2025年苏科新版选择性必修3生物下册阶段测试试卷

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下列关于传统发酵技术的说法，错误的是（）A.果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌属于兼性厌氧微生物，在有氧条件下大量繁殖B.制作果醋需要醋酸菌，它是一种严格厌氧的微生物，可将葡萄中的糖分解为醋酸C.多种微生物参与了腐乳的制作，如酵母菌、毛霉、曲霉等D.制作泡菜利用的乳酸菌是一种厌氧微生物，可以通过无氧呼吸产生乳酸5、下列关于纤维素分解菌分离及运用的叙述，不合理的是（）A.选择培养基中含有大量的纤维素为纤维素分解菌提供生长营养B.可从富含腐殖质的林下土壤中筛选产纤维素酶菌C.刚果红可以与纤维素形成红色复合物，只要产生透明圈就能确定筛选到纤维素分解菌D.用产纤维素酶菌发酵处理农作物秸秆可提高其饲用价值6、古诗云：“葡萄美酒夜光杯，欲饮琵琶马上催”。下列与该诗句相关的生物学现象中，正确的是（）A.葡萄酒的酿制利用了毛霉菌的无氧呼吸过程B.葡萄中的糖类物质为微生物发酵提供了碳源和氮源C.家庭酿制葡萄酒时可不用专门添加微生物菌种D.葡萄酒酿制过程中需定期检测亚硝酸盐含量是否超标7、2021年12月9日，在“天宫课堂”第一课里，我国航天员进行太空授课，演示了细胞学实验图并进行天地课堂实时交流。在中国空间站进行的细胞学实验，可以探究在空间微重力环境下细胞生长发育的有关问题。关于该实验的以下说法，不合理的是（）A.用皮肤干细胞作实验材料B.需要地面的同步实验作对照C.天地实验不能控制无关变量D.因变量是细胞生长发育的情况8、我国已经成功建立了小鼠单倍体胚胎干细胞系。相比于传统的胚胎干细胞，单倍体胚胎干细胞系能够从基因型直接显示表型。下图是单倍体胚胎干细胞系获得过程示意图，下列相关叙述错误的是（）

A.单倍体胚胎干细胞系是探索隐性遗传基因功能的工具细胞B.细胞中出现两个极体可以作为某些哺乳动物受精的标志C.过程②中获得的“早期胚胎”中的内细胞团细胞具有全能性D.图中胚胎干细胞在有丝分裂时会出现同源染色体复制过程评卷人得分二、多选题(共7题，共14分)9、下列关于单克隆抗体的叙述中，正确的是（）A.制备单克隆抗体是动物细胞融合技术最重要的应用B.单克隆抗体特异性强、纯度高、产量大、灵敏度高C.工业化制备单克隆抗体一般通过体内培养获得D.单克隆抗体是由骨髓瘤细胞和效应T细胞形成的杂交瘤细胞产生的10、利用PCR技术扩增目的基因；其原理与细胞内DNA复制类似（如图所示）。图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。下列叙述正确的是（）

A.用PCR方法扩增目的基因时不必知道基因的全部序列B.设计引物时需要避免引物之间形成碱基互补配对而造成引物自连C.退火温度过高可能导致PCR得不到任何扩增产物D.每一循环都消耗引物和原料，需要在操作中及时补充11、猪瘟病毒（CSFV）蛋白质外壳上的E2蛋白；对于病毒入侵细胞至关重要。研究人员利用E2蛋白来制备抗CSFV单克隆抗体的过程如图。下列叙述错误的是（）

