2025年仁爱科普版选择性必修三生物下册阶段测试试卷

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年仁爱科普版选择性必修三生物下册阶段测试试卷305考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五六总分得分评卷人得分一、选择题(共7题，共14分)1、菜籽粕含有35%～45%蛋白质；是畜禽饲料的重要原料，但其中的单宁等抗营养因子限制了菜籽粕的应用。研究者将不同菌种接种到菜籽粕与麸皮制成的固体培养基中发酵48h，测定菜籽粕中单宁的含量，结果如下图。

下列相关叙述错误的是（）A.菜籽粕与麸皮为微生物提供碳源和氮源B.接种后需对培养基进行高压蒸汽灭菌C.黑曲霉菌对单宁的去除效果最为理想D.对照组为不接种微生物的固体培养基2、用XhoI和SalI两种限制性核酸内切酶分别处理同一DNA片段；酶切位点及酶切产物分离结果如图。以下叙述不正确的是（）

A.如图中两种酶识别的核苷酸序列不同B.如图中酶切产物可用于构建重组DNAC.泳道①中是用SalI处理得到的酶切产物D.图中被酶切的DNA片段是单链DNA3、下列关于生物技术的安全性及伦理问题的观点，正确的是（）A.可随意选择转基因植物的目的基因，从而培育出大量的转基因植物B.克隆人可以解决不孕不育患者的痛苦，应该在临床上进行推广实验C.反对设计试管婴儿的原因之一是因为试管婴儿技术属于无性繁殖方式D.生物武器具有传染性强、作用范围广等特点，应严格禁止生产和使用4、下列关于限制酶的说法不正确的是（）A.一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，体现了酶的专一性B.限制酶在特定的位点上切割DNA分子C.限制酶可以断开两条DNA链之间的氢键D.在基因工程的操作中，一般选用同一限制酶切割目的基因与运载体，以获得相同的黏性末端5、下图为科学家在实验室中培养“人造牛肉”的简要过程。下列相关叙述不正确的是（）

A.用胰蛋白酶处理牛肌肉组织，获得分裂能力强的肌肉母细胞B.“人造牛肉”的培养有利于牛肉的工厂化生产，有利于减轻环境污染C.培养液中的支架提供了更多的细胞吸附面积，有利于细胞贴壁生长D.生物反应器内应控制好适宜的温度，并充入纯氧保证细胞呼吸6、下图为真核生物核基因结构模式图，下列叙述正确的是（）

A.启动子编码起始密码子B.cDNA文库和基因组文库的基因中均含有内含子C.在转录完成后，RNA聚合酶从c~d区段脱落下来D.细胞内DNA复制时，只复制编码区，不复制非编码区7、图为科研人员培育克隆猴“中中”的流程图。下列有关叙述正确的是（）

A.“中中”不受卵子b的基因控制B.图中利用了干细胞技术C.d为胚胎发育提供遗传物质和其他适宜条件D.“中中”的染色体数目与a细胞相同评卷人得分二、多选题(共9题，共18分)8、我国科学家提出的异种克隆大熊猫实验技术路线如下图。相关叙述错误的是（）

A.科学家通过对母兔注射孕激素，进行超数排卵处理以获得更多的卵母细胞B.异种重构囊胚在体外培养时，为保证无毒无菌环境，往往需要在培养液中加入维生素C.囊胚由滋养层细胞和内细胞团构成，后者将来可发育成胎儿的各种组织D.兔子宫提供的生理环境与大熊猫差异大，异种重构囊胚可能不能正常发育出大熊猫幼仔9、基因工程利用某目的基因（图甲）和Pl噬菌体载体（图乙）构建重组DNA；限制性核酸内切酶的酶切位点分别是BglⅡ；EcoRⅠ和Sau3AⅠ。下列分析正确的是（）

A.构建重组DNA时，可用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和Pl噬菌体载体B.构建重组DNA时，可用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和Pl噬菌体载体C.图乙中的P1噬菌体载体只用EcoRⅠ切割后，含有2个游离的磷酸基团D.用EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体，再用DNA连接酶连接，只能产生一种重组DNA10、下图为科学家在实验室中培养“人造牛肉”的简要过程；下列相关叙述正确的是（）

A.用胰蛋白酶处理牛肌肉组织，获得分裂能力强的肌肉母细胞B.生物反应器内应控制好适宜的温度，并冲入纯氧保证细胞呼吸C.培养液中的支架提供了更多的细胞吸附面积，有利于细胞贴壁生长D.“人造牛肉”的培养有利于牛肉的工厂化生产，减少环境污染11、2022年6月10日；世界首例体细胞克隆北极狼在北京呱呱坠地。克隆北极狼的供体细胞来自哈尔滨极地公园引进的一只野生北极狼的皮肤样本，卵母细胞来自一只处于发情期的母犬，代孕母体则是一只比格犬。克隆过程如图所示，下列有关叙述正确的是（）

