2025年沪科版选择性必修3生物上册月考试卷

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年沪科版选择性必修3生物上册月考试卷231考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五六总分得分评卷人得分一、选择题(共8题，共16分)1、“设计试管婴儿”与一般所说的“试管婴儿”多了哪一步（）A.体外受精B.胚胎移植C.基因检测D.细胞核移植2、下列有关生物技术安全性及伦理问题的说法，正确的是（）A.针对他人的不同见解，你的正确做法是分析每种观点的科学性，理性地看待问题，趋利避害B.人类利用设计试管婴儿技术可以解决不孕夫妇的生育问题C.对于设计试管婴儿技术，中国政府坚持四不原则D.克隆技术如果被不合理利用将给社会造成灾难，应禁止任何克隆研究3、科研工作者利用禽流感病毒蛋白制备单克隆抗体，下列步骤中叙述不正确的是（）A.用适宜浓度相同抗原多次免疫小鼠，以获得更多的浆细胞B.用培养液培养禽流感病毒，通过离心获得抗原蛋白C.可以用电融合法或PEG融合法诱导浆细胞与骨髓瘤细胞融合得到杂交瘤细胞D.单克隆抗体相比血清抗体特异性更强，并且可以大量制备4、下列关于DNA粗提取与鉴定的叙述，正确的是（）A.菜花提取的DNA滤液中，加入冷酒精有利于溶解DNAB.鸡血细胞液中，加入0．14mol/L的NaCl溶液有利于溶解细胞膜C.洋葱鳞片叶碎片中，加入沐浴液和食盐后研磨有利于去除细胞膜D.与鸡血相比，用同样方法从等体积兔血中提取DNA的量较高5、小鼠胚胎干细胞可从小鼠的囊胚中获取，经定向诱导可获得多种功能细胞。下列叙述正确的是（）A.为获得更多的囊胚，需采用激素注射促进雄鼠产生更多的精子B.胚胎干细胞和其他细胞的全能性不同是由于含有的核基因不同C.用胰蛋白酶将胚胎组织细胞的膜蛋白消化后可获得分散的细胞D.胚胎干细胞和诱导出的各种细胞都需在CO2培养箱中进行培养6、基因工程的基本工具——基因的“剪刀”是指（）A.限制性核酸内切酶B.蛋白酶C.DNA连接酶D.运载体7、谷氨酸的发酵是发酵工程的中心环节。下列有关发酵罐的监测装置作用及目的的叙述，不正确的是（）A.检测培养液中的微生物数目、产物浓度等B.监控pH并及时添加碱性物质以提高产量C.监控溶解氧、温度、通气量和转速等条件，以免影响其代谢途径和产量D.此过程需要控制无氧和恒温条件以利于谷氨酸棒状杆菌和谷氨酸的生成8、下列关于传统发酵技术的说法，正确的是（）A.制作腐乳过程中主要利用毛霉将蛋白质分解成肽和氨基酸B.制作泡菜过程中先将蔬菜装至八成满，然后倒入煮沸的盐水C.当缺少糖源时醋酸菌进行无氧呼吸将乙醇转化为乙醛，再将乙醛转化为醋酸D.制作果酒过程中应先将去除枝梗的葡萄用清水冲洗1~2次，然后晾干备用评卷人得分二、多选题(共6题，共12分)9、在传统发酵技术中；果醋的制作往往在果酒制作基础上进行。下图甲是醋酸发酵装置，乙是培养液pH变化曲线图，下列叙述不正确的是（）

A.发酵初期不通气，溶液中没有气泡产生B.中期可以闻到酒香，说明进行了酒精发酵C.后期接种醋酸菌，适当通气并保持原有温度D.图乙中能正确表示pH变化的曲线是③10、科学家将4个关键基因移植入已分化的肌肉细胞中并表达；使这个细胞成为多能干细胞（iPS细胞），下图为该实验示意图。下列有关叙述错误的是（）

A.应用该技术可缓解器官移植时器官供应不足的问题B.iPS细胞所携带的遗传信息与肌肉细胞相同C.关键基因表达使细胞功能趋向专门化，降低了细胞的分化程度D.图示过程体现了iPS细胞的全能性11、RNA经逆转录后再进行PCR扩增的技术称为RT－PCR，过程如图所示。下列相关叙述正确的是（）