A.注射E2蛋白后，从小鼠脾脏中获得的B淋巴细胞均能产生E2蛋白抗体B.过程②可使用PEG融合法或灭活病毒诱导法，得到的③不一定是杂交瘤细胞C.细胞③经一次筛选即可得到足量多的能产生E2蛋白抗体的杂交瘤细胞D.此过程生产的单克隆抗体既可用于CSFV的检测，也可用于该种猪瘟的治疗12、我国的酿酒技术历史悠久，古人在实际生产中积累了很多经验。《齐民要术》记载：“酒冷沸止，米有不消者，便是曲势尽。”意思是瓮中酒液凉了不再起泡，米有未消耗完的，就是酒曲的力量用尽了。下列叙述正确的是（）A.用酒曲酿酒过程中，为加快微生物代谢需不断通入O2B.酒液温度的变化与酒曲中微生物呼吸作用释放热量有关C.起泡是由微生物进行呼吸作用产生的CO2释放形成的D.“曲势尽”可能是瓮中液体pH降低、酒精浓度过高导致13、下列关于果酒和果醋的制作原理、发酵过程的叙述中不正确的是（）A.果酒和果醋的发酵菌种不同，但代谢类型相同B.制作果酒和果醋时都应用70％的酒精对发酵瓶消毒C.变酸果酒的表面观察到的菌膜可能是醋酸菌的菌落D.果酒和果醋的制作可用同一装置，但需控制不同发酵条件14、被誉为“魔法子弹”的抗体—药物偶联物（ADC）主要由三部分构成：“杀伤弹药”——小分子细胞毒性药物（有效载荷）、“制导系统”——靶向肿瘤细胞表面特异性抗原的单克隆抗体以及将两者连接起来的连接子。这种结构的优势在于具备高效的靶向性和杀伤肿瘤细胞的能力。下列说法错误的是（）A.ADC中的单克隆抗体可特异性消除肿瘤细胞B.ADC的用药量比常规药物使用量少C.ADC中的单克隆抗体的制备需用到细胞融合技术D.ADC可被定向运输到肿瘤细胞15、利用枯草芽孢杆菌的发酵可以生产亮氨酸脱氢酶。在启动子和亮氨酸脱氢酶基因之间插入信号肽（SPN）基因并将重组质粒导人枯草芽孢杆菌构建工程菌，可提高亮氨酸脱氢酶的生产水平。重组质粒的构建如图所示，KmR为卡那霉素抗性基因，ApR为氨苄青霉素抗性基因，图中各限制酶切割产生的黏性末端不同。下列叙述正确的是（）

A.重组质粒pMA5-SPN-leudh除图中标注外还应具有终止子、复制原点等结构B.构建重组质粒用NdeI和BamHI两种酶有助于正确插入目的基因C.图中KmR和ApR存在于质粒中的作用是便于重组DNA分子的筛选D.图中各限制酶切开的是氢键和磷酸二酯键，切下的DNA片段拼接需依靠DNA连接酶评卷人得分三、填空题(共6题，共12分)16、本课题对分解纤维素的微生物进行了初步的筛选。但是，这只是分离纯化的第一步。为确定得到的是纤维素分解菌，还需要进行发酵产纤维素酶的实验，纤维素酶的发酵方法有___________和___________发酵两种。纤维素酶的测定方法，一般是采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的__________进行________的测定。17、本课题对能分解尿素的细菌进行了初步的筛选。但是，这只是分离纯化菌种的第一步。对分离的菌种作进一步的鉴定，还需要借助生物化学的方法。在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的___________将尿素分解成了_____________。氨会使培养基的________________，pH______________。因此，我们可以通过检测培养基______________来判断该化学反应是否发生。在以尿素为唯一氮源的培养基中加入_____________，培养某种细菌后，如果pH升高，指示剂将变________________。18、统计的菌落数往往比活菌的实际数目_____________。这是因为______________________。因此，统计结果一般用而不是用活菌数来表示。除了上述的活菌计数法外，______________也是测定微生物数量的常用方法。19、动物细胞融合与植物原生质体融合的原理基本相同，诱导动物细胞融合的方法与植物原生质体融合的方法类似，常用的诱导因素有______等。20、近年来，克隆技术的发展取得了巨大突破｡在日常生活中，我们遇到过与克隆技术有关的问题吗？_____。21、基因工程是蛋白质工程的关键技术；蛋白质工程是基因工程的延伸。有人对基因工程和蛋白质工程的关系进行了比较，并归纳为下表。

基因工程与蛋白质工程的比较。比较项目蛋白质工程蛋白质工程原理中心法则中心法则区别过程获取目的基因→构建表达载体→导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定预期蛋白质功能→设计蛋白质结构→推测氨基酸序列→合成DNA→表达出蛋白质实质定向改造生物的遗传特性，以获得人类所需要的生物类型或生物产品（基因的异体表达）定向改造蛋白质的分子结构以生产人类所需要的蛋白质定向改造蛋白质的分子结构以生产人类所需要的蛋白质结果生产自然界中已有的蛋白质生产自然界中已有的蛋白质生产自然界中已有的蛋白质联系蛋白质工程是第二代基因工程

上表的比较是否正确？如果有不妥之处，尝试进行修改。_________评卷人得分四、实验题(共2题，共12分)22、豆豉是中国传统特色发酵豆制品调味料。豆豉以黑豆或黄豆为主要原料；利用毛霉；曲霉等微生物产生的蛋白酶的作用，经复杂工序制作而成。程序如下：黑豆→筛选→洗涤→浸泡→沥干→蒸煮→冷却→接种→制曲→洗豉→浸→拌盐→发酵→晾干→成品（干豆豉）。请回答下列问题：