A.体细胞核移植技术比胚胎干细胞核移植技术更易成功B.用电刺激、Ca2+载体等方法激活重构胚，促进其分裂发育C.图中细胞分裂、分化形成克隆胚胎的过程中发生了基因重组D.体细胞核移植技术有望用于增加濒危动物的种群数量12、如图为“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验中样品稀释示意图。据图分析正确的是（）

A.某一稀释度下至少涂3个平板，该实验方法统计得到的结果常会比实际活菌数目少B.3号试管中的样品溶液稀释倍数为104倍C.5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1.7×108个D.该实验需设置牛肉膏蛋白胨培养基作对照，用以判断选择培养基是否有选择作用13、关于现代生物工程技术应用的安全性，下列说法正确的是（）A.对待生物武器的态度应明确而坚定，即坚决禁止生物武器B.对转基因植物的外源DNA要认真选择，避免产生对人体有害或过敏的蛋白质C.我国不反对治疗性克隆，允许有限制地进行克隆人实验D.一旦发现转基因生物出现了安全性问题，要马上停止实验，并销毁重组生物14、2020年7月20日，国际医学权威期刊《柳叶刀》上发表了新冠病毒疫苗II期临床试验的成果。该试验是由陈薇院士等人领衔的团队开展的研究，试验中使用的疫苗是一种腺病毒载体重组新冠病毒疫苗(基因重组疫苗)。试验结果表明，单次接种疫苗28天后，99．5%的受试者产生了特异性抗体，95．3%受试者产生了中和抗体，89%的受试者产生了特异性T细胞免疫反应。这表明，陈薇团队研发的新冠疫苗可为健康人群提供“三重保护”，将新冠病毒“拒之门外”。下列叙述正确的是（）A.该疫苗的制备需要用到限制性核酸内切酶和DNA连接酶B.受试者接受重组新冠病毒疫苗的接种后，体内能产生分泌特定抗体的效应T细胞C.主要通过检测受试者体内新冠病毒抗体的含量来评价试验的有效性D.新冠肺炎康复患者可以不注射该疫苗15、CRISPR/Cas9系统基因编辑是一种对靶向基因进行特定DNA修饰的技术；其原理是由一个向导RNA(sgRNA)分子引导Cas9蛋白到一个特定的基因位点进行切割。受此机制启发，科学家们通过设计sgRNA中碱基的识别序列，即可人为选择DNA上的任一目标位点进行切割（如图所示）。CRISPR/Cas9系统基因编辑技术有时存在编辑对象出错而造成脱靶。下列相关错误的是（）

A.Cas9蛋白通过破坏目标DNA的氢键实现对DNA的切割，与解旋酶的作用类似B.若脱靶率与sgRNA序列的长度有关，则sgRNA的序列越短脱靶率越高C.利用此技术对目标基因部分DNA片段进行切除可能导致染色体变异D.sgRNA的双链区域的碱基互补配对原则与目标基因的双链区域不同16、淀粉经淀粉酶水解后得到的产物是重要的工业原料；但工业化生产常需在高温条件下进行，而现有的淀粉酶耐热性不强，科研人员发现将淀粉酶（AmyS1）第27位的亮氨酸替换为天冬氨酸能产生耐热性高的淀粉酶（AmyS2），由此科研人员根据AmyS2的氨基酸序列设计并人工合成了AmyS2基因，将其导入芽孢杆菌内，具体过程如下图所示。最终结果表明，与导入质粒B相比，导入质粒C的芽孢杆菌培养液中更易获得并提纯AmyS2．下列说法错误的是（）

A.获得AmyS2基因并将其导入芽孢杆菌得到AmyS2的过程是通过基因工程实现的B.构建质粒C时需用限制酶Eco52I和BamHI同时切割质粒B和信号肽基因C.信号肽基因表达的产物可帮助核糖体上合成的AmyS2进入内质网和高尔基体D.可用PCR技术检测芽孢杆菌的DNA上是否插入了AmyS2基因评卷人得分三、填空题(共5题，共10分)17、禁止生物武器公约。

（1）1972年4月10日，苏联、美国、英国分别在其首都签署了《禁止试制、生产和储存并销毁细菌（生物）和毒剂武器公约》（简称_____）；并于1975年3月26日生效。1984年11月15日，我国也加入了这一公约。

