2025年人民版选择性必修3生物下册月考试卷含答案

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A.植物肿瘤的形成与生长素基因和细胞分裂素两个基因的在农杆菌细胞内表达有关B.清除植物肿瘤组织中的农杆菌后肿瘤不再生长C.利用T-DNA进行转基因时不需保留左边界和右边界序列D.去除冠瘿碱合成基因，农杆菌在被感染植物体内不能大量繁殖4、下列与动物细胞培养有关的叙述，不正确的是（）A.细胞体外培养需要糖、氨基酸、促生长因子、无机盐等营养物质B.当贴壁细胞分裂生长到表面相互抑制时，细胞就会停止分裂增殖C.需将细胞置于含有95%O2和5%CO2的混合气体的培养箱中培养D.培养的动物细胞可用于检测有毒物质，判断某种物质的毒性5、引物的设计是影响PCR扩增反应的效率和特异性的关键因素，相关叙述正确的是（）A.引物的碱基数量越少则退火温度越低、目标DNA获得率越高B.根据需要可在引物的5’端添加限制酶识别序列、点突变序列等C.两种引物的退火温度差异较大，可减少引物与模板的非特异性结合D.引物的GC含量越高，结合特异性越强，越利于目标DNA的扩增6、下列关于质粒的说法正确的是（）A.质粒是独立于原核细胞拟核DNA之外的双链DNA分子B.基因工程操作中的质粒一般都是天然存在的，无需改造C.质粒具有某些标记基因，便于对目的基因进行检测和鉴定D.质粒上的基因表达不遵循中心法则，所以可用作外源DNA分子的载体7、植物细胞工程包括植物组织培养、植物体细胞杂交等技术，具有广泛的应用前景和实用价值。下列对这些操作或应用的描述错误的是（）A.可用PEG诱导植物原生质体融合，再生出细胞壁是融合成功的标志B.植物体细胞杂交技术去壁前，需对两种植物细胞进行灭菌处理，以防止杂菌污染C.植物培养基中常用的植物生长调节剂，一般可以分为生长素类，细胞分裂素类和赤霉素类D.获取植物原生质体时，需在与细胞液浓度相当的缓冲液中进行8、人们可以运用植物体细胞杂交技术获得抗线虫病的杂种萝卜一油菜植株；已知萝卜具有抗线虫病基因，而油菜容易被胞囊线虫侵染造成减产。科研人员以萝卜和油菜为亲本进行体细胞杂交，以获得抗线虫病的杂种植株，具体操作流程如图所示。下列说法错误的是（）

A.过程③中施加的生长素的含量要高于细胞分裂素的B.对杂种植株接种胞囊线虫进行个体水平上的鉴定C.可通过观察是否含有叶绿体来对融合细胞进行初步筛选D.过程④中需要进行适当的光照以促进细胞中叶绿素的合成9、下列关于转基因生物安全性的叙述，错误的是（）A.转抗虫基因的植物，会导致昆虫群体抗性基因频率增加B.转基因作物被动物食用后，目的基因会转入动物体细胞中C.种植转基因植物有可能因基因扩散而影响野生植物的遗传多样性D.转基因植物的目的基因可能转入根际微生物评卷人得分二、多选题(共8题，共16分)10、表中生物工程实验选择的材料与实验目的搭配合理的是（）

。组别实验目的实验材料材料特点A获得生产人生长激素的转基因动物乳腺细胞分泌乳汁将相应产物排出体外B获得脱毒苗茎尖分生区附近病毒极少，甚至不含病毒C获得植物突变体愈伤组织细胞分裂能力强，易诱发突变D胚胎干细胞培养囊胚内细胞团能分化形成各种组织和器官A.AB.BC.CD.D11、运用细胞工程技术获得单克隆抗体时，必要的操作是（）A.对小动物注射特定抗原B.融合并筛选杂交瘤细胞C.原代培养效应B细胞D.将胰蛋白酶注入小动物腹腔12、良种试管牛的繁殖过程是用激素促进甲牛多排卵，然后把卵母细胞在体外与人工采集的乙牛的精子进行受精，在特定培养基上培育成胚胎，再把胚胎送入经过激素处理的丙牛的子宫内，孕育成试管牛。下列相关叙述正确的是（）A.“用激素促进甲牛多排卵”的激素是孕激素B.产生试管牛的生殖方式属于有性生殖C.甲牛、乙牛对试管牛核基因的贡献相同D.该技术可应用于加速优良种畜的繁殖13、下列有关动物细胞工程操作的叙述，错误的是（）A.动物细胞培养是动物细胞工程的基础，在进行细胞培养时，培养基中除了加入细胞所需的各种营养物质外，还需要加入琼脂B.动物细胞融合与植物体细胞杂交都能形成杂种个体C.干细胞存在于早期胚胎、骨髓和脐带血等多种组织和器官中，包括胚胎干细胞和成体干细胞等，有着自我更新能力及分化潜能D.动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植14、为保障公共健康；需要定期对公共饮用水进行卫生检测。饮用水的卫生标准是100mL不得检出大肠杆菌或者1000mL不超过3个大肠杆菌。若要确定饮用水是否合格，可采用膜过滤法检测，过程如下图所示。下列相关叙述错误的是（）