（1）蒸煮目的是_________，冷却后再接种的原因是_____________。

（2）观察发现发酵容器中上层豆类的发酵效果比底层的好，说明该菌是________。

（3）制作过程中要加入适量的盐，盐能______________；避免变质。

（4）从黑豆到豆豉。它的成分会发生一定的变化。其中最显著的变化是________。

（5）豆豉制作过程中用到的菌种与课本上_________________________制作的菌种最接近，从细胞结构看，它们属于___________生物。23、酵母菌是制作马奶酒的重要发酵菌种；实验人员将马奶酒中分离到的酵母菌和野生型酵母菌分别加入马奶中进行马奶酒的发酵，相关物质变化如图所示。回答下列问题：

(1)酵母菌是制作马奶酒的要发酵菌种，从同化作用的类型看，酵母菌属于_____（填“自养型”或“异养型”）生物；从细胞呼吸类型看，酵母菌属于_____型生物。

(2)将马奶酒加入发酵装置时，一般要预留约1/3的空间，其目的是_____（答出1点）。发酵过程中，一般将温度控制在_____℃进行发酵。

(3)马奶中的糖类主要是乳糖，马奶中的某些微生物能将乳糖分解为葡萄糖和半乳糖，进而被酵母菌利用产生酒精，制成马奶酒。据图分析，野生型酵母菌优先利用_____进行酒精发酵，与野生型酵母菌相比，马奶酒酵母菌优先利用_____进行酒精发酵，且大量产生酒精阶段，马奶酒酵母菌产生酒精的速率_____（填“更快”或“更慢”）。评卷人得分五、综合题(共4题，共28分)24、人参是一种名贵药材,具有良好的滋补作用。口服α-干扰素在慢性乙肝、丙肝及部分肿瘤的治疗中有一定疗效。下图为科研人员制备能合成干扰素的人参愈伤组织细胞的流程,①~④表示相关的操作,EcoRⅠ、BamHⅠ为限制酶,它们的识别序列及切割位点如表所示。请回答下列问题:

(1)步骤①中,利用PCR技术扩增干扰素基因时,设计引物序列的主要依据是____________。科研人员还在两种引物的一端分别加上了________和________序列,以便于后续的剪切和连接。

(2)过程②所构建的基因表达载体中未标注出的必需元件还有_______,过程③中需先用____处理根瘤农杆菌以便将基因表达载体导入细胞。

(3)过程④中,科研人员提取愈伤组织细胞的RNA后,先通过____过程获得DNA,再进行PCR扩增,若最终未能检测出干扰素基因,其可能原因是________________________。

(4)科研人员认为,将转干扰素基因的人参愈伤组织加工成的药物比单纯干扰素的疗效要好,其依据是__。25、生物柴油是一种可再生清洁能源；其应用在一定程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗。科学家发现，在微生物M产生的脂肪酶的作用下，植物油与甲醇反应能够合成生物柴油（如下图）。

（1）欲分离筛选出能分泌脂肪酶的细菌，应配制以____________为唯一碳源的培养基，这种培养基从功能上看属于________培养基。

（2）在微生物培养过程中，灭菌与消毒的主要区别是灭菌能够杀死物体内外________________。常用________法对玻璃器皿进行灭菌。

（3）若测得稀释倍数为106的培养基中的平板上，菌落数的平均值为254，则每毫升样品中的菌株数是（涂布平板时所用稀释液的体积为0．1mL）_________________________________________。

用该方法统计的醋酸菌数目会比活菌的实际值________（填“小”或“大”），原因是____________________________________________________________________。

（4）在生物柴油生产中所用的脂肪酶，可以通过________工程技术进行工厂化生产。26、儿童癫痫是由大脑神经元异常放电所致的神经系统疾病；遗传因素是其重要病因。研究者对某儿童癫痫患者家系进行调查，结果如图1。对患者和健康志愿者进行基因组测序，推测S基因为致病基因。

(1)据图1可知该病遗传方式为________________，判断依据是_______________________。

(2)近年来发现孕妇血浆中存在游离的胎儿DNA，因此可采集母亲血液进行基因检测，此方法__________（“能”或“不能”）用于Ⅱ-2，原因是_______________________________。

(3)核基因转录的前体RNA中，内含子对应序列被识别并剪切，外显子对应序列拼接为成熟mRNA。据此推测患者发病可能是S基因外显子突变导致，也可能是S基因前体RNA剪切加工异常导致。为探究该推测，研究者分别设计如图2中的引物对__________及________分别扩增外显子1及外显子1-内含子1交界处，并对其他外显子及外显子-内含子交界处扩增、测序，发现除外显子4外患者及父母的测序结果相同。说明患者发病原因是__________________________________________。对外显子-内含子交界处进行测序的原因是该部位___________________________________________。