（2）我国在任何情况下_____、_____、_____生物武器，并反对生物武器及其技术和设备的扩散。18、纤维素酶是一种__________，一般认为它至少包括三种组分，即__________、___________和_______________，前两种酶使纤维素分解成___________，第三种酶将纤维二糖分解成_____________。正是在这三种酶的协同作用下，纤维素最终被__________成葡萄糖，为微生物的生长提供营养，同样，也可以为人类所利用。19、在___________条件下，DNA与___________反应呈现______________，因此_____________可以作为鉴定DNA的试剂。20、动物细胞培养的流程：

取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用______处理分散成______→制成______→转入培养瓶中进行______培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续_____培养。21、植物繁殖的新途径。

微型繁殖：可以高效快速地实现种苗的大量繁殖。

作物脱毒：采用______组织培养来除去病毒（因为植物分生区附近的病毒______）

人工种子：以植物组织培养得到的______、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，经_____包装得到的种子。优点：完全保持优良品种的遗传特性，______；方便储藏和运输。

人工种子的结构包括：______、_____和______。评卷人得分四、判断题(共4题，共32分)22、转基因生物可能会破坏生态平衡（______）A.正确B.错误23、制备单克隆抗体时，2次筛选的目的不同。()____A.正确B.错误24、生物武器包括致病菌类、病毒类和生化毒剂类等。（选择性必修3P111）()A.正确B.错误25、如果转基因植物的外源基因源于自然界，则不会存在安全性问题。()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共1题，共3分)26、有研究表明CDKN2B基因与小鼠的寿命有关；科学家将该基因导入小鼠体内，统计其寿命是否高于正常小鼠。图1表示CDKN2B基因与相关限制酶酶切位点，该基因转录出的mRNA碱基序列与A链的碱基序列相同（T；U视为相同的碱基），图2为质粒简图，请回答下列有关问题：

（1）科学家首先采用PCR技术对目的基因进行扩增。PCR过程中每一循环有两次升温一次降温，其中降温的目的是_______________________________________________________。

（2）科学家在构建基因表达载体过程时，目的基因应插在___________和___________之间才能正常表达。单独使用限制酶HindⅢ分别切割目的基因和载体后产生黏性末端。携带CDKN2B基因的重组质粒成功导入细胞后，发现约一半的细胞中没有检测到CDKN2B蛋白，原因是___________。为了避免这种现象的发生，应对以上方法进行改进，改进措施为___________。

（3）若想让一个转入了目的基因的受精卵发育成多个个体，可以采用___________技术，操作时应注意做到_______________________________________________________。评卷人得分六、综合题(共3题，共24分)27、硒作为生物体内的微量元素；具有抗氧化；增强抵抗力等功能，是生物体内不可或缺的。研究人员以从实验室冷藏的馒头上提取的酵母作为出发菌株，利用紫外线进行物理诱变以筛选富硒能力强的菌株。回答下列问题：

(1)酵母菌细胞呼吸的类型属于___________型。研究人员挑选馒头酵母接种到30mL选择培养基的锥形瓶中，培养基中需要添加的物质主要有____________。将锥形瓶在180r/min的恒温摇床上培养，摇床培养有助于加速培养液中酵母菌的繁殖，原因是___________（答出一点即可）；摇床培养后可添加，以进行梯度稀释获得酵母菌悬液。

(2)将制成的酵母菌悬液用紫外线诱变后，实验人员采用梯度稀释法对诱变菌种稀释105倍，再分别将0.1mL稀释液涂布在3个牛肉膏蛋白陈培养基上，三个平板上统计的菌落数分别为251，265和276，则原酵母菌悬液中每10mL含有的酵母菌个数为____________。为了计算紫外线诱变的致死率，应设计对照实验，对照实验的处理方式为___________。

(3)富硒酵母是制作果酒的优良菌株，在制作果酒的过程中密封不严会导致果酒变酸，其原因是___________；工业发酵时，培养富硒酵母的培养基中还需要添加一定量的抗生素，以___________。28、人胰岛素由A；B两条肽链构成。研究人员用大肠杆菌作生产菌；利用基因工程TTA号冻技术分别生产两条肽链，并在体外将两条肽链加工成胰岛素。请回答下列问题：

（1）由A、B两条肽链可推导出A、B基因的碱基序列，依据是______。因为A、B基因中的脱氧核苷酸数较少，因此常用______的方法获取目的基因。

（2）在基因表达载体中，标记基因的作用是______。基因工程中不能将A、B基因直接导入大肠杆菌的原因是______。

（3）检测A、B基因是否导入受体菌时，常用______作探针。若A、B基因表达的肽链售中氨基酸数目增多，肽链后延，则需对A、B基因进行改造，这个改造是______。

