2025年沪教新版选择性必修3生物上册阶段测试试卷含答案

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A.测定前，耐高温的和需要保持干燥的物品可以采用干热灭菌法处理B.过滤操作要在酒精灯火焰旁进行，防止杂菌污染C.将过滤完的滤膜紧贴在EMB培养基上，完成大肠杆菌的接种操作D.EMB培养基属于选择培养基，只有大肠杆菌能正常生长并形成深紫色菌落5、下图表示利用PCR技术扩增目的基因的部分过程，有关叙述错误的是（）

A.耐高温的DNA聚合酶将游离的脱氧核苷酸连接到引物3'端B.在第3轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段C.第1轮循环前的预变性和每轮循环的变性所用温度相同，时长不同D.从理论上推测，第3轮循环产物中含有引物A的DNA片段占3/46、PCR引物的3'端为结合模板DNA的关键碱基，5'端无严格限制，可用于添加限制酶切点等序列。下列叙述正确的是（）

A.该图表示PCR循环中的变性环节B.PCR第四次循环要消耗15对引物C.Taq酶催化相邻的两个游离dNTP之间形成磷酸二酯键D.用图中引物扩增两个循环后即可获得添加限制酶切点的产物7、据下图分析，下列有关基因工程的说法不正确的是（）

A.为防止目的基因与质粒任意结合而影响基因的表达，应用限制酶Ⅰ、Ⅱ同时切割二者B.DNA聚合酶、DNA连接酶的作用部位都是磷酸二酯键C.与启动子结合的是RNA聚合酶D.能够检测到标记基因表达产物的受体细胞中，也一定会有目的基因的表达产物评卷人得分二、多选题(共9题，共18分)8、如图为苹果酒的发酵装置示意图；下列叙述错误的是（）

A.发酵过程中酒精的产生速率越来越快B.集气管中的气体是酵母菌无氧呼吸产生的CO2C.发酵过程中酵母种群呈“J”型增长D.若发酵液表面出现菌膜，最可能原因是发酵瓶漏气9、下列防止生物武器的措施，正确的是（）A.通过立法，禁止生物武器的生产和扩散B.捕杀敌人投放的带菌的小动物C.大力发展生物武器，以牙还牙D.根据生物武器的类型采取相应措施10、下列关于单克隆抗体的叙述中，正确的是（）A.制备单克隆抗体是动物细胞融合技术最重要的应用B.单克隆抗体特异性强、纯度高、产量大、灵敏度高C.工业化制备单克隆抗体一般通过体内培养获得D.单克隆抗体是由骨髓瘤细胞和效应T细胞形成的杂交瘤细胞产生的11、下列关于生物技术的叙述，不正确的是（）A.烟草叶片可离体培养产生新个体，小鼠杂交瘤细胞可离体培养增殖B.动物细胞培养可用于检测有毒物质，茎尖培养可用于植物脱除病毒C.目的基因必须位于重组质粒的起始密码和终止密码之间，才能进行转录D.目的基因与荧光标记的DNA探针进行分子杂交，能形成磷酸二酯键12、科学家将4个关键基因移植入已分化的肌肉细胞中并表达；使这个细胞成为多能干细胞（iPS细胞），下图为该实验示意图。下列有关叙述错误的是（）

A.应用该技术可缓解器官移植时器官供应不足的问题B.iPS细胞所携带的遗传信息与肌肉细胞相同C.关键基因表达使细胞功能趋向专门化，降低了细胞的分化程度D.图示过程体现了iPS细胞的全能性13、图甲为培育转基因生物时选用的载体，图乙是含有目的基因的一段DNA序列，图中标注了相关限制酶的酶切位点。下列叙述错误的是（）

A.若通过PCR技术提取该目的基因，应该选用引物a和引物cB.构建表达载体时应选用BamHⅠ和HindⅡ这两种限制酶C.图乙中一个DNA分子在PCR仪中经过四轮复制得到所需目的基因的分子数为8个D.只利用含四环素的培养基就可以直接筛选出成功导入表达载体的受体细胞14、青蒿素主要用于恶性疟疾的症状控制以及耐氯喹虫株的治疗。为了快速检测青蒿素；科研人员利用细胞工程技术制备了抗青蒿素的单克隆抗体，其基本操作过程如下图。以下相关叙述正确的是（）