27、亨廷顿舞蹈病是由单基因（HTT）突变导致的神经退行性疾病；中科院利用基因编辑（CRISPR/Cas9）技术首次成功培育出亨廷顿舞蹈病的基因“敲入”猪模型，为制备其它神经退行性疾病大动物模型提供了技术范本和理论依据。具体操作过程如下图：

（1）基因编辑技术所使用的CRISPR/Cas9系统需要对特定的DNA序列识别并切割，其功能类似于基因工程工具中的_____。

（2）过程②所利用的生物技术是_____。过程①~⑥体现的生物学原理是_____。

（3）根据图1中信息，结合已有知识，基因编辑技术与转基因技术所利用的遗传学原理是_____。

（4）图1中成纤维细胞中的目的基因是_____。

（5）假如上图中目的基因用J表示，其所在的DNA片段如下图2所示，图3示所用质粒的部分碱基序列。（现有4种限制酶：MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ；EcoRⅠ；能识别的碱基序列和酶切位点分别为：C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、G↓AATTC）

构建重组质粒的过程中，切割质粒使用的限制酶是_____，处理目的基因不能使用的酶是_____。参考答案一、选择题(共8题，共16分)1、B【分析】【分析】

1；转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。

2；中国政府：禁止生殖性克隆人；坚持四不原则（不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验），不反对治疗性克隆人。

【详解】

A；试管动物的培育需经过体外受精过程；属有性生殖过程，A错误；

B；我国政府的态度是禁止生殖性克隆人；也不接受任何生殖性克隆人的实验，但不反对治疗性克隆，B正确；

C；用转基因食品不会导致外源基因转入人体细胞；C错误；

D；接种流感疫苗可以预防病毒性流感的发生；对变异的的流感病毒不一定完全无效，D错误；

故选B。2、D【分析】【分析】

植物组织培养的过程为：离体的植物组织；器官或细胞经过脱分化形成愈伤组织；愈伤组织经过再分化过程形成胚状体，进一步发育形成植株，该过程受基因选择性表达的调控。决定植物脱分化和再分化的关键因素是植物激素的种类和比例，特别是生长素和细胞分裂素的比例影响了细胞分化的方向。

【详解】

A；这条技术路线是植物组织培养技术；利用的原理是植物细胞的全能性，A正确；

B；在植物组织培养中；当生长素用量比细胞分裂素用量比例高时，有利于根的分化，B正确；

C；愈伤组织再分化形成胚状体时；一般先形成芽，再形成根，而分化的实质是基因的选择性表达，C正确；

D；愈伤组织细胞含有细胞壁；加入细胞融合诱导剂不会诱导细胞融合，因此不会得到染色体加倍的细胞，D错误。

故选D。3、C【分析】【分析】

泡菜发酵的实验原理：

（1）乳酸菌在无氧条件下；将糖分解为乳酸。

（2）利用乳酸菌制作泡菜的过程中会引起亚硝酸盐的含量的变化。

温度过高；食盐用量不足10%；腌制时间过短，容易造成细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加。一般在腌制10天后，亚硝酸盐的含量开始下降。

（3）测定亚硝酸盐含量的原理：在盐酸酸化条件下；亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料，与已知浓度的标准显色液目测比较，估算泡菜中亚硝酸盐含量。

【详解】

A；煮沸泡菜盐水的目的是除去水中的氧气和杀灭盐水中的其他杂菌；而新鲜蔬菜不要煮沸，A错误；

B；由于乳酸菌的严格厌氧的；因此发酵过程始终要保持密封状态，泡菜坛盖边缘的水槽中要始终装满水，B错误；

C；亚硝酸盐一般不会危害人体健康；但可在特定条件下转变成亚硝胺，亚硝胺具有致癌作用，C正确；

D；整个发酵过程中；亚硝酸盐的含量表现为先增加后下降的趋势，D错误。

故选C。4、B【分析】【分析】

1；在利用酵母菌发酵时最好是先通入足够的无菌空气在有氧环境下一段时间使其繁殖；再隔绝氧气进行发酵；酒精发酵的最佳温度是在18℃～25℃，pH最好是弱酸性。

2；醋酸菌好氧型细菌；当缺少糖源时和有氧条件下，可将乙醇（酒精）氧化成醋酸；当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；醋酸菌生长的最佳温度是在30℃～35℃。

3；泡菜的制作原理：起作用的乳酸菌；其代谢类型为异养厌氧型。

4；参与腐乳制作的微生物主要是毛霉；其新陈代谢类型是异养需氧型。腐乳制作的原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。

