R发出的荧光信号被相应仪器检测到，荧光信号的累积与PCR产物数量完全同步（如图2）。请据图回答：

(1)结合图1和图2分析，“荧光RT-PCR”技术所用的试剂盒中通常都应该含有_________酶、__________酶、TaqMan探针、引物、dNTP、Mg2+、缓冲剂系等。在PCR反应体系中一般都需要加入Mg2+，原因是_________，这种分子层面的荧光RT-PCR检测具有特异性和灵敏性都很高的特点，主要与试剂盒中的_________、________有关。

(2)根据TaqMan探针功能分析，探针中碱基序列的设计应主要依据__________。新冠病毒（nCoV-2019）是冠状病毒大家庭中的新的一员，其碱基序列与引起SARS的冠状病毒碱基序列有79.5%的相似性，与流感病毒碱基相似度也较高，因此在设计TaqMan探针时应筛选出nCoV-2019特有序列，以避免_________（填“假阴性”或“假阳性”）的出现。

(3)根据图1和图2，Taq酶作用的除了能催化DNA子链的延伸，还能__________。

(4)若每分子探针水解释放的R基团荧光强度为定值a，则反应体系中某时刻荧光信号强度（Rn）主要与__________、__________有关。在检测过程中，随着PCR的进行，反应产物不断累积，“杂交双链”荧光信号的强度也等比例增加，为了保证检测结果的准确性，一般要达到或超过阀值时才确诊。可通过荧光强度的变化监测产生量的变化从而得到一条荧光扩增曲线图（如下图）。“平台期”出现的最可能的原因是试剂盒中________等有限；超出一定的循环数后，荧光标记的“杂交双链”不再增加。

参考答案一、选择题(共6题，共12分)1、C【分析】【分析】

据图分析：①表示筛选分离纤维素分解菌；②表示接种酵母菌，③表示无氧发酵。微生物X是纤维素分解菌，微生物Y是酵母菌。纤维素分解菌能够将纤维素分解为葡萄糖，酵母菌能够利用葡萄糖无氧发酵产生酒精。从土壤中筛选分离纤维素分解菌的一般步骤是：土壤取样；选择培养、梯度稀释、涂布培养和筛选菌株。

【详解】

A；土壤是微生物的天然培养基；含有各种营养成分，微生物X与Y可以利用选择培养分别把他们分离纯化，A正确；

B、微生物X产生的能将秸秆中纤维素分解的酶至少由三种组分构成，包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶；B正确；

C；糖液浓度过高时；葡萄糖的产生会受到抑制，原因是产物（葡萄糖）过多，反馈抑制了分解秸秆的酶的活性，C错误；

D；酵母菌无氧呼吸可以产生乙醇；所以葡萄糖的酒精发酵必须保证密闭无氧的条件，D正确。

故选C。2、A【分析】【分析】

基因工程的工具酶包括限制酶和DNA连接酶。农杆菌特点：易感染双子叶植物和裸子植物；对大部分单子叶植物没有感染力；Ti质粒的T-DNA可转移至受体细胞，并整合到受体细胞的染色体上。目的基因导入受体细胞后需要进行检测和鉴定，才能确定其是否导入或成功表达。

【详解】

A；⑤只要表现出抗虫性状就表明抗虫基因表达了；即发生了可遗传变异，A正确；

B；③侵染植物细胞后；重组Ti质粒上的T-DNA整合到植物细胞的染色体上，B错误；

C；若受体细胞的染色体上含抗虫基因；并不代表该基因就一定成功表达，因此不能确定⑤是否表现出抗虫性状，C错误；

D；重组质粒的构建需要限制性核酸内切酶和DNA连接酶参与；D错误。

故选A。3、D【分析】【分析】

DNA连接酶：

（1）根据酶的来源不同分为两类：E．coliDNA连接酶、T4DNA连接酶。这二者都能连接黏性末端，此外T4DNA连接酶还可以连接平末端；但连接平末端时的效率比较低。

（2）DNA连接酶连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。

【详解】

①DNA连接酶能催化具有相同黏性末端的DNA片段之间磷酸二酯键的形成；进而实现连接，①正确；

②DNA连接酶能催化具有相同黏性末端的DNA片段之间连接；不能催化具有不同的黏性末端的DNA片段之间连接，②错误；

③DNA连接酶能催化两个DNA片段的核苷酸之间的磷酸二酯键的形成；不能催化氢键的形成，③错误；

④DNA连接酶能催化的是两个DNA片段的核苷酸之间的磷酸二酯键的形成；④正确。即D与题意相符。

故选D。

【点睛】4、A【分析】【分析】

DNA粗提取和鉴定的原理：

（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液；但细胞中的某些蛋白质溶于酒精；DNA对酶；高温和洗涤剂的耐受性。