A.过程①需要RN逆转录酶、引物、核糖核苷酸等条件B.真核细胞的mRNA经过程①②获得的DNA无内含子片段C.过程③PCR扩增时引物中的CG含量会影响退火温度D.RT－PCR技术可应用于新冠病毒（RNA病毒）的核酸检测12、野生型大肠杆菌菌株能在基本培养基上生长，氨基酸营养缺陷型突变株无法合成某种氨基酸，只能在完全培养基上生长，下图为纯化某氨基酸营养缺陷型突变株的部分流程图，①②③④代表培养基，A、B、C表示操作步骤，D、E为菌落。下列叙述正确的是（）

A.图中①②④为完全培养基，③为基本培养基B.A操作的目的是提高突变率，增加突变株的数量C.B的正确操作是用涂布器蘸取菌液后均匀地涂布在②表面D.经C过程原位影印及培养后，可从④中挑取D进行纯化培养13、欲探究1g土壤中有多少能分解尿素的细菌，需要用科学的方法测定微生物数量。下列相关叙述不正确的是（）A.利用以尿素作为唯一氮源的培养基，可从土壤中分离出分解尿素的细菌B.平板划线法可以分离得到单菌落，也可用来测定样品中的活菌数C.样品的稀释度直接影响平板上的菌落数目，因此稀释度越大越好D.利用显微镜进行直接计数，可快速直观地测定样品中的活菌数14、大肠杆菌能在基本培养基上生长；X射线照射后产生的代谢缺陷型大肠杆菌不能在基本培养基上生长，但可以在完全培养基上生长。利用夹层培养法可筛选代谢缺陷型大肠杆菌，具体的操作是：在培养皿底部倒一层基本培养基，冷凝后倒一层含经X射线处理过的菌液的基本培养基，冷凝后再倒一层基本培养基。培养一段时间后，对首次出现的菌落做好标记。然后再向皿内倒一层完全培养基，再培养一段时间后，会长出形态较小的新菌落。下列说法正确的是（）A.X射线诱发染色体变异进而导致大肠杆菌代谢缺陷B.首次出现的菌落做标记时应标记在皿盖上C.夹层培养法可避免细菌移动或菌落被完全培养基冲散D.形态较小的新菌落可能是代谢缺陷型大肠杆菌评卷人得分三、填空题(共7题，共14分)15、本课题对分解纤维素的微生物进行了初步的筛选。但是，这只是分离纯化的第一步。为确定得到的是纤维素分解菌，还需要进行发酵产纤维素酶的实验，纤维素酶的发酵方法有___________和___________发酵两种。纤维素酶的测定方法，一般是采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的__________进行________的测定。16、载体具备的条件：①_____。②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。③______。17、结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：______和______。18、我国政府同样禁止进行治疗性克隆实验。（选择性必修3P108）()19、干细胞的应用：有着_____能力及_____的干细胞，与组织、器官的发育、_____和_____等密切相关。20、首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了______，方法是采用______。21、有时还需进行______的鉴定。如转基因抗虫植物是否出现______。评卷人得分四、判断题(共1题，共7分)22、理性看待转基因技术，就是听之任之，不管不问（______）A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共4题，共32分)23、金黄色葡萄球菌是一种常见的食源性致病微生物；该菌具耐高盐的特性。哥伦比亚血平板含无菌脱纤维羊血，金黄色葡萄球菌可破坏菌落周围的红细胞，产生透明的溶血圈。如图为检测鲜牛奶中是否存在金黄色葡萄球菌的操作流程，请回答：

（1）从功能上看7．5％NaCl（高盐）肉汤培养基属于________培养基，用该培养基对金黄色葡萄球菌进行培养的主要目的是提高___________。

（2）从培养过程分析，振荡培养可以____________________________；更有利于微生物的生长。

（3）在配制哥伦比亚血平板时，添加无菌脱纤维羊血是在高压蒸汽灭菌________（填“之前”或“之后”），原因是________________________。

（4）图中血平板上的接种方法是________________。经规范操作并多次重复，血平板上均出现__________的菌落，初步证明鲜牛奶中存在金黄色葡萄球菌。但牛奶供应商仍认为此菌并非牛奶所携带，因此需要对本次操作进行完善，具体方案是________________。24、苹果树腐烂病是由黑腐皮壳菌引起的；是限制苹果产量的重要因素之一。生产上主要以化学药剂防治该病。为开发生物防治途径，科研人员拟从土壤中分离筛选出能抑制黑腐皮壳菌生长的枯草芽孢杆菌，实验流程图如图1：