【详解】

A；果酒的制作离不开酵母菌；酵母菌属于兼性厌氧生物，在有氧条件下进行有氧呼吸产生大量能量，能够大量繁殖，A正确；

B；制作果醋需要醋酸菌；它是一种好氧微生物，可将葡萄中的糖分解为醋酸，B错误；

C；多种微生物参与了腐乳的制作；如酵母菌、毛霉、曲霉等，C正确；

D；制作泡菜利用的乳酸菌是一种厌氧微生物；可以通过无氧呼吸产生乳酸，D正确。

故选B。

【点睛】5、C【分析】【分析】

纤维素酶是一种复合酶，包括C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶；前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。

【详解】

A；用以纤维素为唯一碳源的培养基筛选纤维素分解菌；其中只有纤维素分解菌能够存活，纤维素能为纤维素分解菌提供营养，A正确；

B；富含腐殖质的林下土壤中富含纤维素；其中的纤维素分解菌较多，故可以从富含腐殖质的林下土壤中筛选产纤维素酶菌，B正确；

C；刚果红与纤维素反应呈红色；纤维素分解菌产生的纤维素酶会将纤维素分解而不能与刚果红染液呈红色，在菌落周围会出现透明圈，为了确定是纤维素分解菌，还需要进行发酵产纤维素酶的实验，C错误；

D；用产纤维素酶菌发酵处理农作物秸秆；可以把纤维素分解成葡萄糖，提高饲用价值，D正确。

故选C。6、C【分析】【分析】

微生物的发酵在食品的制作中具有重要的作用；如酿制葡萄酒时要用到酵母菌，在无氧条件下，酵母菌能分解葡萄糖产生酒精和二氧化碳。

【详解】

A；葡萄酒的酿制利用了酵母菌的无氧呼吸过程；A错误；

B；葡萄中的糖类物质为微生物发酵提供了碳源；不能提供氮源，B错误；

C；家庭酿制葡萄酒时可不用专门添加微生物菌种；C正确；

D；泡菜制作过程中会产生亚硝酸盐；需定期检测亚硝酸盐含量是否超标，D错误。

故选C。7、C【分析】【分析】

实验设计的一般步骤：分组编号→设置对照实验（给与不同的处理）→观察并记录实验结果（注意保证无关变量的一致性）→得出结论。

【详解】

A；皮肤干细胞具有分裂和分化能力；因此用皮肤干细胞作实验材料是合理的，A正确；

B；需要地面的同步实验作对照；这样通过对照能探究空间微重力环境下与正常状态细胞的细胞分裂的不同，B正确；

C；天地实验也能且需要控制无关变量；否则实验的结论不具有说服力，C错误；

D；本实验的自变量是是否具有微重力环境；而因变量是细胞增殖、分化的情况，D正确。

故选C。8、D【分析】【分析】

分析图示可知：表示小鼠孤雌单倍体胚胎干细胞系获得过程；精子和卵母细胞经过①受精作用形成受精卵，然后移除雄原核，经过②早期胚胎发育形成早期胚胎，最终形成孤雌单倍体胚胎干细胞。

【详解】

A；该技术培育的单倍体动物可成为研究隐性基因功能的理想细胞模型；因为显性基因在正常的生物体内也能表达，A正确；

B；在实际胚胎工程操作中；可以在卵黄膜和透明带之间观察到两个极体（一个是第一极体，一个是第二极体）作为受精的标志，B正确；

C；图中“早期胚胎”最可能是囊胚；囊胚的内细胞团细胞具有发育的全能性，C正确；

D；图中胚胎干细胞为孤雌单倍体胚胎；不存在同源染色体，D错误。

故选D。二、多选题(共7题，共14分)9、A:B【分析】【分析】

单克隆抗体的制备过程是：对小动物注射抗原；从该动物的脾脏中获取效应B细胞，将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，克隆化培养杂交瘤细胞（体内培养和体外培养），最后获取单克隆抗体。

【详解】

A；制备单克隆抗体是动物细胞融合技术最重要的应用；融合后形成的杂交瘤细胞既能无限增殖，又能产生单克隆抗体，A正确；

B；单克隆抗体具有特异性强、纯度高、灵敏度高；并可能大量制备的特点，B正确；

C；体内诱生法制备的单克隆抗体需要注入到小鼠的体内；最后从小鼠的腹腔中提取腹水，此方法比较麻烦，而且抗体的量也较少，因此对于工业上需求较多的抗体而言，通常是采用体外培养法，C错误；

D；单克隆抗体是由骨髓瘤细胞和效应B细胞形成的杂交瘤细胞产生的；D错误。

故选AB。10、A:B:C【分析】【分析】

PCR技术：①概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术，所利用的原理为DNA分子的复制，因此PCR技术一般用于基因扩增；②原理：DNA复制；③条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）；④方式：以指数的方式扩增，即约2n；⑤过程：高温变性；低温复性、中温延伸。

