2025年沪教版选择性必修3生物上册阶段测试试卷

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年沪教版选择性必修3生物上册阶段测试试卷391考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五总分得分评卷人得分一、选择题(共9题，共18分)1、下列生物技术操作对遗传物质的改造，不能遗传给子代的是（）A.将含胰岛素基因的表达载体转入大肠杆菌，筛选获得的基因工程菌B.通过植物体细胞杂交获得的番茄--马铃薯杂种植株C.将腺苷酸脱氨酶基因转入淋巴细胞后回输患者，进行基因治疗D.将生长激素基因导入奶牛受精卵，培育出能分泌含生长激素乳汁的奶牛2、不属于动物细胞培养必需条件的是（）A.无菌、无毒的环境B.适宜的温度和pHC.O2等气体环境D.适宜的光照条件3、下列有关现代生物工程技术应用的叙述，正确的是（）A.若转基因植物的外源基因来源于自然界，则不存在安全问题B.克隆人违背现有的伦理道德，会造成严重的社会问题C.因为转基因技术没有新基因产生，所以不存在安全问题D.由于存在生殖隔离，大田种植转基因抗旱、抗除草剂农作物不存在生物安全性问题4、某生物兴趣小组以稻草为原料，通过纤维素分解菌的作用来生产葡萄糖。下列有关叙述正确的是（）A.纤维素酶是单酶，能够直接将纤维素分解成葡萄糖B.分离纤维素分解菌，可选择含纤维素的牛肉膏蛋白胨培养基C.验证纤维素分解菌存在与否，可在培养基中添加刚果红染色剂D.要通过平板划线法计数纤维素分解菌5、下列关于转基因生物引发的安全性问题的叙述，错误的是（）A.对待转基因技术，应趋利避害B.转基因生物引起安全性问题的原因之一是外源基因插入宿主基因组的部分往往是随机的C.转基因生物引发的安全性问题是无法弥补的D.转基因生物有可能造成安全性问题，但不能一概而论6、下列有关微生物计数的叙述中，不正确的是（）A.因为土壤中各类微生物的数量不同，所以，为获得不同类型的微生物要按不同的稀释倍数进行分离B.测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释范围不同C.测定土壤样品中的细菌数目，常用平板划线法进行菌落计数D.牛肉膏蛋白胨培养基的菌落数明显大于选择培养基的数目，说明选择培养基已筛选出一些细菌菌落7、腐乳是我国古代劳动人民制造出的一种经过微生物发酵的大豆食品。下列相关叙述错误的是（）A.制作的腐乳比豆腐更容易保存B.酵母菌也参与腐乳的发酵过程C.腐乳制作过程中，有机物的种类增加D.微生物产生的酶将豆腐中的蛋白质分解为葡萄糖8、如图表示通过植物细胞工程相关技术，利用甲（2n）、乙（2n）两种植物（各含有一种不同的优良性状）培育高产耐盐植株的过程，其中序号代表过程或结构。请分析下列说法正确的是（）

A.①过程常用胰蛋白酶作为化学诱导剂B.②不是甲和乙融合的杂种细胞C.由愈伤组织到④需经过脱分化和再分化的过程D.可通过配制选择培养基对目的植株进行选择9、下列过程不属于克隆的是（）A.单个大肠杆菌形成单菌落B.壁虎断尾后长出新尾巴C.PCR扩增抗除草剂基因D.植物组织培养技术扩繁兰花评卷人得分二、多选题(共9题，共18分)10、营养缺陷性菌株是野生型菌株经过人工诱变或自发突变失去合成某种成长因子的能力；只能在补充了相应的生长因子的基本培养基中才能正常生长的变异菌株。某研究小组对酵母菌用紫外线照射后将其接种到甲培养皿的培养基上，一段时间后将甲培养皿的菌落影印接种（不改变菌落位置）到乙；丙两培养皿的培养基中，进一步培养得到如下图所示结果。

下列分析正确的是（）A.接种到甲培养皿采用的是稀释涂布平板法B.甲、丙两培养皿中的培养基是基本培养基C.甲培养皿中菌落数有可能比接种的酵母菌数少D.甲、乙、丙三个培养皿都可能存在营养缺陷型11、从胰岛素依赖型糖尿病患者的骨髓中分离骨髓间充质干细胞（MSC），诱导分化成胰岛样细胞，再导入该患者体内。放射性免疫分析结果表明诱导的胰岛样细胞团可以正常分泌胰岛素，患者的血糖恢复正常。下列说法正确的是（）A.培养骨髓间充质干细胞的培养液通常需加入血清B.在体外连续培养时，利用胰蛋白酶将接触抑制的骨髓间充质干细胞分开C.在功能上，骨髓间充质干细胞具有发育的全能性D.治疗成功后，康复者的血型有可能发生改变12、转MT-like基因的衣藻对Pb、Cd等重金属离子的抗性明显增强，对Cb2+富集效应显著。某研究小组计划通过多聚酶链式反应（PCR）技术扩增MT-like基因，并进一步通过基因工程手段构建净化重金属废水的工程菌。下列有关PCR操作的叙述，正确的是（）A.PCR扩增需要加入Taq酶和DNA连接酶B.需设计一对与MT-like基因两端序列互补的引物C.设计引物时要避免引物之间形成互补碱基对D.长度相同，但GC含量高的引物需要更高的退火温度13、下列关于传统发酵技术应用的叙述，错误的是（）A.腌制泡菜若时间过短，泡菜中杂菌少但酸性弱、亚硝酸盐含量高B.家庭制作果醋和泡菜时，表面产生菌膜分别由醋酸菌、酵母菌形成C.当氧气不充足、缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸D.制作泡菜时乳酸菌可以将葡萄糖分解成乳酸和CO214、下列有关动物细胞培养的叙述正确的是（）A.用于培养的细胞大都取自胚胎或幼龄动物的器官或组织B.将所取的组织先用胃蛋白酶等进行处理使其分散成单个细胞C.在培养瓶中要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离，制成悬浮液D.动物细胞培养只能传50代左右，所培养的细胞全部衰老死亡15、RNA经逆转录后再进行PCR扩增的技术称为RT－PCR，过程如图所示。下列相关叙述正确的是（）

