2025年人教版选修1生物下册月考试卷含答案

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A.3号试管的稀释倍数为103倍B.5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1.7×108个C.5号试管中稀释液进行平板培养得到的菌落平均数恰为4号试管的10倍D.该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要高2、下列关于腐乳制作原理的叙述，错误的是（）A.腐乳制作实质就是利用发酵技术，将大分子有机物分解为小分子有机物的过程B.腐乳发酵中，起作用的微生物多为异养型真菌C.在腐乳制作过程中，不能有除毛霉外的杂菌参与，因此必须严格灭菌D.家庭自制腐乳时，一般不需单独接种菌种3、下列有关果胶酶及与果胶酶实验探究的有关叙述正确的是（）A.探究果胶酶的用量时，pH、温度不影响实验结果B.果胶酶包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和葡萄糖异构酶等C.探究温度对果胶酶活性影响时，温度、果胶酶用量及反应时间等都是无关变量D.可以用相同时间内过滤得到的果汁体积来确定果胶酶的用量4、下列关于刚果红染色法的说法中，正确的是A.先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应，不需用氯化钠溶液洗去浮色B.倒平板时就加入刚果红，可在培养皿中先加入lmlCR溶液后加入100ml培养基C.培养基中出现透明圈的原因是因为纤维素被分解为葡萄糖导致的D.倒平板时就加入刚果红，长期培养刚果红有可能被其他微生物分解形成透明圈5、如图所示实验中，可被用来检验两种抗生素的杀菌作用的是（图中文字表示培养基中添加的物质或生物）（）A.B.C.D.6、下图为某同学设计的胡萝卜素的鉴定装置及预期结果示意图，下列相关叙述错误的是（）

A.该鉴定方法的鉴定原理是不同色素在液体③中的溶解度不同B.图甲中①为U形扣，能维持滤纸呈圆柱状且防止滤纸边缘接触C.若该同学按图甲操作，能得到图乙所示结果D.图乙中b的出现说明萃取的胡萝卜素中混有其他色素7、下列所述环境条件下的微生物，能正常生长繁殖的是（）A.在人体表皮擦伤部位的破伤风杆菌B.在新配制的植物矿质营养液中的酵母菌C.在缺乏生长素的无氮培养基中的圆褐固氮菌D.在灭菌后的动物细胞培养液中的禽流感病毒8、如图表示果酒和果醋制作过程中的物质变化过程；下列叙述正确的是（）

A.过程①和②都发生在细胞质基质，过程③和④都发生在线粒体中B.醋酸发酵是否产生醋酸，可用pH试纸来检验C.过程③和④不都需要氧气的参与D.过程①～④所需的最适温度基本相同9、某科学兴趣小组计划从血红蛋白的成分是否变化来开展镰刀型细胞贫血症研究性学习。下列是该小组成员获得纯度很高的血红蛋白的实验过程，不正确的一项是（）A.对红细胞进行洗涤，在加入蒸馏水和甲苯使红细胞破裂释放出血红蛋白后，将混合液静置于一段时间后分层获得血红蛋白溶液B.将血红蛋白溶液装入透析袋中透析，可达到粗分离的目的C.利用凝胶色谱操作对血红蛋白进行纯化D.使用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法进行纯度鉴定，以获得纯度很高的血红蛋白评卷人得分二、多选题(共7题，共14分)10、图1表示制备固定化酵母细胞的有关操作；图2是利用固定化酵母细胞进行酒精发酵的示意图。下列叙述正确的是。

A.刚溶化的海藻酸钠应迅速与活化的酵母菌混合制备混合液B.图1中X溶液为CaCl2溶液，其作用是使海藻酸钠形成凝胶珠C.图2发酵过程中搅拌的目的是为了使培养液与酵母菌充分接触D.图1中制备的凝胶珠用蒸馏水洗涤后再转移到图2装置中11、一些真菌中的漆酶可以分解油漆中的许多有机污染物，漆酶可以氧化愈创木酚，产生红棕色物质，因此根据真菌生长过程中培养基的颜色变化，可以挑选出具有潜在漆酶活性的土壤真菌。下列叙述正确的是（）A.含有愈创木酚的平板培养基属于选择培养基B.对培养基进行灭菌的方法是高压蒸汽灭菌法C.倒置平板培养可防止培养基被滴落的冷凝水污染D.制备培养基的步骤依次是溶化、灭菌、定容、倒平板12、为了使牛仔裤呈现“穿旧”效果；在工业洗衣机中用酶洗代替传统的浮石擦洗，是目前重要的生产手段（工艺流程见下图）。下列叙述中错误的是。

A.纤维素酶在仿旧中的作用机理与其在洗衣粉中去污的机理相似B.在上述工艺中，为重复使用纤维素酶，可选用适当的包埋剂固定化酶C.在上述工艺中，通过调节温度、酸碱度、处理时间可控制仿旧颜色的深浅D.纤维素酶催化葡萄糖残基间磷酸二酯键的水解分解纤维素13、如图是围绕加酶洗衣粉洗涤效果进行的研究结果；下列有关叙述，正确的是（）

A.两类洗衣粉的最佳使用温度都为t1B.温度超过t2后加酶洗衣粉中的酶可能失活C.本研究的自变量分别是温度和洗衣粉是否加酶D.图中的纵坐标可以是污渍的残留量14、马奶酒是“蒙古八珍”之一，其中发酵型奶酒是利用某些微生物将马奶中的乳糖水解成单糖1和单糖2，酵母菌再利用这些单糖发酵产生酒精，从而制成马奶酒。科研人员研究分别利用野生型酵母菌和马奶酒中酵母菌的发酵情况，结果如下图所示。下列有关叙述正确的是（）