（2）DNA的鉴定：在沸水浴的条件下；DNA遇二苯胺会被染成蓝色。

【详解】

DNA在0.14mol/LNaCl溶液中的溶解度最低；因此用0.14mol/L氯化钠溶液可以初步析出DNA。A正确。

故选A。5、A【分析】【分析】

动物细胞培养：（1）概念：动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织；将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和繁殖。（2）原理：细胞增殖。（3）动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。

【详解】

A；悬浮培养的动物细胞不出现贴壁生长现象；A错误；

B；悬浮培养的动物细胞会因细胞密度过大、有害代谢产物积累等因素而分裂受阻；而灌流是在细胞密度达到一定浓度或者营养物质低于一定浓度时进行，B正确；

C；过高的灌流速率；培养的细胞没有及时利用营养物质，会导致营养物质不能得到充分利用，造成培养基浪费，C正确；

D；动物细胞的细胞外液的渗透压是相对稳定且适宜的；配制灌流式培养所需培养基时应考虑细胞生存的液体环境的渗透压，D正确。

故选A。6、B【分析】【分析】

醋酸菌是好氧细菌，当O2；糖源都充足时能通过复杂的化学反应将糖分解成乙酸；当缺少糖源时则直接将乙醇转化为乙醛；再将乙醛变为乙酸。醋酸菌可用于制作各种风味的醋。多数醋酸菌的最适生长温度为30〜35℃。

【详解】

A；酿酒利用的微生物是酵母菌；酵母菌是兼性厌氧型生物，先利用氧气进行有氧呼吸产生水和二氧化碳，氧气耗尽进行无氧呼吸产生酒精和二氧化碳，A正确；

B；夏天开瓶后的红酒容易变酸是因为醋酸菌将乙醇转化成乙醛再转化为醋酸；B错误；

C；泡菜的老汤中含有较多乳酸菌；乳酸菌可快速发酵生成乳酸而形成泡菜，C正确；

D；抗生素一般是真菌产生的；可抑制细菌的生长，含抗生素的牛奶不能用来制作酸奶，抗生素抑制乳酸菌的生长、繁殖，D正确。

故选B。二、多选题(共6题，共12分)7、A:C:D【分析】【分析】

疫苗研制已经发展了三代：

第一代疫苗指的是灭活疫苗和减毒活疫苗；通过体外培养病毒，然后用灭活的病毒刺激人体产生抗体，它是使用最为广泛的传统疫苗；

第二代疫苗又称为亚单位疫苗；是通过基因工程原理获得的具有免疫活性的病原特异性结构蛋白，刺激人体产生抗体；

第三代疫苗是核酸疫苗；又称基因疫苗，包括DNA疫苗和mRNA疫苗，其中DNA疫苗是将编码某一抗原蛋白的基因作为疫苗，注射到人体中，通过正常的人体生理活动产生抗原蛋白，诱导机体持续作出免疫应答产生抗体。

【详解】

A；该疫苗是基因重组疫苗；需要将腺病毒载体和新冠病毒的基因进行连接，所以该疫苗的制备需要用到限制性核酸内切酶和DNA连接酶，A正确；

B；受试者接受重组新冠病毒疫苗的接种后；体内能产生分泌特定抗体的浆细胞，B错误；

C；主要通过检测受试者体内新冠病毒抗体的含量来评价试验的有效性；C正确；

D；新冠肺炎康复患者体内产生了新冠病毒抗体和和相应的记忆细胞；可以不注射该疫苗，D正确。

故选ACD。8、B:C【分析】【分析】

人们现在的伦理道德观念还不能接受克隆人﹔设计试管婴儿是为了治疗疾病；但有可能被滥用，如用于设计婴儿性别等，可能会出现负面影响﹔进行基因检测时，可通过基因进行检测，也可通过测定基因的表达产物蛋白质来进行;对于基因歧视现象，可通过正确的科学知识传播；伦理道德教育和立法得以解决。