A.检测前一般需要对水样收集瓶、培养皿、镊子等进行干热灭菌B.完成过滤后需将滤膜置于固体培养基上，在25℃下培养观察C.为减少实验误差，应按照上述实验步骤多次取样重复进行检测D.可用血细胞计数板直接计数法替代膜过滤法检测饮用水中的大肠杆菌数量15、关于现代生物工程技术应用的安全性，下列说法正确的是（）A.对待生物武器的态度应明确而坚定，即坚决禁止生物武器B.对转基因植物的外源DNA要认真选择，避免产生对人体有害或过敏的蛋白质C.我国不反对治疗性克隆，允许有限制地进行克隆人实验D.一旦发现转基因生物出现了安全性问题，要马上停止实验，并销毁重组生物16、下列有关微生物的分离与培养实验的叙述，正确的是（）A.倒平板前，为了防止杂菌污染，需要将锥形瓶口通过酒精灯火焰B.倒平板时，应将培养皿打开一条略大于瓶口的缝隙，以免培养基溅到皿盖上C.为了防止污染，接种环经灼烧灭菌后应立即挑取菌落D.用移液器吸取相应的菌液前，需要将样液充分摇匀17、蛋白质工程就是通过对蛋白质化学、蛋白质晶体学和蛋白质动力学的研究，获得有关蛋白质理化特性和分子特性的信息，在此基础上对编码蛋白质的基因进行有目的的设计和改造，通过基因工程技术获得可以表达蛋白质的转基因生物，中华鲟是一种濒危野生动物。研究者试图通过蛋白质工程改造中华鲟体内的某些蛋白质，使其更加适应现在的水域环境。下列有关说法错误的是（）A.蛋白质工程可定向改变蛋白质分子的结构B.改造蛋白质可通过改变基因结构实现C.改造后的中华鲟和现有中华鲟不再是同一物种D.改造后的中华鲟的后代不具有改造的蛋白质评卷人得分三、填空题(共9题，共18分)18、平板冷凝后，为什么要将平板倒置？________19、平板划线法是通过____________在_______________培养基表面______________的操作，将__________的菌种______________分散到培养基的表面。在数次划线后培养，可以分离到由____________繁殖而来的肉眼可见的_______________，这就是_______________________。稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的______________，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到_____________培养基的表面，进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成____________，从而能在培养基表面形成___________________。20、基因进入受体细胞的______——“分子运输车”21、假设PCR反应中，只有一个DNA片段作为模板，请计算在30次循环后，反应物中大约有个这样的_______个DNA片段，一共需要加入______________个引物。22、蛋白质工程是指以______作为基础，通过______，对现有蛋白质进行_____，或制造一种______，以满足人类的生产和生活的需求。（基因工程在原则上只能生产______的蛋白质）

23、在我国市场上究竟有多少种转基因产品呢？一位同学带着这样的问题，进行了调查并将结果归纳成下图｡

对该同学的调查和归纳结果，有人表示认同，有人提出质疑｡质疑者认为：目前我国市场上根本没有大豆､玉米或甜菜的转基因产品｡我们的观点是什么_____？24、我国政府同样禁止进行治疗性克隆实验。（选择性必修3P108）()25、科学家采用定点诱变的方法构建T4溶菌酶的新蛋白质，发现其中一种新蛋白质的第9和第164位氨基酸残基被转换为半胱氨酸残基，并形成一个二硫键。这种新蛋白质的热稳定性会有什么变化？这项技术的要点是什么？_________26、某种微生物合成的一种蛋白酶与人体消化液中某种蛋白酶的结构和功能很相似，只是前者热稳定性较差，进入人体后容易失效。尝试根据本节课所学知识提出改造该种微生物蛋白酶的思路_________。评卷人得分四、判断题(共2题，共12分)27、基因工程技术已被广泛用于改良动植物品种、提高作物和畜产品的产量等方面。（选择性必修3P87）()A.正确B.错误28、“设计试管婴儿”与“试管婴儿”相比在植入前需要对胚胎进行遗传学诊断。()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共3题，共21分)29、单克隆抗体在防治H7N9型禽流感上具有显著疗效。下图是科研人员制备H7N9病毒的单克隆抗体X的过程。回答下列问题：

（1）上图中B淋巴细胞是取自______________的动物或人。融合的M细胞先用选择培养基进行筛选，再进行克隆化培养和_______________以得到符合要求的N细胞，N细胞的名称是______________。

（2）为了进一步研究H7N9病毒的单克隆抗体X（以下简称抗体X）的效果及作用机制；科学家开展了如下实验：

实验一：在体外将抗体X与HA蛋白（H7N9病毒表面的一种蛋白）混合，检测抗体X对HA蛋白的亲和力。实验结果如下表所示。（注：KD值越小，抗体和HA蛋白的亲和力越高；机体Y为一种已知的H7N9病毒的抗体。）。抗体种类KD抗体X5．32×10-9M抗体Y1．95×10-9M

实验二：以一定浓度的H7N9病毒感染小鼠；一天后向小鼠腹腔分别注射一定剂量的抗体X；Y；14天后测定小鼠存活情况和体重变化。实验结果表明：抗体X的体内治疗效果优于抗体Y。