A.乳糖属于二糖，其元素组成是H、OB.14~16h时，野生型酵母菌内可能正在进行单糖2发酵相关基因的表达C.与野生型酵母菌相比，马奶酒中酵母菌完成酒精发酵用时更短D.在发酵过程中，两种类型的酵母菌细胞内均存在[H]的积累15、如图为苹果酒的发酵装置示意图；下列叙述错误的是（）

A.发酵过程中酒精的产生速率越来越快B.集气管中的气体是酵母菌无氧呼吸产生的CO2C.发酵过程中酵母种群呈“J”型增长D.若发酵液表面出现菌膜，最可能原因是发酵瓶漏气16、下列关于中学“腐乳的制作”实验，叙述正确的是（）A.加盐主要是为了调节水分，利于毛霉生长B.勤向腐乳坯表面喷水，有利于毛霉菌丝的生长C.将长满毛霉的豆腐块放在瓶中，并逐层加盐，接近瓶口表面的盐要铺厚一些D.实验室制作的腐乳不宜直接食用评卷人得分三、填空题(共6题，共12分)17、纯度鉴定——SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳。

判断________的蛋白质是否达到要求，需要进行蛋白质纯度的鉴定。鉴定方法中使用最多的是____________。18、红细胞的洗涤。

①目的：去除________。

②方法：采用________离心，如500r·min－1离心2min，然后用胶头吸管吸出上层透明的黄色______，将下层______的红细胞液体倒入______，再加入五倍体积的________，缓慢搅拌________，低速短时间离心，如此重复洗涤三次，直至上清液中没有______，表明红细胞已洗涤干净。19、洗涤次数过少，无法除去____________；离心速度过高和时间过长会使___________等一同沉淀，达不到分离效果。20、在缺水状态下，微生物处于__________状态。__________就是让处于____________状态的微生物重新恢复___________的生活状态。21、分离血红蛋白溶液时，从上往下数，第___层血红蛋白水溶液。22、血红蛋白的释放。

将洗涤好的红细胞倒入烧杯中，加________到________体积，再加40%体积的______，置于磁力搅拌器上充分搅拌10min。在________和________的作用下，红细胞______，释放出血红蛋白。评卷人得分四、非选择题(共4题，共12分)23、下图为果酒的生产工艺流程简图；据图回答问题。

选料→冲洗→①→灭菌→接种→发酵→②→果酒。

（1）流程中①；②处的内容应为___________、___________。

（2）果酒制作离不开___________；与醋酸菌相比，前者在结构上的主要特点是___________。

（3）果酒制作过程中；接种完成后要先向发酵液中通入一段时间的无菌空气，目的是___________。

（4）果酒制作是否成功；需发酵后用____溶液来鉴定，该物质与酒精反应呈现___________色。

（5）若是制作果醋时，需要在___________供应和糖源充足时，醋酸菌将糖分解成醋酸；在糖源不充足时，也可以利用___________生成醋酸。24、成都七中的生物兴趣小组在寒假以“蛋白质的提取和分离”和“泡菜中亚硝酸盐含量的测定”为课题进行了研究性学习。分析并回答以下问题：

(1)样品处理中红细胞的洗涤要用____反复冲洗；离心。影响红细胞洗涤效果的因素包括___________。

(2)血红蛋白粗分离阶段,透析的目的是_______,若要尽快达到理想的透析效果,可以________(写出一种方法)。

(3)蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶电泳中的迁移率主要取决于__________因素。

(4)装填凝胶色谱柱时,要注意色谱柱内不能有气泡存在,一旦发现气泡必须重装。这是因为__________。

(5)亚硝酸盐的定量测定可以用______法,在制备样品处理液过程中加入氢氧化铝乳液的作用是___________。25、猕猴桃是人们非常喜爱的一种水果，不仅可以直接食用，还可以对其进行深加工，制成猕猴桃果汁、果酒等。如图为生产猕猴桃果汁和果酒的流程示意图，回答下列问题。

（1）在生产猕猴桃汁的流程中，为了提高出汁率和澄清度，可在压榨前加入一定量的果胶酶处理1小时。果胶酶包括_____等，其作用是_____。

（2）猕猴桃汁在保藏期的某阶段会产生酚类物质导致果汁褐变或二次浑浊，后来人们发现，漆酶能有效降解酚类物质，使果汁澄清。将漆酶应用于果汁澄清的过程中，可采用_____法固定该酶。而细胞的固定化则多采用_____法，原因是_____。

（3）制作好的果汁也可继续用于猕猴桃酒的生产。在进行发酵前需要在猕猴桃汁中接入的菌种从细胞结构上看是_____细胞。同时添加适量蔗糖，从微生物所需营养分析，其主要目的是_____。

（4）主体发酵结束后，需将上层“酒液”转移到另一灭菌容器中进行后续贮藏，此时要防止“酒液”变酸以保证果酒品质。使“酒液”变酸的微生物的发酵条件与果酒制作的发酵条件不同的是_____。26、请回答下列蛋白质的提取和分离实验相关问题：

（1）凝胶色谱法是根据_________________分离蛋白质的有效方法。

（2）蛋白质的提取和分离实验中洗涤红细胞的目的______________________________。

（3）重复洗涤三次；直至____________________，表明红细胞已洗涤干净。在该过程中离心速度过高和时间过长会导致___________________________。

