2025年人教版选择性必修3生物上册阶段测试试卷

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A.①过程可用胰蛋白酶处理剪碎后的小鼠脾脏B.②过程应先用聚乙二醇或灭活病毒诱导细胞融合C.②③过程筛选相关细胞时都需用选择培养基D.④过程可将细胞注射到小鼠腹腔内或体外培养4、科研人员在常规PCR基础上发展出同时检测多种病原体的多重PCR技术，检测原理（a、b）及结果（c）如下图。下列叙述错误的是（）

A.需要针对不同病原体设计特异性引物和荧光探针B.图中b是PCR反应的复性过程C.多重PCR同时完成对4种病原体的检测D.由结果推测该检测样品中有A病原体的核酸5、下列关于生物武器及其使用的叙述，正确的是（）A.生物武器不易控制，使用不当可能会危害己方安全B.炭疽杆菌产生的肉毒杆菌毒素能够引起肌肉麻痹C.现在的年轻人都已接种天花疫苗，对其有特异性免疫能力，所以不感染该病毒D.为了国家安全，可以进行必要的小范围的生物武器研究6、动物细胞培养是动物细胞工程的基础，相关叙述正确的是（）A.因为动物血清成分已研究清楚，所以在动物细胞培养基中加入动物血清B.悬浮培养的杂交瘤细胞会因细胞密度过大、发生接触抑制等因素而分裂受阻C.体外培养从牛卵巢采集的卵母细胞，细胞表面相互接触时细胞才停止分裂增殖D.将小鼠成纤维细胞诱导为多能干细胞，体外分化后可治疗小鼠的镰状细胞贫血7、下列关于生物武器的说法，错误的是（）A.应坚决禁止研制生物武器B.不生产、不储存生物武器C.必要时可小范围使用D.不只是对敌方人员有伤害8、为了获得抗蚜虫棉花新品种，研究人员将雪花莲凝集素基因（GNA）和尾穗苋凝集素基因（ACA）与载体（pBI121）结合，然后导入棉花细胞。下列叙述正确的是（）

A.用限制酶BsaBI和DNA聚合酶处理两种基因可获得GNA-ACA融合基因B.与只用KpnI相比，KpnI和XhoI处理融合基因和载体可保证基因转录方向正确C.在含卡那霉素的培养基上能存活的植物细胞即为成功转入目的基因的细胞D.用PCR技术检测GNA和ACA基因成功导入棉花细胞后，棉花就一定表现抗蚜虫性状9、基因工程是在DNA分子水平上进行设计操作的，在基因工程操作的基本步骤中，一定不进行碱基互补配对的是A.利用PCR技术扩增目的基因B.目的基因与运载体的黏性末端结合C.抗原-抗体杂交检测目的基因表达D.DNA探针检测受体细胞的目的基因评卷人得分二、多选题(共7题，共14分)10、用XhoI和SalI两种限制性内切核酸酶分别单独酶切同一种DNA片段；酶切位点及酶切产物的琼脂糖凝胶电泳结果如图。以下叙述错误的是（）

A.XhoI和SalI两种酶识别的核糖核苷酸序列不同B.泳道①中是用SalI处理得到的酶切产物C.泳道②中的酶切产物可用DNA连接酶拼接成一个重组DNA分子D.图中被酶切的DNA片段是单链DNA11、下图为利用PCR技术扩增特定DNA片段的部分示意图；图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。下列有关描述错误的是（）

A.利用PCR技术扩增目的基因时不需要解旋酶而需要耐高温的DNA聚合酶B.引物是子链合成延伸基础，子链沿着模板链的3’→5’方向延伸C.从理论上推测，第四轮循环产物中只含有引物A的DNA片段所占的比例为15/16D.在第三轮循环产物中才开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段且占1/212、下图是我国科学家制备小鼠孤雄单倍体胚胎干细胞的相关研究流程；其中Oct4基因在维持胚胎干细胞全能性和自我更新中发挥极其重要的作用。下列叙述正确的是（）