A.过程①需要RN逆转录酶、引物、核糖核苷酸等条件B.真核细胞的mRNA经过程①②获得的DNA无内含子片段C.过程③PCR扩增时引物中的CG含量会影响退火温度D.RT－PCR技术可应用于新冠病毒（RNA病毒）的核酸检测16、利用基因编辑技术将病毒外壳蛋白基因导入猪细胞中，然后通过核移植技术培育基因编辑猪，可用于生产基因工程疫苗。如图为基因编辑猪培育流程，下列叙述不正确的是（）

A.对1号猪使用促性腺激素处理，可使其超数排卵B.采集到的卵母细胞需在体外培养到MⅡ期才能用于核移植C.产出的基因编辑猪的性染色体来自2号与3号猪D.为检测病毒外壳蛋白基因是否被导入4号猪并正常表达，可采用DNA测序的方法17、利用基因工程技术可使大肠杆菌生产人的胰岛素原。下列相关叙述中，错误的是（）A.人和大肠杆菌在合成胰岛素原时，转录和翻译的场所是相同的B.DNA连接酶能催化磷酸与脱氧核糖形成化学键C.通过检测发现大肠杆菌中没有胰岛素原产生，则可判断重组质粒未导入受体菌D.人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原有较高的生物活性18、2019年，中国科学院神经科学研究所利用CRISPR—Cas9基因编辑技术，用基因敲除的猴的体细胞通过克隆技术培育出5只克隆疾病猴。下列相关叙述错误的是（）A.克隆猴基因组成差异小，可减少个体差异对实验的干扰B.受精卵经基因编辑后形成的胚胎都成功发育为克隆疾病猴C.克隆疾病猴有助于研究该疾病致病机制和开发相应药物D.可以运用该基因编辑技术进行生殖性克隆人的研究评卷人得分三、填空题(共9题，共18分)19、一般包括______、______等技术20、体细胞核移植技术存在的问题：

克隆动物存在着健康问题、表现出______缺陷等。21、动物细胞融合的意义：克服了______，成为研究_____、_____、肿瘤和生物新品种培育的重要手段。22、基因的“剪刀”是_____，它的化学本质是_____，它只能识别一种特定的_____，并在_____上切割DNA分子；基因的“针线”是______，它能连接DNA骨架上的_____，DNA的骨架由___________构成；基因的运载体是将_____送入_____的运输工具。目前常用的运载体有_____、________和_____。质粒存在于许多_____和______等生物中，是拟核或_____外能够_____的很小的环状_____。23、基因工程的原理是_____，又叫_____或_____。通俗地说，就是按照_____，把一种生物的_____提取出来，加以_____，然后放到_____，_____地改造生物的遗传性状。24、______——“分子缝合针”25、基因工程操作一般经历如下四个步骤：_____。26、结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：______和______。27、动物细胞培养的流程：

取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用______处理分散成______→制成______→转入培养瓶中进行______培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续_____培养。评卷人得分四、实验题(共4题，共36分)28、近年来；纪录片《舌尖上的中国》引发全民关注美食的热潮，其中多次讲述了利用不同微生物的发酵作用制作的美味食品。请分析回答下列问题：

（1）在果醋制作时；运用醋酸菌在供应________________和糖源充足时，将糖分解成醋酸；在糖源不充足时，也可以生成醋酸。反应式为：________________________。

（2）制作泡菜的腌制过程中；会产生亚硝酸盐。在____________________条件下，亚硝酸盐与对氨苯磺酸发生________________反应后，与N—1—萘基乙二胺盐酸盐结合形成__________色染料。

（3）腐乳制作的流程是：让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制。用盐腌制时；应注意控制________；配制卤汤时，要使卤汤中酒的含量控制在_____________%左右。

（4）在果酒制作时，变酸的原因是_____________________________。29、鼠伤寒沙门氏菌的野生型菌株（his+）可在基本培养基（含微量组氨酸）上生长形成菌落，而突变型的组氨酸营养缺陷型菌株（his-）不能合成组氨酸；无法在基本培养基上形成菌落。利用his菌株可检测环境或食品中是否存在化学致癌剂（诱发his-菌株突变）。回答下列问题：

(1).基本培养基的成分主要包括_____。制备基本固体培养基的操作：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。倒平板时应注意：_____。

(2).检测是否存在化学致癌剂时，用_____法将his-菌株接种于基本培养基上，使其密集均匀分布在平板上，将浸泡过待测化合物的滤纸片贴于平板中央。若培养基灭菌合格，则可能影响该检测结果的两个重要因素是_____。若图A为对照组，B为实验组，则A组滤纸片的处理方法是_____。经正确检验后，结果如B所示，则实验结果和结论为_____。