①实验一结果表明：对H7N9病毒HA蛋白亲和力更高的抗体是__________。

②分析实验一和实验二的结果差异，研究人员提出假说：抗体除了中和病毒活性之外，还可以通过和巨噬细胞表面的受体相结合，从而增强巨噬细胞的吞噬作用，进而清除被病毒感染的靶细胞。请以巨噬细胞、感染了H7N9病毒的肺上皮细胞、细胞培养液、抗体X、抗体Y和无关抗体等为材料，设计实验验证上述假说。写出实验思路__________。30、（1）在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑______、______和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、______、______等优点；因此常作为遗传学研究的实验材料。

（2）在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行________（消毒、灭菌）；操作者的双手需要进行清洗和______；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能__________。

（3）若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的_______。

（4）通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的____________。

（5）培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_________。

（6）若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过_______处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。31、佩戴口罩是预防病原体感染的有效措施之一。使用过的口罩；如果没有妥善处理会对生态环境造成巨大威胁。某科研团队欲从不同环境的土壤中筛选出能高效降解一次性口罩（主要成分是聚丙烯纤维）的细菌。请回答下列问题：

(1)该科研团队设计了一个对照实验；请将以下实验步骤补充完整：

①采集来自不同环境的等量土壤，编号为A、B、C、D。将同型号等量的一次性口罩经___________处理后埋入各组土壤中。

②在相同且适宜条件下培养一段时间后；观察各组中口罩的腐烂程度。

③从口罩腐烂程度_________的一组上采集细菌样品。

(2)分离纯化目的菌时，培养基以______________作为唯一的碳源。这样的培养基按功能划分，属于_________培养基，其含义是指______________。

(3)若需进一步对土样中的细菌计数，上图所示微生物接种的方法是_____________，在3个平板上分别滴加0.1mL稀释液，经适当培养后，3个平板上菌落数分别是65、66和67，则1g土壤中的活菌数约为__________个。该方法所得测量值一般比实际值偏低的原因是________________________。评卷人得分六、综合题(共3题，共9分)32、某兴趣小组为了检测某品牌酸奶中乳酸杆菌的数量；进行了如图所示的实验操作。回答下列问题。

（1）配制培养基时，培养基中的碳源是指_______________________________。

（2）图示实验中进行接种的方法叫做______________法，①过程中10g酸奶相当于被稀释了______________倍。若培养基灭菌合格，培养适宜时间后A、B、C三个培养皿中的乳酸菌菌落数依次为45、48、42个，则该品牌酸奶中每10g样品中的乳酸杆菌数量约为______________个。

（3）接种过程应在酒精灯火焰旁进行，目的是______________。

（4）培养待测微生物时，培养皿需置于无氧环境中培养，原因是______________。33、新型冠状病毒是一种单链RNA病毒；新型冠状病毒感染的常规检测方法是通过实时荧光PCR鉴定。

（1）首先，从样本中提取病毒RNA，经________酶作用生成cDNA。然后以cDNA为模板进行实时荧光PCR扩增；测定样品中病毒核酸量。

（2）通过实时荧光PCR扩增目的基因；需额外添加荧光标记探针（一小段单链DNA，可与目的基因中部序列特异性结合）。当探针完整时，不产生荧光。在PCR过程中，与目的基因结合的探针被TaqDNA聚合酶水解，R与Q分离后，R发出的荧光可被检测到（如图1）。

①当样本中有目的基因时，引物和探针与目的基因退火时，通过________原则而特异性结合。

②在PCR循环的延伸阶段，TaqDNA聚合酶催化子链的合成并水解探针。检测到的荧光强度与反应体系中DNA分子数呈_________（正相关或反相关反）关系。

（3）通过实时荧光PCR检测新型冠状病毒感染时；检测到的荧光强度变化如图2所示。

①与指数增长期相比，线性增长期目的基因数量的增长率下降，原因有_________。

②Ct值的含义：在PCR扩增过程中，每个反应管内的荧光信号达到设定的荧光阈值时所经历的扩增循环数。因此，当样本中初始模板越多时，Ct值就_________。

③某新型冠状病毒核酸检测说明书标明，Ct≤37判定为阳性，Ct>40或无Ct值判定为阴性。图2所示新型冠状病毒核酸检测结果应判定为_________。

（4）阴性结果也不能排除新型冠状病毒感染。可能产生假阴性的因素有________。

a．取样太早；样本中病毒量少，达不到实时荧光PCR检测阈值。

b．样本被污染；RNA酶将病毒RNA降解。

c．病毒发生变异34、土壤中的磷大部分以难被植物吸收利用的无效态（如磷酸钙等难溶态；在水中呈白色沉淀）存在，溶磷菌能够把无效态的磷转化为可被直接利用的可溶性磷。

(1)磷是植物生长发育的必需元素，可组成______等化合物。（填出2种即可）

(2)从土壤中筛选溶磷菌的一般步骤如下：

溶磷菌的分离：依次配备浓度为10-3、10-4、10-5的土壤稀释液，分别取0.1mL均匀涂布于含难溶磷的固体培养基上培养2d。待菌落长出后挑取______的菌落，于基础培养基上采用______法进行多次纯化。溶磷菌的筛选：将分高获得的溶磷菌分别配制成菌悬液，接入已灭菌的含难溶磷液体培养基中做实验组，则对照组的培养基加入______，5d后测定培养液中可溶性磷含量。若接菌培养液可溶性磷含量为a，对照组可溶性磷含量为b，则菌株溶磷量为______。选择溶磷量最大的菌种为目的菌。

