实验1 微生物实验室规则 实验2培养基配制及灭菌课件

微生物学实验

华侨大学化工学院华侨大学化工学院实验1微生物实验室规则实验2培养基配制及灭菌实验1微生物实验室规则、工作环境要求、实验记录、常用器皿材料和仪器设备实验1微生物实验室规则实验2培养基配制及灭菌微生物实验的意义、研究进展

和实验内容

一、研究内容研究微生物的形态、结构、生理生化、遗传变异、微生物与其他生物、与自然界之间的关系1.机理研究：微生物适应环境的机制，鞭毛运动的机理等（是生化和分子生物学研究的重要研究内容和研究材料。）实验1微生物实验室规则实验2培养基配制及灭菌2.微生物与实际应用微生物与发酵工程微生物与环境工程微生物与农业微生物与医学领域微生物与食品工业实验1微生物实验室规则实验2培养基配制及灭菌二、微生物学研究进展

微生物基因组学研究（MicrobialGenomics）不可培养微生物（UnculturedMicroorganisms）DNA芯片（DNAChip）三域学说（Bacteria,Archae,Eucaryote）实验1微生物实验室规则实验2培养基配制及灭菌三、微生物学与Nobel奖

到目前为止，几十项Nobel生理学和医学奖，化学奖都与微生物学有关参考：沈萍教授《微生物学》绪论部分Nobel获奖者。实验1微生物实验室规则实验2培养基配制及灭菌四、如何进行微生物学实验严肃认真科学态度分析问题搞清原理实验1微生物实验室规则实验2培养基配制及灭菌五、微生物实验安排与考核平时表现、基础实验：10+30%，一次考试考试：60%实验1微生物实验室规则实验2培养基配制及灭菌课堂纪律严格遵守实验室规章制度严肃课堂纪律不允许无故旷课、早退迟到（3次）实验1微生物实验室规则实验2培养基配制及灭菌实验室安全和卫生

安全实验室严禁吸烟。注意用水、用电和防火正确使用化学试剂和仪器正确清洗器具

禁止在实验室吃东西及饮水实验废弃物分类处理，勿污染环境卫生每次实验需留下4位同学值日，协助保持实验室清洁（班长及生活委员安排）实验1微生物实验室规则实验2培养基配制及灭菌实验预习报告及实验结果目的原理步骤结果及分析

学习委员（报告批改后返给同学修改，再收回留档，统计分数）实验1微生物实验室规则实验2培养基配制及灭菌周次教学内容、作业及考试安排周次教学内容、作业及考试安排3实验1微生物实验室规则、工作环境要求、实验记录、常用器皿材料和仪器设备实验2微生物营养成分配制和消毒灭菌技术8实验7放线菌的形态观察霉菌的形态观察4实验3实验室环境及人体表面微生物的检查分离实验4显微镜的使用及细菌的简单染色法9实验8酵母菌的形态观察微生物大小的测定和计数5国庆放假10实验9水中细菌总数的测定实验10滤膜法测定水中大肠菌群6实验3实验室环境及人体表面微生物的检查分离（结果观察及描述）实验5革兰氏染色法、细菌荚膜染色法11实验11环境因素对微生物生长的影响7实验6细菌芽孢染色法和鞭毛染色法12-14考试实验1微生物实验室规则实验2培养基配制及灭菌分组及各组器皿清单每组器皿清单酒精灯