【详解】

A；用PCR方法扩增目的基因时；只要知道目的基因前后的序列用以设计引物就可以了，因此不必知道基因的全部序列，A正确；

B；PCR过程中需要两种引物分子；不同引物能靠碱基互补配对而形成（部分）双链的话会造成引物不能同模板DNA结合，也就不能发生进一步的链式反应，这一点需要避免，B正确；

C；若退火温度过高；则引物与模板DNA无法形成部分双链，PCR也就不能发生，C正确；

D；PCR技术中的引物和原料是一次性添加的；不需要补充，D错误。

故选ABC。

【点睛】11、A:C【分析】【分析】

将浆细胞和骨髓瘤细胞融合；经筛选获得能产生特异性抗体的杂交瘤细胞进行体内或体外培养，获得大量的特异性抗体的技术，称为单克隆抗体的制备。

【详解】

A；注射E2蛋白后；从小鼠脾脏中获得的B淋巴细胞有多种，不一定能产生E2蛋白抗体，A错误；

B；过程②可使用PEG融合法或灭活病毒诱导法；得到的③可能是杂交瘤细胞，或者是融合的B细胞或是融合的骨髓瘤细胞，B正确；

C；细胞③要进行克隆化培养和抗体检测；经过多次筛选，才可获得足量多的能产生E2蛋白抗体的杂交瘤细胞，C错误；

D；猪瘟病毒（CSFV）的检测采用抗原-抗体杂交技术；抗CSFV的单克隆抗体能与猪瘟病毒（CSFV）蛋白质外壳上的E2蛋白结合，故此过程生产的单克隆抗体可用于CSFV的检测，D正确。

故选AC。12、B:C:D【分析】【分析】

用酒曲酿酒菌种是酵母菌；代谢类型是兼性厌氧型真菌，属于真核细胞，条件是18～25℃；前期需氧，后期不需氧。

【详解】

A、用酒曲酿酒是利用了微生物细胞呼吸的原理，进行的是酵母菌的无氧发酵，不能一直通入O2；A错误；

B；由于呼吸作用会产热；故会导致酒液温度产生变化，B正确；

C、起泡是由微生物进行呼吸作用产生的CO2释放到发酵液中形成的；C正确；

D；“曲势尽”可能是随着发酵的进行瓮中液体pH降低、酒精浓度过高导致酵母菌大量死亡；D正确。

故选BCD。13、A:C【分析】【分析】

果酒；果醋制作的注意事项。

(1)材料的选择与处理：选择新鲜的葡萄；榨汁前先将葡萄冲洗，并除去枝梗，以防葡萄汁流失及污染。冲洗以洗去灰尘为目的，且不要太干净，以防洗去野生型酵母菌。

(2)防止发酵液被污染的方法①榨汁机要清洗干净并晾干。②发酵瓶要洗净并用体积分数为70%的酒精消毒；或用洗洁精洗涤。③装入葡萄汁后要封闭充气口。

【详解】

A；果酒发酵的菌种是酵母菌；其代谢类型为异养兼性厌氧型，而果醋发酵的菌种是醋酸菌，其代谢类型是异养需氧型，A符合题意；

B；制作果酒和果醋时均需要对发酵瓶消毒；均可用体积分数为70%的酒精进行消毒，B不符合题意；

C；在变酸果酒的表面观察到的菌膜可能是醋酸菌在液面大量繁殖而形成的；液体表面不能形成菌落，C符合题意；

D；果酒和果醋的制作可用同一装置；但需控制不同发酵条件，果酒制作需要无氧环境，适宜温度为18～25℃，而果醋制作需要有氧环境，适宜温度为30～35℃，D不符合题意。

故选AC。14、A:D【分析】【分析】

单克隆抗体的制备过程:首先用特定抗原注射小鼠体内；使其发生免疫，小鼠体内产生具有免疫能力的B淋巴细胞。利用动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，单克隆抗体制备过程中的两次筛选：第一次筛选:利用特定选择培养基筛选，获得杂交瘤细胞，即AB型细胞（A为B淋巴细胞，B为骨髓瘤细胞），不需要A；B、AA、BB型细胞。第二次筛选：利用多孔板法和抗原—抗体杂交法筛选，获得产生特定抗体的杂交瘤细胞。