(3).使用过的培养基在丢弃之前应做的处理及目的是_____。30、利用乳腺生物反应器获取药用蛋白具有产量高；成本低等优点。如图为培育转基因奶牛获得人血清白蛋白的流程。

请回答：

（1）PCR扩增人血清白蛋白基因使用的酶是_____________。要使人血清白蛋白基因在转基因奶牛的乳腺细胞中表达，应将其与____________基因的启动子等调控组件重组。

（2）基因工程的核心步骤是________________________，将目的基因导入牛受精卵所用的方法是____________________。

（3）体外受精前精子要进行____________处理，过程②包括__________技术和胚胎移植技术；可用___________技术获得多只与该转基因奶牛遗传物质相同的牛犊。

（4）若要检测牛奶中是否含有人血清白蛋白，可采用_________________技术。31、新冠病毒竟然是友军？近日有媒体报道称感染新冠病毒可以治疗肺癌；该报道中的结论是基于美国科学家发表的一篇论文《鼻部吸入新冠刺突蛋白S1可缓解肺癌发展》。该研究使用新冠病毒的刺突蛋白S1进行了体内和体外实验，分析回答下列问题：

(1)体外实验：首先培养肺癌细胞，在细胞培养液中除了加入必要的营养物质外，还加了一定浓度的________以防止杂菌污染，细胞瓶放在37℃的________中培养。随后用刺突蛋白S1处理肺癌细胞并检测细胞的凋亡率，结果如图1。结果表明________。

(2)小鼠体内实验：流程如图2，实验结果如图3。其中NNK是尼古丁的衍生物亚硝胺酮，长时间对小鼠进行NNK处理的目的是________。

(3)对比体内实验和体外实验的结果发现刺突蛋白S1在体内抑癌的效果比体外的效果好得多，推测原因可能是刺突蛋白S1引起了免疫系统的________功能激活。为了进一步确认肺部肿瘤比例的减少到底是不是因为新冠病毒刺突蛋白S1的作用，还应增加一组对照为NNK+________。

(4)上述研究成果是否足以证明感染新冠病毒可以治疗肺癌？请做出判断并说明理由________________。评卷人得分五、综合题(共4题，共36分)32、我国酿酒技术历史悠久；许多古籍有所记载。《唐书》记载，“葡萄酒，西域有之及破高昌京中始识其味。”《史记·大宛列传》记载，“宛左右以蒲陶（即葡萄）为酒，富人藏酒至万馀石，久者数十岁不败。”回答下列问题：

（1）葡萄酒的制作需要以酵母菌为菌种；其异化作用类型是________。酵母菌与醋酸菌在细胞结构上的主要区别是醋酸菌________________________。

（2）使用血细胞计数板对活菌种进行计数；取1ml菌体培养液并适当稀释（稀释样液的无菌水中加入几滴台盼蓝染液），显微镜下观察计数，只计________（填“被”或“不被”）染成蓝色的菌体。

（3）家庭酿造葡萄酒，时间最好选在9或10月份，原因是________________________，酵母菌主要来自________________。在酿酒过程中；会出现“先来水后来酒”的现象，产生水的生理过程及所处的阶段是________________，是否有酒精产生，可以用________________（试剂）检测。

（4）如果发酵装置中混入醋酸菌，在果酒发酵旺盛期间发酵液中________（填“有”或“没有”）醋酸产生，原因是________________________。33、木质素广泛存在于植物细胞壁；是自然界含量仅次于纤维素的有机化合物。利用微生物降解木质素对于造纸工业废水处理；生产乙醇燃料具有重要意义。科研人员开展相关研究，从秸秆堆积处地表下筛选出高效分解木质素微生物，初筛培养基成分见下表。回答以下问题：

。成分木质素硝酸铵硫酸镁磷酸二氢钾磷酸氢二钠琼脂蒸馏水含量2．0g1．33g0．5g1．0g0．2g20g1000ml（1）该培养基从功能上来看属于______培养基，其依据是______。

（2）该培养基的灭菌方法是______。为进一步分离纯化，在含有愈创木酚的鉴别培养基上进行接种的方法是______。

（3）该类微生物会产生分解木质素的漆酶，利用凝胶色谱法可以提纯该酶，其原理是______。

（4）研究发现CU2+对漆酶活性有影响，其结果见下图所示，据图分析可以得出的结论是______。

34、生物武器的作用途径有哪些？_____35、CRISPR/Cas9基因编辑技术荣获2020年度诺贝尔化学奖；CRISPR/Cas9系统由Cas9蛋白和一条向导RNA构成。向导RNA中含20个碱基的识别序列，可以和目标DNA的靶位点结合，在向导RNA引导下，Cas9将DNA双链切断（如图1所示）。水稻是世界上最重要的粮食作物之一，供养了世界将近50%的人口。由子囊菌引起的稻瘟病，是水稻生产上最严重的病害之一，常常导致水稻产量严重损失。为研究水稻OsERF922基因与稻瘟病抗性的关系，我国科研工作者利用CRISPR/Cas9技术获得了水稻OsERF922基因敲除植株。请回答下列问题：