（4）在凝胶色谱柱装填时不得有气泡存在；原因为气泡会________________________。在操作中不能发生洗脱液流干漏出凝胶颗粒的现象，如果发生则___________________。

（5）在蛋白质的分离过程中如果观察到__________________________________，说明色谱柱制作成功。评卷人得分五、综合题(共4题，共32分)27、金属硫蛋白（MT）是一类广泛存在的金属结合蛋白，某研究小组计划通过多聚酶链式反应（PCR）扩增获得目的基因，构建转基因工程菌，用于重金属废水的净化处理。PCR扩增过程示意图如下，请回答下列问题：

（1）从高表达MT蛋白的生物组织中提取mRNA，通过______________获得______________用于PCR扩增。

（2）设计一对与MT基因两端序列互补配对的引物（引物1和引物2），为方便构建重组质粒，在引物中需要增加适当的______________位点。设计引物时需要避免引物之间形成______________；而造成引物自连。

（3）图中步骤1代表______________；步骤2代表退火，步骤3代表延伸，这三个步骤组成一轮循环。

（4）PCR扩增时，退火温度的设定是成败的关键。退火温度过高会破坏_________的碱基配对。退火温度的设定与引物长度、碱基组成有关，长度相同但____________的引物需要设定更高的退火温度。

（5）如果PCR反应得不到任何扩增产物，则可以采取的改进措施有___________（填序号：①升高退火温度②降低退火温度③重新设计引物）。28、甘蔗既是人们喜爱的一种食品；又是制取蔗糖的重要原材料。甘蔗渣用途广泛，除用作燃料；造纸等之外，近年来研究人员还发现有其他经济价值。回答下列问题：

(1)甘蔗渣中含有一种多酚类物质，该物质具有预防鸡和鸡蛋感染沙门氏菌的作用，因而能够降低鸡的死亡率。该物质可用萃取法提取。萃取前需将原料干燥和粉碎，干燥和粉碎目的是___，萃取效率主要取决于萃取剂的___。

(2)为了解甘蔗渣中微生物的数量，称取1g甘蔗渣样品，转入99mL无菌水中，经梯度稀释后，获得细胞密度不同的菌悬液。分别取0.1mL菌悬液涂布在固体培养基上，其中10倍稀释的菌悬液培养后平均长出了32个菌落，每克甘蔗渣中微生物数量为___个。

(3)甘蔗渣中富含纤维素，人们发现醋酸菌也能合成纤维素，因此筛选优良菌株可以用于工业化生产细菌纤维素。制备醋酸菌初筛平板时，需要将培养基的pH调至___性，灭菌后须在未凝固的培养基中加入无菌碳酸钙粉末、充分混匀后倒平板，加入碳酸钙的目的是___。培养筛选得到的醋酸菌时，在缺少糖源的液体培养基中可加入乙醇作为___。

(4)甘蔗渣堆积过程中会积累某些兼性厌氧型乳酸菌。初筛醋酸菌时，乳酸菌有可能混入其中，且两者菌落形态相似。请设计一个简单实验，区分筛选平板上的醋酸菌和乳酸菌。(简要写出实验步骤和预期结果)___。29、自生固氮菌是土壤中能独立固定空气中N2的细菌；将玉米种子用自身固氨菌拌种后播种，可显著提高产量并降低化肥的使用量。科研人员进行了土壤中自生固氮菌的分离和固氮能力测定的研究，部分实验流程如下图。请回答：

(1)步骤①土样应取自当地____________（填“表层”或“深层”）土壤；步骤②需充分振荡20min，主要目的是____________。

(2)步骤③将土壤悬浮液稀释了____________倍，步骤④所用的接种工具是____________。

(3)下表为两种培养基的配方，步骤④应选其中的____________培养基，并加入琼脂后进行高压蒸汽灭菌、倒平板。纯化培养时，需同时进行未接种培养基的培养，目的是_______。

Ashby培养基：甘露醇（C6H14O6）10g，KH2PO40．2g，MgSO4·7H2O0．2g，NaCl0．2g，K2SO40．3g，CaCO35g；蒸馏水1000mL。

LB培养基：蛋白胨1g；酵母提取物5g，NaCl5g，蒸馏水1000mL，pH7．0-7．2

(4)将纯化的固氮菌置于完全培养液中扩大培养48小时；经离心后收集下层细胞并转移至特定培养基中进行固氮能力的测定，筛选出固氮能力最强的菌种CM12为进一步鉴定其固氮，科研人员选用发芽一致的玉米种子进行3组盆栽实验，30d后测定土壤微生物有机氮含量，结果如下图。

CK：对照处理组。

N：尿素处理组（每盆土壤中50mL有全营养液：成份为在1000mL无氮植物营养液中加入0．12g尿素）

CM12：自生固氮菌CM12处理组（每盆土壤浇50mL接种自身固氮菌的无氮植物营养液）

①对照组（CK）的处理为____________。

②实验结果表明：施用尿素处理和接种固氮菌CM12处理均能显著增加土壤微生物有机氮含量。与尿素处理组相比，CM12处理组土壤微生物有机氮含量增加了约____________%。

③自生固氨菌较共生固氮菌（如根瘤菌）的应用范围更广，原因是____________。30、血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分，负责血液中O2和CO2的运输；可以选用猪；牛、羊或其他哺乳动物的血液来分离血红蛋白。据图回答下列问题。

(1)采集血液样本后，为防止血液凝固，需要加入__________等抗凝剂；采集的血样要及时进行血细胞的分离，分离时采用__________离心；分离出的红细胞用__________洗涤干净。

