2025年人教A新版选择性必修3生物下册月考试卷

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年人教A新版选择性必修3生物下册月考试卷973考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五六总分得分评卷人得分一、选择题(共9题，共18分)1、下列有关生物工程相关知识的叙述，正确的是（）A.目的基因与质粒在DNA连接酶作用下结合的过程属于DNA分子杂交B.治疗癌症所用的“生物导弹”中单克隆抗体的作用是识别并消灭癌细胞C.通过体细胞核移植培育的克隆动物的性状与提供细胞核的动物不完全相同D.植物体细胞杂交技术就是用物理或化学方法促使两个原生质体融合2、下列关于转基因产品安全性的叙述，错误的是（）A.我国已经对转基因食品和转基因农产品强制实施了产品标识制度B.国际上大多数国家都在转基因食品标签上警示性注明可能的危害C.目前对转基因产品安全性的争论主要集中在食用安全性和环境安全性上D.开展风险评估、预警跟踪和风险管理是保障转基因生物安全的前提3、SRY基因为Y染色体上的性别决定基因；可用SRY-PCR法鉴定胚胎性别，其基本程序如下图。相关说法不正确的是（）

A.通常提取囊胚期内细胞团细胞的DNA作为复制模板B.PCR反应需要提供含DNA模板、两种引物、四种脱氧核苷酸和耐热的DNA聚合酶的缓冲溶液C.扩增相同时间，获得DNA的含量与模板DNA的量成正相关D.SRY探针能与雄性胚胎样品中DNA配对4、甲品种青花菜具有由核基因控制的多种优良性状，但属于胞质雄性不育品种。通过体细胞杂交，成功地将乙品种细胞质中的可育基因引入甲中，下图为该操作示意图。下列相关叙述错误的是（）

A.人工诱导原生质体融合可使用离心法B.融合的原生质体再生出细胞壁后再进行组织培养C.杂种细胞经过一定激素和营养的诱导，发育成为杂种植株D.筛选出的杂种植株含有控制甲青花菜优良性状的基因，但只能通过母本进行传递5、谷氨酸的发酵是发酵工程的中心环节。下列有关发酵罐的监测装置作用及目的的叙述，不正确的是（）A.检测培养液中的微生物数目、产物浓度等B.监控pH并及时添加碱性物质以提高产量C.监控溶解氧、温度、通气量和转速等条件，以免影响其代谢途径和产量D.此过程需要控制无氧和恒温条件以利于谷氨酸棒状杆菌和谷氨酸的生成6、重庆忠州豆腐乳被业界称为“腐乳王”，因风味独特而盛销不衰，远销英国、加拿大、中东、东南亚等国家和地区，腐乳的制作流程为“让豆腐块长出白色菌丝（前期发酵）→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制”。下列相关说法正确的是（）A.腐乳制作过程中有多种微生物的参与，其中起主要作用的是曲霉B.霉菌分泌的蛋白酶等物质，能将蛋白质分解为小分子肽和氨基酸C.加盐和卤汤腌制的目的仅仅是调味，并不能抑制瓶内杂菌的生长D.豆腐块相当于固体培养基，腌制用的玻璃瓶常用紫外线进行灭菌7、利用新鲜洋葱作为实验材料提取DNA时（）A.可将洋葱置于清水中，细胞吸水破裂后将DNA释放出来B.离心后上清液中加入75%冷酒精，出现的白色丝状物就是纯净的DNAC.将晾干的白色丝状物置于2mol/L的NaCl溶液中，会发生溶解现象D.可利用DNA在低温下遇到二苯胺试剂呈现蓝色反应的特性对其进行鉴定8、OsGLO1、EcCAT、EcGCL和TSR四个基因分别编码四种不同的酶，研究人员将这些基因分别与叶绿体转运肽（引导合成的蛋白质进入叶绿体）基因连接，构建多基因表达载体（载体中部分序列如下图所示），利用农杆菌转化法转化水稻，在水稻（单子叶植转植物）叶绿体内构建了一条新代谢途径，提高了水稻的产量。下列叙述正确的是（）

A.四个基因转录时都以DNA的同一条单链为模板B.农杆菌能在自然条件下侵染单子叶植物和裸子植物C.四个基因都在水稻叶绿体内进行转录翻译D.可用抗原-抗体杂交技术检测四种酶在转基因水稻中的表达量9、新冠病毒与细胞膜上的ACE2受体结合后，侵入人体细胞，导致肺部病变。小鼠与人表达的ACE2蛋白存在较大差异，导致新冠病毒不能感染小鼠。科学家将人的ACE2基因转入小鼠，建立新冠病毒感染小鼠模型。下列相关叙述不正确的是（）A.ACE2蛋白的结构是新冠病毒侵染的重要决定因素之一B.转基因时加入启动子来调控ACE2基因的选择性表达C.将人ACE2基因导入小鼠的肺细胞建立新冠病毒感染小鼠模型D.转基因小鼠的疾病严重程度与人的ACE2基因表达水平相关评卷人得分二、多选题(共7题，共14分)10、下图是快速RT-PCR过程示意图；①和②为逆转录酶催化的逆转录过程，③是PCR过程。据图分析下列说法错误的是（）

A.逆转录酶具有DNA聚合酶能力B.③PCR过程只需要引物bC.RT-PCR不能检测基因表达水平D.RT-PCR可检测新冠病毒等RNA病毒11、如图为体细胞核移植过程流程图；下列相关叙述不正确的是（）

A.去掉受体卵母细胞的核的目的是使核移植动物的遗传物质几乎全部来自有利用价值的动物提供的细胞核B.核移植的供体细胞一般都选传代10~50代左右的细胞C.动物细胞核移植技术中使用的去核方法只有显微操作法D.上述过程能够体现动物细胞的细胞核具有全能性12、下列关于高产奶牛克隆过程的叙述，错误的是（）A.供体牛体细胞在进行体外培养时，不可能发生细胞贴壁和接触抑制的现象B.培养至MⅡ中期的卵母细胞的细胞质中含有能促进细胞核全能性表达的物质C.通过电刺激促进供体与去核受体细胞两两融合，供体核进入卵母细胞D.胚胎移植时，应将重组细胞直接移入代孕母牛的子宫13、筛选淀粉分解菌需使用以淀粉为唯一碳源的培养基。接种培养后；得到如图所示的两个菌落，培养平板经稀碘液处理，出现了以菌落为中心的透明圈。相关叙述正确的是。