A.过程②体现了细胞膜的流动性，过程⑤若在体内进行则操作更简单B.过程③常使用选择培养基，过程④常使用抗原-抗体杂交技术C.若细胞乙均由细胞两两融合而成，则细胞乙、丙、丁的染色体组数一定相同D.骨髓瘤细胞通常是从小鼠脾脏中提取的，其表面糖蛋白减少，培养时失去接触抑制15、常见的辅助生殖技术有两种：一种叫做人工授精，即通过人工的方法，把精液或者精子送到雌性的生殖道，达到增加怀孕几率的目的；第二种辅助生殖技术就是试管动物，主要涉及体外受精、胚胎体外培养和胚胎移植等技术。下列叙述正确的是（）A.人工授精后形成的早期胚胎立即与母体子宫建立联系B.辅助生殖技术不一定会用到胚胎移植C.与克隆动物不同，试管动物的培育属于有性生殖D.人工授精和试管动物技术都要注意受体的生殖周期16、基因工程在农牧业、医药卫生和食品工业等多方面的应用发展迅速，如图表示利用基因工程技术生产人血清白蛋白的两条途径。下列叙述错误的是（）

A.若某基因是从人的细胞内提取mRNA经逆转录形成的，则该基因中不含启动子序列B.扩增目的基因时，利用耐高温的DNA连接酶从引物a、b的3'-端进行子链合成C.导入人血清白蛋白基因的绵羊受体细胞是乳腺细胞D.利用农杆菌转化法可将含有目的基因的重组质粒整合到植物受体细胞的染色体DNA上评卷人得分三、填空题(共7题，共14分)17、哺乳动物核移植可以分为______核移植（比较容易）和______核移植（比较难）。18、人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质一一培养基。其中，配制成的_______________的基质称为液体培养基，配制成的固体状态的基质称为________________________。在液体培养基中加入凝固剂_______________________后，制成琼脂固体培养基，它是实验室中最常用的培养基之一。微生物在_________________培养基表面生长，可以形成肉眼可见的菌落。（琼脂是一种从红藻中提取的____________________。琼脂在98℃以上熔化，在44℃以下凝固，在常规培养条件下呈现固态。）19、1.基因检测引发的伦理问题。

（1）基因身份证：基因身份证指把个人的_____和_____检测出来；记录在磁卡上，而做成的个人基因身份证。

（2）基因检测引发的争论①_____②_____③_____④_____⑤_____⑥_____

。项目。

反对。

支持。

技术方面。

目前人类对①及基因间的相互作用尚缺乏足够的认识；通过基因检测达到②的目的是很困难的；基因检测结果会给受检者带来巨大的③。

通过基因检测可以对遗传性疾病及早采取④；适时进行治疗，达到挽救患者生命的目的。

道德方面。

基因资讯的泄露造成⑤；如个人婚姻困难；人际关系疏远，更明显的是造成一支遗传性失业大军。

对于基因歧视现象；可以通过正确的科学知识传播；⑥教育和立法得以解决。

2.试管婴儿与设计试管婴儿的比较①_____②_____③_____④_____

。项目。

设计试管婴儿。

试管婴儿。

技术手段。

胚胎移植前①（填“需要”或“不需要”）进行遗传学诊断这一环节。

②（填“需要”或‘不需要”）进行遗传学诊断。

实践应用。

用于白血病；贫血病等遗传性疾病的预测。

解决不孕不育问题。

联系。

二者都是③受精；体外进行早期胚胎发育，再进行胚胎移植，从生殖方式上都为④

20、通过统计平板上的________________，就能推测出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果准确，一般选择菌落数在_________________________的平板进行计数。21、______——“分子缝合针”22、_______mol/L浓度下，DNA溶解度最大。23、细胞贴壁和接触抑制：悬液中分散的细胞很快就______，称为______。细胞数目不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面______时，细胞就会_____，这种现象称为______。评卷人得分四、判断题(共3题，共15分)24、要对蛋白质的结构进行设计改造，最终必须通过改造氨基酸序列来完成。（选择性必修3P94）()A.正确B.错误25、治疗性克隆是指利用克隆技术产生特定的细胞、组织和器官，用它们来修复或替代受损的细胞、组织和器官，从而达到治疗疾病的目的。（选择性必修3P106）()A.正确B.错误26、蛋白质工程是一项难度很大的工程，主要是因为蛋白质发挥功能必须依赖于正确的高级结构，而这种高级结构往往十分复杂。（选择性必修3P95）()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共1题，共10分)27、科研人员以病毒表面S蛋白作为主要的病毒抗原；利用基因工程研制疫苗用于接种预防，简要过程如图所示。回答下列问题：