（1）①中木糖和硝酸钾的作用分别是______________。

（2）②→③中梯度稀释的目的是_____________________________________________。

（3）制作的平板需要倒置的目的除了防止培养基中水分过快蒸发之外，还有______________。

（4）现有经纯化后获得的4个枯草芽孢杆菌品系，为探究哪个品系对黑腐皮壳菌的抑制效果更好，科研人员在如图2平板中的A处接种黑腐皮壳菌，在距离A处等距离的B1～B4处分别接种等量的4个枯草芽孢杆菌品系，在适宜条件下培养3﹣5天后，通过观察_________________________筛选出抑菌更好的枯草芽孢杆菌菌株。

图2

（5）在利用稀释涂布平板法统计土样中活菌的数目时，为了保证结果准确，一般选择菌落数在______________的平板进行计数。该方法所得结果往往比实际细菌的数目要少，原因是__________________________________。25、干燥综合征（SS）是临床常见的一种自身免疫病；患者血清中存在多种抗体，其中以SSB抗体特异性最强。下图表示科研人员利用基因工程技术获得SSB蛋白及利用SSB蛋白对小鼠进行免疫的过程。回答下列问题：

(1)利用RNA通过①过程获得cDNA需要________酶。已知真核生物mRNA在3'端加有PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）保护尾部不被降解。为了针对性获得cDNA，应如何设计逆转录第一步时的DNA引物______，设计引物的目的是______。

(2)为确保与pET41a质粒定向连接，对逆转录得到的cDNA扩增时，应在相应引物的_______（填“5'”或“3'”）端加上______酶切位点。

(3)③过程用重组质粒转染大肠杆菌时，需要用Ca2+处理大肠杆菌，目的是______，然后将处理后的大肠杆菌先接种在添加_______的培养基（A）上培养，待长出菌落后再利用无菌膜同位置转移到添加______的培养基（B）上培养，收集_______菌落进一步纯化后将菌体破碎处理；筛选得到SSB蛋白。

(4)将改造后的大肠杆菌生产的SSB蛋白注入到小鼠体内是为了检测该蛋白是否具有抗原性，则后续实验内容应为抽取小鼠血液_______。26、T-2毒素是一种由霉菌分泌的脂溶性小分子；可通过污染饲料引起畜禽中毒反应。CYP3A是猪体内降解T-2毒素的关键酶，T-2毒素可诱导CYP3A基因表达水平升高。

(1)T-2毒素是霉菌的_____（选填“初级”或“次级”）代谢产物，主要以_____方式进入猪细胞。

(2)B1和B2是CYP3A基因启动子上游的两个调控序列，为研究T-2毒素诱导CYP3A基因表达的机理，研究者首先将不同调控序列分别和CYP3A基因启动子及荧光素酶基因（LUC基因）连接构建表达载体，再分别导入猪肝细胞，然后向各组猪肝细胞培养液中加入_____，适宜条件下进行培养；24h后检测LUC酶活性，计算启动子活性相对值，结果如图1所示。据图可知，B1和B2调控序列是CYP3A基因响应T-2毒素的核心元件，理由是_____。

(3)研究表明NF-Y和Sp1两种蛋白均参与T-2毒素对CYP3A的诱导；B2是Spl的结合位点。研究者推测，NF-Y通过与B1结合，与Sp1共同调控CYP3A基因的表达。

①为证明Bl是NF-Y的结合位点，研究者依据B1序列制备了野生型和突变型探针，分别与猪肝细胞核蛋白提取物混合，实验分组及结果如图2．据实验结果推测，第4组出现阻滞带的原因是_____，进而推测第5组结果产生的原因是_____。

②研究者设计实验进一步证明了NF-Y和Spl通过互作共同发挥调控功能，实验设计思路是：增大或缩小B1和B2两者之间的距离，检测CYP3A基因的启动子活性。据此分析，实验假设是_____。评卷人得分六、综合题(共2题，共18分)27、生物工程技术为人们获得需要的生物新品种或新产品提供了便利。据图回答下列问题：