A.培养基中的淀粉也可为微生物提供氮源B.两个菌落中的微生物为同一种微生物C.两个菌落中的微生物均能将淀粉酶分泌至细胞外D.透明圈直径与菌落直径的比值越大，说明该微生物分解淀粉的能力越大14、某种病毒的主要表面抗原为S蛋白，用S蛋白制备的单克隆抗体可用于该种病毒的检测。下列说法正确的是（）

A.B淋巴细胞分离自经S蛋白免疫过的小鼠B.稀释培养后多孔玻璃板中的杂交瘤细胞数目可能不到细胞总数的一半C.集落①的细胞既能无限增殖又能产生单克隆抗体D.集落②～④的细胞可用于扩大化培养生产单克隆抗体15、甲品种青花菜具有由核基因控制的多种优良性状，但属于胞质雄性不育品种。通过体细胞杂交，成功将乙品种细胞质中的可育基因引入甲品种中。下列相关叙述错误的是（）

A.获得的融合原生质体需放在无菌水中以防杂菌污染B.流程中A处理可使用纤维素酶和果胶酶，B处理可使用聚乙二醇C.培养形成的愈伤组织可继续在原培养基中分化形成植株D.杂种植株含有控制甲品种青花菜优良性状的基因，并能通过父本进行传递16、下列关于“试管婴儿”、“设计试管婴儿”技术及安全伦理的叙述，错误的是（）A.“试管婴儿”、“设计试管婴儿”技术在生物学上所依据的原理都是无性生殖B.“试管婴儿”、“设计试管婴儿”技术对人类的作用是相同的C.“设计试管婴儿”形成的胚胎需遗传学诊断后植入母体孕育D.不符合遗传要求的胚胎如何处理会引起道德伦理之争评卷人得分三、填空题(共8题，共16分)17、酶是细胞合成的生物催化剂。随着生物科学技术的发展；酶已经走出实验室，走进人们的生产和生活。请回答下面有关酶的问题：

（1）在腐乳制作的过程中；利用毛霉等微生物产生的蛋白酶将豆腐中的蛋白质分解成________，____________将脂肪水解为甘油和脂肪酸。加酶洗衣粉里添加的酶制剂中，应用最广泛；效果最明显的是____________。

（2）果胶酶包括_____________________________；生产中如果要固定果胶酶；最好采用______________________________________法固定化。

（3）酶提取和分离原理：需要用__________法去除相对分子质量大的杂质蛋白，以纯化酶；利用_________________________法对酶进行纯度鉴定。18、基因的“剪刀”是_____，它的化学本质是_____，它只能识别一种特定的_____，并在_____上切割DNA分子；基因的“针线”是______，它能连接DNA骨架上的_____，DNA的骨架由___________构成；基因的运载体是将_____送入_____的运输工具。目前常用的运载体有_____、________和_____。质粒存在于许多_____和______等生物中，是拟核或_____外能够_____的很小的环状_____。19、基因工程取得了突飞猛进的发展。_____、_____等技术的应用不仅使生命科学的研究发生了前所未有的变化，而且在实际应用领域，如____、_____、_____、______等方面也展示出美好的应用前景。抗虫棉中的抗虫基因来自_____，抗虫基因作物的使用，不仅减少了_____，降低了____，而且还减少了_____。20、动物基因工程：______。21、动物细胞培养的流程：

取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用______处理分散成______→制成______→转入培养瓶中进行______培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续_____培养。22、沙门氏菌是一种常见的食源性致病菌；被感染了沙门氏菌的人或带菌者的粪便污染的食品，会使人发生食物中毒。沙门氏菌的最适繁殖温度为37°C，在20℃以上即能大出繁殖，其对热抵抗力不强，在60℃的条件下15min就能被杀死。肉桂精油是从肉桂树中提炼获得的，具有不溶于水；易溶于有机溶剂且易挥发的特性，能抑制沙门氏菌的繁殖。回答下列问题：

（1）培养沙门氏菌时要进行无菌操作，常用的灭菌方法有________（答出两种）。用平板培养沙门氏菌时一般需要将平板________（填“倒置”或“正置”）。单个细菌在平板上会形成菌落，研究人员通常可根据菌落的形状、大小和颜色等特征来初步区分不同种的微生物，原因是________。

（2）从鸡粪便取样，经选择培养后需要经过一系列________才能将样品涂布到鉴别培养基上。对获得的沙门氏菌常采用________的方法长期保存。

（3）根据题干信息，为避免食用被沙门氏菌污染的食品而引发的食物中毒，家庭中储存、加工食品的方法是________。

（4）根据肉桂精油的化学特性，可采用________法来提取，提取过程中影响精油品质的因素有________。23、生物武器的致病能力强、攻击范围广。它可以直接或通过食物、生活必需品和带菌昆虫等散布，经由呼吸道、消化道和皮肤等侵入人、畜体内，造成大规模伤亡，但对植物无害。（选择性必修3P111）()24、应用分析与比较的方法，对生殖性克隆与治疗性克隆进行列表阐述｡

生殖性克隆与治疗性克隆的比较。比较项目生殖性克隆治疗性克隆含义__________用到的技术__________目的__________评卷人得分四、判断题(共3题，共6分)25、酿酒酵母的最适生长温度为30度。()A.正确B.错误26、胚胎发育至囊胚期时，细胞逐渐分化。（选择性必修3P58）()A.正确B.错误27、“设计试管婴儿”与“试管婴儿”相比在植入前需要对胚胎进行遗传学诊断。()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共3题，共12分)28、某兴趣小组就“泡菜腌制过程中亚硝酸盐含量变化”开展了研究；操作如下：1月4日下午选取1；2、3号三只相同的泡菜坛，在每个坛中加入洗净的新鲜莲花菜0.6kg，再分别倒入等量煮沸并冷却的10%的盐水，将坛密封，置于同一环境中。封坛前进行第一次取样测定亚硝酸盐含量，后来定时测定，结果如下图。