(2)图1中，液体A为__________，液体B为__________；该操作的目的是__________。

(3)图2中操作的正确顺序为__________（填标号）。

(4)图3为样品进行SDS一聚丙烯酰胺凝胶电泳的结果图，若将该样品放在凝胶色谱柱中，先流出的是__________（填“a”或“b”），电泳中标准蛋白的作用是__________。参考答案一、选择题(共9题，共18分)1、B【分析】3号试管的稀释倍数为104倍，A错误；5号试管进行稀释涂布平板法计数的结果表明每克土壤中的菌株数为（168+175+167）÷3×105×10=1.7×108个；B正确；5号试管中稀释液进行平板培养，稀释倍数比4号的低10倍，如果稀释倍数适当，得到的菌落平均数可能是5号的10倍，C错误；稀释涂布平板得到的菌落可能存在两个或多个细菌细胞长成一个菌落，使该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要低，D错误。

【点睛】本题主要考查尿素分解菌的筛选与分离过程的稀释与计数，意在强化学生对相关知识点的理解与运用。2、C【分析】【分析】

1；多种微生物参与了豆腐的发酵；如青霉、酵母、曲霉、毛霉等，其中起主要作用的是毛霉。2、腐乳制作的原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸。

【详解】

A；腐乳制作实质就是利用发酵技术；将大分子有机物分解为小分子有机物的过程，可将蛋白质分解为小分子的肽和氨基酸，将脂肪分解为甘油和脂肪酸，A正确；

B；腐乳发酵中；起作用的微生物多为异养型真菌，如毛霉、青霉、酵母菌和曲霉，B正确；

C；腐乳的制作过程中多种微生物参与了豆腐的发酵；如青霉、酵母、曲霉、毛霉等，其中起主要作用的是毛霉，家庭自制腐乳不需要严格灭菌，C错误；

D；家庭自制腐乳时；一般不需单独接种菌种，如毛霉来自空气中的毛霉孢子，D正确。

故选C。3、D【分析】【分析】

果胶酶包括多聚半乳糖醛酸酶；果胶分解酶和果胶酯酶等；探究果胶酶的用量时；实验的变量是果胶酶的用量，据此答题。

【详解】

A；探究果胶酶的用量时；pH、温度会影响实验结果，pH、温度要相同且适宜，A错误；

B；果胶酶包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶等；B错误；

C；探究温度对果胶酶活性影响时；温度是自变量，而果胶酶用量及反应时间等都是无关变量，C错误；

D；可以用相同时间内过滤得到的果汁体积来确定果胶酶的用量；D正确。

故选D。4、D【分析】【详解】

常用的刚果红染色法有两种：一是先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应，此种方法需用氯化钠溶液洗去浮色，二是在倒平板时就加入刚果红，此种方法则不需要用氯化钠溶液洗去浮色，A错误；倒平板时就加入刚果红，可在培养皿中先加入10mg/mLCR溶液，灭菌后，按照每200mL培养基加入1ml的比例加入CR溶液，B错误；在含有纤维素的培养基中加入刚果红时，刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红-纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，C错误；倒平板时就加入刚果红，由于有些微生物能降解色素，长期培养刚果红有可能被其他微生物分解而形成透明圈，D正确。5、C【分析】【分析】

设计实验应该遵循对照原则；等量原则、单一变量原则等；实验应该设计不添加任何抗生素（添加等量无菌水）的对照组，以证明实验组中的抗生素是否具有杀菌作用，还应设计添加了不同抗生素的两个实验组，相互对照可判断两者杀菌作用的强弱。

【详解】

A；没有对照组；A错误；

B；“无细菌”组不是对照组；根据单一变量原则，应该控制无关变量相同且适宜，自变量是是否添加抗生素，每组培养基上的细菌是无关变量，每组中的实验生物的状态应该基本相同，所以对照组是有细菌的，B错误；

C；“只有细菌”组没有添加抗生素（添加等量无菌水）；为对照组，“抗生素A+细菌”和“抗生素B+细菌”为两个实验组，C正确；

D；没有对照组；注意“只有抗生素A”和“只有抗生素B”不是对照组，D错误。

故选C。

【点睛】

自变量是人为控制的变量，如本题的自变量为是否添加了抗生素，因变量是随自变量改变而变化的变量，如细菌生长的数量，其他的为无关变量，应该控制无关变量相同且适宜，如各组培养基上细菌的初始数量应该相同，同时每组添加的抗生素（或无菌水）的量应该相同。6、C【分析】【分析】