(3)将适量目的菌接入己灭菌的含难溶磷的液体培养基中培养；每天取样测定溶磷量和pH变化情况，结果见下图。

①结果表明目的菌分解难溶磷的能力呈现______的趋势。

②根据培养液的pH变化情况，可对目的菌的解磷原理作出的推测是________________________。

(4)请预期该溶磷菌在农业生产方面可能的应用________________________。参考答案一、选择题(共9题，共18分)1、C【分析】【分析】

胚胎移植的基本程序主要包括：①对供；受体的选择和处理（选择遗传特性和生产性能优秀的供体；有健康的体质和正常繁殖能力的受体。用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理）；②配种或人工授精；③对胚胎的收集、检查、培养或保存（对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑椹或胚囊胚阶段）；④对胚胎进行移植；⑤移植后的检查。

【详解】

AB；哺乳动物的体外受精主要包括卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能和受精等几个主要步骤。精子与卵子在体外受精后；应将受精卵移入发育培养基中继续培养，以检查受精状况和受精卵的发育能力，并将其培养至桑椹胚或囊胚进行胚胎移植，所以胚胎移植前，要对胚胎进行检查以确定其是否发育到桑椹胚或囊胚阶段，AB正确；

C；在胚胎移植前；若要对胚胎的性别进行鉴定，应取囊胚的滋养层细胞做DNA分析，C错误；

D；胚胎移植入受体母畜的子宫后；还需对受体母畜进行是否妊娠检查，以保证其为移植的胚胎提供孕育的条件，D正确。

故选C。2、A【分析】【分析】

【详解】

A；采用花粉管通道法将目的基因导入植物体细胞的方法比较经济有效；故A错误；

B；将目的基因导入受体细胞最有效的方法是显微注射法；故B正确；

C；受体细胞是微生物时；采用钙离子处理，使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态（感受态），故C正确；

D；将目的基因导入植物细胞最常用的方法是农杆菌转化法；故D正确。

故选A。3、D【分析】【分析】

由题意知：农杆菌Ti质粒的基因被剪切后整合到植物的染色体上；因为其质粒上的细胞分裂素和生长素基因，诱发细胞异常生长和分裂，产生了过量的细胞分裂素和生长素，导致细胞过度增殖形成植物肿瘤。

【详解】

A；植物肿瘤的形成与生长素基因和细胞分裂素两个基因在植物细胞内表达有关；A错误；

B；清除植物肿瘤组织中的农杆菌后；还有Ti质粒整合到植物DNA上的，通过基因的复制表达也会导致肿瘤继续生长，B错误；

C；T-DNA在转移的过程中需要保留左边界和右边界序列；转移结束后需要将左边界和右边界序列进行剪切，C错误；

D；根据题干信息“冠瘿碱是农杆菌生命活动必需的有机物质；而植物自身不能合成和利用”可知，去除冠瘿碱合成基因，农杆菌在被感染植物体内不能大量繁殖，D正确。

故选D。

【点睛】4、C【分析】【分析】

动物细胞培养的培养条件：（1）无菌无毒环境；（2）营养：所需营养物质与体内基本相同；例如需要有糖；氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然成分；（3）温度和pH值：哺乳动物多以36.5±0.5℃为宜，多数细胞生存的适宜pH为7.2～7.4；（4）气体环境：通常采用培养皿或松盖培养瓶，将其置于含95%空气加5%CO2的混合气体的培养箱中进行培养。

【详解】

A；动物细胞培养液的成分通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素等此外还含有动物血清、血浆等；A正确；

B；在进行动物细胞培养过程中；经常表现为接触抑制的特征，即当贴壁细胞分裂生长到表面相互抑制时，细胞就会停止分裂增殖，B正确；

C、动物细胞培养时应将其置于含95%空气加5%CO2的混合气体的培养箱中进行培养；C错误；

D；检测有毒物质；判断某种物质的毒性，属于动物细胞工程的应用，D正确。

故选C。5、B【分析】【分析】

PCR技术：

1；概念：PCR全称为聚合酶链式反应；是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。

2；原理：DNA复制。

3；前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物。

4；条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）。

5；过程：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶；高温条件下氢键可自动解开）；低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。

【详解】

A；退火温度与时间；取决于引物的长度、碱基组成及其浓度，引物的碱基数量越少变性时破开的氢键越少，则退火温度越低，但能与引物发生配对的片段就越多，目标DNA获得率越低，A错误；