A.受精卵发育过程中桑椹胚前的细胞都是全能性细胞B.推测Oct4基因的表达有利于延缓衰老C.过程③胚胎干细胞细胞核大、核仁明显D.从卵巢中获取的卵母细胞可直接用于过程①13、土壤被称为“微生物的天然培养基”。科学工作者要从土壤中分离或鉴定需要的微生物，需要配制选择培养基，再通过接种、培养、纯化、筛选等技术获得微生物。下列关于培养基对微生物的分离或鉴定的叙述，正确的是（）A.从土壤中分离出酵母菌和霉菌，需要配制含青霉素的培养基，在灭菌后将培养基调至酸性B.从土壤中分离出纤维素的分解菌，需要配制含纤维素为唯一碳源的培养基且加刚果红C.以尿素为唯一氮源的培养基，采用稀释涂布平板法可分离出分解尿素的分解菌D.从土壤中分离固氮微生物需要配制不含氮源的培养基，且培养条件要适宜14、白地霉侵染是导致柑橘酸腐病的主要原因，实验证明桔梅奇酵母通过分泌普切明酸对白地霉具有生物防治能力。已知铁是真菌生长的必需元素，是胞内重要酶活性中心的组成部分。普切明酸是桔梅奇酵母产生的一种水溶性铁螯合剂，能快速在培养基中扩散并与其中的Fe3+形成稳定红色复合物。研究配制的含有不同浓度FeCl3的培养基如下表所示。实验结果为随FeCl3浓度增大，抑菌圈红色加深但变窄，如下图所示。相关叙述正确的是（）。成分MgSO4NaH2PO4蛋白胨FeCl3溶液水琼脂用量5g7g15g500mL7g20g

A.蛋白胨可以提供碳源、氮源、维生素，琼脂不是营养物质B.白地霉采用了平板划线法，桔梅奇酵母采用了涂布平板法C.结果表明，FeCl3浓度增大，普切明酸与Fe3+结合的数量减少D.结果表明，FeCl3能降低桔梅奇酵母对白地霉的防治效果15、进行土壤中尿素分解菌的选择培养时，利用的培养基组分及含量如表所示。下列分析错误的是（）。组分含量KH2PO41.4gNa2HPO42.1gMgSO4•7H2O0.2g葡萄糖10.0g尿素1.0g琼脂15.0gH2O定容至1000mL

A.KH2PO4和Na2HPO4既可为菌体提供无机盐，又可调节培养基的pHB.尿素既可为尿素分解菌提供氮源，又可对培养基中的微生物起选择作用C.琼脂既可为尿素分解菌提供碳源，又起到凝固剂的作用D.蒸馏水既可进行定容，又可对培养液进行稀释以便于计数16、下列有关动物细胞培养的表述错误的是（）A.培养环境中需要O2，不需要CO2B.细胞要经过脱分化形成愈伤组织C.培养液通常含有糖类，氨基酸，无机盐，维生素和动物血清D.培养瓶中的细胞培养到一定阶段后分瓶后才能继续增殖评卷人得分三、填空题(共9题，共18分)17、本课题对分解纤维素的微生物进行了初步的筛选。但是，这只是分离纯化的第一步。为确定得到的是纤维素分解菌，还需要进行发酵产纤维素酶的实验，纤维素酶的发酵方法有___________和___________发酵两种。纤维素酶的测定方法，一般是采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的__________进行________的测定。18、本课题对能分解尿素的细菌进行了初步的筛选。但是，这只是分离纯化菌种的第一步。对分离的菌种作进一步的鉴定，还需要借助生物化学的方法。在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的___________将尿素分解成了_____________。氨会使培养基的________________，pH______________。因此，我们可以通过检测培养基______________来判断该化学反应是否发生。在以尿素为唯一氮源的培养基中加入_____________，培养某种细菌后，如果pH升高，指示剂将变________________。19、酵母菌是______________微生物。酵母菌进行有氧呼吸的反应式如下：______________________；酵母菌进行无氧呼吸的反应式如下：_________________。20、结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：______和______。21、DNA的粗提取实验中，如果实验材料是非哺乳动物如鸡血细胞，需要在鸡血细胞中加入一定量的____________，如果实验材料是植物细胞，需要先使用_______________溶解细胞膜。22、将DNA粗提取液在____________℃的恒温水浴箱中保温10—15分钟。23、请回答有关植物细胞工程的问题：