（1）测定亚硝酸盐含量的方法是_______；其原理是：在盐酸酸化的条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成_____，将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测比较，可以大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量。

（2）实验中；盐水加热煮沸是为了______；冷却之后再使用是为了保证_______等微生物的生命活动不受影响。

（3）在腌制过程中；坛中溶液量会增加，原因是_____。

（4）图中数据表明；泡菜在腌制的第_____天亚硝酸盐含量达到最大值，腌制到第______天以后再食用可以较好地避免亚硝酸盐对人体健康的危害。

（5）实验中三只坛中产生的亚硝酸盐含量存在差异；最可能的原因是__________。

（6）为了让实验数据更好地表明泡菜腌制过程中亚硝酸盐含量变化，对该实验所获得的3组数据应进行怎样的处理才更合理？_________________。29、苹果树腐烂病是由黑腐皮壳菌引起的；是限制苹果产量的重要因素之一。生产上主要以化学药剂防治该病。为开发生物防治途径，科研人员拟从土壤中分离筛选出能抑制黑腐皮壳菌生长的枯草芽孢杆菌，实验流程图如图1：

（1）①中木糖和硝酸钾的作用分别是______________。

（2）②→③中梯度稀释的目的是_____________________________________________。

（3）制作的平板需要倒置的目的除了防止培养基中水分过快蒸发之外，还有______________。

（4）现有经纯化后获得的4个枯草芽孢杆菌品系，为探究哪个品系对黑腐皮壳菌的抑制效果更好，科研人员在如图2平板中的A处接种黑腐皮壳菌，在距离A处等距离的B1～B4处分别接种等量的4个枯草芽孢杆菌品系，在适宜条件下培养3﹣5天后，通过观察_________________________筛选出抑菌更好的枯草芽孢杆菌菌株。

图2

（5）在利用稀释涂布平板法统计土样中活菌的数目时，为了保证结果准确，一般选择菌落数在______________的平板进行计数。该方法所得结果往往比实际细菌的数目要少，原因是__________________________________。30、下图是某同学设计的传统发酵装置示意图。比较传统发酵技术与现代发酵工程；回答下列问题：

(1)传统发酵酿酒与现代工业发酵酿酒的原理是______。请设计简单的实验验证发酵过程中产生了酒精（不考虑发酵液中葡萄糖的影响），写出实验思路并预期实验结果与结论______。

(2)传统发酵技术一般以天然存在的______发酵，品质不一，现代工业发酵一般为单一菌种发酵，品质较高。自制的果酒并非商品意义上的产品，在实际生产中还需要经过______装瓶等过程才能获得成品酒。

(3)若要测定发酵罐中酵母菌的种群密度，取10mL发酵液稀释1000倍，利用25×16的血细胞计数板，观察并统计到中方格中的酵母菌平均数为9个，则每毫升发酵液中酵母菌数量约是______个。

(4)利用上图中装置酿酒与酿醋时，操作上的最主要的区别是______。评卷人得分六、综合题(共3题，共12分)31、生产生活中常采用微生物发酵的方式获取目的产物。某工厂通过培养毛霉来获得蛋白酶。请回答：

（1）工业上培养毛霉获取蛋白酶时一般采用的培养基是________（填“固体培养基”或“液体培养基”），该培养基的成分除无机盐、水、氮源外还必须有的成分是_________，该成分的作用是__________。

（2）要对培养到某一时期的毛霉活菌进行计数常采用的接种方法是__________，计算出的活菌数目往往比实际数目少，原因是_________。使用后的培养基在丢弃前一定要做_________处理。

（3）研究者欲利用电泳对毛霉产生的蛋白质进行分离，为消除蛋白质分子原有电荷量对蛋白质迁移率的影响，需要加入的物质是_________，原因是___________________________。32、图甲是动物细胞培养的过程图；图乙是克隆羊培育过程示意图，请据图回答下列问题：

(1)图甲所示技术的原理为________，容器A中的是动物器官或组织，它一般取自_____。

(2)动物细胞培养过程中，需要两次使用___________处理，且都需要注意浓度和处理时间，以防对细胞结构造成破环。图甲中细胞培养的培养液成分与植物组织培养基成分最主要的区别在于前者含有____。为了防止细胞培养过程中的杂菌污染，可向培养液中加入适量的____。细胞在____培养过程中，绝大部分会衰老死亡，只有极少数细胞存活，这是因为存活的细胞发生了________。

(3)图乙中核移植时受体应选用_______________期的卵母细胞，将供体的核注入去核的卵母细胞一般采用______________法，多莉面部的毛色为______________。

(4)在目前现有技术条件下，还不能将从动物体内分离出来的成熟的体细胞直接培养成一个新个体，而是必须将体细胞的细胞核移植到去核的卵母细胞中才能发育成新个体，你认为原因可能是________（多选）。A．卵母细胞细胞质可使体细胞核全能性得到表达B．卵母细胞含有的营养物质多C．卵母细胞大，便于操作D．重组细胞才具有全能性(5)克隆动物培育成功有什么实际应用意义？_____________。33、中国是名副其实的“胃病大国”。究其原因除了国人的饮食习惯；生长环境外；幕后推手其实是——幽门螺旋杆菌（Hp），它主要寄生在食道、胃及十二指肠等处，可导致胃炎、消化道溃疡、胃癌等疾病，主要通过消化道传播。某科研小组在胃病患者体内采集样本制成菌液后进行培养和分离，其基本步骤为：配制培养基→灭菌→X→接种→培养→观察。请回答下列问题：

(1)膳食中的亚硝酸盐在适宜的pH、温度和一定的微生物作用下可转变为致癌物______________。实验室培养微生物时获得纯净培养物的关键是________________。

(2)步骤X为_____________，需要在酒精灯火焰旁操作，待培养基冷却凝固后，要将培养皿____________，原因是________________（答出两点）。