由于不同色素在层析液中溶解度不同可利用纸层析法将色素分开；溶解度越大在滤纸上扩散的速度越快，溶解度越小在滤纸上扩散的速度越慢。

【详解】

A；液体③为层析液；由于不同色素在层析液中溶解度不同可利用纸层析法将色素分开，溶解度越大在滤纸上扩散的速度越快，溶解度越小在滤纸上扩散的速度越慢，A正确；

B；图甲中①为U形扣；能固定滤纸呈圆柱的形状，且防止滤纸边缘接触影响实验结果，B正确；

C；图甲中层析液没过了样品原点；最终得到的结果不会有层析带的出现，C错误；

D、图乙中ABCD为4个点样点，由于不同色素在层析液中溶解度不同，图中a应为胡萝卜素，b应该为其他色素，图乙中b的出现说明萃取的胡萝卜素中混有其他色素；D正确。

故选C。7、C【分析】【分析】

破伤风杆菌为异养厌氧型，酵母菌为异养兼性厌氧型，圆褐固氮菌为异养需氧型，

其具有较强的固氮能力；并且能够分泌生长素，促进植株的生长和果实的发育。

【详解】

A、破伤风杆菌为厌氧菌，无法在表皮擦伤部位正常生长繁殖，A错误；

B、酵母菌属于异养型生物，无法在植物矿质培养液中生长繁殖，B错误；

C、圆褐固氮菌属于自生固氮菌，可以在缺乏生长素的无氮培养基中生长繁殖，C正确；

D、禽流感病毒需要寄生在活细胞中，不能用动物细胞培养液培养，D错误。

故选C。8、B【分析】分析题图：图示表示果酒和果醋制作过程中的物质变化过程；其中①表示细胞呼吸的第一阶段；②表示无氧呼吸的第二阶段（果酒发酵）；③表示有氧呼吸的第二和第三阶段；④表示醋酸发酵过程。

【详解】

A；过程①是细胞呼吸的第一阶段；过程②是无氧呼吸的第二阶段，细胞呼吸的第一阶段以及无氧呼吸均发生在细胞质基质中，过程③是有氧呼吸的第二、三阶段，发生在线粒体中，而过程④为果醋制作过程，醋酸菌为需氧型细菌，属于原核生物，没有线粒体，A错误；

B；果醋制作过程中；可以通过品尝或用pH试纸检验是否产生醋酸，B正确；

C；过程③表示有氧呼吸的第二和第三阶段；其中第三阶段需要氧气的参与，过程④表示果醋发酵，由于醋酸菌是嗜氧菌，因此该过程也需要氧气的参与，C错误；

D；过程①②③是酵母菌的呼吸作用；所需的最适温度基本相同（18～25℃），过程④是醋酸菌的酿醋过程，所需的最适温度在30～35℃，故过程①～④所需的最适温度不相同，D错误。

故选B。

【点睛】9、A【分析】【分析】

血红蛋白的提取和分离：

1；样品处理：洗涤；用生理盐水洗涤，低速离心，直至上清液中没有黄色；

2；血红蛋白释放：加入蒸馏水和甲苯；细胞破碎释放血红蛋白；

3；分离：低速离心；分成4层，第三层红色透明液体为血红蛋白水溶液层，分出该层；

4；透析：放入透析袋；出去分子量较小的杂质；

5；过凝胶色谱柱收集纯蛋白；

6；SDS检测。

【详解】

A；蒸馏水可以使细胞吸水膨胀破裂；甲苯可以溶解细胞膜，有利于血红蛋白的释放，对红细胞进行洗涤，在加入蒸馏水和甲苯使红细胞破裂释放出血红蛋白后，混合液中需要离心分层才能获得血红蛋白溶液，A错误；

B；透析的原理是分子量小的物质自由出入透析袋；而大分子的血红蛋白留在袋内，这样出去分子量小的杂质，将血红蛋白溶液进行透析，其目的是去除相对分子质量较小的杂质，达到粗分离的目的，B正确；

C；在凝胶色谱柱内；相对分子质量较大的蛋白质不能进入凝胶内，路程短，移动速度快；而相对分子质量较小的蛋白质会进入凝胶内，路程长，移动速度慢，最后洗脱出来的是相对分子质量较小的蛋白质，可以对血红蛋白进行纯化，C正确；

D；SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法是蛋白质纯化鉴定使用最多的方法；SDS消除了净电荷对迁移率的影响，加入SDS可以使蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率完全取决于分子的大小，D正确。

故选A。二、多选题(共7题，共14分)10、B:C:D【分析】【分析】

制作固定化酵母细胞的实验步骤：1、酵母细胞的活化；2、配制0.05mol/L的CaCl2溶液；3；配制海藻酸钠溶液（该实验成败的关键步骤）；4、海藻酸钠溶液与酵母细胞混合；5、固定化酵母细胞。

【详解】

A；溶化的海藻酸钠应冷却至室温后与活化的酵母菌混合；A错误；

B、海藻酸钠与酵母菌混合液应滴入CaCl2溶液中；以制备凝胶珠，B正确；

C；搅拌可使酵母菌与培养液充分接触；有利于发酵的顺利进行，C正确；

D；凝胶珠用蒸馏水冲洗2～3次后；再转移到发酵装置中，D正确。

故选BCD。11、A:B:C【分析】【分析】

1；选择培养基是指根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基；使混合菌样中的劣势菌变成优势菌，从而提高该菌的筛选率。

2；制备固体培养基的基本过程为计算、称量、溶化、定容、灭菌、倒平板。

【详解】

A；从功能上分析；含有愈创木酚的平板培养基可用于筛选具有潜在漆酶活性的土壤真菌，属于选择培养基，A正确；

B；对培养基进行灭菌时；应采用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌，B正确；

C；平板冷凝后皿盖上会凝结水珠；凝固后的培养基表面的湿度也比较高，若将平板倒置培养，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染，C正确；

D；制备培养基的步骤是：计算、称量、溶化、定容、灭菌、倒平板；D错误。

故选ABC。

【点睛】12、B:D【分析】【详解】

试题分析：在仿旧和去污中；纤维素酶均作用于衣物，二者作用相似，A项正确；由于纤维素酶较小，不能用包埋法固定化酶，B项错误；改变温度；酸碱度和处理时间均会影响酶作用的结果，控制仿旧颜色的深浅，C项正确；纤维素酶催化葡萄糖残基之间的糖苷键水解分解纤维素，D项错误。