（4）引导肽是由引导肽基因控制合成的段多肽序列，若在A、B肽链的前端加上引导肽序列后，可将A、B肽链引导到大肠杆菌的细胞膜外，便于A、B肽链提取。为实现上述目的，在基因层面的操作是______29、新型冠状病毒可通过表面的刺突蛋白（S蛋白）与人呼吸道黏膜上皮细胞的ACE2受体结合；侵入人体，引起肺炎。图1为病毒侵入后，人体内发生的部分免疫反应示意图。单克隆抗体可阻断病毒的黏附或入侵，故抗体药物的研发已成为治疗新冠肺炎的研究热点之一。图2为筛选；制备抗S蛋白单克隆抗体的示意图。请据图回答下列问题。

(1)图1中人体内抗原呈递细胞吞噬病毒，并将病毒的抗原暴露在细胞表面，被____细胞表面的受体识别后激活该细胞。

(2)B细胞识别入侵的病毒后，在细胞因子作用下，经过细胞的___，形成__细胞。

(3)为判断疑似患者是否为新型冠状病毒感染者，采集鼻咽拭子主要用于病原学检查，检测病毒的__；采集血液样本主要用于血清学检查，检测__。

(4)据图2所示，研制抗S蛋白单克隆抗体，需先注射___免疫小鼠以激活小鼠的免疫细胞；再提取激活的B细胞与骨髓瘤细胞融合，用HAT培养基筛选获得。

___细胞。因为同一种抗原可能激活__细胞，还需继续筛选才能获得分泌单克隆抗体的细胞株。参考答案一、选择题(共7题，共14分)1、B【分析】【分析】

制备培养基的基本过程为：计算；称量、溶化、调pH、灭菌、倒平板。对培养基灭菌常用高压蒸汽灭菌。图中不同菌种接种到菜籽粕与麸皮制成的固体培养基中发酵48h后；发酵菜籽粕中单宁含量都发生了不同程度的减少，说明微生物发酵可去除单宁。

【详解】

A；菜籽粕含有35%～45%蛋白质；麸皮富含纤维素，菜籽粕与麸皮可为微生物提供碳源和氮源，A正确；

B；对培养基灭菌应在接种前；接种后再灭菌，菌种将被全部杀死，B错误；

C；据图可知；与对照组相比，黑曲霉菌发酵菜籽粕中单宁含量最低，说明黑曲霉菌对单宁的去除效果最为理想，C正确；

D；对照组为不接种微生物的固体培养基；目的是作为对照，说明微生物去除单宁的作用，D正确。

故选B。2、D【分析】【详解】

【分析】该题考查DNA的结构；限制酶的特点和功能等。DNA一般是双螺旋结构；限制酶可以识别特定的脱氧核苷酸序列；并在每条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键进行切割。

【详解】限制酶识别特定的脱氧核苷酸序列，不同的限制酶能识别不同的核苷酸序列，由电泳图可知XhoI和SalI两种酶分别切割时，识别的序列不同，A正确；同种限制酶切割出的DNA片段，具有相同的粘性末端，再用DNA连接酶进行连接，可以构成重组DNA，B正确；SalI将DNA片段切成4段，XhoI将DNA片段切成3段，根据电泳结果可知泳道①为SalI，泳道②为XhoI；C正确；限制酶切割双链DNA，酶切后的DNA片段仍然是双链DNA，D错误，所以选D。

【点睛】注意图1两种限制酶的识别位点数量，SalI有3个识别位点，能将DNA片段切成4段，XhoI有2个识别位点，能将DNA片段切成3段。3、D【分析】【分析】

1；转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。

2；中国政府：禁止生殖性克隆人；坚持四不原则（不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验），不反对治疗性克隆人。

3；生物武器种类：包括致病菌、病毒、生化毒剂；以及经过基因重组的致病菌等。把这些病原体直接或者通过食物、生活必需品等散布到敌方，可以对军队和平民造成大规模杀伤后果。

【详解】

A；转基因生物存在食物安全、生态安全等问题；不可随意选择转基因植物的目的基因，从而培育出大量的转基因植物，A错误；

B；克隆人是不道德的；禁止生殖性克隆人，不应该在临床上进行推广实验，B错误；

C；试管婴儿可以设计婴儿的性别；反对设计试管婴儿的原因之一是有人滥用此技术选择性设计婴儿，而试管婴儿技术属于有性繁殖方式，C错误；

D；生物武器包括致病菌、病毒、生化毒剂；以及经过基因重组的致病菌等，具有传染性强、作用范围广等特点，应严格禁止生产和使用，D正确。

故选D。

【点睛】4、C【分析】【分析】

关于限制酶；考生可以从以下几方面把握：（1）来源：主要从原核生物中分离纯化出来。（2）特异性：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。（3）结果：形成黏性末端或平末端。

【详解】

ABC；一种限制酶只能识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列；并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，可见，限制酶在特定的位点上切割DNA分子，体现了酶的特异性，A、B正确，C错误；