（1）在植物中，一些分化的细胞，经过________的诱导，可以脱分化失去其__________而转变成未分化细胞。

（2）胡萝卜的组织培养中，将接种后的胡萝卜组织块，放在恒温_________（填：“光照”或“黑暗”）条件下培养。一段时间后，将生长良好的愈伤组织转接到_________培养基上继续培养。

（3）在植物组织培养过程中，由于培养细胞一直处于不断的分生状态，因此容易受到__________的影响而产生突变。为筛选出具有抗盐性状的突变体，需将种子播种在含_____的培养基上，获得所需个体。24、生物武器的致病能力强、攻击范围广。它可以直接或通过食物、生活必需品和带菌昆虫等散布，经由呼吸道、消化道和皮肤等侵入人、畜体内，造成大规模伤亡，但对植物无害。（选择性必修3P111）()25、我国政府同样禁止进行治疗性克隆实验。（选择性必修3P108）()评卷人得分四、综合题(共3题，共30分)26、尿素[CO（NH2）2]是有机态氮肥；只有在被土壤中的微生物分解后，才能被农作物吸收和利用。某兴趣小组试图从土壤中分离能分解尿素的细菌；相关流程如图所示。回答下列问题：

(1)为了分离得到尿素分解菌，需要配制培养基，培养基中加入的尿素能为微生物提供的营养成分是__________。

(2)配制好的培养基，采用__________法进行灭菌，待平板冷却凝固后需要将平板__________（填放置方式），这样做的目的是____________________（答出1点）。

(3)据图分析，该兴趣小组设置了三个培养皿进行接种，所采用的接种方法是__________，培养一段时间后，经过统计，在培养基表面分别形成了51、42、45个菌落，据此计算，1g土壤样品中约有分解尿素的细菌__________个。27、PCR技术是把某一DNA片段在实验条件下；合成许许多多相同片段的一种方法，利用这种技术能快速而特异的扩增任何要求的目的基因或者DNA分子片段，“人类基因组计划”的研究中常用到这种技术。请结合有关知识，回答有关此技术的一些问题：

（1）PCR技术能把某一DNA片段进行扩增，依据的原理是：_____________________。

（2）PCR反应需要在一定的缓冲液中进行，还需要提供DNA模板、__________________等条件。

（3）某DNA片段有160个碱基，其中有腺嘌呤35个，若让该DNA分子扩增三次（即复制三次）至少需要鸟嘌呤脱氧核苷酸的数目是____________个。

（4）将大肠杆菌置于含15N的培养基上培养。这样，后代大肠杆菌细胞中的DNA双链均被15N标记。然后将被15N标记的大肠杆菌作为亲代转到普通培养基中，繁殖两代。第一代大肠杆菌DNA贮存的遗传信息与亲代大肠杆菌DNA贮存的遗传信息完全相同的原因是________________________________________________________________________________。如果将第二代大肠杆菌的DNA分子总量作为整体1，其中，带有15N的第二代大肠杆菌DNA分子约占总量的______________%。

（5）PCR中加入的引物有____________种，加入引物的作用是______________________。28、养殖家禽的饲料中富含谷物；纤维素是谷物的重要成分，但家禽消化道中缺少能降解纤维素的酶，阻碍了家禽对饲料的吸收与利用。研究人员利用转基因技术改造乳酸杆菌，将其添加于饲料中，以提高家禽养殖效率。

（1）枯草芽孢杆菌分泌可降解纤维素的一种酶；这种酶由W基因编码。为在乳酸杆菌中表达W基因，需使用图1中质粒为载体。图2为克隆得到的含W基因的DNA片段，W基因以乙链为转录模板链，转录时mRNA自身延伸的方向为5'→3'。