（1）在培育转人生长激素基因牛过程中，③过程培养到___________阶段。可以采用__________技术；培育出多头相同的转基因犊牛。

（2）prG能激发细胞不断分裂，通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体，II最可能是____细胞，Ⅲ代表的细胞具有______________的特点。

（3）从免疫的小鼠脾脏细胞中获取B淋巴细胞，在诱导剂的作用下与骨髓瘤细胞融合，形成_______________________，然后通过体内培养或体外培养也可以生产单克隆抗体。单克隆抗体与普通血清抗体相比较，具有__________________的特点。

（4）在抗虫棉培育过程中，④过程中的受体细胞采用愈伤组织细胞与采用叶肉细胞相比较，其优点是___________，⑤过程采用的技术是___________________。28、马铃薯是世界上最重要的粮食作物之一；与大多数粮食作物不同，马铃薯主要以块茎繁殖。

(1)野生马铃薯为二倍体，而商业化的马铃薯栽培品种为四倍体，即体细胞中有4个______。块茎繁殖易携带病原体；且四倍体的染色体高度杂合，使引入新性状的育种工作复杂化。因此，利用二倍体杂交是马铃普育种的发展趋势。

(2)大多数二倍体马铃薯自交不亲和，其受1号染色体上复等位基因（S1，S2，S3）控制。如下图所示；该基因在雌蕊的花柱中编码S酶，能抑制花粉管的伸长，导致精子不能与卵细胞结合；在雄蕊的花粉中则编码F蛋白，能识别降解进入花粉管的S酶，但对相同基因编码的S酶无效。

图中的两个亲本杂交，后代的基因型及比例是______。

(3)科学家发现一种自交亲和的二倍体马铃薯RH，研究发现其自交亲和由12号染色体上的A基因决定，A蛋白能识别绝大多数类型的S酶。将RH（父本，AaS1S1）与自交不亲和的二倍体PI（母本，aaS2S2）杂交；流程如图。

①F1中SC自交，F2中:AA：Aa=1:1，无aa类型的个体，理由是基因型为______的精子花粉管不能伸长；无法完成受精。

②写出F1中SC自交的遗传图解_________。

(4)S酶是雌蕊阻断花粉管萌发的“锁”，RH中的A蛋白则表现出“万能钥匙”的作用，从而打破自交不亲和性，对培育马铃薯自交系有重要作用。请写出利用RH培育出自交亲和的PI的流程___________。（用文字或图示作答均可）参考答案一、选择题(共8题，共16分)1、C【分析】【分析】

1；试管婴儿技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精；并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植后产生后代的技术。

2；设计试管婴儿技术是通过体外受精获得许多胚胎；然后从中选择符合要求的胚胎，再经移植后产生后代的技术。

【详解】

结合分析可知；“设计试管婴儿”与一般所说的“试管婴儿”相比，多了一步基因检测的过程，C符合题意。

故选C。2、A【分析】【分析】

转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应；过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。

治疗性克隆：指利用克隆技术产生特定细胞和组织（皮肤；神经或肌肉等）用于治疗性移植。

生殖性克隆：指将克隆技术用于生育目的；即用于产生人类个体。

中国政府：禁止生殖性克隆人；坚持四不原则（不赞成；不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验），不反对治疗性克隆人。

【详解】

A；对于生物技术安全性及伦理问题；针对他人的不同见解，正确做法是分析每种观点的科学性，理性地看待问题，趋利避害，A正确；

B；人类利用试管婴儿技术解决不孕夫妇的生育问题；B错误；

C；对克隆技术中国政府的态度是禁止生殖性克隆人；坚持四不原则（不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验），C错误；

C；对克隆技术中国政府的态度是禁止生殖性克隆人；坚持四不原则（不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验），不反对治疗性克隆，D错误。

故选A。3、B【分析】【分析】

单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应；之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，可用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养，最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。

【详解】

A；多次给小鼠注射适宜浓度的抗原；引起小鼠发生体液免疫，可以获得更多的浆细胞，A正确；

B；禽流感病毒没有细胞结构；不能在培养液中独立生存，B错误；

C；用灭活的病毒可诱导浆细胞与骨髓瘤细胞发生融合形成杂交瘤细胞；除外还可以用聚乙二醇诱导融合，C正确；

D；杂交瘤细胞既具有浆细胞能合成抗体的特点；也具有骨髓瘤细胞无限繁殖的特点，骨髓瘤细胞既能无限增殖，又能产生特异性抗体，因此单克隆抗体相比血清抗体特异性更强，并且可以大量制备，D正确。