D；在基因工程的操作中；一般选用同一限制酶切割目的基因与运载体，以获得相同的黏性末端，D正确。

故选C。5、D【分析】【分析】

动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。

【详解】

A；胰蛋白酶处理动物组织；可以使组织分散成单个细胞，利于动物细胞培养，A正确；

B；理论上来说；仅来自1只动物的干细胞，可制成的肉品数量比宰杀1头牛多很多倍，有利于牛肉的工厂化生产，同时也可减少对土地、饮用水和饲料的需求，且温室气体等其他环境污染物也会减少，B正确；

C；动物细胞培养过程中悬液中的细胞会很快贴附在瓶壁上；如果想得到大量的产物，可以增大细胞吸附面积，有利于细胞贴壁生长，C正确。

D、动物细胞培养的气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%CO2（调节pH值）；D错误。

故选D。6、C【分析】【分析】

真核细胞的基因由编码区和非编码区两部分组成；其中编码区包括能够编码蛋白质的序列（外显子）和一般不能够编码蛋白质的序列（内含子），在真核细胞基因表达时，首先由DNA转录出前驱mRNA，然后经过裁接才能形成成熟的mRNA。

【详解】

A；mRNA上起始密码子的序列应由基因的编码区编码；而启动子位于编码区上游的非编码区，所以启动子不编码起始密码子，A错误；

B；cDNA文库中不含有内含子；B错误；

C；c~d区为终止子区域；终止子可终止转录过程，因此在转录完成后，RNA聚合酶从c~d区段脱落下来，C正确；

D；DNA分子复制时形成的子代DNA与亲代DNA相同；不具有选择性，因此细胞内DNA复制时，即复制编码区，也复制非编码区，D错误。

故选C。7、D【分析】【分析】

核移植是指将供体细胞核移入除去核的卵母细胞中；使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。

【详解】

A、“中中”也会受到卵子b细胞质遗传物质的影响；A错误；

B；据图可知；图中利用了体细胞核移植技术，没有用到干细胞技术，B错误；

C；d为受体动物；能为胚胎发育提供发育环境，但不提供遗传物质，C错误；

D；a是成纤维细胞；“中中”的细胞核中的染色体来自于a细胞，故“中中”的染色体数目与a细胞相同，D正确。

故选D。二、多选题(共9题，共18分)8、A:B【分析】【分析】

分析图解：异种克隆大熊猫的培育首先通过核移植技术获得重组细胞；然后经过早期胚胎培养获得异种重构囊胚，再利用胚胎移植技术将重构囊胚移植如代孕兔体内。

【详解】

A；科学家通过对母兔注射促性腺激素；进行超数排卵处理以获得更多的卵母细胞，A错误；

B；异种重构囊胚在体外培养时；往往需要在培养液中加入抗生素，从而保证无毒无菌环境，B错误；

C；囊胚由滋养层细胞和内细胞团构成；其中滋养层细胞将来发育为胎盘和胎膜，内细胞团将来发育成胚胎的各种组织，C正确；

D；目前；异种重构囊胚在代孕兔的子宫内能正常着床，但是不能正常发育生产出大熊猫幼仔，很可能是代孕兔提供的营养物质不能让异种重构囊胚正常发育，D正确。

故选AB。

【点睛】9、A:B:C【分析】【分析】

一种限制酶只能识别一种核苷酸序列且在特定的位点对DNA分子进行切割；切割出的末端有黏性末端和平末端两种，具有相同黏性末端的DNA片段之间可以在DNA连接酶的作用下连接到一起。

【详解】

A；如果用BglⅡ和Sau3AI切割目的基因；目的基因两端将形成不同的黏性末端，同样用BglⅡ和Sau3AI切割Pl噬菌体载体也形成这两种相同的黏性末端，因此它们可构成重组DNA，A正确；

B；由于Sau3AI的切割位点在EcoRI的左侧；因此用EcoRI和Sau3AI切割目的基因，目的基因两端将形成不同的黏性末端，同样用EcoRI和Sau3AI切割Pl噬菌体载体也形成这两种相同的黏性末端，因此它们可构成重组DNA，B正确；

C；P1噬菌体载体为环状DNA；其上只含有一个EcoRI的切点，因此用EcoRI切割后，该环状DNA分子变为线性双链DNA分子，因每条链上含有一个游离的磷酸基团，因此切割后含有两个游离的磷酸基团，C正确；

D；从图甲看出；用EcoRI切割目的基因后两端各有一切口，与图乙中EcoRI切口对接时，可有两种可能，即可产生两种重组DNA，D错误。

故选ABC。10、A:C:D【分析】【分析】

用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。动物细胞培养过程中悬液中的细胞会很快贴附在瓶壁上。动物细胞培养的气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%CO2。“人造牛肉”的培养不仅产量高；并可以减少成本和降低环境污染。