考点：酶的应用13、B:C:D【分析】【分析】

1；加酶洗衣粉是指含有酶制剂的洗衣粉；目前常用的酶制剂有四类：蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶，其中，应用最广泛、效果最明显的是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶。

2；影响加酶洗衣粉洗涤效果的因素有水温、水量、水质、洗衣粉的用量；衣物的质料、大小及浸泡时间和洗涤的时间等。在这些因素中，水温是要研究的对象，而其他因素应在实验中保持不变。

3；据图分析：该实验的自变量是温度和洗衣粉的种类；因变量是洗衣粉的去污效果。

【详解】

A、加酶洗衣粉的最佳使用温度都为t1，而普通洗衣粉在t1时的洗涤效果没有t2时好；A错误；

B、由于温度过高，加酶洗衣粉中的酶可能失活，由图可知，温度超过t2后加酶洗衣粉中的酶可能失活；B正确；

C；图中曲线显示本实验的自变量有温度和洗衣粉的种类；即洗衣粉是否加酶，C正确；

D；本实验研究的因变量可能是污渍的残留量或污渍消失所需的时间长短等；D正确。

故选BCD。

【点睛】14、A:B:C【分析】【分析】

据图可知；野生型酵母菌首先利用单糖1进行发酵，当这种糖耗尽时（14h左右），酒精产量的增加停滞一段时间，才开始利用单糖2进行发酵。

【详解】

A；乳糖是由1分子半乳糖和1分子葡萄糖构成的二糖；其元素组成是C、H、O，A正确；

B；据图可知；野生型酵母菌首先利用单糖1进行发酵，当这种糖耗尽时（14h左右），酒精产量的增加停滞一段时间，才开始利用单糖2进行发酵。故14~16h时，野生型酵母菌内可能正在进行单糖2发酵相关基因的表达，以促进对单糖2的利用，B正确；

C；由图可知；野生型酵母菌完成酒精发酵用时大约22h，马奶酒中酵母菌完成酒精发酵用时大约14h，即马奶酒中酵母菌完成酒精发酵用时更短，C正确；

D、在酵母菌酒精发酵过程中，[H]与丙酮酸反应生成酒精和CO2；因此两种类型的酵母菌内均不存在[H]的积累，D错误。

故选ABC。15、A:B:C【分析】【分析】

【详解】

A；酵母菌首先进行有氧呼吸；而后进行无氧呼吸，发酵过程中由于营养物质的减少、有害代谢产物的积累，pH的改变，酒精的产生速率逐渐减慢，A错误；

B、集气管中的气体是酵母菌有氧呼吸和无氧呼吸产生的CO2；B错误；

C；发酵过程中酵母种群呈“S”型增长；而后减少，C错误；

D；若酵液表面出现菌膜；属于醋酸菌，需氧型微生物，可能是发酵瓶漏气引起的，D正确。

故选ABC。

【点睛】16、C:D【分析】【分析】

腐乳是用豆腐发酵制成；多种微生物参与发酵，其中起主要作用的是毛霉。毛霉是一种丝状真菌具发达的白色菌丝。毛霉等微生物产生的以蛋白酶为主各种酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸。

【详解】

A；加盐主要是为了抑制微生物生长；防止豆腐腐败变质，A错误；

B；勤向腐乳坯表面喷水；会导致豆腐含水量过高，不利于毛霉菌丝的生长，B错误；

C；加盐腌制时；为防止污染，将长满毛霉的豆腐块分层整齐地摆放在瓶中，同时逐层加盐，随着层数的加高而增高盐量，接近瓶口表面的盐要铺厚一些，C正确；

D；实验室制作的腐乳可能灭菌不彻底；不宜直接食用，D正确。

故选CD。三、填空题(共6题，共12分)17、略

【分析】【详解】

血红蛋白的提取和分离一般可分为四步：样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定。通过样品处理收集到血红蛋白溶液，通过粗分离除去小分子杂质，通过纯化除去相对分子质量大的蛋白质，判断纯化的蛋白质是否达到要求，常通过SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。【解析】纯化SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳18、略

【分析】【详解】

①红细胞含有大量血红蛋白；故红细胞的洗涤需要去除杂蛋白。

②方法：采用低速短时间离心，如500r·min－1离心2min，然后用胶头吸管吸出上层透明的黄色血浆，将下层暗红色的红细胞液体倒入烧杯，再加入五倍体积的生理盐水，缓慢搅拌10min，低速短时间离心，如此重复洗涤三次，直至上清液中没有黄色，表明红细胞已洗涤干净。【解析】杂蛋白低速短时间血浆暗红色烧杯生理盐水10min黄色19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】血浆蛋白白细胞20、略

【解析】①.休眠②.活化③.休眠④.正常21、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】322、略

【分析】【详解】

血红蛋白的释放。

将洗涤好的红细胞倒入烧杯中，加蒸馏水到原血液体积，再加40%体积的甲苯，置于磁力搅拌器上充分搅拌10min。在蒸馏水和甲苯的作用下，红细胞裂，释放出血红蛋白。【解析】蒸馏水原血液甲苯蒸馏水甲苯破裂四、非选择题(共4题，共12分)23、略