【详解】

A；基因编辑制造婴儿的行为不符合伦理道德；A正确；

B；设计试管婴儿如专门用来设计婴儿性别是不符合伦理道德的；可能会存在负面影响，B错误；

C；我国禁止生殖性克隆人；但允许人胚胎干细胞的研究在有关规定下进行，C错误；

D；生物武器危害巨大；世界各国都应禁止生物武器，D正确。

故选BC。9、A:C:D【分析】微生物常见的接种方法（稀释涂布平板法可用于微生物的计数）：

①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后；均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

【详解】

A；平板划线无法得知稀释倍数；不能用于活菌计数，故统计洗手前手部细菌的数量，选择的接种方法是稀释涂布平板法，A错误；

B；除图中操作外；还需要设置一组未接种的空白培养基进行培养，以验证培养基是否被杂菌污染，B正确；

C；由于当两个或多个细胞连在一起时；平板上显示的只是一个菌落，故培养基上的一个菌落可能来源于样品稀释液中的一个、甚至几个活菌，C错误；

D；由于菌落肉眼可见；故初步判断培养基上菌种的类型，可用肉眼观察菌体的形态特征，D错误。

故选ACD。10、A:C【分析】【分析】

果酒的制作利用酵母菌的无氧呼吸产生酒精；醋酸菌在糖源；氧气充足时；直接将葡萄糖氧化为醋酸；在糖源不足、氧气充足时，可利用酒精，即乙醇作为呼吸底物，先将乙醇变成乙醛而后变为乙酸（醋酸）。

【详解】

A；制备培养基过程中；pH的调节应在灭菌前进行，A错误；

B；制作果酒时适当加大接种量；酵母菌菌体的基数增大，可使其快速形成优势菌群，抑制杂菌生长，提高发酵速率，B正确；

C；现代发酵工程选育出性状优良的菌种后；为满足发酵过程的需要，还要对菌种进行扩大培养，之后才可进行发酵罐内的发酵，C错误；

D；醋酸菌能够氧化酒精产生醋酸；造成葡萄酒的败坏。首先，乙醇被氧化生成乙醛，然后乙醛再被氧化生成醋酸（乙酸），故夏天开瓶后的红酒容易变酸，D正确。

故选AC。11、A:B:C【分析】【分析】

本题知识点为刚果红染色法筛选纤维素分解菌的原理、培养基中各物质的作用。刚果红是一种染料，它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。当我们在含有纤维素的培养基中加入刚果红时，刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物。当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红-纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。纤维素为纤维素分解菌提供碳源，尿素为纤维素分解菌提供氮源，KH2PO4和K2HPO4具有缓冲作用；在提供无机盐的同时还能维持培养基的pH。获取单个菌落的方法可通过稀释涂布平板或平板划线等技术完成。

【详解】

A；在此培养基中；纤维素为纤维素分解菌提供碳源，尿素为纤维素分解菌提供氮源，A正确；

B、KH2PO4和K2HPO4具有缓冲作用；在提供无机盐的同时还能维持培养基的pH，B正确；

C；从平板上纤维素分解菌的菌落分布可以看出（菌落较均匀）；接种方法为稀释涂布平板法，C正确；

D；菌落周围有透明圈不一定是细胞分解了纤维素；还有可能是分解了刚果红染料，D错误；

故选ABC。12、A:C:D【分析】【分析】

1；动物细胞培养过程：取动物组织块--剪碎组织--用胰蛋白酶处理分散成单个细胞--制成细胞悬液--转入培养液中（原代培养）--放入二氧化碳培养箱培养--贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞；制成细胞悬液--转入培养液（传代培养）--放入二氧化碳培养箱培养。

2；胚胎工程是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术；如体外受精、胚胎分割、胚胎移植、胚胎干细胞培养等技术。

【详解】

A；干扰素是人体的蛋白质；故从酵母菌细胞中提取到人的干扰素，说明目的基因已经完成了在受体细胞中的表达，A正确；

B；在植物细胞和组织培养中；花药可以进行离体培养成单倍体植株，B错误；

C；使用酶解法可以获得单个细胞；故在动物细胞培养中，用胰蛋白酶处理肝组织可获得单个肝细胞，C正确；

D；对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术；使体外受精、胚胎移植和胚胎分割成为可能，D正确。

故选ACD。

【点睛】三、填空题(共7题，共14分)13、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】单个核苷酸两个DNA片段14、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】目的基因稳定和表达15、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】2030×22030×2－216、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】60—7517、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】物理和化学性18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】胰蛋白酶单个细胞细胞悬液原代传代19、略