(1)新冠病毒是一种RNA病毒，一般先通过_____________________得到cDNA，再经PCR技术获取大量S蛋白基因，PCR的中文全称是_____________________。

(2)PCR技术还需用到_____________________酶，该酶能够使脱氧核苷酸从引物的_____________________端开始连接，据下图分析，可选择的引物是_____________________。

(3)为了验证表达的S蛋白与病毒S蛋白有相同的免疫反应特性；请设计简单的检测方案并预期检测结果。

方案:_________________________________。

结果:_________________________________。评卷人得分六、综合题(共2题，共8分)28、科技的进步催生了基因工程；细胞工程和胚胎工程等；为人类的生产生活带来了便利。请回答下列问题：

（1）基因工程：①在水稻基因组中定位了一个目的基因a，其碱基序列未知，但已知临近区域的一段DNA序列，若将含有目的基因的DNA片段克隆出来，可以利用_______________设计引物。

②将含有目的基因的表达载体导入到受体细胞，最好选择水稻幼苗的分生区，原因是_____________________。

③目的基因能否在受体细胞（水稻）稳定遗传的关键是要_________________________。

④获得抗除草剂转基因水稻自交系A的技术路线如下图。

为防止酶切产物自身环化，构建表达载体需用2种限制酶，选择的原则是____________。

A．G基因编码蛋白质的序列中；每种限制酶只有一个切割位点。

B．Ti质粒内；每种限制酶只有一个切割位点。

C．酶切后；Ti质粒形成的两个黏性末端序列相同。

D．酶切后；G基因形成的两个黏性末端序列不相同。

（2）下列属于植物克隆和动物克隆共有的培养方法是（_________）

A．原生质体培养传代培养B．器官培养愈伤组织培养。

C．贴壁培养传代培养D．悬浮培养器官培养。

（3）灭活的疫苗安全性高、应用广泛。灭活是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力，但不破坏病原体的_____________________________。

（4）胚胎工程大大提高了优良母畜的繁殖潜力，促进了畜牧业的发展，增大了人类的收益。胚胎工程的理论基础是哺乳动物在自然条件下，配子的发生、___________和____________的发育规律。29、酵母菌絮凝是指菌体细胞间通过细胞壁相互粘附；聚集成团的现象。适当提高酵母菌的絮凝能力；有助于发酵结束时细胞和产物的分离，可大幅节约生产成本。科研人员利用基因工程改造酵母菌，使其絮凝能力提升。

(1)酵母菌的R基因对絮凝能力有一定的抑制作用，图1表示科研人员利用同源重组（在两个DNA分子的同源序列之间直接交换的一种重组）基因敲除技术敲除R基因的过程。

①研究人员将整合了lox序列的庆大霉素抗性基因导入酵母菌，lox-庆大霉素抗性基因通过同源重组的方式整合到酵母菌基因组中，重组片段上庆大霉素抗性基因的作用是_____________。

②利用含有庆大霉素的培养基获得单菌落，再挑取单菌落进行PCR扩增，若要验证庆大霉素抗性基因是否替换R基因，则扩增时选择图2中的引物是_________和_________，在PCR延伸阶段中_____________催化脱氧核苷酸连接到引物的_________端。

③给酵母菌导入PC质粒，并将其置于添加____________的培养基中；获得敲除R基因且无庆大霉素抗性基因标记的R菌。

(2)科研人员对野生菌株和R基因敲除菌株的酒精发酵能力和絮凝能力进行了测定，实验结果表明，获得了R基因敲除且不影响酒精发酵能力的符合人类生产需求的菌株。请在图3中依据实验结果补充实验数据。______

参考答案一、选择题(共7题，共14分)1、C【分析】【分析】

转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应；过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。