①很多启动子具有物种特异性，在图1质粒中插入W基因，其上游启动子应选择___________（填正确选项前字母）。

A．枯草芽孢杆菌启动子B．乳酸杆菌启动子C．农杆菌启动子。

②下表是几种限制酶识别序列及其切割位点；图1；图2中标注了相关限制酶的酶切位点。

。限制酶。

EcoRI

BamHI

KpnI

MfeI

HindIII

识别序列及切割位点。

根据上述信息，应使用限制酶___________切割图1中质粒，使用限制酶___________切割图2中含W基因的DNA片段，以获得能正确表达W基因的重组质粒。所得重组质粒转化乳酸杆菌后，使用含抗生素_______的培养基筛选；以得到转入W基因的乳酸杆菌。

（2）为确定导入重组质粒的乳酸杆菌是否具有分解纤维素的能力；研究人员用液体培养基分别培养下表所示菌种。所得部分菌液接种于固体鉴定培养基上，另取部分菌液上清液测定酶活力，实验方案及测定结果如下表所示。

。菌种酶活性相对值乳酸杆菌未检出X未检出导入了重组质粒的乳酸杆菌0．96表中的X应为___________。若要检测导入重组质粒的乳酸杆菌是否合成了纤维素酶的方法是_____________。

（3）解决谷物中纤维素难以被消化吸收的另一思路是将W基因转入家禽中，使转基因家禽消化道特异表达能够降解纤维素的酶。采用显微注射的方法将重组质粒导入_________细胞中，上述研究方法与该思路相比，有哪些优点_________________（写出2点）。参考答案一、选择题(共9题，共18分)1、D【分析】【分析】

1；基因工程的原理是基因重组。

2；基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因；启动子、终止子和标记基因等。

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同；导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法；基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：

①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；

②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；

③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。

个体水平上的鉴定：

抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

A；由题意可知；该技术定向非常精确，故只需要编辑少量的细胞就可以对遗传病进行治疗，A正确；

B；该技术能帮助修复人类早期胚胎中与肥厚性心肌病相关的基因MYBPC3的突变；但也会引发基因歧视问题，B正确；

C；由于外源基因插入宿主基因组的部位往往是随机的；因此有时候会出现一些人们意想不到的后果，潜藏着难以预测的、巨大的不确定性和风险，C正确；

D；利用基因编辑技术设计试管婴儿；以期得到“完美婴儿”，已经涉及到新生命的诞生，会造成生物技术安全与伦理问题，D错误。

故选D。2、D【分析】【分析】

根据题意可知；驱蚊草的培育属于细胞工程育种中的植物体细胞杂交，其优点是打破生殖隔离的限制，克服远源杂交不亲和的障碍。在植物体细胞杂交的过程中，需要用纤维素酶和果胶酶去除植物的细胞壁，获得原生质体，然后用物理法或化学法等诱导原生质体融合，形成杂种细胞，再利用植物组织培养技术将杂种细胞培育成完整植株。

【详解】

A；利用植物体细胞杂交技术培育驱蚊草的过程中；形成杂种细胞后需利用植物组织培养技术将杂种细胞培育成植株，A正确；

B；驱蚊草的培育属于细胞工程育种中的植物体细胞杂交；其优点是打破生殖隔离的限制，克服远源杂交不亲和的障碍，B正确；

C；驱蚊草的培育采用了植物体细胞杂交技术；培育过程中需要去除细胞壁，再进行原生质体的融合，C正确；

D；通过植物组织培养技术实现由杂种细胞形成杂种植株的过程；该过程需经历脱分化和再分化，包含了细胞的有丝分裂和细胞分化，不包含减数分裂，D错误。

故选D。3、C【分析】【分析】

1；单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应；之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞，诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养,即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。

2；两次筛选：第一次筛选得到杂交瘤细胞(去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞)；第二次筛选出能够产生特异性抗体的细胞群。

3；杂交瘤细胞的特点：既能大量增殖；又能产生特异性抗体。

4；诱导动物细胞融合的方法有：物理法(离心、振动)、化学法(聚乙二醇)、生物法(灭活的病毒)。

5；单克隆抗体与常规的血清抗体相比；最大的优势在于特异性强，灵敏度高，可大量制备。

【详解】

A；①过程可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理剪碎后的小鼠脾脏；获得分散的细胞，A正确；