(3)利用平板划线法分离纯化微生物的原理是_____________________________。

(4)请写出可以预防幽门螺旋杆菌传染的健康生活方式_____________________________（答出1点即可）。参考答案一、选择题(共9题，共18分)1、C【分析】【分析】

1；单克隆抗体的作用：①作为诊断试剂：（最广泛的用途）具有准确、高效、简易、快速的优点；②用于治疗疾病和运载药物：主要用于治疗癌症；可制成“生物导弹”。

2；动物体细胞核移植：将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中；使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为克隆动物。克隆动物的细胞核基因都来自提供细胞核的生物，而细胞质基因都来自提供细胞质的生物，因此克隆动物的性状与提供细胞核的动物相似。

【详解】

A；目的基因与质粒在DNA连接酶作用下结合的过程属于基因重组；A错误；

B；治疗癌症所用的“生物导弹”中单克隆抗体的作用是识别癌细胞；B错误；

C；克隆动物与供体动物性状不完全相同；从遗传物质的角度来说，是因为卵母细胞的细胞质中的遗传物质会对克隆动物的性状产生影响，同时受到环境的影响，C正确；

D；植物体细胞杂交技术是先用酶解法去除植物细胞的细胞壁；可用物理或化学方法促使两个原生质体融合，形成杂种细胞，再通过植物的组织培养将杂种细胞培育成杂种植株，D错误。

故选C。2、B【分析】【分析】

我国针对转基因技术；颁布和实施了一系列法规和政策，既维护了消费者对转基因产品的知情权和选择权，又最大程度地保证了转基因技术和已经上市的转基因产品的安全性。

【详解】

AB；我国农业部颁布了《农业转基因生物标识管理办法》；要求对转基因产品及其加工品加贴标注，以方便消费者自主选择；国际上并非大多数国家都在转基因食品标签上警示性注明了可能的危害，A正确，B错误。

C；目前对转基因产品安全性的争论主要集中在转基因食物的安全性和转基因产品对环境安全的影响上；C正确。

D；风险评估、预警跟踪和风险管理等是保障转基因生物安全的前提；D正确。

故选B。3、A【分析】【分析】

1；PCR原理：在解旋酶作用下；打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4中游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链。

2；PCR反应过程是：变性→复性→延伸过程。

3；结果：上述三步反应完成后；一个DNA分子就变成了两个DNA分子，随着重复次数的增多，DNA分子就以2n的形式增加，PCR的反应过程都是在PCR扩增仪中完成的。

【详解】

A；通常提取滋养层细胞的DNA作为复制模板；这是因为滋养层细胞是胎儿发育过程中形成的细胞，其DNA可作为复制模板，A错误；

B；PCR反应需要提供含DNA模板、两种引物、四种脱氧核苷酸作原料和耐热的DNA聚合酶的缓冲溶液；B正确；

C、PCR反应中，DNA分子以2n的形式增加；若扩增相同时间，获得DNA的含量与模板DNA及引物的量成正相关，C正确；

D；SRY探针能与雄性胚胎样品中DNA配对；形成杂合双链，D正确。

故选A。

【点睛】4、D【分析】【分析】

题图分析：该图为体细胞杂交过程；其中A为去除细胞壁，制备原生质体，可以用酶解法，B为诱导原生质体融合，可以用聚乙二醇处理，融合的杂种细胞应该具备乙品种细胞质中的可育基因，甲品种的控制多种优良性状的核基因，该过程的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。

【详解】

A；人工诱导原生质体融合的方法有化学法（聚乙二醇）和物理法（离心、振动、电刺激等）两大类；A正确；

B；杂种细胞再生出细胞壁是细胞融合成功的标志；融合成功之后再进行组织培养，B正确；

C；杂种细胞经过外源生长素和细胞分裂素的诱导；脱分化形成愈伤组织，再分化形成胚状体，进一步成为杂种植株，C正确；

D；甲品种青花菜具有由核基因控制的多种优良性状；杂种植株细胞核内含有控制甲青花菜优良性状的基因，具备乙品种细胞质中的可育基因，因此精子中具备一半核基因，并可通过父本（精子）进行传递，D错误。

故选D。5、D【分析】【分析】

谷氨酸棒状杆菌是一种异养兼性厌氧细菌；谷氨酸棒状杆菌在扩大培养时，碳氮比应为4：1，而在发酵获得谷氨酸时碳氮比应为3：1。扩大培养应在有氧条件下进行，在无氧条件下，谷氨酸棒状杆菌能将葡萄糖和含氮物质（如尿素；硫酸铵、氨水）合成为谷氨酸．谷氨酸经过人们的进一步加工，就成为谷氨酸钠－味精。

【详解】

A；发酵罐的监测装置；可以方便检测培养液中的细菌数目、产物浓度、代谢产物类型等，以了解发酵进程，A正确；

B；在谷氨酸发酵过程中；随着谷氨酸的不断生成，发酵液的pH值不断的减小，对谷氨酸产生抑制，为了维持发酵的最佳条件，要监控pH并及时添加碱性物质或氨水以维持pH稳定，提高谷氨酸的产量，B正确；

C；谷氨酸发酵过程需要严格控制温度、pH、溶氧、通气量等；以免影响其代谢途径和产量，例如溶氧不足，生成的代谢产物就会是乳酸或琥珀酸，C正确；

D；谷氨酸棒状杆菌是一种异养兼性厌氧细菌；扩大培养应在有氧条件下进行，有利于谷氨酸棒状杆菌的生成，在无氧条件下，谷氨酸棒状杆菌能将葡萄糖和含氮物质(如尿素、硫酸铵、氨水)合成为谷氨酸，D错误。

故选D。6、B【分析】【分析】

腐乳的制作原理：参与豆腐发酵的微生物有青霉；酵母、曲霉、毛霉等多种；其中起主要作用的是毛霉，其代谢类型为异养需氧型；毛霉能够产生蛋白酶和脂肪酶，将蛋白质和脂肪分别水解成小分子的肽和氨基酸、甘油和脂肪酸。