【详解】

A；食用转基因的食物时；可能会因外源基因产生的性状对食用者不适而造成不良反应，A正确；

B；转基因植物是人造物种；可能与自然物种杂交，从而危及生态系统的稳定性，B正确；

C；基因污染是一种可增殖的污染；可通过繁殖而传递下去，C错误；

D；在大面积种植转基因植物时；要在周围设置缓冲带作物以防转基因的扩散，D正确。

故选C。2、C【分析】【分析】

动物细胞培养依据细胞增殖的原理；培养过程中需要无菌；无毒的环境中，以免杂菌污染；同时需要提供适宜的营养物质和温度、pH、气体条件。

【详解】

A、培养环境需要CO2维持培养液一定的pH；A错误；

B；体外培养的细胞有的能贴壁生长；有的能悬浮生长，癌细胞培养时不会发生接触抑制的现象，B错误；

C；培养液中通常含有糖类、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等；以满足细胞分裂、生长的需要，C正确；

D；培养瓶中细胞若悬浮生长；可直接用离心法收集，制成悬液后分瓶培养，D错误。

故选C。

【点睛】3、A【分析】【分析】

为了获得大量斑马鱼胚胎细胞；可用胰蛋白酶处理斑马鱼囊胚的内细胞团分散成单个细胞，取分散细胞作为初始材料进行原代培养。

【详解】

A；胚胎干细胞是一类全能型细胞；囊胚期的细胞开始出现分化，其中内细胞团细胞具有全能性，而滋养层细胞不具有全能性，故处理斑马鱼胚胎的滋养层，不能获得大量胚胎干细胞，A错误；

B；排卵多（便于生物学统计）、体外受精（便于观察和计数）等都是斑马鱼作为模式脊椎动物的优点；B正确；

C；斑马鱼的透明胚胎；有利于观察药物对其体内器官发育的影响，C正确；

D；题干信息“斑马鱼和人类基因有着87%的相似性”；故利用斑马鱼进行实验获得的结论大多数情况下也适用于人类，D正确；

故选A。4、D【分析】【分析】

大肠杆菌的代谢能与伊红美蓝（EMB培养基的指示剂）反应；菌落呈黑色，因此可以制备EMB培养基来鉴别大肠杆菌。在实验室进行微生物培养的时候都需要进行严格的无菌操作，尽量减少杂菌的污染。

【详解】

A；能耐高温的；需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具等，可以采用干热灭菌法，A正确；

B；在酒精灯火焰附近操作可以减少空气中的杂菌污染；B正确；

C；由于过滤完后细菌黏附在滤膜上；将滤膜紧贴在EMB培养基上可以将黏附在滤膜上的菌种接种在培养基上，C正确；

D；EMB培养基属于鉴别培养基；D错误。

故选D。5、D【分析】【分析】

PCR全称为聚合酶链式反应；是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术，所利用的原理为DNA分子的复制，因此PCR技术一般用于基因扩增。①原理：DNA复制；②条件：模板DNA；四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）；③方式：以指数的方式扩增，即约2n；④过程：变性→复性→延伸。

【详解】

A；耐高温的DNA聚合酶总将游离的脱氧核苷酸连接到3′端；所以子链的合成方向是从子链的5′端向3′端延伸，A正确；

B；由于题图中的引物A和引物B均不在该片段的端点；因此第一轮循环后，得到的两DNA片段中两条脱氧核苷酸链都不等长；第二轮中亦不会出现等长的引物，所以在第二轮循环产物中不会出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段，在第三轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段，B正确；

C；PCR中第一个循环的预变性；时间是要比其他循环的变性时间长的，一般为5～10min，其他的每个循环的变性时间是一分钟左右，变性的温度都相同，都在90-95℃左右，C正确；

D；由图可知；由原来的每条母链为模板经第一轮合成的两个DNA分子中，只含有引物A或引物B，而以新合成的子链为模板合成新DNA分子时，两种引物都含有，故第三轮循环共产生8个DNA分子，其中含有引物A的分子是7个，即占7/8，D错误。

故选D。6、D【分析】【分析】

PCR全称为聚合酶链式反应；是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。PCR需要模板DNA；四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）。