【分析】略【解析】营养无菌、无毒的环境适宜的温度、pH和渗透压气体环境四、判断题(共4题，共40分)20、B【分析】【详解】

理性看待转基因技术，正确的做法是趋利避害，而不能因噎废食，所以本题错误。21、B【分析】【详解】

酿酒酵母的最适生长温度是28℃；但在发酵过程中，一般将温度控制在18-30℃，这是因为果皮表面附着的野生酵母菌可能有多种（有多种酵母菌参与了发酵过程），从实践的角度看，大致控制温度范围比较简单易行。

故本说法错误。22、A【分析】【详解】

目前动物细胞核移植技术中普遍使用的去核方法是显微操作法。也有人采用梯度离心、紫外线短时间照射和化学物质处理等方法。这些方法是在没有穿透卵母细胞透明带的情况下去核或使其中的DNA变性，故正确。23、B【分析】【详解】

基因工程技术可以使建立移植器官工厂的设想成为现实；说明并未开始实际应用。

故错误。五、实验题(共4题，共20分)24、略

【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因；启动子、终止子和标记基因等。

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同；导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法；基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因−−DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA−−分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

（1）利用RT—PCR技术即逆转录—多聚酶链式反应制备PG基因；由于多聚半乳糖醛酸酶（PG）可降解果胶使细胞壁破损，从而使果实变红变软，说明PG基因在果肉中表达量较高，所以最好从番茄的果肉细胞中提取mRNA，此技术所需要的酶主要有逆转录酶和Taq酶（或热稳定DNA聚合酶）；

（2）据图可知；转基因番茄PG基因与反向连接PG基因的转录产物mRNA1和mRNA2相结合形成双链，从而抑制PG基因的翻译过程，使PG合成量减少，从而延长果实保质期；

（3）分析表达载体的构建过程图可知；目的基因插入到图中农杆菌的四环素抗性基因上，导致农杆菌失去了四环素的抗性，所以图中农杆菌能够在含卡那霉素的培养基中生存，而在含四环素的培养基中不能生存的即为已转化的所需农杆菌；

（4）图中是利用农杆菌将反向连接PC基因导入番茄细胞的；此方法称为农杆菌转化法。不能用标记的PG基因的单链作为探针进行检测番茄细胞染色体DNA上是否插入了反向连接PC基因，理由是番茄细胞内原有的天然PG基因和插入的反向连接PG基因，均会与该探针形成杂交带；

（5）将转化的番茄细胞通过植物组织培养技术形成番茄幼苗过程中；需要在培养基中添加有机营养物质，原因是该培养过程中植物细胞不能进行光合作用（或光合作用很弱）。

【点睛】

本题结合图解，考查基因工程和植物组织培养的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤；识记植物组织培养的过程及应用，能结合图中信息准确答题。【解析】果肉逆转录酶和Taq酶（或热稳定DNA聚合酶）翻译卡那霉素四环素农杆菌转化法不能番茄细胞内原有的天然PG基因和插入的反向连接PG基因，均会与该探针形成杂交带要该培养过程中植物细胞不能进行光合作用（或光合作用很弱）25、略

【分析】【分析】

常用的接种方法：平板划线法和稀释涂布平板法。在统计菌落数目时；为了保证结果准确，一般选择菌落数在30-300的平板进行计数。

【详解】

（1）①要探究圆褐固氨菌和巨大芽孢杆菌处理某餐厨垃圾废液的最佳接种量比；故需要将不同配比的菌液接种在100mL某餐厨垃圾废液中，为了保证氧气供应及目的菌与培养液充分接触，需要进行振荡培养。另外为了减小误差，还需要设置对照组，接种等量无菌水，在相同的条件下培养。

②测定活菌数；需要利用稀释涂布平板法，接种时故需要取一定量菌液进行梯度稀释，然后分别取0.1mL的菌液采用涂布法接种于基本培养基中培养。可以根据菌落的形态区分两种菌，为了保证结果准确，一般选择菌落数在30-300的平板进行计数，根据实验数据可知，两种菌混合接种时有效菌落数均大于单独接种，从代谢产物角度分析，原因可能是两种菌可以相互利用对方的代谢产物作为营养物质。当两菌种接种量比例为1：1时，废液中两种菌种的有效活菌数能够实现同步最大化。