B；根据需要可在引物的5’端添加限制酶识别序列、点突变序列等；以便更加准确地获得目的基因，B正确；

C；两种引物的退火温度差异较大；导致不能同时退火，甚至一条链在延伸，一条链在退火，可增加引物与模板的非特异性结合，C错误；

D；引物的GC含量越高；结合特异性越强，但GC过高，不利用退火，从而阻碍目标DNA的扩增，D错误。

故选B。6、C【分析】【分析】

1；常用的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒。

2；质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。

3；作为运载体必须具备的条件：①要具有限制酶的切割位点；②要有标记基因（如抗性基因）；以便于重组后重组子的筛选③能在宿主细胞中稳定存在并复制；④是安全的，对受体细胞无害，而且要易从供体细胞分离出来。

4；天然的质粒不能直接作为载体；基因工程中用到的质粒都是在天然质粒的基础上进行过人工改造的。

【详解】

A；质粒是独立于原核细胞拟核DNA之外的环状DNA分子；可在体外进行自我复制，A错误；

B；天然的质粒不能直接作为载体；基因工程用到的质粒都是在天然质粒的基础上进行过人工改造的，B错误；

C；质粒具有某些标记基因；如抗生素基因，用于对目的基因的检测和鉴定，C正确；

D；质粒上的基因表达遵循中心法则；D错误。

故选C。7、B【分析】1；植物组织培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织；然后再分化生成根、芽，最终形成植物体。植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。2、植物的体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞，进而利用植物的组织培养将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株。植物体细胞杂交依据的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。

【详解】

A；PEG可以破环细胞间相互排斥的表面作用力；从而使相邻细胞聚集而促进融合，故可用PEG诱导植物原生质体融合，再生出细胞壁是融合成功的标志，A正确；

B；植物体细胞杂交技术去壁前；不能对两种植物细胞进行灭菌处理，因为灭菌后植物细胞会死亡而不能得到杂种细胞，B错误；

C；植物培养基中常用的植物生长调节剂一般可以分为生长素类、细胞分裂素类和赤霉素类；C正确；

D；获取植物原生质体时；除使用纤维素酶和果胶酶外，还需要在蔗糖浓度与细胞液浓度相当的缓冲液中进行，以免细胞过度失水或吸水，此时原生质体已无细胞壁，D正确。

故选B。8、A【分析】【分析】

题图分析；图中①过程为酶解法去除细胞壁获得原生质体的过程，②原生质体融合成为杂种细胞的过程，③是杂种细胞脱分化形成愈伤组织的过程，④过程表示再分化成为杂种植株的过程。

【详解】

A；过程③中施加的生长素的和细胞分裂素比例适中；可以诱导产生愈伤组织，A错误；

B；对杂种植株接种胞囊线虫进行个体水平上的鉴定；进而检测杂种植株是否达到预期，B正确；

C；由于用于融合的叶肉细胞中有叶绿体；而根细胞中没有叶绿体，因此，可通过观察是否含有叶绿体来对融合细胞进行初步筛选，C正确；

D；过程④为脱分化形成再生植株的过程；该过程中需要进行适当的光照以促进细胞中叶绿素的合成，D正确。

故选A。9、B【分析】【分析】

转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应；过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。

【详解】

A；转抗虫基因的植物；植物对昆虫进行选择，会导致昆虫群体抗性基因频率增加，A正确；

B；动物取食转基因作物后；要经过消化吸收才进入身体，目的基因不可能直接进入动物细胞中，B错误；

C；转基因植物可能与野生植物发生杂交而出现基因交流；影响野生植物的遗传多样性，C正确；

D；目的基因被微生物摄入细胞内后；可能进入这些微生物中，D正确。

故选B。二、多选题(共8题，共16分)10、B:C:D【分析】【分析】

囊胚的内细胞团细胞属于胚胎干细胞；具有很强的分裂能力，可以用胚胎干细胞培养；采用基因工程技术培养乳腺生物反应器时，受体细胞是受精卵，因为受精卵全能性最高。

【详解】

A；采用基因工程技术培养乳腺生物反应器时；受体细胞是受精卵而不是乳腺细胞，因为受精卵全能性最高，A错误；

B；植物分生区附近（如茎尖）含病毒极少；甚至不舍病毒，因此可采用茎尖组织培养技术获得脱毒苗，B正确；

C；愈伤组织分裂能力强；易发生突变，容易获得突变体，C正确；

D；囊胚的内细胞团细胞具有很强的分裂能力；可以用于胚胎干细胞培养，进而诱导培养成各种组织和器官，D正确。

故选BCD。11、A:B【分析】【分析】

在制备单克隆抗体的过程中；需要先对小鼠进行特定抗原免疫，使机体产生相应的浆细胞；在诱导细胞融合时，除了异种细胞融合外，还有同种细胞融合，因此需要在培养基中筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞；效应B细胞不能分裂；在获得能分泌所需抗体的杂交瘤细胞时，可以将其注入小鼠腹腔中，以备获得大量的单克隆抗体。

【详解】

A；在制备单克隆抗体的过程中；需要先对小鼠进行特定抗原免疫，使机体产生相应的浆细胞，A正确；

B；在诱导细胞融合时；除了异种细胞融合外，还有同种细胞融合，因此需要在培养基中筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞，B正确；