B；②过程属于动物细胞融合；诱导动物细胞融合的方法包括化学法(聚乙二醇)和生物法(灭活的病毒)，B正确；

C；②过程属于第一次筛选；需要用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，③过程需要进行抗体阳性检测，无需选择培养基，C错误；

D；④过程属于单克隆抗体扩增；可将细胞注射到小鼠腹腔内或体外培养，从而获得大量单克隆抗体，D正确。

故选C。4、B【分析】【分析】

PCR技术：

（1）概念：PCR全称为聚合酶链式反应；是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。

（2）原理：DNA复制。

（3）前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成一对引物。

（4）条件：模板DNA；四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）。（5）过程：①高温变性：DNA解旋过程；②低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶；高温条件下氢键可自动解开。

【详解】

A；不同的病原体的碱基序列是不同的；因此需要根据病原体的碱基序列设计不同的特异性引物和荧光探针，A正确；

B、图中b是PCR反应的延伸过程；该过程中发生合成子链的过程，B错误；

CD；科研人员在常规PCR基础上发展出同时检测多种病原体的多重PCR技术；由图c可知，多重PCR同时完成对（A、B、C、D）4种病原体的检测，实验组中B、C、D的剩余探针荧光强度与阴性对照组相似，说明该检测样品中没有B、C、D病原体的核酸，实验组中A的剩余探针荧光强度与阴性对照组不同，说明该检测样品中有A病原体的核酸，CD正确。

故选B。5、A【分析】【分析】

1；生物武器种类：包括致病菌、病毒、生化毒剂；以及经过基因重组的致病菌等。

2；生物武器的特点：单位面积效应大；有特定的伤害对象；具有传染性；危害时间久；不易被发现和鉴定；使用者本身易受伤害；生物武器造价低；技术难度不大，隐秘性强，可以在任何地方研制和生产。

【详解】

A；生物武器有局限性；不易控制，使用不当会危害己方，A正确；

B；肉毒杆菌毒素是由肉毒杆菌产生的；而不是由炭疽杆菌产生的，B错误；

C；如今年轻人普遍都未接种天花疫苗；很难有效防治天花，C错误；

D；生物武器几乎对所有人都有杀伤力；是一种不人道的武器，应该坚决禁止，D错误。

故选A。6、D【分析】【分析】

动物细胞培养是指从动物体中取出相关的组织；将它分散成单个细胞，然后在适宜的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。

【详解】

A；由于对动物血清成分尚未全部研究清楚；因此在动物细胞培养基中加入动物血清，A错误；

B；杂交瘤细胞具备肿瘤细胞可无限增殖的特点；因此不会发生接触抑制等现象，B错误；

C；体外培养从牛卵巢采集的卵母细胞；需要培养到减数第二次分裂才具备受精的能力，在受精过程中完成减数第二次分裂，因此体外培养的卵母细胞不会增殖分裂，C错误；

D；将小鼠成纤维细胞诱导为多能干细胞；体外分化后可治疗小鼠的镰状细胞贫血，D正确。

故选D。7、C【分析】【分析】

我国对生物武器的态度：不发展；不生产、不储存生物武器；并反对生物武器及其技术和设备的扩散。

【详解】

AC；生物武器几乎对所有人都具有杀伤力；应坚决禁止研制和使用生物武器，A正确，C错误；

B；我国对生物武器的态度：不发展、不生产、不储存生物武器；并反对生物武器及其技术和设备的扩散，B正确；

D；生物武器不只是对敌方人员有伤害；对使用者本身也会造成伤害，D正确。

故选C。8、B【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子、复制原点和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4)）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因：DNA分子杂交技术和PCR技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA：分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质：抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

A；由图可知；GNA、ACA都含有限制酶BsaBI的酶切位点，故用限制酶BsaBI和DNA连接酶处理两种基因可获得GNA-ACA融合基因，DNA聚合酶是催化单个核苷酸连接，而DNA连接酶是催化DNA片段连接，A错误；