【详解】

A；胰蛋白酶处理动物组织；可以使组织分散成单个细胞，利于动物细胞培养，A正确。

B、动物细胞培养的气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%CO2；B错误。

C；动物细胞培养过程中悬液中的细胞会很快贴附在瓶壁上。所以细胞贴附瓶壁的培养瓶或培养皿的内表面光滑；无毒，易于贴附，如果想得到大量的产物，可以增大细胞吸附面积，有利于细胞贴壁生长，C正确。

D；人造牛肉”的培养有利于牛肉的工厂化生产；同时也可减少对土地、饮用水和饲料的需求，且温室气体等其他环境污染物也会减少，D正确。

故选ACD。11、B:D【分析】【分析】

克隆是指生物体通过体细胞进行的无性繁殖；以及由无性繁殖形成的基因型完全相同的后代个体。通常是利用生物技术由无性生殖产生与原个体有完全相同基因的个体或种群。

【详解】

A；体细胞的分化程度比胚胎干细胞的分化程度高；与体细胞核移植技术相比，胚胎干细胞核移植技术更易成功，A错误；

B；在体细胞核移植过程中；用物理方法或化学方法（如电脉冲、钙离子载体、乙醇、蛋白质合成酶抑制剂等）激活受体细胞，使其完成细胞分裂和发育进程，B正确；

C；基因重组发生在有性生殖的生物进行减数分裂产生配子的过程中(狭义上的基因重组)以及基因工程技术中（包含在广义的基因重组内）；而细胞分裂、分化的过程一般不会发生基因重组，C错误；

D；体细胞核移植技术是无性繁殖；有望用于增加濒危动物的种群数量，D正确。

故选BD。12、A:B:D【分析】【分析】

分析题图：图中5支试管为梯度稀释；最后经稀释涂布平板法接种培养后进行计数。统计菌落数在30~300的平板，取其平均值，进行计数。计数公式为（C÷V）×M。（C为平均菌落数，V为涂布液体积，M为稀释倍数）。

【详解】

A；设置重复组；增强实验的说服力与准确性，故某一稀释度下至少涂3个平板。稀释涂布平板得到的菌落可能存在两个或多个细菌细胞长成一个菌落，使该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要低，A正确；

B、据图可知，将10g土样加入到90mL无菌水中定容至100mL后，此时土样稀释倍数为10倍，再经3次10倍稀释得到3号试管中的样品，故3号试管中样品的稀释倍数是104倍；B正确；

C、5号试管进行稀释涂布平板法计数的结果表明每克土壤中的菌株数为（168+175+167）÷3×106÷0.1≈1.7×109个；C错误；

D；要判断选择培养基是否起到选择作用；需设置接种了的牛肉膏蛋白胨培养基作对照，若牛肉膏蛋白胨培养基培养基上的菌落种类数目多于选择培养基上的菌落类型，则说明起到了选择作用，D正确。

故选ABD。13、A:B:D【分析】【分析】

1；生物武器是利用生物战剂杀伤人员、牲畜、毁坏植物的武器。生物武器又是生物制剂、载体和分散手段的综合利用。生物武器自诞生以来；给人类的生存安全构成了严重威胁。

2；转基因生物的安全性问题包括食物安全、生物安全和环境安全。

3；“治疗性克隆”将使人胚胎干细胞（简称ES细胞）造福于人类的一种非常重要的途径。治疗性克隆是指把患者体细胞移植到去核卵母细胞中构建形成重组胚胎；体外培养到一定时期分离出ES细胞，获得的ES细胞定向分化为所需的特定类型细胞（如神经细胞、肌肉细胞和血细胞），用于治疗。

【详解】

A；对待生物武器的态度应明确而坚定；即在任何情况下都不发展、不生产、不储存生物武器，坚决禁止生物武器，A正确；

B；转基因要注意基因安全；对外源DNA要进行认真选择，避免产生对人体有害的或过敏的蛋白质，B正确；

C；中国对于克隆人的态度是不反对治疗性克隆；禁止进行克隆人的实验，C错误；

D；一旦发现转基因生物出现了安全性问题；包括食品安全、生物安全和生态安全，要马上停止试验，并销毁重组生物，D正确。

故选ABD。14、A:C:D【分析】【分析】

疫苗研制已经发展了三代：

第一代疫苗指的是灭活疫苗和减毒活疫苗；通过体外培养病毒，然后用灭活的病毒刺激人体产生抗体，它是使用最为广泛的传统疫苗；

第二代疫苗又称为亚单位疫苗；是通过基因工程原理获得的具有免疫活性的病原特异性结构蛋白，刺激人体产生抗体；

第三代疫苗是核酸疫苗；又称基因疫苗，包括DNA疫苗和mRNA疫苗，其中DNA疫苗是将编码某一抗原蛋白的基因作为疫苗，注射到人体中，通过正常的人体生理活动产生抗原蛋白，诱导机体持续作出免疫应答产生抗体。