【分析】试题分析：果酒生产的工艺流程为：选料→冲洗→粉碎→灭菌→接种→发酵→过滤→果酒；所以题中①表示粉碎，②表示过滤。

（1）根据以上分析已知；流程中①；②处分别为粉碎、过滤。

（2）果酒制作离不开酵母菌；为真核生物，而醋酸菌为原核生物，两者的主要区别是酵母菌含有核膜包被的成形的细胞核。

（3）果酒制作过程中；接种完成后要先向发酵罐中通入一段时间的无菌空气，目的是在有氧条件下，使酵母菌迅速繁殖，增加酵母菌数量，有利于后期发酵。

（4）酸性条件下；重铬酸钾与酒精反应呈现灰绿色。

（5）醋酸菌在糖源和氧气充足时，能将葡萄糖分解成醋酸；当糖源不足时，醋酸菌可将酒精变成乙醛，再将乙醛最终转变成醋酸。【解析】粉碎过滤酵母菌有核膜包被的细胞核在有氧条件下，使酵母菌迅速繁殖，增加数量酸性重铬酸钾灰绿氧气酒精24、略

【分析】【分析】

蛋白质的提取和分离一般分为四步：样品处理；粗分离、纯化和纯度鉴定。在样品处理时；红细胞的洗涤要用生理盐水反复冲洗、离心，洗涤的目的是去除杂蛋白，以利于后续步骤的分离纯化。血红蛋白粗分离的目的是通过透析法去除血红蛋白溶液中相对分子质量较小的杂质；若要尽快达到理想的透析效果，可以采用的方法是加大缓冲液的量或及时更换缓冲液。电泳利用了待分离样品中各种分子的带电性质以及分子大小、形状等的差异，在电泳过程中会产生不同的迁移速度，从而实现各种分子的分离。凝胶色谱法分离蛋白质的原理：凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小来分离蛋白质的有效方法，相对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程长，移动的速度慢，相对分子质量大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道，路程短，移动的速度快，因此相对分子质量不同的蛋白质得以分离，在装填凝胶色谱柱时，凝胶装填在色谱柱内要均匀，不能有气泡存在，因为气泡会影响蛋白质洗脱的次序。测定亚硝酸盐含量的实验中，亚硝酸盐的定量测定可以用光电比色法，制备样品处理液时加入氢氧化铝的目的是使滤液色素脱色。

【详解】

（1）样品处理中红细胞的洗涤要用生理盐水反复冲洗；离心。影响红细胞洗涤效果的因素包括洗涤次数、离心时间和离心速度。

（2）血红蛋白粗分离阶段；透析的目的是除去小分子杂质分，若要尽快达到理想的透析效果，可以增加缓冲液的量或及时更换缓冲液。

（3）蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶电泳中的迁移率主要取决于净电荷的多少和分子的大小因素。

（4）由于气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序；降低分离效果，因此色谱柱内不能有气泡存在，一旦发现气泡必须重装。

（5）亚硝酸盐的定量测定可以用比色法；在制备样品处理液过程中加入氢氧化铝乳液的作用是除去滤液中的色素，使滤液变得无色透明。

【点睛】

本题考查蛋白质的提取和分离、亚硝酸盐的测定，对于此类试题，需要学生注意的细节较多，如实验的原理、实验采用的试剂及试剂作用、实验方法等，需要学生在平时的学习过程中注意积累。【解析】生理盐水洗涤次数、离心时间和离心速度除去小分子杂质分增加缓冲液的量或及时更换缓冲液净电荷的多少和分子的大小气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分离效果比色除去滤液中的色素，使滤液变得无色透明25、略

【分析】【分析】

1；参与果酒制作的微生物是酵母菌；其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。果酒制作的原理：

（1）在有氧条件下，反应式如下：C6H12O6+6H2O+6O2→6CO2+12H2O+能量；

（2）在无氧条件下，反应式如下：C6H12O6→2CO2+2C2H5OH+能量。

2；参与果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：

当氧气；糖源都充足时；醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。

当缺少糖源时；醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。

3、固定方法：。名称原理适用范围包埋法将微生物细胞均匀地包埋在不溶于水的多孔性载体中多用于细胞的固定化学结合法利用共价链、离子键将酶分子或细胞相互结合，或将其结合到载体上多用于酶的固定物理吸附法通过物理吸附作用，把酶固定在纤维素、琼脂糖、多孔玻璃和离子交换树脂等载体上

【详解】

（1）果胶酶包括多聚半乳糖酶；果胶分解酶、果胶酯酶等；其作用是分解果胶，瓦解植物的细胞壁及胞间层。

（2）固定化酶可采用化学结合或物理吸附法；而固定化细胞多采用包埋法，原因是细胞个大，难以被吸附或结合，但不会从包埋材料中漏出。

（3）参与果酒发酵的微生物是酵母菌；属于真核细胞；培养酵母菌时需要添加适量蔗糖，主要目的是提供碳源。

（4）使“酒液”变酸的微生物为醋酸菌（嗜氧菌；嗜温菌）；其所需的发酵条件与果酒制作的发酵条件不同的是通入氧气、温度。

【点睛】

本题考查果酒和果醋的制作、固定化技术等，对于此类试题，需要考生注意的细节较多，如实验的原理、实验采用的方法、实验现象及结论，需要考生在平时的学习过程中注意积累。【解析】多聚半乳糖酶、果胶分解酶、果胶酯酶分解果胶，瓦解植物的细胞壁及胞间层化学结合或物理吸附包埋细胞个大，难以被吸附或结合，但不会从包埋材料中漏出真核提供碳源通入氧气、温度26、略