故选B。4、C【分析】【分析】

1；DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同；在0.14mol/L的NaCl溶液中的溶解度最低；

2；DNA不溶于酒精溶液；

3；蛋白质不能忍受60～80℃的高温；DNA在80℃以上才会变性。洗涤剂能够瓦解细胞膜，但对DNA没有影响；

4；DNA含量相对较高的生物组织；如鸡血、菜花、洋葱等。

【详解】

A；DNA不溶于酒精溶液；所以加入冷酒精不利于溶解DNA，A错误；

B；DNA在0.14mol/L的NaCl溶液中的溶解度最低；不利于提取DNA，洗涤剂能够瓦解细胞膜，B错误；

C；沐浴液属于洗涤剂；能够瓦解细胞膜，C正确；

D；DNA含量相对较高的生物组织；如鸡血、菜花、洋葱等；兔属于哺乳动物，血中DNA含量少，D错误。

故选C。5、D【分析】【分析】

1；胚胎干细胞简称ES或EK细胞；来源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的内细胞团）。

2；ES细胞在饲养层细胞上或在添加抑制因子的培养液中；能够维持不分化的状态。在培养液中加入分化诱导因子，如牛磺酸、丁酰环腺苷酸等化学物质时，就可以诱导ES细胞向不同类型的组织细胞分化，这为揭示细胞分化和细胞凋亡机理提供了有效的手段。

【详解】

A；为了获得更多的囊胚；可以采用激素促进成熟雌性个体超数排卵，然后将卵细胞从母体内取出，在试管内与人工采集的精子进行体外受精，培育成胚胎，A错误；

B；胚胎干细胞和其他细胞含有的核基因是相同的；而两者的全能性不同是由于分化程度不同，B错误；

C；运用细胞培养技术可以从哺乳动物的早期胚胎中获得胚胎干细胞；首先必须用胰蛋白酶处理内细胞团，分解细胞间的胶原蛋白等，使之分散成单个细胞，C错误；

D、动物细胞培养时需要在5%CO2的培养箱中进行培养；以维持培养液的pH，D正确；

故选D。6、A【分析】【分析】

DNA重组技术至少需要三种工具：限制性核酸内切酶（限制酶）；DNA连接酶、运载体；

1；限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列；并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂；

2；DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键；

3；运载体：常用的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒。

【详解】

A；限制性核酸内切酶是基因工程的“剪刀”；A正确；

B；蛋白酶能催化蛋白质水解；不是基因工程的基本工具，B错误；

C；DNA连接酶是基因工程的“针线”；C错误；

D；运载体是基因工程的运输工具；D错误。

故选A。

【点睛】7、D【分析】【分析】

谷氨酸棒状杆菌是一种异养兼性厌氧细菌；谷氨酸棒状杆菌在扩大培养时，碳氮比应为4：1，而在发酵获得谷氨酸时碳氮比应为3：1。扩大培养应在有氧条件下进行，在无氧条件下，谷氨酸棒状杆菌能将葡萄糖和含氮物质（如尿素；硫酸铵、氨水）合成为谷氨酸．谷氨酸经过人们的进一步加工，就成为谷氨酸钠－味精。

【详解】

A；发酵罐的监测装置；可以方便检测培养液中的细菌数目、产物浓度、代谢产物类型等，以了解发酵进程，A正确；

B；在谷氨酸发酵过程中；随着谷氨酸的不断生成，发酵液的pH值不断的减小，对谷氨酸产生抑制，为了维持发酵的最佳条件，要监控pH并及时添加碱性物质或氨水以维持pH稳定，提高谷氨酸的产量，B正确；

C；谷氨酸发酵过程需要严格控制温度、pH、溶氧、通气量等；以免影响其代谢途径和产量，例如溶氧不足，生成的代谢产物就会是乳酸或琥珀酸，C正确；

D；谷氨酸棒状杆菌是一种异养兼性厌氧细菌；扩大培养应在有氧条件下进行，有利于谷氨酸棒状杆菌的生成，在无氧条件下，谷氨酸棒状杆菌能将葡萄糖和含氮物质(如尿素、硫酸铵、氨水)合成为谷氨酸，D错误。