【详解】

A；参与豆腐发酵的微生物有青霉、酵母、曲霉、毛霉等多种；其中起主要作用的是毛霉，A错误；

B；毛霉能够产生蛋白酶和脂肪酶；将蛋白质和脂肪分别水解成小分子的肽和氨基酸、甘油和脂肪酸，B正确；

C；加盐腌制和加卤汤的目的是抑制瓶内杂菌生长的同时又能调制腐乳的风味；C错误；

D；豆腐块相当于固体培养基；能为微生物发酵提供营养条件等，在密封腌制时，最好将瓶口通过酒精灯的火焰，用灼烧法进行灭菌，以防止瓶口被污染，D错误。

故选B。7、C【分析】【分析】

DNA粗提取和鉴定的原理：

1；DNA的溶解性：

（1）DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同（0.14mol/L溶解度最低）；利用这一特点，选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离目的。

（2）DNA不溶于酒精溶液；但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理，可以将DNA与蛋白质进一步的分离。

2；DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性：蛋白酶能水解蛋白质；但是对DNA没有影响。大多数蛋白质不能忍受60-80℃的高温，而DNA在80℃以上才会变性。洗涤剂能够瓦解细胞膜，但对DNA没有影响。

3；DNA的鉴定：在沸水浴条件下；DNA遇二苯胺会被染成蓝色，因此二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。

【详解】

A；洋葱是植物细胞；其细胞壁有保护和支撑的作用，不会吸水涨破，需要用洗涤剂瓦解细胞膜，A错误；

B；在上清液中加入等体积的95%的冷酒精；白色丝状物是粗提取的DNA，B错误；

C；DNA在2mol/L的氯化钠溶液中溶解度较大；所以将晾干的白色丝状物置于2mol/L的NaCl溶液中，会发生溶解现象，C正确；

D；DNA在沸水浴条件下遇到二苯胺试剂呈现蓝色反应；D错误。

故选C。

【点睛】8、D【分析】【分析】

线粒体和叶绿体的DNA；都能够进行半自主自我复制，并通过转录和翻译控制某些蛋白质的合成，但同时受到细胞核基因的控制。标记基因：便于重组DNA分子的筛选。

【详解】

A；四个基因转录时不一定都以DNA的同一条单链为模板；A错误；

B；农杆菌是植物基因工程最常用的运载体；农杆菌在自然条件下能感染的植物有双子叶植物和裸子植物，少数单子叶植物，B错误；

C；这些基因在叶绿体外合成；由叶绿体转运肽引导合成的蛋白质进入叶绿体，C错误；

D；可用抗原-抗体杂交技术检测是否有相应的蛋白质产生；从而检测四种酶在转基因水稻中的表达情况，D正确。

故选D。9、C【分析】【分析】

新型冠状病毒利用ACE2作为细胞受体进入细胞；但不能感染野生型小鼠，发现小鼠与人表达的ACE2蛋白存在较大差异，说明新冠感染生物体与ACE2受体有直接联系。

【详解】

A；ACE2作为受体与新冠病毒特异性结合；导致病毒进入细胞，所以ACE2蛋白的结构是新冠病毒侵染的重要决定因素之一，A正确；

B；人的ACE2基因在转入小鼠中时需要同时连接相应的启动子以便来调控ACE2基因的选择性表达；B正确；

C；新冠病毒感染小鼠模型要将人ACE2基因导入小鼠的受精卵细胞中去；C错误；

D；ACE2基因表达水平越高；新冠侵入细胞就越多越容易，D正确；

故选C。二、多选题(共7题，共14分)10、B:C【分析】【分析】

据图可知，逆转录酶可以催化以RNA为模板合成cDNA，还可催化以cDNA为模板合成其互补DNA；RT-PCR过程中需要a、b两种引物。

【详解】

A；逆转录酶催化合成DNA；所以具有DNA聚合酶的能力，A正确；

B、③PCR过程需要引物a、b；因为后续的模板链序列既有与靶RNA一致的，也有与cDNA一致的，B错误；

C；RT-PCR可检测基因的转录情况从而推知基因的表达水平；C错误；

D；通过设计RNA的特异性引物进行RT-PCR检测新冠病毒等RNA病毒；D正确。

故选BC。11、B:C【分析】【分析】

分析题图：该图为动物体细胞核移植过程和胚胎移植过程。动物核移植是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中；使其重组并发育成一个新的胚胎。

【详解】

A；生物的性状主要受核基因控制；去掉受体卵母细胞的核的目的是使核移植动物的遗传物质几乎全部来自有利用价值的动物提供的细胞核，A正确；

B；核移植时做供核一方的一般是传代10代以内细胞；原因是细胞能保持正常的二倍体核型，遗传物质不发生改变，B错误；

C；动物细胞核移植技术中普遍使用的去核方法是显微操作法；也可采用梯度离心、紫外线短时间照射和化学物质处理等方法，C错误；

D；核移植技术得到克隆动物能够体现动物细胞的细胞核具有全能性；D正确。

故选BC。12、A:D【分析】【分析】

动物核移植是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中；使其重组并发育成一个新的胚胎。这个新的胚胎最终发育为动物个体。核移植得到的动物称克隆动物，克隆动物的核基因完全来自供体动物，而细胞质基因来自受体细胞。

【详解】

A；供体牛体细胞在进行体外培养时；当贴壁细胞分裂生长到细胞表面相互接触时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触性抑制，A错误；

B；核移植用MⅡ中期的卵母细胞做受体细胞原因有卵母细胞体积大；便于操作；含有促使细胞核表达全能性的物质；营养物质丰富，B正确；

C；去核的卵母细胞与供体细胞通过电击后融合；供体核进入受体卵母细胞，构建成重组胚胎，C正确；

D；胚胎移植时；应先将重组细胞培养成早期胚胎，再把早期胚胎移入代孕母牛的子宫，D错误。

故选AD。13、C:D【分析】【分析】

该选择培养基中的唯一碳源是淀粉；只有能利用淀粉的微生物才能存活。利用淀粉的微生物分解淀粉后，会产生以菌落为中心的透明圈。

【详解】

A.淀粉只含有C；H、O三种元素；因此培养基中的淀粉不能为微生物提供氮源，A错误；

B.两个菌落的周围均有透明圈；说明两个菌落中的微生物都能分解淀粉，但不一定为同一种微生物，B错误；

C.两个菌落的周围均有透明圈；说明两个菌落中的微生物均能产生淀粉酶并将淀粉酶分泌至细胞外，C正确；

D.透明圈是由于培养基中的淀粉被微生物产生的淀粉酶分解后而产生的；因此透明圈直径与菌落直径的比值越大，说明该微生物分解淀粉的能力越大，D正确。

故选CD。14、A:B:C【分析】【分析】

15、A:C【分析】【分析】

植物体细胞杂交技术：就是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞；并把杂种细胞培育成完整植物体的技术。诱导融合的方法：物理法包括离心；振动、电刺激等．化学法一般是用聚乙二醇（PEG）作为诱导剂。