【分析】【分析】

血红蛋白的提取与分离的实验步骤主要有：

（1）样品处理：①红细胞的洗涤；②血红蛋白的释放，③分离血红蛋白。

（2）粗分离：①分离血红蛋白溶液；②透析。

（3）纯化：调节缓冲液面→加入蛋白质样品→调节缓冲液面→洗脱→收集分装蛋白质。

（4）纯度鉴定--SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳。

【详解】

（1）凝胶色谱法是根据相对分子质量大小分离蛋白质的有效方法；分子量大的路径短；速度快。

（2）蛋白质的提取和分离实验中；首先要用生理盐水洗涤红细胞，其目的是去除杂蛋白。

（3）洗涤红细胞后有利于后续步骤的分离纯化；洗涤干净的标志是离心后的上清液不再呈现黄色；该实验的目的是分离白细胞，离心速度过高和时间过长会导致白细胞等一同沉淀，而达不到分离效果使实验失败。

（4）由于气泡的存在会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序；降低分离效果，所以在装填凝胶色谱柱时，不得有气泡产生。在操作中不能发生洗脱液流干漏出凝胶颗粒的现象，如果发生则凝胶色谱柱需要重新装填。

（5）在蛋白质分离过程中；如果红色区带均匀一致地移动，说明色谱柱制作成功。

【点睛】

易错点：纯化的过程是调节缓冲液面→加入蛋白质样品→调节缓冲液面→洗脱→收集分装蛋白质，不要记混；记住在装填凝胶色谱柱时，不得有气泡产生。【解析】相对分子质量的大小去除杂蛋白上清液不再呈现黄色白细胞等一同沉淀，达不到分离效果搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分离效果凝胶色谱柱需要重新装填红色区带均匀一致地移动五、综合题(共4题，共32分)27、略

【分析】【详解】

（1）PCR扩增目的基因，首先要有目的基因作为模板，所以从高表达MT蛋白的生物组织中提取mRNA，通过逆转录获得cDNA，从而用于PCR扩增。

（2）构建重组质粒，首先用限制酶切割含目的基因的DNA片段和质粒；所以位于目的基因两端的引物中需要增加适量的限制酶位点。设计的引物之间不能有碱基互补配对，否则引物自连，不能与模板相连。

（3）图中步骤1、2、3分别表示变性；退火、延伸；这三个步骤组成一轮循环。

（4）退火表示引物与模板链相连，若温度过高会破坏引物与模板的碱基配对。由于G-C间三个氢键，A-T间两个键，所以G-C含量越高的引物；退火温度越高。

（5）PCR反应得不到任何扩增产物；可能是退火温度过高，导致引物与模板不能相连，或引物间相互配对，引物自连，不能与模板相连，可通过降低退火温度或重新设计引物进行改进。

【定位】

基因工程，PCR技术。

【点睛】

本题主要考查基因工程的相关知识，要求学生理解PCR的具体过程，以及引物的作用，学会分析引物或温度改变对PCR结果的影响。【解析】①.逆转录②.cDNA③.限制性核酸内切酶④.碱基互补配对⑤.变性⑥.引物与模板⑦.GC含量高⑧.②③28、略

【分析】【分析】

1；萃取的效率主要取决于萃取剂的性质和使用量；同时还受到原料颗粒的大小、紧密程度、含水量、萃取的温度和时间等条件的影响；一般来说，原料颗粒小，萃取温度高，时间长，需要提取的物质就能够充分溶解，萃取效果就好。

(1)

萃取前将原料干燥；粉碎的目的是有利于萃取剂溶解该多酚类物质；使原料与萃取剂充分接触，萃取效率主要取决于萃取剂的性质和使用量。

(2)

称取1g甘蔗渣样品，转入99mL无菌水中，制备成菌悬液（该过程中已经稀释了100倍），经梯度稀释后，分别取0.1mL菌悬液涂布在固体培养基上，其中10倍稀释的菌悬液培养后平均长出了32个菌落，则该样本中每克甘蔗渣约含微生物=32×100×10÷0.1=3.2×105个。

(3)

醋酸菌属于细菌；故制备醋酸菌初筛平板时，需要将培养基的pH调至中性或微碱性；灭菌后在未凝固的培养基中加入无菌碳酸钙粉末；充分混匀后倒平板，加入碳酸钙的目的是使培养基不透明，从而使醋酸菌菌落周围出现透明圈，这是因为醋酸菌产生的醋酸可分解碳酸钙，产生透明圈；在缺少糖源的液体培养基中醋酸菌以乙醇为碳源，先把乙醇氧化为乙醛，再把乙醛氧化为乙酸。

(4)

由于醋酸菌是好氧菌；而乳酸菌是厌氧菌，为将醋酸菌和乳酸菌进行分析，可先将平板置于无氧环境下继续培养，观察菌落形态和透明圈大小：若菌落继续生长，且透明圈增大，则为兼性厌氧型的乳酸菌菌落，若菌落不能继续生长，透明圈不再扩大，则为醋酸菌菌落。故实验步骤：将平板置于无氧环境下继续培养，观察菌落形态和透明圈大小。预期结果：若菌落继续生长，且透明圈增大，则为兼性厌氧型的乳酸菌菌落，若菌落不能继续生长，透明圈不再扩大，则为醋酸菌菌落。

【点睛】

本题考查微生物的分离和培养、萃取等知识，要求考生识记无菌技术，掌握计数微生物的方法，能进行相关计算；并能提取有效信息准确答题。【解析】(1)有利于萃取剂溶解花色苷；使原料与萃取剂充分接触性质和使用量。

(2)3.2×105

(3)中性或微碱使培养基不透明；从而使醋酸菌菌落周围出现透明圈碳源。

(4)