故选D。8、A【分析】【分析】

1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。果酒制作的原理：（1）在有氧条件下，反应式如下：C6H12O6+6H2O+6O26CO2+12H2O+能量；（2）在无氧条件下，反应式如下：C6H12O62CO2+2C2H5OH+能量。

2；参与果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。

3；参与腐乳制作的微生物主要是毛霉；其新陈代谢类型是异养需氧型。腐乳制作的原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。

【详解】

A；制作腐乳过程中主要利用毛霉产生的蛋白酶将蛋白质分解成肽和氨基酸；产生的脂肪酶将脂肪分解为甘油和脂肪酸，A正确；

B；制作泡菜过程中先将蔬菜装至半坛；然后倒入煮沸后冷却的盐水，B错误；

C；醋酸菌为需氧型细菌；进行有氧呼吸，当缺少糖源时醋酸菌将乙醇转化为乙醛，再将乙醛转化为醋酸，C错误；

D；制作果酒过程中应该先用清水冲洗1~2次；然后再去除葡萄的枝梗，D错误。

故选A。二、多选题(共6题，共12分)9、A:C:D【分析】【分析】

1；参与果酒制作的微生物是酵母菌；其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。

果酒制作的原理：

（1）在有氧条件下，反应式如下：C6H12O6+6H2O+6O2→6CO2+12H2O；

（2）在无氧条件下，反应式如下：C6H12O6→2CO2+2C2H5OH。

2；参与果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。

【详解】

A；若发酵初期不通入气体；由于锥形瓶中含有少量空气，溶液中酵母菌也可通过有氧呼吸产生二氧化碳，即使没有空气，酵母菌也能通过无氧呼吸产生二氧化碳，因此有气泡产生，A错误；

B；中期可以闻到酒香；说明有酒精产生，即进行了酒精发酵，B正确；

C；由于醋酸菌是嗜氧菌；也是嗜温菌，因此后期接种醋酸菌，需通气并适当升高温度，C错误；

D；醋酸发酵过程中；发酵液的pH会进一步降低，因此图乙中能正确表示pH变化的曲线是②，D错误。

故选ACD。10、B:C:D【分析】【分析】

1；干细胞的概念：动物和人体内保留着少量具有分裂和分化能力的细胞。

2；干细胞的分类：（1）全能干细胞：具有形成完整个体的分化潜能；（2）多能干细胞：具有分化出多种细胞组织的潜能；（3）专能干细胞：只能向一种或两种密切相关的细胞类型分化。如神经干细胞可分化为各类神经细胞；造血干细胞可分化为红细胞、白细胞等各类血细胞。

3；胚胎干细胞的主要用途是：（1）可用于研究哺乳动物个体发生和发育规律；（2）是在体外条件下研究细胞分化的理想材料；在培养液中加入分化诱导因子，如牛黄酸等化学物质时，就可以诱导ES细胞向不同类型的组织细胞分化，这为揭示细胞分化和细胞凋亡的机理提供了有效的手段；（3）可以用于治疗人类的某些顽疾，如帕金森综合症、少年糖尿病等；（4）利用可以被诱导分化形成新的组织细胞的特性，移植ES细胞可使坏死或退化的部位得以修复并恢复正常功能；（5）随着组织工程技术的发展，通过ES细胞体外诱导分化，定向培育出人造组织器官，用于器官移植，解决供体器官不足和器官移植后免疫排斥的问题。

【详解】

A；由题图知；应用该技术可以缓解器官移植时器官供应不足的问题，A正确；

B；iPS细胞导入了外源基因；其遗传信息与肌肉细胞不同，B错误；

C；关键基因表达形成iPS细胞；没有使细胞功能趋向专门化，C错误；

D；过程①②③表示细胞分化；其实质是基因的选择性表达，没有体现iPS细胞的全能性，D错误。

故选BCD。11、B:C:D【分析】【分析】

PCR技术：1；概念：PCR全称为聚合酶链式反应；是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。2、原理：DNA复制。3、前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物。4、条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）5、过程：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开）；低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。