(1).向导RNA和Cas9蛋白形成的复合物，在功能上接近于限制酶，但是它比限制酶更具备的优势是___________________________。

(2).利用CRISPR/Cas9技术获得了水稻OsERF922基因敲除植株实验步骤如下：根据OsERF922基因序列，选择合适的___________________，设计向导RNA，然后利用PCR反应得到向导RNA对应的DNA片段，将该片段连接到CRISPR/Cas9载体上，得到CRISPR/Cas9基因表达载体；CRISPR/Cas9基因表达载体应该具备的能力是：__________________________________________________。将CRISPR/Cas9基因表达载体导入____________________，并用它侵染水稻细胞；再将被侵染成功的水稻细胞通过__________________技术；最终获得OsERF922基因敲除水稻植株。

(3).前人研究表明，下调OsERF922基因的表达能提高植物与防御相关的一些基因（如植物抗毒素生物合成酶）的表达量，据此推测OsERF922基因敲除水稻植株对稻瘟病的抵抗力会_________________（“增强”或者“减弱”）。要证明此推测，请简要写出实验思路：________________。参考答案一、选择题(共9题，共18分)1、C【分析】【分析】

基因治疗是指将外源正常基因导入靶细胞；以纠正或补偿缺陷和异常基因引起的疾病，以达到治疗目的。其中也包括转基因等方面的技术应用，也就是将外源基因通过基因转移技术将其插入病人的适当的受体细胞中，使外源基因制造的产物能治疗某种疾病。从广义说，基因治疗还可包括从DNA水平采取的治疗某些疾病的措施和新技术。

【详解】

A；将含胰岛素基因的表达载体转入大肠杆菌；筛选获得的基因工程菌可以通过二分裂的方式遗传给后代，A不符合题意；

B；通过植物体细胞杂交获得的番茄--马铃薯杂种植株；遗传物质发生改变，可以通过无性繁殖遗传给子代，B不符合题意；

C；将腺苷酸脱氨酶基因转入淋巴细胞；只是淋巴细胞含有这个基因，其生殖细胞的该基因没有改变，因此不能遗传给子代，C符合题意；

D；将生长激素基因导入奶牛受精卵；受精卵含有生长素基因，受精卵培育成的奶牛含有该基因，因此可以遗传给后代，D不符合题意。

故选C。2、D【分析】【分析】

动物细胞培养必需条件包括：无菌、无毒的环境，适宜的温度和pH，O2等气体环境。

【详解】

分析可知，适宜的光照条件不属于动物细胞培养的必需条件，故选D。3、B【分析】【分析】

转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应；过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。

【详解】

A；转基因技术的安全问题需要验证才能得到证实；若转基因植物的外源基因来源于自然界，也有可能存在安全问题，A错误；

B；克隆人违背现有的伦理道德；将严重威胁着人类社会的稳定，打破原有的人际关系，影响人类社会的进步，会造成严重的社会问题，B正确；

C；虽然转基因技术没有新基因产生；但导入受体细胞的位置是随机的等原因，所以存在安全问题，C错误；

D；大田种植转基因抗旱、抗除草剂农作物可能会存在生物安全性问题；如造成基因污染，形成“超级杂草”，D错误。

故选B。4、C【分析】【分析】

微生物常见的接种的方法：

①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在划线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后；均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

【详解】

A、纤维素酶是一种复合酶，包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶；前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖.，A错误；

B；分离分解纤维素的细菌时；使用的选择性培养基的营养成分特点是仅以纤维素为唯一碳源，B错误；

C；刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物；当纤维素被分解后；红色复合物不能形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，故经一段时间培养后，应挑选周围出现透明圈的菌落，可筛选出纤维素分解菌，C正确；

D；分离纯化纤维素分解菌时可采用平板划线法；但不能计数，D错误。

故选C。

【点睛】5、C【分析】【分析】

转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应；过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。对待转基因技术的利弊；正确的做法应该是趋利避害，不能因噎废食。

【详解】

A；对待转基因技术；应趋利避害，这样可以避免转基因生物引发的安全性问题，A正确；

B；转基因生物引起安全性问题的原因之一是外源基因插入宿主基因组的部位往往是随机的；可能会出现意想不到的后果，B正确。

C；对待转基因技术；应趋利避害，这样可以避免转基因生物引发的安全性问题，C错误；

D；转基因生物有可能造成安全性问题；也能造福人类，因此不能一概而论，D正确。

故选C。6、C【分析】【分析】

从土壤中筛选目的微生物的流程一般为：土壤取样→样品的稀释→将稀释液涂布到以尿素为唯一氮源的培养基上→挑选能生长的菌落→鉴定。当样品的稀释庋足够高时；培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。稀释涂布平板法可以用于微生物计数，通过统计平板上的菌落数来推测样品中大约含有的活菌数。

【详解】

A；因为土壤中各类微生物的数量不同；所以，为获得不同类型的微生物要按不同的稀释倍数进行分离，A正确；

B；测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量；选用的稀释范围不同，B正确；

C；平板划线法可以用于微生物的分离；而不能用于计数，稀释涂布平板法可以用于微生物计数，C错误；

D；牛肉膏蛋白胨培养基的菌落数明显大于选择培养基的数目；说明选择培养基已筛选出一些细菌菌落，D正确。

故选C。

【点睛】

本题主要考查筛选与分离目的微生物的相关知识，意在强化学生对所学知识的识记、理解与掌握。7、D【分析】【分析】

腐乳的制作原理：参与豆腐发酵的微生物有青霉；酵母、曲霉、毛霉等多种；其中起主要作用的是毛霉，其代谢类型为异养需氧型，适宜温度为15～18℃；毛霉能够产生蛋白酶和脂肪酶，将蛋白质和脂肪分别水解成小分子的肽和氨基酸、甘油和脂肪酸。