B；图中质粒与ACA-GNA上都含有KpnI和XhoI的酶切位点；与只用KpnI相比，KpnI和XhoI处理融合基因和载体可保证基因转录方向正确，避免反向连接，B正确；

C；由于载体上含有卡那霉素抗性基因；在含卡那霉素的培养基上能存活的植物细胞为成功转入目的基因的细胞或含有普通质粒的细胞，C错误；

D；PCR技术可用于基因探针的制备；可用来检测目的基因是否导入受体细胞，基因GNA和ACA导入棉花细胞后不一定正常表达，所以不一定具有抗虫性状，D错误。

故选B。

9、C【分析】【分析】

基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与鉴定。其中人工合成目的基因；基因表达载体的构建、目的基因的检测都进行碱基互补配对原则。

【详解】

A；利用PCR技术扩增目的基因的原理是DNA的双链复制；DNA复制过程中遵循碱基互补配对，A不符合题意；

B；目的基因与运载体的粘性末端之间的碱基通过碱基互补配对连接在一起；形成基因表达载体，B不符合题意；

C；抗原与抗体都不含碱基；所以抗原抗体杂交不存在碱基互补配对，C符合题意；

D；用DNA探针检测目的基因时需要进行碱基互补配对；D不符合题意。

故选C。二、多选题(共7题，共14分)10、A:D【分析】【分析】

1；DNA一般是双螺旋结构；限制酶可以识别特定的脱氧核苷酸序列；并在每条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键进行切割。

2；图1中SaLl有3个识别位点；能将DNA片段切成4段，Xhol有2个识别位点，能将DNA片段切成3段。

【详解】

A；限制酶识别特定的脱氧核苷酸序列；不同的限制酶能识别不同的脱氧核苷酸序列，A错误；

B；Sall将DNA片段切成4段；Xhol将DNA片段切成3段，根据电泳结果可知泳道①为Sall，泳道②为XhoⅠ，B正确；

C；同种限制酶切割出的DNA片段；具有相同的粘性末端，再用DNA连接酶进行连接，可以构成重组DNA，C正确；

D；限制酶切割双链DNA；酶切后的DNA片段仍然是双链DNA，D错误。

故选AD。11、C:D【分析】【分析】

聚酶链式反应扩增DNA片段：

1.PCR原理：在解旋酶作用下；打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4中游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链。

2.PCR反应过程是：变性→复性→延伸。

【详解】

A；利用PCR技术扩增目的基因时不需要解旋酶；该过程中氢键的断裂是通过高温完成的，而子链延伸过程需要耐高温的DNA聚合酶，A正确；

B；引物是子链合成延伸基础；即DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，也可以说子链沿着模板链的3’→5’方向延伸，B正确；

C、从理论上推测，第四轮循环产物共有24=16个DNA分子；其中有2个是模板链，只含有引物A的DNA片段即为与其中的一个模板链形成的1个DNA分子，因此，第四轮循环产物中只含有引物A的DNA片段所占的比例为1/16，C错误；

D、DNA复制为半保留复制，DNA复制n次，共形成2n个DNA，其中两个DNA含有母链和子链（引物A或引物B），（2n-2）个DNA都含有子链（含有引物A和引物B）。第三轮循环即DNA复制3次；共形成8个DNA，其中2个DNA含有引物A或引物B，6个DNA含有引物A和引物B，其中只有2个两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段，含量为1/4，D错误。