【详解】

A；分析题意可知；ADC中的单克隆抗体将细胞毒性药物运送到靶向肿瘤，但不会消除肿瘤细胞，真正发挥药效的是细胞毒性药物，A错误；

B；由于ADC可将药物带到肿瘤细胞所在部位；定位杀死肿瘤细胞，故ADC的用药量比常规用药的药量少，B正确；

C；单克隆抗体的制备需要将B细胞与骨髓瘤细胞融合；故需要用到细胞融合技术，C正确；

D；ADC通过体液运输；与肿瘤细胞进行特异性结合，体液运输是不定向的，D错误。

故选AD。15、A:B:C【分析】【分析】

限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列；并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，形成黏性末端和平末端两种。

【详解】

A；重组质粒pM5-SPN-leudh中除图中标注外；还应该具有终止子，复制原点等结构，A正确；

B；NdeI和BamHI两种酶切割形成的黏性末端不同；构建重组质粒用NdeI和BamHI两种酶切有助于目的基因正确插入，B正确；

C；KmR和A_pR为标记基因；图中KmR和A_pR存在于质粒中的作用是便于重组DNA分子的筛选，C正确；

D；限制酶和DNA连接酶的作用部位为磷酸二酯键；D错误。

故选ABC。三、填空题(共6题，共12分)16、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】液体发酵固体发酵葡萄糖定量17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】脲酶氨碱性增强升高pH的变化酚红指示剂红18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】低当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落菌落数19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】聚乙二醇、灭活的病毒、电刺激20、略

【分析】【详解】

在日常生活中；我们遇到过的与克隆技术有关的问题有：

①濒临灭绝动物的克隆：克隆可以拯救濒危的国家保护动物以及植物；我们可运用克隆，复制濒临灭绝的生物，让其不至于在我们的生活中消失；

②农业克隆：应用于农业等领域；通过转基因的方式，增加粮食的亩产量，提高土地的单位出产量；

③细胞克隆替代或者修复人体细胞问题；比如胚胎干细胞；

④畜牧业克隆：应用于畜牧业，提升优良品种群体基数，缩短畜牧育种年限。【解析】有，比如：①濒临灭绝动物的克隆；②农业克隆：应用于农业等领域，通过转基因的方式，增加粮食的亩产量，提高土地的单位出产量；③细胞克隆替代或者修复人体细胞问题，比如胚胎干细胞；④畜牧业克隆：应用于畜牧业，提升优良品种群体基数，缩短畜牧育种年限。21、略

【分析】【详解】

蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，其结果是生产自然界没有的蛋白质。【解析】蛋白质工程的结果是生产自然界没有的蛋白质四、实验题(共2题，共12分)22、略

【分析】豆豉的制作原理与腐乳的制作类似：起主要作用的是真菌中的毛霉；适宜温度为15℃～18℃；毛霉能够产生蛋白酶和脂肪酶，将蛋白质和脂肪分别水解成小分子的肽和氨基酸；甘油和脂肪酸。

【详解】

（1）黄豆煮熟的目的主要破坏黄豆内部结构；使蛋白质变性，淀粉达到糊化程度，易于水解，同时可起到灭菌的作用，冷却后再接种的原因是防止高温杀死菌种；

（2）发酵装置的上层含氧量比较高；发酵装置内上层黄豆的发酵效果比底层好，说明该发酵菌是需氧菌，其新陈代谢类型是异养需氧型；

（3）盐能抑制微生物生长所以制作豆豉过程中要加入适量的盐；避免变质；

（4）大豆到豆豉的过程中；主要利用毛霉；曲霉等微生物产生的蛋白酶的作用，所以其中最显著的变化是蛋白质被蛋白酶分解成小分子肽和氨基酸；

（5）腐乳的制作过程也是利用了毛霉；曲霉等微生物产生的蛋白酶的作用；毛霉、曲霉等微生物都是真核生物。

【点睛】

本题考查了豆豉制作的相关知识，要求考生能够识记豆豉制作的原理；能够利用酶的专一性解答蛋白酶和脂肪酶作用的产物是解答本题的关键。【解析】破坏大豆内部分子结构，使蛋白质适度变性，淀粉达到糊化程度，易于水解，同时可起到灭菌的作用防止高温杀死菌种好氧菌抑制微生物生长蛋白质转变成氨基酸和肽。腐乳真核23、略

【分析】【分析】

酵母菌是兼性厌氧菌；既可以进行有氧呼吸（彻底的氧化分解，释放大量的能量，有利于酵母菌的繁殖），又可以进行无氧呼吸（释放少量能量，产生酒精）。

【详解】

（1）酵母菌是制作马奶酒的要发酵菌种；从同化作用的类型看，酵母菌代谢过程中会消耗葡萄糖，所以属于异养型生物；酵母菌在有氧无氧条件都能生存，从细胞呼吸类型看，酵母菌属于兼性厌氧型生物。