【详解】

A；获得的融合原生质体需放在等渗的无菌溶液中；不能放在无菌水中，否则会吸水涨破，A错误；

B；流程中A为去除细胞壁；可使用纤维素酶和果胶酶分解细胞壁，B过程为诱导原生质体融合，需要用聚乙二醇进行诱导，B正确；

C；形成愈伤组织的脱分化培养基和再分化形成植株的再分化培养基中细胞分裂素和生长素比例不同；C错误；

D；甲品种控制多种优良性状的基因；为核基因，杂种植物细胞核内含有控制甲青花菜优良性状的基因，精子中具有一半核基因，能通过父本（精子）进行传递，D正确。

故选AC。16、A:B【分析】【分析】

1；试管婴儿技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精；并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植后产生后代的技术。

2；设计试管婴儿技术是通过体外受精获得许多胚胎；然后从中选择符合要求的胚胎，再经移植后产生后代的技术。

【详解】

A；试管婴儿的培育主要采用的是体外受精、胚胎移植等技术；属于有性生殖。试管婴儿是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植后产生后代的技术，属于有性生殖，A错误；

B；设计试管婴儿可用于疾病治疗；试管婴儿用于解决不孕不育问题，B错误；

C；“设计试管婴儿”形成的胚胎需遗传学诊断后选择符合要求的胚胎植入母体孕育；C正确；

D；不符合遗传要求的胚胎如何处理会引起道德伦理之争；D正确。

故选AB。

【点睛】三、填空题(共8题，共16分)17、略

【分析】【分析】

1；腐乳制作过程中多种微生物参与了发酵；其中起主要作用的是毛霉，毛霉等微生物产生蛋白酶能将豆腐中的蛋白质转化成小分子肽和氨基酸，脂肪酶将脂肪转化成甘油和脂肪酸。

2；果胶酶能够分解果胶；瓦解植物的细胞壁及胞间层，使榨取果汁变得容易，而果胶分解成可溶性的半乳糖醛酸，也使得浑浊的果汁变得澄清。果胶酶并不特指某一种酶，而是分解果胶的一类酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶。

【详解】

（1）在腐乳制作的过程中；利用毛霉等微生物产生的蛋白酶将豆腐中的蛋白质分解成小分子肽和氨基酸，脂肪酶将脂肪水解为甘油和脂肪酸；加酶洗衣粉里添加的酶制剂中，应用最广泛；效果最明显的是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶。

（2）果胶酶并不特指某一种酶；而是分解果胶的一类酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶；果胶分解酶和果胶酯酶；在果汁生产过程中如果要固定果胶酶，最好采用化学结合和物理吸附法固定化，这是因为酶分子小，体积小的酶容易从包埋材料中漏出。

（3）酶提取和分离原理：需要用凝胶色谱法去除相对分子质量大的杂质蛋白；以纯化酶；利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法对酶进行纯度鉴定。

【点睛】

本题考查腐乳制作和酶提取等知识，对于此类试题，需要考生注意的细节较多，如实验的原理、实验步骤、实验采用的试剂及试剂的作用等，需要考生在平时的学习过程中注意积累。【解析】小分子肽和氨基酸脂肪酶碱性蛋白酶和碱性脂肪酶半乳糖醛酸酶、果胶分解酶、果胶酯酶化学结合法和物理吸附凝胶色谱（分配色谱）聚丙烯酰胺凝胶电泳18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】限制酶蛋白质核苷酸序列特定的切点DNA连接酶缺口磷酸-脱氧核糖外源基因受体细胞质粒噬菌体动植物病毒细菌酵母菌细胞核自主复制DNA分子19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】基因转移基因扩增医药卫生农牧业、食品工业环境保护苏云金杆菌农药的用量生产成本农药对环境的污染。20、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】提高动物生长速度、改善畜产品品质、用转基因动物生产药物21、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】胰蛋白酶单个细胞细胞悬液原代传代22、略

【分析】【分析】

微生物实验中常用的灭菌方法有干热灭菌；高压蒸汽灭菌和灼烧灭菌；其中对于培养基一般用高压蒸汽灭菌，对于接种环一般用灼烧灭菌，对于培养皿等可以用干热灭菌。培养基放入培养箱中需要倒置培养，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染。对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法，即将菌种接种到试管的固体斜面培养基上，在合适的温度下培养，当菌落长成后将试管放入4℃的冰箱中保藏，以后每3-6个月都要重新将菌种从旧的培养基上转移到新鲜的培养基上；对于需要长期保存的菌种可以采用甘油管藏法，在3mL的甘油瓶中装入1mL甘油后灭菌，将1mL培养的菌液转移到甘油瓶中，与甘油充分混匀后放在-20℃的冷冻箱中保存。植物有效成分的提取方法主要有蒸馏法、压榨法和萃取法，如玫瑰精油的化学性质稳定，难溶于水，易溶于有机溶剂，能随水蒸气一同蒸馏，常采用蒸馏法提取；对于如橘皮精油，其主要储存在橘皮部分，由于橘皮精油的有效成分在用水蒸气蒸馏时会发生部分水解，又会产生原料焦糊问题，所以一般采用压榨法提取。

【详解】

（1）微生物培养中常用的灭菌方法有高压蒸汽灭菌法；灼烧灭菌法、干热灭菌法等。用平板培养沙门氏菌时一般需要将平板倒置；可以防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染。在一定的培养条件下，不同种微生物表现出各自稳定的菌落特征，因此单个细菌在平板上会形成菌落，通常可根据菌落的形状、大小和颜色等特征来初步区分不同种的微生物。