故选CD。

【点睛】12、A:B:C【分析】【分析】

分析图示可知；将卵子去核，然后注入Oct4转基因小鼠的精子，用氧化锶激活，可使该换核的细胞形成雄原核，并分裂分化形成单倍体囊，最终形成孤雄单倍体胚胎干细胞。

【详解】

A；由于桑椹胚期的细胞没有出现分化；桑椹胚前的细胞都具有发育成完整胚胎的潜能，是全能性细胞，A正确；

B；从题干可知；Oct4基因在维持胚胎干细胞全能性和自我更新中发挥极其重要的作用，可推测Oct4基因的表达有利于延缓衰老，B正确；

C；过程③胚胎干细胞具有胚胎细胞的特性；体积较小，细胞核大，核仁明显，C正确；

D；卵巢中取出来的是未成熟的卵细胞；要进行培养到减数第二次分裂的中期才能受精，不能直接用于过程①，D错误。

故选ABC。

【点睛】13、B:C:D【分析】【分析】

选择培养基是指一类根据特定微生物的特殊营养要求或其对某理化因素抗性的原理而设计的培养基。具有只允许特定的微生物生长；而同时抑制或阻止其他微生物生长的功能。

【详解】

A；青霉素能杀死细菌；对真菌无影响，因此，从土壤中分离出酵母菌和霉菌，需要配制含青霉素的培养基，且调试pH需要在灭菌前，A错误；

B；纤维素分解菌含纤维素水解酶能利用纤维素；其他微生物不能利用纤维素，刚果红和纤维素形成红色复合物，纤维素被分解后出现透明圈，所以能分离和筛选纤维素的分解菌，B正确；

C、分解尿素的分解菌能合成脲酶，把尿素分解成NH3，NH3再转化NO3-、NH4+被植物利用；其他微生物细胞中不能合成脲酶，不能利用尿素，在以尿素为唯一氮源的培养基上不能生长，C正确；

D、固氮菌能利用空气中N2；其他微生物不能利用，因此需要配制不含氮源的培养基进行筛选，且培养条件要适宜，D正确。

故选BCD。14、A:D【分析】【分析】

1；培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求；配制出供其生长繁殖的营养基质；根据物理性质分为固体培养基和液体培养基，培养基中一般含有水、碳源、氮源和无机盐。在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质和氧气的要求。

2；微生物常见的接种的方法：

（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后；均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

【详解】

A；蛋白胨可以提供碳源、氮源、维生素；琼脂是凝固剂的一种，并不是营养物质，在培养液中加入琼脂可以使液体培养基成为琼脂固体培养基，A正确；

B；白地霉、桔梅奇酵母的接种都采用了涂布平板法；B错误；

C、随培养基中FeCl3浓度的增加，普切明酸与Fe3+的结合增强；抑菌圈的红色加深，C错误；

D、普切明酸与Fe3+形成红色复合物，但随培养基中FeCl3浓度的增加，抑菌圈变窄，说明FeCl3能降低桔梅奇酵母对白地霉的防治效果；D正确。

故选AD。15、C:D【分析】【分析】

实验室的培养基按照功能划分；可以分为选择培养基和鉴别培养基。选择培养基是在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基称为选择培养基。

【详解】

A、KH2PO4和Na2HPO4可为尿素分解菌提供无机盐，H2PO4-和HPO42-又是一种调节pH的缓冲对；A正确；

B；培养基中除了尿素无其他含氮物质；只有尿素分解菌能通过分解尿素进行生长繁殖，故尿素既能为尿素分解菌提供氮源，又可对培养基中的微生物起选择作用，B正确；

C；琼脂不能被微生物利用；只能充当凝固剂，C错误；

D、表中的H2O为蒸馏水；起定容作用，蒸馏水不能对培养液进行稀释，稀释所用的溶剂应该是无菌水，D错误。

故选CD。16、A:B【分析】【分析】

动物细胞培养需要满足以下条件：①无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。②营养：合成培养基成分：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常需加入血清、血浆等天然成分。③温度：适宜温度。④气体环境：95%空气+5%CO2。

【详解】

A、动物细胞培养中，培养环境中需要O2，也需要CO2（用来维持培养液的pH）；A错误；

B；动物细胞培养不需要脱分化；植物细胞要经过脱分化才形成愈伤组织，B错误；

C；动物细胞培养中常用含糖类、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清的液体培养基；C正确；

D；动物细胞培养过程中会出现接触抑制现象而停止分裂增殖；故培养瓶中的细胞培养到一定阶段后要用胰蛋白酶处理，分瓶后才能继续增殖，D正确。

故选AB。三、填空题(共9题，共18分)17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】液体发酵固体发酵葡萄糖定量18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】脲酶氨碱性增强升高pH的变化酚红指示剂红19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】兼性厌氧C6H12O6+6H2O+6O2→6CO2+12H2OC6H12O6→2C2H5OH+2CO220、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】黏性末端平末端。21、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】蒸馏水洗涤剂和食盐22、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】60—7523、略