【详解】

A；图中引物与模板链碱基互补配对；该图表示PCR循环中的复性环节，A错误；

B、PCR三次循环共消耗7（23-1）对引物，PCR四次循环共消耗15（24-1）对引物；第四次循环要消耗8对引物，B错误；

C；dNMP只有一个磷酸基团；为脱氧核苷酸，dNTP有三个磷酸基团，延伸时，在Taq酶催化下，dNMP作为扩增的原料会依次连接到3'端，相邻的dNMP间形成磷酸二酯键，C错误；

D；由于一个引物不在该片段的端点；因此第一轮循环后，得到的一个DNA片段中两条脱氧核苷酸链都不等长，通过绘图可推知，再经过一次循环，产物中开始出现脱氧核苷酸链等长的DNA片段，所以扩增两个循环后即可获得添加限制酶切点的产物，D正确。

故选D。7、D【分析】【分析】

基因表达载体的构建：1；过程：用同一种限制酶切割目的基因和运载体；再用DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组DNA分子。2、目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在并且可以遗传给下一代并表达和发挥作用。3、基因表达载体的组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因。（1）启动子在基因的首段，它是RNA聚合酶的结合位点，能控制着转录的开始；（2）终止子在基因的尾端，它控制着转录的结束；（3）标记基因便于目的基因的鉴定和筛选。

【详解】

A；限制酶Ⅰ和酶Ⅱ识别的核苷酸序列不同；所以用限制酶Ⅰ和酶Ⅱ同时切割目的基因和质粒可防止二者任意结合，A正确；

B；DNA聚合酶、DNA连接酶的作用部位都是磷酸二酯键；前者是连接单个的脱氧核苷酸，后者是连接DNA片段，B正确；

C；启动子和终止子都是一段有特殊结构的DNA片段；其中启动子是RNA聚合酶的结合位点，能启动转录过程，而终止子能终止转录过程，C正确；

D；重组DNA分子上的抗性基因可用于目的基因的检测与鉴定；但是有目的基因也不一定成功表达，D错误。

故选D。二、多选题(共9题，共18分)8、A:B:C【分析】【分析】

【详解】

A；酵母菌首先进行有氧呼吸；而后进行无氧呼吸，发酵过程中由于营养物质的减少、有害代谢产物的积累，pH的改变，酒精的产生速率逐渐减慢，A错误；

B、集气管中的气体是酵母菌有氧呼吸和无氧呼吸产生的CO2；B错误；

C；发酵过程中酵母种群呈“S”型增长；而后减少，C错误；

D；若酵液表面出现菌膜；属于醋酸菌，需氧型微生物，可能是发酵瓶漏气引起的，D正确。

故选ABC。

【点睛】9、A:B:D【分析】【分析】

生物武器种类：包括致病菌、病毒、生化毒剂，以及经过基因重组的致病菌等。把这些病原体直接或者通过食物、生活必需品等散布到敌方，可以对军队和平民造成大规模杀伤后果。

生物武器的特点：1、单位面积效应大；2、有特定的伤害对象；3、具有传染性；4、危害时间久；5、不易被发现和鉴定；6、使用者本身易受伤害；7、生物武器造价低，技术难度不大，隐秘性强，可以在任何地方研制和生产。

生物武器的局限性：1；生物武器主要指病原微生物；所以它们的生存、繁殖、死亡易受环境条件（如温度）的影响。2、还受地形、风向等多种条件影响。3、生物武器使用时不易控制，使用不当可危害本方安全。

【详解】

生物武器是多种多样的；对于不同的生物武器应用不同的防治方法，但总的原则是禁止生物武器的生产和扩散，因此ABD正确，C错误。

故选ABD。10、A:B【分析】【分析】

单克隆抗体的制备过程是：对小动物注射抗原；从该动物的脾脏中获取效应B细胞，将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，克隆化培养杂交瘤细胞（体内培养和体外培养），最后获取单克隆抗体。

【详解】

A；制备单克隆抗体是动物细胞融合技术最重要的应用；融合后形成的杂交瘤细胞既能无限增殖，又能产生单克隆抗体，A正确；

B；单克隆抗体具有特异性强、纯度高、灵敏度高；并可能大量制备的特点，B正确；

C；体内诱生法制备的单克隆抗体需要注入到小鼠的体内；最后从小鼠的腹腔中提取腹水，此方法比较麻烦，而且抗体的量也较少，因此对于工业上需求较多的抗体而言，通常是采用体外培养法，C错误；