【详解】

A；相比豆腐；腐乳中氨基酸、脂肪酸增多，营养价值比豆腐高，且腐乳容易保存，A正确；

B；参与豆腐发酵的微生物有青霉、酵母、曲霉、毛霉等多种微生物；其中起主要作用的是毛霉，故酵母菌液曾参与腐乳的发酵，B正确；

C；腐乳制作过程中；毛霉产生的蛋白酶和脂肪酶将豆腐中的蛋白质、脂肪分解成小分子有机物并利用其中一部分能量，因此腐乳制作过程中有机物种类增多，但有机物的干重减少，含有的能量减少，C正确；

D；蛋白质分解产物为氨基酸和小分子的肽；D错误。

故选D。8、B【分析】【分析】

该图是植物原生质体融合以及植物细胞培养过程图；①表示利用化学或物理方法融合细胞，②表示正在融合的细胞，③表示杂种细胞，④表示杂种植株。植物组织培养：在无菌和人工控制的条件下，将离体的植物器官；组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。

【详解】

A；在培育高产耐盐植株时；若使用化学方法诱导甲、乙原生质体融合，则①过程可选用聚乙二醇作为诱导剂，A错误；

B；甲、乙原生质体经诱导融合后可能形成甲和甲融合、乙和乙融合及甲和乙融合的细胞；且②为尚未再生出细胞壁的原生质体，不是细胞，B正确；

C；愈伤组织到④只需经过再分化的过程；C错误；

D；对目的植株进行筛选应从植物性状水平筛选；而运用选择培养基培养属于细胞水平，故应当用高盐环境对目的植株进行筛选，D错误。

故选B。9、B【分析】【分析】

克隆是指生物体通过体细胞进行的无性繁殖；以及由无性繁殖形成的基因型完全相同的后代个体组成的种群，通常是利用生物技术由无性生殖产生与原个体有完全相同基因后代的过程。

【详解】

A；单个大肠杆菌通过二分裂增殖逐渐形成大肠杆菌单菌落；二分裂是无性生殖，属于克隆，A正确；

B；壁虎短尾后长出新尾巴是细胞分裂、分化的结果；不属于克隆，B错误；

C；PCR技术的原理是DNA复制；其扩增基因的过程即DNA的复制，属于分子水平上的克隆，C正确；

D；利用植物组织培养技术扩繁兰花属于无性生殖；相当于个体水平上的克隆，D正确。

故选B。二、多选题(共9题，共18分)10、A:C【分析】【分析】

①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过足够稀释后；均匀涂布在培养皿表面，经培养后，可形成单菌落。

【详解】

A；甲培养皿的菌落均匀分布；接种方法应为稀释涂布平板法，A正确；

B；甲、丙培养基菌落数目多；包括野生型酵母菌菌株和某种营养缺陷型酵母菌菌株，乙培养皿菌株是某种营养缺陷型酵母菌菌株，乙培养皿的培养基是基本培养基，甲和丙是加入了同种营养成分的培养基，B错误；

C；由于基因突变具有不定向性；接种到甲培养皿的酵母菌可能还有其他营养缺陷型，且有些菌落不一定由一个酵母菌形成，所以，甲培养皿中菌落数有可能比接种的酵母菌数少，C正确；

D；乙培养皿的培养基是基本培养基；形成的菌落只可能是野生型菌落，D错误。

故选AC。11、A:B【分析】【分析】

动物细胞培养的原理利用的是细胞的增殖；培养过程需要无毒无菌的环境；充足的营养、适宜的温度和pH以及适宜的气体环境。

【详解】

A；细胞体外培养所需的营养物质与体内基本相同；需要加入血清，以补充培养基中缺乏的物质，A正确；

B；在体外连续培养时；常采用胰蛋白酶或者胶原蛋白酶将细胞分开，B正确；

C；骨髓间充质干细胞可以分化成胰岛样组织细胞；但没有发育成一个完整的个体人，不能说明其具有发育的全能性，C错误；

D；由于导入的是胰岛样细胞；与血型无关，治疗成功后康复者的血型不可能发生改变，D错误。

故选AB。12、B:C:D【分析】【分析】

PCR技术：1；概念：PCR全称为聚合酶链式反应；是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。2、原理：DNA复制。3、前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物。4、条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）。5、过程：①高温变性：DNA解旋过程；②低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开。

【详解】

A；DNA连接酶催化DNA片段连接；Taq酶催化脱氧核苷酸连接，故PCR扩增不需要DNA连接酶，A错误；

B；PCR技术的原理是碱基互补配对和DNA半保留复制；其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物，因此需设计一对与MT-like基因两端序列互补的引物，B正确；

C；为避免引物自连；设计引物时要避免引物之间形成互补碱基对，C正确；

D；因G-C碱基对之间的氢键多于A-T碱基对之间的氢键；GC碱基对含量高的双链的稳定性更高，故GC碱基对含量高的引物需要更高的退火温度，D正确。

故选BCD。

【点睛】13、A:D【分析】【分析】

1；果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌；醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动，其代谢类型属于异养需氧型。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解为醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30-35℃。