（2）从鸡粪便取样；经选择培养后，如果要将样品涂布到鉴别培养基上，需要经过一系列梯度稀释。对获得的沙门氏菌进行长期保存常采用甘油管藏法。

（3）根据题干信息；沙门氏菌的最适繁殖温度为37°C，在20℃以上即能大出繁殖，其对热抵抗力不强，在60℃的条件下15min就能被杀死，因此为避免食用被沙门氏菌污染的食品而引发的食物中毒，家庭中可采取低温储存；高温加工方法进行处理。

（4）根据题意；肉桂精油不溶于水；易溶于有机溶剂且易挥发，故可采用水蒸气蒸馏法进行提取，提取过程中蒸馏的温度、时间都会影响精油品质。

【点睛】

本题主要考查现代生物科技的原理和运用，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力，能运用所学知识，准确判断问题的能力。【解析】灼烧灭菌法、高压蒸汽灭菌法、干热灭菌法倒置在一定的培养条件下，不同种微生物表现出各自稳定的菌落特征梯度稀释甘油管藏低温储存、高温加工水蒸气蒸馏蒸馏的温度、时间23、略

【分析】【详解】

生物武器是利用生物战剂杀伤人员、牲畜、毁坏植物的武器。致病能力强、攻击范围广。它可以直接或通过食物、生活必需品和带菌昆虫等散布，经由呼吸道、消化道和皮肤等侵入人、畜体内，造成大规模伤亡，同时可毁坏植物，该说法错误。【解析】错误24、略

【分析】【详解】

生殖性克隆指利用克隆技术获得胚胎；并将胚胎孕育成为人类个体的克隆性技术，其目的是用于生育，获得人的复制品；治疗性克隆是指利用克隆技术产生特定细胞或组织等，用于治疗性移植的克隆性技术，其目的是用于医学研究和疾病的治疗。

据概念可知，实现生殖性克隆和治疗性克隆都会用到的技术有体细胞核移植技术、动物细胞培养技术、早期胚胎培养技术、胚胎移植技术等；治疗性克隆在获取胚胎干细胞后，根据治疗目的诱导干细胞分化形成各种组织和器官，供患者移植用，故治疗性克隆还会应用到的技术为干细胞培养技术。【解析】生殖性克隆指利用克隆技术获得胚胎，并将胚胎孕育成为人类个体的克隆性技术治疗性克隆是指利用克隆技术产生特定细胞或组织等，用于治疗性移植的克隆性技术体细胞核移植技术、动物细胞培养技术、早期胚胎培养技术、胚胎移植技术等体细胞核移植技术，早期胚胎培养技术、动物细胞培养技术、胚胎移植技术、干细胞培养技术等用于生育，获得人的复制品用于医学研究和疾病的治疗四、判断题(共3题，共6分)25、B【分析】【详解】

酿酒酵母的最适生长温度是28℃；但在发酵过程中，一般将温度控制在18-30℃，这是因为果皮表面附着的野生酵母菌可能有多种（有多种酵母菌参与了发酵过程），从实践的角度看，大致控制温度范围比较简单易行。

故本说法错误。26、A【分析】【详解】

胚胎发育至囊胚期时，细胞逐渐分化。聚集在胚胎一端的细胞形成内细胞团，将来发育成胚胎的各种组织，即发育成完整的胚胎，而沿透明带内壁拓展和排列的细胞，称为滋养层细胞，它们将来发育成胎膜和胎盘，为胚胎的发育提供营养，故该表述正确。27、A【分析】【分析】

“设计试管婴儿”在植入前需要对胚胎进行遗传学诊断；而“试管婴儿”是解决不孕不育等问题，不需要进行遗传学诊断。

【详解】

“设计试管婴儿”与“试管婴儿”相比在植入前需要通过多种技术手段对胚胎进行遗传学诊断；以便选择合适的设计出来的试管婴儿。

故正确五、实验题(共3题，共12分)28、略

【分析】试题分析：本题考查泡菜的制作；考查对泡菜制作原理；亚硝酸盐含量检测原理的理解和识记。解答此题，可根据图中曲线升降规律判断泡菜制作过程中亚硝酸盐含量变化趋势，分析其升降原因，确定适合食用的发酵时间。

（1）测定亚硝酸盐含量可用比色法；其原理是：在盐酸酸化的条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N—1—萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料，将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测比较，可以大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量。

（2）高温可使微生物中的蛋白质变性；杀死微生物，实验中盐水加热煮沸可杀灭杂菌；冷却之后再使用是为了避免高温使乳酸菌死亡。

（3）在腌制过程中；由于盐水溶液浓度过高，细胞渗透失水，使坛中溶液量会增加。

（4）据图可知；1；2、3号泡菜坛中，在腌制的第7天亚硝酸盐含量均达到最大值，腌制到第14天以后亚硝酸盐含量降到较低水平，可以避免亚硝酸盐对人体健康的危害。

（5）泡菜制作过程中亚硝酸盐含量变化与微生物的数量和代谢强度有关；实验中三只坛中产生的亚硝酸盐含量存在差异，最可能的原因是各坛中微生物种类和数量可能存在差异。

（6）为让实验数据更好的表明泡菜腌制过程中亚硝酸盐含量变化，避免偶然因素造成的数据误差，应对该实验所获得的三组数据先求平均值，再绘制一条曲线(将三个坛中每次测定的亚硝酸盐的含量分别记录，求出平均值，然后以日期为横坐标，亚硝酸盐的平均含量为纵坐标画出一条曲线)。【解析】比色法玫瑰红色染料杀灭杂菌乳酸菌外界溶液浓度过高使细胞渗透失水814各坛中微生物种类和数量可能存在差异(或其他合理答案)先求平均值，再绘制一条曲线（将三个坛中每次测定的亚硝酸盐的含量分别记录，求出平均值，然后以日期为横坐标，亚硝酸盐的平均含量为纵坐标画出一条曲线）29、略