C；效应B细胞不能分裂；C错误；

D；在获得能分泌所需抗体的杂交瘤细胞时；可以将其注入小鼠腹腔中，以备获得大量的单克隆抗体，而不需要将胰蛋白酶注入小动物腹腔，D错误。

故选AB。12、B:C:D【分析】【分析】

良种试管牛的繁殖过程：对供体和受体的选择和处理（同期发情处理；超数排卵处理）；配种或进行人工授精、对胚胎的收集检查培养或保存、进行胚胎移植。

【详解】

A；处理供体甲牛的激素可能是促性腺激素；使其超数排卵，A错误；

B；产生试管牛的过程中经过了两性生殖细胞的融合过程；因此试管牛产生的生殖方式属于有性生殖，B正确；

C；母本甲牛提供卵细胞、父本乙牛提供精子；试管牛细胞核中基因一半来源于父方，一半来源于母方，C正确；

D；体外受精和早期胚胎发育、胚胎移植等技术可以缩短繁殖周期；增加一生繁殖的后代数量，即该技术可充分发挥优良雌性个体的繁殖潜力，D正确。

故选BCD。

【点睛】13、A:B【分析】【分析】

动物细胞工程技术包括动物细胞培养；动物细胞融合、核移植技术等技术；其中动物细胞培养是动物细胞工程的基础。在进行细胞培养时，培养基中除了加入细胞所需的各种营养物质外，还需要加入血清等天然成分。干细胞包括胚胎干细胞和成体干细胞等，存在于早期胚胎、骨髓和脐带血等多种组织和器官中，有着自我更新能力及分化潜能。

【详解】

A；在进行动物细胞培养时；培养基中除了加入细胞所需的各种营养物质外，还需要加入血清等天然成分，A错误；

B；动物细胞融合不能形成杂种个体；形成的是杂种细胞，而植物体细胞杂交能形成杂种个体，两者都能形成杂种细胞，B错误；

C；干细胞包括胚胎干细胞和成体干细胞等；存在于早期胚胎、骨髓和脐带血等多种组织和器官中，有着自我更新能力及分化潜能，C正确；

D；动物体细胞分化程度较高；全能性较低，因此动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植，D正确。

故选AB。14、B:D【分析】【分析】

细菌的数目可以通过滤膜法来测定。将已知体积的水过滤后；将滤膜放在伊红美蓝培养基上培养。在该培养基上，大肠杆菌的菌落呈黑色，根据黑色菌落的数目，计算水样中大肠杆菌的数量。微生物接种时，为了避免其它杂菌的污染，接种过程要进行无菌操作。灼烧灭菌常适用于接种环；接种针；干热灭菌常适用于玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具；高压蒸汽灭菌常适用于无菌水、培养基。

【详解】

A；检测前需要对水样收集瓶、滤膜、培养基、镊子灭菌；防止杂菌干扰，A正确；

B；完成过滤后需将滤膜置于固体培养基上；在37℃下培养观察，B错误；

C；为减少实验误差；按照上述实验步骤多次取样重复进行检测，取平均值作为实验数据，C正确；

D；大肠杆菌较小；不能用血细胞计数板直接计数法替代膜过滤法检测，D错误。

故选BD。15、A:B:D【分析】【分析】

1；生物武器是利用生物战剂杀伤人员、牲畜、毁坏植物的武器。生物武器又是生物制剂、载体和分散手段的综合利用。生物武器自诞生以来；给人类的生存安全构成了严重威胁。

2；转基因生物的安全性问题包括食物安全、生物安全和环境安全。

3；“治疗性克隆”将使人胚胎干细胞（简称ES细胞）造福于人类的一种非常重要的途径。治疗性克隆是指把患者体细胞移植到去核卵母细胞中构建形成重组胚胎；体外培养到一定时期分离出ES细胞，获得的ES细胞定向分化为所需的特定类型细胞（如神经细胞、肌肉细胞和血细胞），用于治疗。

【详解】

A；对待生物武器的态度应明确而坚定；即在任何情况下都不发展、不生产、不储存生物武器，坚决禁止生物武器，A正确；

B；转基因要注意基因安全；对外源DNA要进行认真选择，避免产生对人体有害的或过敏的蛋白质，B正确；

C；中国对于克隆人的态度是不反对治疗性克隆；禁止进行克隆人的实验，C错误；

D；一旦发现转基因生物出现了安全性问题；包括食品安全、生物安全和生态安全，要马上停止试验，并销毁重组生物，D正确。

故选ABD。16、A:D【分析】【分析】

平板划线的操作的基本步骤是：(1)右手持接种环；经火焰灭菌，待凉后，在火焰旁打开盛有菌液的试管棉塞，并将试管口过火焰，将已冷却的接种环伸入菌液，沾取一环菌液，将试管口过火焰并塞上棉塞。(2)左手斜持琼脂平板，皿盖打开一条缝，右手于火焰近处将接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖，接种环不应划破培养基表面。(3)烧灼接种环，杀灭环上残留菌液，待冷却，从第一区域划线的末端开始往第二区内划线，重复以上操作，在第三四五区内划线，注意不要将最后一区的划线与第一区相连。(4)将平板倒置，放入培养箱中培养。