2；泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌。在无氧条件下；乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。

【详解】

A；腌制泡菜若时间过短；容易造成乳酸菌、细菌大量繁殖，杂菌多，亚硝酸盐含量增加，A错误；

B；家庭制作果醋；表面产生菌膜由醋酸菌形成，而泡菜表面的菌膜是酵母菌繁殖形成的，B正确；

C；当氧气不充足、缺少糖源时；醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸，C正确；

D、乳酸菌分解葡萄糖，只产生乳酸，不能产生CO2；D错误。

故选AD。

【点睛】14、A:C【分析】【分析】

动物细胞培养条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌②添加一定量的抗生素③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和pH。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH）。

【详解】

A；用于培养的细胞大都取自胚胎或幼龄动物的器官或组织；因为胚胎或幼龄动物的器官或组织分裂能力旺盛，A正确；

B；动物细胞培养中需先用胰蛋白酶使所取的组织分散成单个细胞；胃蛋白酶的最适pH值呈酸性，而细胞培养液的pH大多数是7.2-7.4，B错误；

C；细胞存在接触抑制；因此在培养瓶中要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离，制成悬浮液进行传代培养，C正确；

D；动物细胞培养传到50左右不能再继续传代；部分细胞遗传物质改变，具有癌变细胞的特点，可以在培养条件下无限制的传代下去，D错误。

故选AC。

【点睛】15、B:C:D【分析】【分析】

PCR技术：1；概念：PCR全称为聚合酶链式反应；是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。2、原理：DNA复制。3、前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物。4、条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）5、过程：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开）；低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。

【详解】

A；过程①是由mRNA形成单链DNA的过程；表示逆转录，需要RNA、逆转录酶、引物、脱氧核苷酸等条件，A错误；

B；真核细胞中DNA的外显子部分转录的RNA拼接形成mRNA；因此真核细胞的mRNA经过程①②逆转录过程获得的DNA无内含子片段，B正确；

C；CG含量越高；氢键越多，结构越稳定，因此过程③PCR扩增时引物中的CG含量会影响退火温度，C正确；

D；新冠病毒遗传物质是RNA；RT-PCR技术可应用于新冠病毒的核酸检测，D正确。

故选BCD。

【点睛】16、C:D【分析】【分析】

据图分析；图示基因编辑猪培育过程涉及的技术手段有转基因技术；核移植技术、早期胚胎培养技术和胚胎移植技术等，利用转基因技术将病毒外壳蛋白基因（目的基因）导入2号猪的体细胞核中，然后将2号猪的体细胞核移植到1号猪的去核卵母细胞中，再将重组细胞培养到囊胚并移植到3号猪的子宫中去，最后分娩产生了4号转基因克隆猪。

【详解】

A；对供体母猪使用促性腺激素处理；使其超数排卵，A正确；

B；获得的卵母细胞去核后；需要培养到减数第二次分裂中期才能进行核移植，B正确；

C；染色体位于细胞核；则产出的基因编辑猪的性染色体来自于2号猪，C错误；

D；为检测病毒外壳蛋白基因是否正常表达；可采用的方法是抗原-抗体杂交，D错误。

故选CD。17、A:C:D【分析】【分析】

大肠杆菌是原核生物；原核细胞与真核细胞相比，最大的区别是原核细胞没有被核膜包被的成形的细胞核（没有核膜；核仁和染色体）；原核细胞只有核糖体一种细胞器；原核细胞中，转录和翻译在相同时空中进行，而真核生物的转录和翻译过程在不同时间和空间进行。

【详解】

A；人体胰岛细胞是真核细胞；在合成胰岛素原时，转录在细胞核中进行，翻译在细胞质的核糖体上进行，原核细胞没有细胞核，A错误；

B；DNA连接酶能在两个相同黏性末端配对后的磷酸与脱氧核糖之间形成化学键（磷酸二酯键）；B正确；

C；通过检测；大肠杆菌中没有胰岛素原产生，不能判断重组质粒未导入受体菌，也可能是导入后没有表达，C错误；

D；大肠杆菌是原核生物；没有内质网和高尔基体，不能对胰岛素原进行加工，因此人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原没有生物活性，D错误。

故选ACD。18、B:D【分析】【分析】

动物细胞核移植技术是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中；使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。

【详解】

A；5只克隆疾病猴是由猴的体细胞通过克隆技术（属于无性繁殖）获得的；所以其基因组成差异小，可减少个体差异对实验的干扰，A正确；

B；经基因编辑后形成的胚胎不一定都能发育成克隆疾病猴；B错误；

C；克隆疾病猴有助于研究该疾病致病机制和开发相应药物；C正确；

D；不能利用该技术进行克隆人的研究；D错误。

故选BD。

【点睛】三、填空题(共9题，共18分)19、略

【解析】①.动物细胞培养和核移植技术、②.动物细胞融合与单克隆抗体20、略

【解析】遗传和生理21、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】远缘杂交的不亲和性细胞遗传细胞免疫、22、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】限制酶蛋白质核苷酸序列特定的切点DNA连接酶缺口磷酸-脱氧核糖外源基因受体细胞质粒噬菌体动植物病毒细菌酵母菌细胞核自主复制DNA分子23、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】基因重组基因拼接技术DNA重组技术人们意愿某种基因修饰改造另一种生物细胞里定向24、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】DNA连接酶25、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】提取目的基因、目的基因与运载体结合、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。26、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】黏性末端平末端。27、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】胰蛋白酶单个细胞细胞悬液原代传代四、实验题(共4题，共36分)28、略