D；单克隆抗体是由骨髓瘤细胞和效应B细胞形成的杂交瘤细胞产生的；D错误。

故选AB。11、C:D【分析】【分析】

基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建（核心）；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与表达。细胞工程中用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁获得原生质体和用胰蛋白酶处理动物组织得到单个细胞都采用了酶的专一性原理。诱导原生质体融合和动物细胞融合都采用了生物膜的流动性原理；植物组织培养的原理是细胞的全能性，动物细胞培养的原理是细胞增殖。

【详解】

A；由细胞工程原理可知；植物细胞或组织离体培养可以得到植物个体，动物细胞可以进行培养而实现增殖，A正确；

B；细胞工程应用非常广泛；动物细胞培养可用于检测有毒物质，茎尖培养可用于植物脱除病毒，B正确；

C；基因表达载体构建必须使目的基因必须位于重组质粒的启动子和终止子之间；这样才能有利于目的基因表达，C错误；

D；DNA分子杂交的原理是碱基互补形成杂交带；不能产生磷酸二酯键，D错误。

故选CD。12、B:C:D【分析】【分析】

1；干细胞的概念：动物和人体内保留着少量具有分裂和分化能力的细胞。

2；干细胞的分类：（1）全能干细胞：具有形成完整个体的分化潜能；（2）多能干细胞：具有分化出多种细胞组织的潜能；（3）专能干细胞：只能向一种或两种密切相关的细胞类型分化。如神经干细胞可分化为各类神经细胞；造血干细胞可分化为红细胞、白细胞等各类血细胞。

3；胚胎干细胞的主要用途是：（1）可用于研究哺乳动物个体发生和发育规律；（2）是在体外条件下研究细胞分化的理想材料；在培养液中加入分化诱导因子，如牛黄酸等化学物质时，就可以诱导ES细胞向不同类型的组织细胞分化，这为揭示细胞分化和细胞凋亡的机理提供了有效的手段；（3）可以用于治疗人类的某些顽疾，如帕金森综合症、少年糖尿病等；（4）利用可以被诱导分化形成新的组织细胞的特性，移植ES细胞可使坏死或退化的部位得以修复并恢复正常功能；（5）随着组织工程技术的发展，通过ES细胞体外诱导分化，定向培育出人造组织器官，用于器官移植，解决供体器官不足和器官移植后免疫排斥的问题。

【详解】

A；由题图知；应用该技术可以缓解器官移植时器官供应不足的问题，A正确；

B；iPS细胞导入了外源基因；其遗传信息与肌肉细胞不同，B错误；

C；关键基因表达形成iPS细胞；没有使细胞功能趋向专门化，C错误；

D；过程①②③表示细胞分化；其实质是基因的选择性表达，没有体现iPS细胞的全能性，D错误。

故选BCD。13、B:D【分析】【分析】

分析题图：构建表达载体时；不能选用限制酶BamHⅠ，否则会导致两种抗性基因都被破坏，因此应该选择Bc1I和HindⅢ这两种限制酶，根据引物的延伸方向，所用的引物为图乙中引物a和引物c。

【详解】

A；PCR技术要求两种引物分别和目的基因的两条单链结合；根据引物的延伸方向，所用的引物为图乙中引物a和引物c，A正确；

B；根据图甲可知；BamHⅠ会导致两种抗性基因都被破坏，同时为防止目的基因自身环化，因此只能选BclI和HindⅢ两种限制酶切割，B错误；

C；图乙中一个DNA分子在PCR仪中经过四轮复制可得到16个DNA片段；其中所需目的基因的分子数为8个，C正确；

D；由于选择BclI和HindⅢ这两种限制酶；破坏了氨苄青霉素抗性基因，但没有破坏四环素抗性基因，因此应该先用含四环素的培养基筛选出含有基因表达载体和普通质粒的大肠杆菌，再用含氨苄青霉素的培养基筛选含重组质粒的大肠杆菌，培养基加氨苄青霉素含普通质粒的大肠杆菌能生存，而含重组质粒的不能生存，从而筛选出成功导入表达载体的受体细胞，D错误。