1个/人镊子

1把/人培养皿

5套/组三角瓶（250ml）2套/组烧杯（250ml）

1个/组载波片

10片/组废液缸

1个/组接种针/环

1把/组（或人）玻棒

2根/组试管

6个/组试管架

1个/组绳子

2段/组蒸馏水瓶带滴管

1套/组2人一组（最后一组3人）（按学号）用后各自清理保管。损毁或丢失，找实验室管理老师登记赔偿并补领实验1微生物实验室规则实验2培养基配制及灭菌实验2微生物营养成分配制和消毒灭菌技术实验1微生物实验室规则实验2培养基配制及灭菌一、目的要求1、了解培养基制备原理，掌握培养基制备方法。2、掌握干热灭菌和高压蒸汽灭菌的原理和方法。3、学会培养皿、瓶口的包扎。实验1微生物实验室规则实验2培养基配制及灭菌（二）灭菌原理1干热灭菌原理（蛋白质凝固变性）一般繁殖体——80－100℃，1h芽孢——160－170℃，2h＜180℃实验1微生物实验室规则实验2培养基配制及灭菌2湿热灭菌原理－高压蒸汽灭菌

在密闭的蒸锅内，锅内温度达121℃，15min－30min，可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽孢（蛋白凝固变性）。

优点？实验1微生物实验室规则实验2培养基配制及灭菌实验1微生物实验室规则实验2培养基配制及灭菌实验1微生物实验室规则实验2培养基配制及灭菌三、实验器材1、材料琼脂粉、酵母膏（粉）、蛋白胨、NaCl等。2、设备天平（6台）、称量纸、量筒、玻璃注射器（3-5把）、烧杯、玻璃棒、pH试纸、标签，纱布（8层纱布，包扎瓶口用，每组1份）、报纸、三角瓶、绳子、试管及试管塞、酒精灯、火柴、药勺（4把）、高压蒸汽灭菌锅（1台）、烘箱（1台）、电热板（6台）等。实验1微生物实验室规则实验2培养基配制及灭菌四、操作步骤（一）培养基的制备LB培养基(Luria-Bertanimedium)为例实验1微生物实验室规则实验2培养基配制及灭菌

LB酵母粉5g蛋白胨10gNaCl5g琼脂粉或琼脂条12-15g蒸馏水1000mlpH7.2-7.8依上述配方配制150ml，请换算好相应的质量数。（称量纸，药勺，天平，烧杯，量筒，三角瓶，试管）（试管4-5ml；剩余装入三角瓶）倒平板（5个）搁置斜面（4个）干热或湿热实验1微生物实验室规则实验2培养基配制及灭菌制备LB平板待培养基冷却至45-60℃（不烫手）时，于酒精灯火焰无菌区均匀倒入培养皿中（每个约20ml），冷却后凝固成固体胶状平板（LB平板）。搁置斜面：适当冷却后便可将试管口端搁在玻璃棒或其他合适高度的器具上，斜面长度不超过试管总长的1/2为宜。实验1微生物实验室规则实验2培养基配制及灭菌每人携带2个平板，自己设计实验，分离培养微生物。倒扣培养，尽可能密封。注意观察，将实验结果简单描述。（采集的样品、生长的状况[时间，快慢]、种类和数量是否可区分，各多少），交给学习委员，下次课分享。实验1微生物实验室规则实验2培养基配制及灭菌（二）灭菌

干热灭菌操作步骤：（1）用报纸条包好干燥的培养皿。（2）将待灭菌物品均匀放入烘箱内。（3）开启电源，设定温度和时间（160－170℃，2小时）。（4）切断电源，待温度降至70℃以下时，打开箱门，取出灭菌物品。实验1微生物实验室规则实验2培养基配制及灭菌湿热灭菌操作步骤：1、灭菌物准备2、高压蒸汽灭菌（1）加水（2）装锅（3）接通热源，设置参数（121℃，15min－30min）（4）升压、升温（5）切断电源（6）取出灭菌物（7）待培养基冷却后置于37℃恒温箱内培养24h，若无菌生长则放入冰箱或阴凉处保存备用。实验1微生物实验室规则实验2培养基配制及灭菌五思考题1、培养微生物的培养基应具备哪些条件？2、为什么培养基配制好后必须立即灭菌？采用那种灭菌方式？3、为什么高压蒸汽灭菌时要先将冷空气排尽？4、还有哪种灭菌方式属于