【分析】【分析】

参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为兼性厌氧型，果酒制作原理是酵母菌在无氧条件下，利用葡萄糖产生酒精和CO2；参与果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陈代谢类型是异养需氧型，当氧气；糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。

【详解】

（1）在果醋制作时；醋酸菌在供应氧气和糖源充足时，能将糖分解成醋酸；在糖源不充足时，也可以利用酒精生成醋酸。反应式为：C₂H₅OH+O₂→CH₃COOH+H₂O

（2）制作泡菜的腌制过程中；会产生亚硝酸盐。在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N—1—萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰色染料。

（3）腐乳制作的流程是：让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制。用盐腌制时；应注意控制盐的用量；配制卤汤时，要使卤汤中酒的含量控制在12%左右，若酒精含量过高会延长腐乳成熟的时间，若酒精含量过低则不足以杀菌。

（4）在果酒制作时；混有杂菌可能会让果酒变酸。

【点睛】

本题考查果酒和果醋的制作、腐乳的制作、泡菜的制作等知识，要求学生掌握果酒、果醋、腐乳和泡菜制作的原理及条件，掌握亚硝酸盐的测定方法，能结合所学的知识准确答题。【解析】氧气C₂H₅OH+O₂→CH₃COOH+H₂O盐酸酸化重氮化玫瑰色盐的用量12混有杂菌29、略

【分析】【分析】

培养基的制作流程一般为：计算→称量→溶化（包括琼脂）→调节pH→分装→灭菌→倒平板→（冷却后）倒置平板。微生物接种是微生物学研究中最常用的基本操作；主要用于微生物的分离纯化。具体来说，就是在无菌条件下，用接种环或接种针等专用工具，从一个培养皿（上面可能存在各种杂菌落）挑取所需的微生物，转接到另一个培养基中进行培养的方法。【小问1】

培养基的组成成分包括碳源；氮源、水、无机盐、生长因子等。倒平板时；应待培养基冷却到50℃左右倒平板，平板冷凝后要将平板倒置，倒平板过程中应在酒精灯火焰附近进行，以防止杂菌污染。【小问2】

题干中表明菌体密集均匀分布在平板上；所以是稀释涂布平板法接种。培养基灭菌合格，影响因素应为除培养基灭菌以外可能的影响因素，因此，可能操作过程中是否无菌操作，以及使用的滤纸条是否灭菌合格等。A为对照组，应除自变量以外，其他条件都相同，因此，处理方法为浸泡在无菌水中处理后贴于平板中央；实验中能观察到出现野生型菌株菌落，说明环境中存在化学致癌剂导致突变型菌株突变成野生型菌株。【小问3】

使用过的培养基应灭菌后再丢弃；以防止培养基中的有害物质污染环境或感染实验操作者。

【点睛】

本题考查培养基的成分、制备过程以及微生物的接种方法等相关知识，意在考查考生对所学知识的识记和理解能力。【解析】【小题1】①.碳源；氮源、水和无机盐②.待培养基冷却至50℃左右时；在酒精灯火焰旁附近倒平板。

【小题2】①.稀释涂布平板②.滤纸片是否灭菌彻底和待测化合物是否含有杂菌③.（滤纸片）用无菌水浸泡④.his-菌株在培养基上突变为his+菌株；说明待测化合物中存在致癌剂（或待测化合物中存在化学诱变剂，这些化学物质具有致癌性，叙述合理即可）

【小题3】灭菌，避免对环境造成污染30、略

【分析】【分析】

转基因奶牛的产生采用了体外受精（精子的采集和获能；卵母细胞的采集和培养、受精）、早期胚胎培养和胚胎移植等技术。

【详解】

（1）参与PCR的主要物质：引物；热稳定性DNA聚合酶（Taq酶）、原料（dNTP）、模板和缓冲液（其中需要Mg2+）等；故主要使用热稳定性DNA聚合酶（Taq酶）。基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子、复制原点和标记基因等，故要使人血清白蛋白基因在转基因奶牛的乳腺细胞中表达，应将其与（牛）乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组。

（2）基因表达载体的构建是基因工程的核心步骤。将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法。

（3）体外受精是指哺乳动物的精子和卵子在体外人工控制的环境中完成受精过程的技术。成熟的精子在受精前需获能处理；过程②包括早期胚胎培养（动物细胞培养）技术和胚胎移植技术。为了获得多只与该转基因奶牛遗传物质相同的牛犊；可进行胚胎分割，操作时的注意事项是将囊胚阶段的内细胞团均等分割。

（4）若要检测牛奶中是否含有人血清白蛋白；根据抗原特异性结合原理，可采用抗原—抗体杂交技术。

【点睛】

本题考查基因工程等知识，要求考生识记基因工程的原理、工具及操作步骤；蛋白质工程是通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种新的蛋白质。能根据题干信息设计实验，综合考察运用生物学知识解决实际问题的能力。【解析】热稳定DNA聚合酶（Taq酶）（牛）乳腺蛋白基因表达载体的构建显微注射法获能早期胚胎培养（动物细胞培养）胚胎分割抗原—抗体杂交31、略