故选BD。14、A:B:C【分析】【分析】

题图分析：过程①为注射抗原；诱导小鼠产生具有免疫能力的B细胞；过程②为将具有免疫能力的B细胞和骨髓瘤细胞融合；过程③用选择性培养基筛选杂交瘤细胞；过程④用抗体检测和克隆培养得到能产生特定抗体的杂交瘤细胞；过程⑤为提取单克隆抗体。

【详解】

A；过程②为将具有免疫能力的B细胞和骨髓瘤细胞融合；体现了细胞膜的流动性；过程⑤为提取单克隆抗体，若在体内进行（可从小鼠腹水中提取），则操作更简单，A正确；

B；过程③是筛选杂交瘤细胞；常使用选择培养基（未融合的细胞，融合的具有相同核的细胞均死亡，杂交瘤细胞能正常生存）；过程④用抗体检测和克隆培养得到能产生特定抗体的杂交瘤细胞，常使用抗原—抗体杂交技术，B正确；

C；因细胞甲和细胞乙均来源于小鼠；若细胞乙均由细胞两两融合而成，则细胞乙和经筛选后的丙、丁的染色体组数一定相同，C正确；

D；骨髓瘤细胞是从小鼠的骨髓中提取的；脾脏中无骨髓瘤细胞，D错误。

故选ABC。15、B:C:D【分析】【分析】

胚胎工程技术包含的内容很丰富；目前在医学和生产上应用较多的是体外受精；胚胎移植和胚胎分割等，借助这些技术，可以进一步挖掘动物的繁殖潜力。哺乳动物的体外受精技术主要包括卵母细胞的采集、精子的获取和受精等步骤。采集到的卵母细胞和精子，要分别在体外进行成熟培养和获能处理，然后才能用于体外受精。

【详解】

A；人工授精后形成的早期胚胎在一定时间内并未与母体子宫建立组织上的联系；A错误；

B；如果是人工授精的方式进行辅助生殖技术；就不需要胚胎移植，B正确；

C；克隆技术属于无性繁殖；试管动物的培育涉及精卵结合，属于有性生殖，C正确；

D；受体的生殖周期将影响人工授精和试管动物技术的成功率；故人工授精和试管动物技术都要注意受体的生殖周期，D正确。

故选BCD。16、B:C:D【分析】【分析】

将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法；农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可整合到受体细胞的染色体DNA上。基因表达载体常包括目的基因；启动子、终止子、标记基因。标记基因是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。

【详解】

A；mRNA是由基因启动子后面的序列编码而来的；若某基因是从人的细胞内提取mRNA经逆转录形成的，则该基因中不含启动子序列，A正确；

B、扩增目的基因时，利用耐高温的DNA聚合酶从引物a、b的3'-端进行子链合成；B错误；

C；导入人血清白蛋白基因的绵羊受体细胞不是乳腺细胞；而是受精卵或早期胚胎细胞，C错误；

D；农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞；并且整合到受体细胞染色体的DNA上，根据农杆菌的这一特点，将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以把目的基因整合到植物细胞中染色体的DNA上，将基因转入动物细胞常用显微注射法，D错误。

故选BCD。三、填空题(共7题，共14分)17、略

【解析】①.胚胎细胞②.体细胞18、略

【解析】①.液体状态②.固体培养基③.琼脂④.固体⑤.多糖19、略

【分析】【分析】

1.基因检测可以把人体内的致病基因和易感基因检测出来；通过采取一定的预防措施预防遗传病的发生，但同时可能会带来基因歧视等伦理道德方面的问题。

2.设计试管婴儿不同于试管婴儿；试管婴儿是为了解决不孕不育的问题，而设计试管婴儿是为了解决器官移植方面的医疗问题。

【详解】

1.（1）基因身份证是指把每个人的致病基因和易感基因都检测出来；并记录在磁卡上，这样到医院看病时，只要带上这种身份证，医生就可以“对证”治疗。

（2）反对基因检测的人认为：目前人类对基因结构及基因间相互作用尚缺乏足够的认识；要想通过基因检测达到预防疾病的目的是困难的；况且人类的多基因病，既与基因有关，又与环境和生活习惯有关，有某种致病基因的人不见得就会患病。但是，基因检测结果本身就已经足以给受检者带来巨大的心理压力。个人基因资讯的泄露所造成的基因歧视，势必造成奇特的失业大军，即遗传性失业大军。个人基因资讯被暴露之后，还会造成个人婚姻困难；人际关系疏远等严重后果。支持基因检测的人认为：通过基因检测可以对遗传性疾病及早采取预防措施，适时进行治疗，达到挽救患者生命的目的。对于基因歧视现象，可以通过正确的科学知识传播、伦理道德教育和立法得以解决。