（2）由实验数据可知，R3接种组随着时间的延长，蛋白质的含量下降最明显；R1接种组随着处理时间的延长；脂肪的含量下降最明显，即脂肪的降解效果最好。

（3）固态厨余垃圾因富含粗纤维；蛋白质、淀粉等物质；可加工形成有机复合肥、蛋白饲料等，利用了物质循环再生、能量多级利用的生态工程的原理，AB正确。故选AB。

【点睛】

本题结合图形和表格，主要考查微生物的分离和培养的相关知识，要求考生掌握稀释涂布平板法的操作流程，识记微生物计数的方法，能结合所学知识和图形信息准确答题。【解析】某厨余垃圾废液加入等量无菌水稀释涂布平板法30~300两种菌可以相互利用对方的代谢产物作为营养物质（一种菌的代谢产物是另一种菌的营养物质）1:1R3（或2:1）R1（或0:1）AB26、略

【分析】【分析】

单克隆抗体制备过程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应；之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。

（1）

据图分析，科研人员利用基因工程将目标微生物编码膜蛋白的基因序列，构建基因表达载体，并导入用CaCl2处理的大肠杆菌细胞中；使目的基因增殖并表达可获取大量膜蛋白。

（2）

杂交瘤细胞由淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合而成；其合成DNA有“D途径”和“S途径”两条途径。“HAT培养基”有筛选作用，在添加了氨基喋吟的HAT培养基中，杂交瘤细胞“D途径”虽然被氨基嘌呤阻断，但可通过“S途径”合成DNA，不断分裂增殖；而淋巴细胞和淋巴细胞自身融合细胞因缺乏在体外培养液中增殖的能力，而不能在HAT培养基中生长；骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞自身融合细胞在HAT培养基中因DNA合成途径被氨基嘌呤阻断而不能进行DNA复制，也不生长。

（3）

带有荧光的单克隆抗体与待分离微生物群体混合；可起到标记目标微生物的作用。

（4）

双特异性单克隆抗体借助单克隆抗体的导向作用；能将药物定向带到癌细胞所在的位置，在原位杀死癌细胞，这样既不损伤正常细胞，又减少了用药剂量。体现的是双特异性单克隆抗体在治疗疾病方面起到运载药物的用途。

【点睛】

本题考查单克隆抗体的制备过程和动物细胞的培养，意在考查学生对所学知识的理解与掌握程度，培养了学生分析图示、获取信息、解决问题的综合应用的能力。【解析】（1）基因的表达载体Ca2+或CaCl2

（2）HAT培养基淋巴细胞和淋巴细胞自身融合细胞因缺乏在体外培养液中增殖的能力；故不能在HAT培养基中生长；骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞自身融合细胞在HAT培养基中因DNA合成途径被氨基嘌呤阻断而不能进行DNA复制，而不生长。

（3）标记目标微生物。

（4）双特异性单克隆抗体能将抗癌药物定向带到肿瘤细胞所在位置，在原位杀死癌细胞治疗疾病（运载药物）27、略

【分析】【分析】

根据物理性质可将培养基分成固体培养基；半固体培养基和液体培养基。

(1)

水蒸气蒸馏法的原理是利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来；形成油水混合物，冷却后又会重新分出油层和水层。

(2)

胰蛋白胨和酵母浸膏都可以为微生物提供氮源；培养基中加入了琼脂；因此是固体培养基；对培养基的灭菌应采取高压蒸汽灭菌法。

(3)

为了避免微生物的干扰；根据单一变量原则，对照组应该设置为把滤纸片置于等量无菌水中浸泡。

(4)

该实验为验证类实验；实验结果是已知的，实验组的3个滤纸片上含有抑菌作用的挥发油，其纸片外围大肠杆菌不能繁殖，因而出现抑菌圈（透明圈），而对照组的不会出现。

【点睛】

本题考察获取目的菌种的相关知识，需要考生熟练掌握培养基的制备、培养基的类型以及实验的原理等内容。【解析】(1)利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来；形成油水混合物，冷却后又会重新分出油层和水层。

(2)胰蛋白胨和酵母浸膏固体高压蒸汽灭菌。

(3)等量无菌水。

(4)实验组的3个滤纸片上含有抑菌作用的挥发油，其纸片外围大肠杆菌不能繁殖，因而出现抑菌圈（透明圈）六、综合题(共2题，共8分)28、略

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