【分析】【分析】

微生物的分离：①利用该分离对象对某一营养物质的“嗜好”；专门在培养基中加入该营养物质，使该微生物大量增殖。这些物质主要是一些特殊的碳源；氮源，如纤维素可用来富集纤维素分解微生物，尿素可用来富集尿素分解微生物。②利用该分离对象对某种抑制物质的抗性，在混合培养物中加入该抑制物质，经培养后，由于原来占优势的它种微生物的生长受到抑制，而分离对象却可趁机大量增殖，使之在数量上占优势。如筛选酵母菌和霉菌，在培养基中加入青霉素，因青霉素可抑制细菌和放线菌的细胞壁的合成，从而抑制两类微生物的生长，而酵母菌和霉菌正常生长增殖。

【详解】

（1）微生物的生长需要碳源；氮源、水和无机盐；①中木糖含有C、H、O元素，故能提供碳源，硝酸钾中含有N元素，可以提供氮源和无机盐。

（2）分离筛选枯草芽孢杆菌需要得到单菌落；②→③中梯度稀释的目的是将聚集在一起的微生物分散成单个细胞，从而能在固体培养基表面形成单个菌落。

（3）制作的平板需要倒置的目的除了防止培养基中水分过快蒸发之外；还可以防止冷凝水落入培养基造成污染。

（4）分析题意可知，A处接种黑腐皮壳菌，在距离A处等距离的B1~B4处分别接种等量的4个枯草芽孢杆菌品系；在适宜条件下培养3－5天，由于枯草芽孢杆菌能抑制黑腐皮壳菌生长，通过观测黑腐皮壳菌菌落的形状（黑腐皮壳菌菌落边缘与4个枯草芽孢杆菌菌落的距离），就能筛选出抑菌更好的枯草芽孢杆菌菌株。

（5）在利用稀释涂布平板法统计土样中活菌的数目时；为了保证结果准确，一般选择菌落数在30~300的平板进行计数。当两个或多个细菌连在一起时平板上观察到的只是一个菌落，故该方法所得结果往往比实际细菌的数目要少。

【点睛】

本题考查微生物的分离和计数的相关知识，意在考查考生利用所学知识解决实际问题的能力，难度中等。【解析】提供碳源，提供氮源和无机盐将聚集在一起的微生物分散成单个细胞，从而能在固体培养基表面形成单个菌落防止冷凝水落入培养基造成污染观测黑腐皮壳菌菌落的形状（黑腐皮壳菌菌落边缘与4个枯草芽孢杆菌菌落的距离）30～300当两个或多个细菌连在一起时平板上观察到的只是一个菌落30、略

【分析】【分析】

参与果酒的制作的微生物主要是酵母菌；其新陈代谢的类型为异养兼性厌氧型，较适宜的发酵温度为18~30℃。在无氧的环境中酵母菌把糖类分解为酒精和二氧化碳。在果酒制作过程中检测发酵液是否含有酒精，取样后滴加适量酸性重铬酸钾溶液并振荡，若观察到溶液颜色的变化是橙色变成灰绿色，则说明发酵液中含有酒精。

【详解】

（1）传统发酵酿酒与现代工业发酵酿酒都是利用了酵母菌的无氧呼吸。酵母菌属于真核生物；其代谢类型是兼性厌氧型，在有氧条件下进行大量增殖，在无氧条件下将葡萄糖分解为酒精。

橙色的重铬酸钾溶液在酸性条件下与乙醇（即酒精）发生化学反应；变成灰绿色，该实验目的是验证发酵过程中产生了酒精，因此实验自变量是是否加入发酵液，因变量为溶液颜色变化。对照组中应加入酒精作为阳性对照。实验过程中应遵循等量原则；单一变量原则等，因此实验思路是：取两支试管分别标号A、B，A试管中各加入2ml发酵液，作为实验组，B试管中各加入2ml酒精，作为对照组，两试管中都加入适量酸性重铬酸钾，振荡后观察试管中颜色变化，AB两试管都变为灰绿色，即可验证发酵过程中产生了酒精。

（2）传统发酵技术一般不进行严格灭菌操作；因此其发酵菌种为天然的混合菌种。现代工业发酵酿制果酒不同于自制果酒，需要经过沉淀；过滤、灭菌、装瓶等过程才能获得成品酒。

（3）25×16型的血细胞计数板计算公式：酵母细胞个数/1mL=1个中方格中酵母菌数×25×10000×稀释倍数，因此该实验中每毫升发酵液中酵母菌数量=9×25×10000×1000=2.25×109。

（4）酿酒利用酵母菌的无氧呼吸，需要关闭充气口，酿醋利用醋酸菌，醋酸菌是需氧型微生物，因此需向充气孔中充入无菌空气。【解析】(1)酵母菌是兼性厌氧微生物；在无氧条件下将葡萄糖分解为酒精实验思路：取两支试管分别标号A；B，向A试管中各加入2ml发酵液，向B试管中各加入2ml酒精，向AB两试管各滴加0．5ml溶有0．1g重铬酸钾的浓硫酸溶液（或酸性重铬酸钾），并轻轻震荡，观察试管中溶液颜色变化。

(2)混合菌种沉淀；过滤、灭菌。

(3)2.25×109

(4)酿酒时需关闭充气口，酿醋时则需向充气孔中充入无菌空气六、综合题(共3题，共12分)31、略

【分析】【分析】

1；生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落；②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

2；凝胶电泳法：（1）原理：不同蛋白质的带电性质、电量、形状和大小不同；在电场中受到的作用力大小、方向、阻力不同，导致不同蛋白质在电场中的运动方向和运动速度不同。（2）分离方法：琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳等。（3）分离过程：在一定pH下，使蛋白质基团带上正电或负电；加入带负电荷多的SDS，形成“蛋白质-SDS复合物”，使蛋白质迁移速率仅取决于分子大小。

【详解】

（1）毛霉分泌的蛋白酶属于细胞代谢产物；需要使用液体培养基培养毛霉获得，微生物生长繁殖的基本营养物质包括无机盐；水、氮源、碳源等，其中碳源为其它有机物的合成提供原料，为微生物的正常生命活动提供能量。

（2）微生物常用