【详解】

A；该疫苗是基因重组疫苗；需要将腺病毒载体和新冠病毒的基因进行连接，所以该疫苗的制备需要用到限制性核酸内切酶和DNA连接酶，A正确；

B；受试者接受重组新冠病毒疫苗的接种后；体内能产生分泌特定抗体的浆细胞，B错误；

C；主要通过检测受试者体内新冠病毒抗体的含量来评价试验的有效性；C正确；

D；新冠肺炎康复患者体内产生了新冠病毒抗体和和相应的记忆细胞；可以不注射该疫苗，D正确。

故选ACD。15、A:C【分析】【分析】

1；基因工程的工具：①限制酶；能识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂；②DNA连接酶，连接两个核苷酸之间的磷酸二酯键；③运载体，质粒是最常用的运载体，除此之外，还有λ噬菌体衍生物、动植物病毒。

2；基因治疗：把正常的基因导入病人体内有缺陷的细胞中；使该基因的表达产物发挥功能，从而达到治疗疾病的目的。基因治疗分为体外基因治疗和体内基因治疗两种类型。

【详解】

A；根据题干信息“由一个向导RNA（sgRNA）分子引导Cas9蛋白到一个特定的基因位点进行切割”；再结合图解可知能够行使特异性识别DNA序列并切割特定位点功能的分子是向导RNA（sgRNA）分子和Cas9蛋白，其类似于基因工程中限制酶，作用的化学键是磷酸二酯键，A错误；

B；非基因编辑对象也可能含有与sgRNA配对的碱基序列；造成sgRNA选错对象与之错误结合而脱靶，sgRNA的序列长短影响成功率，序列越短，脱靶率越高，B正确；

C；染色体变异会引起基因的数目或排列顺序改变；利用此技术对目标基因部分DNA片段进行切除属于基因内部碱基对的改变，不改变基因的数目和排列顺序，故不属于染色体变异，C错误；

D；sgRNA的双链区域的碱基互补配对原则遵循的是DNA与RNA之间的配对关系；而目标基因的双链区域遵循的是DNA之间的配对方式，故两者不同，D正确。

故选AC。16、A:B:C【分析】【分析】

基因工程：目的基因的筛选与获取；构建基因表达载体、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。

分泌蛋白的合成：首先；在游离的核糖体中以氨基酸为原料开始多肽链的合成。当合成了一段肽链后，这段肽链会与核糖体一起转移到粗面内质网上继续合成过程，并且边合成边转移到内质网腔内，再经过加工；折叠，形成具有一定空间结构的蛋白质。内质网膜鼓出形成囊泡，包裹着蛋白质离开内质网，到达高尔基体，与高尔基体融合，高尔基体对蛋白质做进一步的加工，然后形成包裹着蛋白质的囊泡转运到细胞膜，与细胞膜融合。

【详解】

A；科研人员根据AmyS2的氨基酸序列设计并人工合成了AmyS2基因；因此获得AmyS2基因并将其导入芽孢杆菌得到AmyS2的过程是通过蛋白质工程和基因工程实现的，A错误；

B；BamHI会破坏AmyS2基因；B错误；

C；在分泌蛋白的合成过程中；信号肽序列可帮助肽链进入内质网，在内质网被切割，因此信号肽基因表达的产物可帮助核糖体上合成的AmyS2进入内质网，但不能引导其进入高尔基体，C错误；

D；可用PCR技术检测芽孢杆菌的DNA上是否插入了AmyS2基因；如果经过PCR扩增，不出现扩增产物，说明没有插入基因，反之，则成功插入，D正确。

故选ABC。三、填空题(共5题，共10分)17、略

【分析】【详解】

为最大程度的保障人类权益；签署了禁止生物武器公约：

（1）《禁止试制；生产和储存并销毁细菌（生物）和毒剂武器公约》；简称《禁止生物武器公约》。

（2）我国对于生物武器的态度是在任何情况下不发展、不生产、不储存生物武器，并反对生物武器及其技术和设备的扩散。【解析】①.《禁止生物武器公约》②.不发展③.不生产④.不储存18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】复合酶C1酶CX酶葡萄糖苷酶纤维二糖葡萄糖水解19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】沸水浴二苯胺蓝色二苯胺20、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】胰蛋白酶单个细胞细胞悬液原代传代21、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】茎尖极少或没有）胚状体人工薄膜不受季节的限制人工种皮；胚状体和人工胚乳。