【详解】

A；倒平板前；需要将锥形瓶口通过酒精灯火焰，通过灼烧灭菌防止杂菌污染，A正确；

B；倒平板时；应将培养皿打开一条略大于瓶口的缝隙，以免杂菌进入，而不是为了防溅，B错误；

C；接种环经灼烧灭菌后应等到冷却后再挑取菌落；否则高温会使菌落死亡，C错误；

D；用移液器吸取相应的菌液前；需要将样液充分摇匀，保证菌液中微生物均匀分布，提高实验的准确性，D正确。

故选AD。17、C:D【分析】【分析】

蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础；通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。也就是说，蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程，是包含多学科的综合科技工程领域。

基本流程：从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的核糖核苷酸序列（RNA）→找到相对应的脱氧核糖核苷酸序列（DNA）。

【详解】

A；蛋白质工程可以通过改造基因来定向改变蛋白质分子的结构；A正确；

B；因为基因指导蛋白质的合成；所以改造蛋白质可通过改变基因结构实现，B正确；

C；改造后的中华鲟具有新的性状；但其和现有中华鲟之间没有生殖隔离，仍是同一物种，C错误；

D；蛋白质工程改造的是基因；可以遗传给子代，因此改造后的中华鲟的后代也具有改造的蛋白质，D错误。

故选CD。三、填空题(共9题，共18分)18、略

【解析】平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠。将平板倒置，既可以防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染，又可避免培养基中的水分过快挥发19、略

【解析】①.接种环②.琼脂固体③.连续划线④.聚集⑤.逐步稀释⑥.一个细胞⑦.子细胞群体⑧.菌落⑨.梯度稀释⑩.琼脂固体⑪.单个细胞⑫.单个的菌落20、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】载体21、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】2030×22030×2－222、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系基因修饰或基因合成改造新的蛋白质自然界已存在23、略

【分析】【详解】

目前我国市场上的转基因食品，从原料来源看，进口的主要有大豆、油菜籽和玉米及相关产品，国内生产的有棉籽油和番木瓜，故我国市场上有大豆等的转基因产品。【解析】目前我国市场上的转基因食品，从原料来源看，进口的主要有大豆、油菜籽和玉米及相关产品，国内生产的有棉籽油和番木瓜。24、略

【分析】【详解】

中国政府的态度：禁止生殖性克隆，不反对治疗性克隆，该表述错误。【解析】错误25、略

【分析】【详解】

蛋白质形成二硫键，使蛋白质的结构更加稳定，因此T4溶菌酶的热稳定性会提高。这项技术属于蛋白质工程技术，其步骤为从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获得所需的蛋白质。【解析】会提高T4溶菌酶的耐热性。这项技术属于蛋白质工程技术，该技术的要点是从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获得所需的蛋白质。26、略

【分析】【详解】

要提高酶的热稳定性，可采用蛋白质工程技术替换少数氨基酸，改善其功能，需要从改造控制该酶合成的基因着手，具体做法为从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列→获得所需的蛋白质。【解析】采用蛋白质工程技术替换少数氨基酸，提高该酶的热稳定性，从改造控制该酶合成的基因着手，具体做法为从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列→获得所需的蛋白质。四、判断题(共2题，共12分)27、A【分析】【详解】

目前，基因工程技术已被广泛用于改良动植物品种、提高作物和畜产品的产量等方面，例如转基因抗虫植物；将植物花青素代谢相关的基因导入牵牛花中，使其呈现自然界没有的颜色，提高了观赏价值；将外源生长素基因导入鲤鱼体内，转基因鲤鱼生长速率加快等，所以正确。28、A【分析】【分析】

“设计试管婴儿”在植入前需要对胚胎进行遗传学诊断；而“试管婴儿”是解决不孕不育等问题，不需要进行遗传学诊断。

【详解】

“设计试管婴儿”与“试管婴儿”相比在植入前需要通过多种技术手段对胚胎进行遗传学诊断；以便选择合适的设计出来的试管婴儿。

故正确五、实验题(共3题，共21分)29、略

【分析】【分析】

1；分析题图：小鼠骨體瘤细胞和取自感染病毒的人体内的浆细胞进行细胞融合；M表示融合细胞，N表示筛选出的杂交瘤细胞。

【详解】

（1）分析题图：小鼠骨體瘤细胞和取自感染病毒的人体内的浆细胞进行细胞融合，M表示融合细胞，N表示筛选出的杂交瘤细胞；B淋巴细胞是取自感染H7N9病毒的动物或人；随后将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行融合，对融合后的细胞用选择培养基进行筛选，挑选出B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的细胞，然后再进行克隆化培养和抗体检测，以得到符合要求的N细胞，N细胞的名称是杂交瘤细胞；

（2）①据题中图表分析，KD值越小，抗体和HA蛋白的亲和力越高；抗体Y的KD值小于抗体X的KD值，故对H7N9病毒HA蛋白亲和力更高的抗体是抗体Y；

②抗体X的体内治疗效果优于抗体Y，但对H7N9病毒HA蛋白亲和力更高的抗体是抗体Y，验证抗体除了中和病毒活性之外，还可以通过和巨噬细胞表面的受体相结合，从而增强巨噬细胞的吞噬作用，进而清除被病毒感染的靶细胞，需要进行抗体X和抗体Y的对照实验，并与无关抗体进行比较，可以将巨噬细胞及感染了H7N9病毒的肺上皮细胞分别加入A；B、C三组细胞培养液中；并向这三组培养液中分别加入无关抗体、抗体X和抗体Y，一段时间后检测并比较肺上皮细胞的裂解百分比。