【分析】【分析】

植物组织培养的条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度；适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。决定植物脱分化和再分化的关键因素是植物激素的种类和比例；特别是生长素和细胞分裂素的协同作用在组织培养过程中非常重要，被称为“激素杠杆”。

【详解】

（1）在植物中；一些分化的细胞，经过激素的诱导，可以脱分化失去其特有的结构和功能而转变成未分化细胞。

（2）胡萝卜的组织培养中；将接种后的胡萝卜组织块，放在恒温黑暗条件下培养。一段时间后，将生长良好的愈伤组织转接到分化培养基上继续培养。

（3）在植物组织培养过程中；由于培养细胞一直处于不断的分生状态，因此容易受到培养条件和外界压力的影响而产生突变。为筛选出具有抗盐性状的突变体，需将种子播种在含一定浓度的盐的培养基上，获得所需个体。

【点睛】

本题考查植物组织培养的相关知识，要求考生识记植物组织培养的过程、原理及条件，掌握植物组织培养技术的相关应用，能结合所学的知识准确分析，属于考纲识记和理解层次的考查。【解析】①.激素②.特有的结构和功能③.黑暗④.分化⑤.培养条件和外界压力⑥.一定浓度的盐24、略

【分析】【详解】

生物武器是利用生物战剂杀伤人员、牲畜、毁坏植物的武器。致病能力强、攻击范围广。它可以直接或通过食物、生活必需品和带菌昆虫等散布，经由呼吸道、消化道和皮肤等侵入人、畜体内，造成大规模伤亡，同时可毁坏植物，该说法错误。【解析】错误25、略

【分析】【详解】

中国政府的态度：禁止生殖性克隆，不反对治疗性克隆，该表述错误。【解析】错误四、综合题(共3题，共30分)26、略

【分析】【分析】

统计菌落数目的方法。

（1）显微镜直接计数法①原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板；在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量；②方法：用计数板计数；③缺点：不能区分死菌与活菌。

（2）间接计数法（活菌计数法）①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。②操作a、设置重复组，增强实验的说服力与准确性。b；为了保证结果准确；一般选择菌落数在30~300的平板进行计数。③计算公式：每克样品中的菌株数=（C÷V)×M，其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M代表稀释倍数。

【详解】

（1）各种培养基一般都含有水；碳源、氮源、无机盐；此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求，能为微生物提供的营养成分是碳源和氮源。

（2）培养基一般采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌；为了避免培养基表面的水分过快地蒸发；防止皿盖上的冷凝水珠落入培养基，造成污染，待平板冷却凝固后需要将平板倒置。

（3）取lg土壤，按如图稀释后，在三个平板上分别接入0.1ml稀释液后，经适当培养后，3个平板上的菌落数分别是51、42、45个，根据计算公式：每克样品中的菌株数=（C÷V)×M计算，因此1g土壤样品中约有分解尿素的细菌=（51+42+45）/3÷0.1×105=5.6×107个。【解析】(1)碳源和氮源。

(2)高压蒸汽灭菌倒置避免培养基表面的水分过快地蒸发；防止皿盖上的冷凝水珠落入培养基；造成污染。

(3)稀释涂布平板法4.6×10727、略

【分析】【分析】

PCR技术：

1；概念：PCR全称为聚合酶链式反应；是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。

2；原理：DNA复制。

3；前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物。

4；条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）。

5；过程：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶；高温条件下氢键可自动解开）；②低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。

（1）

PCR技术是指在体外模拟生物体内DNA分子复制的过程；因此其原理是DNA双链复制。

（2）

根据分析可知；PCR反应需要在一定的缓冲液中进行，还需要提供DNA模板；四种脱氧核苷酸、两种引物、耐热的DNA聚合酶等条件。

（3）

DNA片段含160个碱基，其中有腺嘌呤35个，则T=35，G=C=45，经3