【分析】【分析】

在动物细胞培养过程中，为防止培养过程中杂菌污染，通常要在细胞培养液中添加一定量的抗生素。培养过程中通常采用培养皿或松盖培养瓶，将其置于含95%空气加5%CO2的混合气体的培养箱中进行培养。

【详解】

（1）培养动物细胞时，为防止培养过程中杂菌污染，通常要在细胞培养液中添加一定量的抗生素。培养肺癌细胞需要提供适宜温度和维持培养液的pH，因此要放在37℃的含95%空气加5%CO2的混合气体的培养箱中培养。

根据题干“新冠刺突蛋白S1可缓解肺癌发展”及图可知；刺突蛋白能促进细胞凋亡，且在一定范围内，随着所用的刺突蛋白的浓度增大，其促进凋亡的效果越明显。

（2）NNK是尼古丁的衍生物亚硝胺酮；是致癌物，用其长时间处理小鼠目的是诱导小鼠肺部肿瘤产生，即侯建肺癌小鼠模型。

（3）由题干“刺突蛋白S1在体内抑癌的效果比体外的效果好得多”可知；在体内环境下，刺突蛋白S1激活了免疫系统的免疫监视功能，进而识别和杀伤以及清除体内的突变细胞,防止肿瘤的发生。为探究肺部肿瘤比例的减少是不是因为新冠病毒刺突蛋白S1的作用，还应该设计一组对照：NNK+等量其他外源蛋白，若实验组肺部肿瘤比例的减少量大于对照组，说明肺部肿瘤比例的减少确实是因为新冠病毒刺突蛋白S1的作用。

（4）由题干“媒体报道称感染新冠病毒可以治疗肺癌”可知，其自变量为是否感染新冠病毒，而论文中自变量为刺突蛋白S1处理的浓度，二者不是同种变量，刺突蛋白并不能模拟新冠病毒的感染，无法做出上述推测，因此结论并不可靠。【解析】(1)抗生素含95%空气加5%CO2的混合气体的培养箱刺突蛋白能促进细胞凋亡；且在一定范围内，浓度大的促进凋亡效果好。（答出自变量和因变量的定性和定量关系即可）

(2)建立肺癌小鼠模型（诱导肺部肿瘤产生）

(3)免疫监视等量其他外源蛋白。

(4)不合理（1分）自变量不同，媒体的报导中的自变量是新冠病毒的感染，论文中的是刺突蛋白S1，刺突蛋白并不能模拟新冠病毒的感染/对照设置不合理，结论不可靠（与不合理偶联，从自变量或实验设计角度合理即可）五、综合题(共4题，共36分)32、略

【分析】【分析】

1.果酒的制作离不开酵母菌；酵母菌是兼性厌氧型生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，在无氧条件下，酵母菌进行酒精发酵。温度是酵母菌生长和发酵的重要条件，20℃左右，酒精发酵时，一般将温度控制在18~25℃，在葡萄酒自然发酵过程当中，其主要作用的是附着在葡萄皮上的野生酵母菌。

2.醋酸菌是一种好氧细菌；只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动。醋酸菌对氧气的含量特别敏感，当进行深层发酵时，即使只是短时间中断通入氧气，也会引起醋酸菌死亡。当氧气；糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30~35℃。

【详解】

（1）葡萄酒的制作需要以酵母菌为菌种；其异化作用类型是兼性厌氧型，即既能进行有氧呼吸，也能进行无氧呼吸（酒精发酵）。酵母菌为单细胞真菌，为真核生物，而醋酸菌是原核生物，二者在细胞结构上的主要区别是醋酸菌没有核膜包被的细胞核。

（2）使用血细胞计数板对活菌种进行计数；取1ml菌体培养液并适当稀释（稀释样液的无菌水中加入几滴台盼蓝染液），由于细胞膜具有选择透过性，活菌不被台盼蓝染色，因此，在显微镜下观察计数，只计不被染成蓝色的菌体即为活菌数。

（3）家庭酿造葡萄酒；时间最好选在9或10月份，因为此时的环境温度适宜酵母菌的生长繁殖，发酵过程利用的酵母菌主要来自附着在葡萄皮上的野生型酵母菌。在酿酒过程中，会出现“先来水后来酒”的现象，其中水是在酵母菌有氧呼吸的第三阶段产生的，酒精是酵母菌无氧呼吸的产物，是否有酒精产生，可以用（酸性）重铬酸钾检测，检测表现出灰绿色，意味着有酒精生成。

（4）如果发酵装置中混入醋酸菌；在果酒发酵旺盛期间发酵液中没有醋酸产生，因为醋酸菌是严格的需氧型微生物，在缺氧环境中无法生长繁殖，即醋酸菌不适应果酒发酵时缺氧的环境。

【点睛】

熟知果酒、果醋制作的原理以及涉及菌种的生理特性是解答本题的关键，掌握果酒、果醋制作的操作要点是解答本题的另一关键。【解析】（1）兼性厌氧型无以核膜为界限的细胞核（2）不被（3）此时的环境温度适宜酵母菌的生长繁殖附着在葡萄皮上的野生型酵母菌有氧呼吸第三阶段（酸性）重铬酸钾（4）没有醋酸菌进行有氧呼吸，无法适应果酒发酵时缺氧的环境33、略

【分析】【分析】

1；在微生物学中；将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称做选择培养基。虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源（提供碳元素的物质）、氮源（提供氮元素的物质）和无机盐。另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。

2；微生物常见的接种的方法：（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能