【点睛】

对单克隆抗体制备流程、抗体效果检测原理和实验目的及用品的分析，是解决本题的关键。【解析】①.感染过H7N9病毒②.抗体检测③.杂交瘤细胞④.Y⑤.将巨噬细胞及感染了H7N9病毒的肺上皮细胞分别加入A、B、C三组细胞培养液中，并向这三组培养液中分别加入无关抗体、抗体X和抗体Y，一段时间后检测并比较肺上皮细胞的裂解百分比。30、略

【分析】【分析】

1；大肠杆菌属于细菌；是原核生物。微生物营养成分主要有碳源、氮源、水和无机盐等，另外还需要注意渗透压、温度、pH等条件。大肠杆菌常作为遗传学研究的实验材料．微生物培养的关键是无菌技术，防止外来杂菌的污染。

2；微生物培养的关键是无菌操作。使用强烈的理化因素杀死物体内外一切微生物的细胞、芽孢和孢子的过程称为灭菌；常用的方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌。消毒是指用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体体表或内部的一部分微生物的过程。常用的方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线或化学药物消毒法等。

【详解】

（1）大肠杆菌具有体积小；结构简单、变异类型容易选择、易培养、生活周期短等优点；培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑温度、酸碱度和渗透压等条件。

（2）灭菌使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物；所以对培养基和培养皿进行灭菌；消毒使用较为温和的物理或化学方法，仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物，操作者的双手需要进行清洗和消毒，紫外线能使蛋白质变性，还能损伤DNA的结构。

（3）稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释；然后将不同稀释度的菌液，分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，应保证样品稀释的比例适合。

（4）对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状；大小等菌落特征对细菌进行初步的鉴定。

（5）培养大肠杆菌时；在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生。

（6）因为有的大肠杆菌会释放一种强烈的毒素；并可能导致肠管出现严重症状，使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。

【点睛】

本题主要考查微生物培养的相关知识，要求考生能够识记大肠杆菌的培养条件以及其作为遗传实验的优点，区分掌握不同材料消毒和灭菌的方法，识记菌种鉴定的方法等，属于基础题。【解析】①.温度②.酸碱度③.易培养④.生活周期短⑤.灭菌⑥.消毒⑦.损伤DNA的结构⑧.比例合适⑨.鉴定(或分类)⑩.将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生.⑪.灭菌31、略

【分析】【分析】

筛选目的菌株的原理：在寻找目的菌株时；要根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。实验室中微生物菌株的筛选，也应用了同样的原理，即人为提供有利于目的菌株生长的条件（营养；温度、pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。而在筛选菌株的时候，常用到选择培养基。在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称作选择培养基。

【详解】

（1）①不同类型土壤中微生物的种类和数量不同；可采集来自不同环境（不同地区）的等量土壤，编号为A；B、C、D。本实验要筛选能高效降解一次性口罩（主要成分是聚丙烯纤维）的细菌，可人为制造有利于该菌生长的环境，因此将同型号的等量一次性口罩经灭菌处理后埋入各组土壤中。

②一段时间后；观察各组中口罩的腐烂程度。

③从口罩腐烂程度最大的一组上采集细菌样品；该样品即含有较强分解口罩能力的菌体。

（2）该目的菌是能高效降解一次性口罩（主要成分是聚丙烯纤维）的细菌；因此培养基以聚丙烯纤维作为唯一的碳源。这样的培养基按功能划分，属于选择培养基，在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。

（3）据图可知，上述需要对土样中的细菌计数，先将菌液梯度稀释，然后涂布在平板上，该接种的方法是稀释涂布平板法。据图可知，1g土样加入到99mL无菌水，稀释了100倍，随后取1mL的菌液分别加入9mL的无菌水，稀释10倍，因此最后被稀释了106倍，根据公式每克样品中的菌株数=（C÷V）×M=（65+66+67）÷3÷0.1×106=6.6×108个。稀释涂布平板法常用菌落数表示菌液中细胞数，当两个或多个细胞连在一起时平板上观察到的只是一个菌落，因此该方法所得测量值一般比实际值偏低。【解析】(1)灭菌最大。

(2)聚丙烯纤维选择在微生物学中；将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。

(3)稀释涂布平板法6.6×108当两个或多个细胞连在一起时平板上观察到的只是一个菌落六、综合题(共3题，共9分)32、略

【分析】【分析】

1、碳源：凡能为微生物提供所需碳元素的营养物质，无机碳源：CO2、NaHCO3；有机碳源：糖类；脂肪酸、花生粉饼、石油等。

2；无菌技术的主要内容。

①对实验操作的空间；操作者的衣着和手；进行清洁和消毒；

②将用于微生物培养的器皿；接种用具和培养基等器具进行灭菌；

③为避免周围环境中微生物的污染；实验操作应在酒精灯火焰附近进行；

④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相