（2）将马奶酒加入发酵装置时；要留有大约1/3的空间，不能装满，这样既可以为酵母菌大量繁殖提供适量的氧气，又可以防止发酵旺盛时发酵液溢出，发酵过程中，一般将温度控制在18~30℃进行发酵。

（3）马奶中的糖类主要是乳糖，马奶中的某些微生物能将乳糖分解为葡萄糖和半乳糖，进而被酵母菌利用产生酒精，制成马奶酒。据图分析，第一幅图中葡萄糖浓度先下降，所以野生型酵母菌优先利用葡萄糖进行酒精发酵，与野生型酵母菌相比，第二幅图中半乳糖先下降，说明马奶酒酵母菌优先利用半乳糖进行酒精发酵，且大量产生酒精阶段，马奶酒酵母菌产生酒精浓度曲线的斜率更大，说明产生酒精的速率更快。【解析】(1)异养型兼性厌氧。

(2)为酵母菌的繁殖提供适量的氧气；防止发酵旺盛时发酵液溢出18~30（或28）

(3)葡萄糖半乳糖更快五、综合题(共4题，共28分)24、略

【分析】试题分析：分析图图中过程①表示利用PCR技术扩增目的基因；过程②表示基因表达载体的构建，过程③表示将重组质粒导入根瘤农杆菌，过程④表示目的基因的检测和鉴定。

（1）步骤①中；利用PCR技术扩增干扰素基因时，设计引物序列的主要依据是干扰素基因两端的部分核苷酸序列。由于需要用EcoRⅠ；BamHⅠ两种限制酶切割目的基因和质粒，因此科研人员还在两种引物的一端分别加上了GAATTC和GGATCC序列，以便于后续的剪切和连接。

（2）基因表达载体的组成包括目的基因、标记基因、启动子、终止子和复制原点，因此过程②所构建的基因表达载体中未标注出的必需元件还有复制原点；微生物细胞作为受体细胞时，需要钙离子处理使其变为感受态细胞，即过程③中需先用Ca2+处理根瘤农杆菌以便将基因表达载体导入细胞。

（3）在利用反转录法合成目的基因时；科研人员提取愈伤组织细胞的RNA后，先通过逆转录过程获得DNA，再进行PCR扩增。干扰素基因未能导入人参愈伤组织细胞或导入人参愈伤组织细胞的干扰素基因未能转录，这会导致通过该方法不能检测出干扰素基因。

（4）科研人员认为；药物既有干扰素的治疗作用，又有人参的滋补作用，因此将转干扰素基因的人参愈伤组织加工成的药物比单纯干扰素的疗效要好。

【点睛】答本题的关键是掌握基因工程的一般步骤，分析并确定图中四个数字代表的过程的名称，同时能够根据碱基互补配对原则和限制酶的识别序列确定引物两端需要加入的序列。【解析】干扰素基因两端的部分核苷酸序列GAATTCGGATCC复制原点Ca2+逆转录干扰素基因未能导入人参愈伤组织细胞(或导入人参愈伤组织细胞的干扰素基因未能转录)将干扰素的治疗作用与人参的滋补作用相结合,能在抗病毒、抗肿瘤和免疫调节等方面发挥协同作用25、略

【分析】【分析】

1；微生物的营养物质主要有碳源、氮源、水和无机盐等；筛选菌株时需要用选择培养基；实验室中筛选微生物的原理是人为提供有利于目的菌生长的条件，同时抑制或阻止其他微生物生长。

2；微生物常见的接种的方法①平板划线法：将已经溶化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

（1）

筛选产脂肪酶的微生物M时；应该使用只有目的菌能够生存的，其他微生物不能生存的选择培养基，故培养基中应该添加植物油作为唯一碳源；从功能上看，这种培养基属于选择培养基。

（2）

在微生物培养过程中；灭菌和消毒的主要区别是灭菌能够杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子；玻璃器皿常采用的灭菌方法为干热灭菌。

（3）

该组同学在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均值为254，则每毫升样品中的菌株数=254×106÷0.1=2.54×109个；因当两个或多个细胞连在一起时；平板上观察的是一个菌落，故用该方法统计的醋酸菌数目会比活菌的实际值偏小。

（4）

在生物柴油生产中所用的脂肪酶；可以通过发酵工程技术进行工厂化生产。

【点睛】

本题考查微生物的分离和培养，要求考生识记培养基的种类；识记接种微生物常用的两种方法；掌握计数微生物的方法，能根据图中信息答题，难度中等。【解析】（1）植物油选择。

（2）所有微生物（包括芽孢和孢子）干热灭菌。

（3）2．54×109个小当两个或多个细