2.设计试管婴儿需要因而具有特定的性别或遗传性状；因此胚胎移植前需要进行遗传学诊断这一环节，而试管婴儿是为了解决不孕不育问题，不需要考虑婴儿的性别等问题，不需要进行遗传学诊断。二者的共同点是：两者都是体外受精，并进行体外早期胚胎培养，都要经过胚胎移植，都是有性生殖。

【点睛】

1.基因与疾病的关系：具有致病基因的个体不一定患遗传病；因为生物的性状还受到环境因素的影响；没有致病基因也可能患病，因为基因表达的蛋白质，在加工或修饰过程中出现错误，也会出现症状。

2.明确设计试管婴儿和试管婴儿目的的不同是解答本题的关键之一。【解析】致病基因易感基因基因结构预防疾病心理压力预防措施基因歧视伦理道德需要不需要体外有性生殖20、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】菌落数30～30021、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】DNA连接酶22、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】0．1423、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】贴附在瓶壁上细胞贴壁相互抑制停止分裂增殖细胞的接触抑制。四、判断题(共3题，共15分)24、B【分析】【详解】

要对蛋白质的结构进行设计改造，最终必须通过改造基因中的碱基序列来完成，因为基因能指导蛋白质的生物合成，故说法错误。25、A【分析】【详解】

治疗性克隆是指利用克隆技术产生特定的细胞、组织和器官，用它们来修复或替代受损的细胞、组织和器官，从而达到治疗疾病的目的。本说法正确。26、A【分析】【详解】

蛋白质工程是一项难度很大的工程，主要是因为蛋白质发挥功能必须依赖于正确的高级结构，而这种高级结构往往十分复杂，并且蛋白质的结构具有多样性，这也在一定程度上增加了蛋白质工程的难度，故说法正确。五、实验题(共1题，共10分)27、略

【分析】【分析】

PCR原理：在解旋酶作用下；打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4种游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3'端延伸DNA链。

【详解】

（1）利用RNA得到相应DNA的方法为逆转录；起作用的酶为逆转录酶。在体外将DNA扩增的技术是PCR，中文名称为多聚酶链式反应。

（2）PCR技术是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术；该过程需要热稳定DNA聚合酶（Taq酶），热稳定DNA聚合酶(Taq酶)能够使脱氧核苷酸从引物的3'端开始连接，使子代DNA从5'向3'延伸；进行扩增时，还应选择一对方向相反的引物，且与模板的3'端结合，据图可知，应选择Ⅱ；Ⅲ。

（3）细胞内是否合成了由目的基因控制的蛋白质，使用抗原-抗体杂交法检测，为了检验表达的S蛋白是否与病毒S蛋白有相同的免疫反应特性，可用S蛋白与新冠病毒肺炎康复患者血清进行抗原-抗体杂交实验来进行检测，本实验是验证性实验，实验结果是唯一的，因此本实验结果是出现杂交带。【解析】(1)逆转录多聚酶链式反应。

(2)热稳定DNA聚合酶##Taq酶3'II；Ⅲ

(3)用表达的S蛋白与新冠病毒肺炎康复患者血清进行抗原-抗体杂交实验出现杂交带六、综合题(共2题，共8分)28、略

【分析】【分析】

1；构建基因表达载体时需要同一种限制酶切割目的基因和运载体；用DNA连接酶连接。为防止酶切产物自身环化，切割目的基因两端常用两种酶分别切割。

2；植物组织培养技术：外植体经过脱分化形成愈伤组织；再经过再分化形成胚状体，最后形成新植物体。

3；动物细胞培养的过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞；制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。

【详解】

（1）①克隆DNA片段可以采用PCR技术；利用已知的DNA片段设计引物。

②将含有目的基因的表达载体导入到受体细胞；需要将受体细胞培育成植株，由于分生区的细胞分化程度低，全能性高，所以可以作为受体细胞