（2）四、判断题(共4题，共32分)22、A【分析】【详解】

转基因生物可能会破坏生态平衡，特别是对生物多样性的影响。大自然经过亿万年的演化，各种生物相对处于一种和谐的生态平衡状态。但是，如果我们用转基因技术把某种生物人为地变得更加“强悍”，那其他物种就会衰败以至灭绝，故本题正确。23、A【分析】【详解】

制备单克隆抗体时，第一次筛选的目的是获得杂交瘤细胞，第二次筛选目的是获得能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，故正确。24、A【分析】【详解】

生物武器是利用生物战剂杀伤人员、牲畜、毁坏植物的武器。生物武器种类包括致病菌、病毒、生化毒剂以及经过基因重组的致病菌等。故该说法正确。25、B【分析】【详解】

来源于自然界的目的基因导入植物体后，可能破坏原有的基因结构，具有不确定性，外源基因也可能通过花粉传播，使其他植物成为“超级植物"等，所以如果转基因植物的外源基因来源于自然界，也可能存在安全性问题。本说法错误。五、实验题(共1题，共3分)26、略

【分析】【分析】

1；PCR扩增的过程是：目的基因DNA受热变性后解链为单链；引物与单链相应互补序列结合，然后在DNA聚合酶作用下进行延伸，如此重复循环多次。

2；构建基因表达载体过程时；目的基因应插在启动子和终止子之间才能正常表达。

【详解】

（1）PCR过程中每次循环两次升温（变性和延伸）和一次降温（复性）；其中降温（复性）的目的是让两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合。

（2）基因表达载体包括标记基因；目的基因；启动子和终止子，科学家在构建基因表达载体过程时，目的基因应插在启动子和终止子之间才能正常表达。单独使用限制酶HindⅢ切割目的基因和载体后，由于部分基因反向连接，导致携带CDKN2B基因的重组质粒成功导入细胞后，约一半的细胞中没有检测到CDKN2B蛋白。为了避免这种现象的发生，可以同时用两种酶进行切割，由于SmaⅠ会破坏CDKN2B基因，不能选用该酶切割，HindⅢ会破坏质粒的两种标记基因，不能选用该酶切，PstⅠ和EcoRⅠ能切下完整的CDKN2B基因，并不会破坏抗四环素基因基因，因此为了避免这种现象的发生，可以同时用PstⅠ、EcoRⅠ分别对目的基因和载体进行酶切。

（3）来自同一个胚胎的后代具有相同的遗传物质；因此要让一个受精卵发育成多个个体，可采用胚胎分割技术，然后经移植获得多胎。分割时应注意将囊胚的内细胞团均等分割。

【点睛】

本题考查基因工程和胚胎分隔技术相关知识，掌握基因工程和胚胎分割操作步骤是解决本题的关键。【解析】让两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合启动子终止子部分基因反向连接同时用PstⅠ、EcoRI分别对目的基因和载体进行酶切胚胎分割将囊胚的内细胞团均等分割六、综合题(共3题，共24分)27、略

【分析】【分析】

酵母菌是一种单细胞真菌；在有氧和无氧环境下都能生存，属于兼性厌氧菌。

【详解】

（1）酵母菌在有氧和无氧条件下都能生存；呼吸类型为兼性厌氧型；培养基的基本成分包括水；碳源、氮源和无机盐等，因此研究所用的选择培养基需要添加上述四种物质；摇床能使酵母菌充分接触营养物质，有利于酵母菌对营养物质的利用，同时能提供更多的氧气，以促进酵母菌的增殖，因此摇床培养能加速酵母菌的繁殖。

（2）首先计算三个平板的平均菌落数为（251+265+276）/3=264，实验人员采用梯度稀释法将菌种稀释了105倍，涂布平板时使用了0.1mL，此时是106倍，求没10mL酵母菌悬液，所以最终是107倍，因此每10mL含有的酵母菌个数为264107，即2.64109；计算紫外线诱变的致死率设计对照试验；应保证实验的唯一变量是紫外线的有无，因此对照试验的处理方式为将等量的未接受紫外线照射的菌液接种在牛肉膏蛋白胨培养基上。

（3）制作果酒需要严格密封，密封不严导致醋酸菌繁殖，从而使乙醇转化为醋酸，最终引起果酒变酸；抗生素的作用在于防止杂菌污染。【解析】(1)兼性厌氧水、氮源、碳源和无机盐摇床培养能使营养物质充分和酵母菌接触，有利于酵母菌对营养物质的利用；为培养液提供更多的氧气，有利于酵母菌的有氧呼吸，以促进酵母菌的增殖

(2)2.64×109将等量的未接受紫外线照射的菌液接种到牛肉膏蛋白胨培养基上。

(3)密封不严，导致醋酸菌繁殖，将乙