【详解】

A；过程①是由mRNA形成单链DNA的过程；表示逆转录，需要RNA、逆转录酶、引物、脱氧核苷酸等条件，A错误；

B；真核细胞中DNA的外显子部分转录的RNA拼接形成mRNA；因此真核细胞的mRNA经过程①②逆转录过程获得的DNA无内含子片段，B正确；

C；CG含量越高；氢键越多，结构越稳定，因此过程③PCR扩增时引物中的CG含量会影响退火温度，C正确；

D；新冠病毒遗传物质是RNA；RT-PCR技术可应用于新冠病毒的核酸检测，D正确。

故选BCD。

【点睛】12、A:D【分析】【分析】

由题图信息分析可知；图中首先利用培养基扩增菌体，然后在涂布在平板上，再通过影印法将菌种接种到两种培养基中，分别是基本培养基；完全培养基；野生型大肠杆菌菌株能在基本培养基上生长，而氨基酸营养缺陷型菌株由于发生基因突变无法合成某种氨基酸只能在完全培养基上生长，据此利用培养基的种类便可以选择出氨基酸突变株。

【详解】

A；野生型大肠杆菌菌株能在基本培养基上生长；氨基酸营养缺陷型突变株无法合成某种氨基酸，只能在完全培养基上生长，根据题干信息和图形分析，图中①②④中含有菌落，①②④为完全培养基，③中影印处无菌落，③为基本培养基，A正确；

B；紫外线可以提高突变的频率；而A操作即培养的目的是提高已经突变菌株的浓度（A操作不能提高突变率），即增加突变株的数量，B错误；

C；B操作是将菌液滴加到培养基表面；再用涂布器将菌液均匀的涂布在②表面，C错误；

D；从图中可看出；D在③基本培养基中无法生长，在完全培养基中可生长，说明D是氨基酸缺陷型菌落，故经C过程影印及培养后，可从④培养基中挑取D菌落进行纯化培养，D正确。

故选AD。13、B:C:D【分析】【分析】

选择培养基是用来将某种或某类微生物从混杂的微生物群体中分离出来的培养基。设计选择培养基时；主要考虑某些微生物的特殊营养需求或它们对某些化学物质具有的抗性。

【详解】

A；以尿素作为唯一氮源的培养基为选择培养基；可从土壤中分离出分解尿素的细菌，A正确；

B；平板划线法能将单个微生物分散到培养基上；从而分离得到单菌落，但是不可以用来测定样品中的活菌数，稀释涂布平板法可以计数，B错误；

C；样品的稀释度太大；会导致微生物数量太少，一般要求稀释后平板上的菌落数在30到300之间比较合适，C错误；

D；利用显微镜进行直接计数；可快速直观地测定样品中的活菌数和死菌数，D错误。

故选BCD。14、C:D【分析】【分析】

微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养基表面，经培养后可形成单个菌落。

【详解】

A；大肠杆菌是原核生物；没有染色体，A错误；

B；首次出现的菌落做标记时应标记在皿底上；B错误；

C；夹层培养法不需要对大肠杆菌进行再次接种；可避免细菌移动或菌落被完全培养基冲散，C正确；

D；由于代谢缺陷型大肠杆菌不能在基本培养基上生长；所以形态较小的新菌落可能是代谢缺陷型大肠杆菌，D正确。

故选CD。三、填空题(共7题，共14分)15、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】液体发酵固体发酵葡萄糖定量16、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】能在受体细胞中复制并稳定保存具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】黏性末端平末端。18、略

【分析】【详解】

中国政府的态度：禁止生殖性克隆，不反对治疗性克隆，该表述错误。【解析】错误19、略

【分析】略【解析】自我更新分化潜能再生修复20、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】目的基因DNA分子杂交技术。21、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】个体生物学水平抗虫性状。四、判断题(共1题，共7分)22、B【分析】【详解】

理性看待转基因技术，正确的做法是趋利避害，而不能因噎废食，所以本题错误。五、实验题(共4题，共32分)23、略

【分析】【分析】

1；选择培养基：人为提供有利于目的菌株生长的条件；同时抑制或阻止其他微生物生长的培养基。

2；根据题意分析；金黄色葡萄球菌可破坏哥伦比亚血平板上菌落周围的红细胞，产生透明的溶血圈。

【详解】

（1）金黄色葡萄球菌具耐高盐的特性；可用7.5％NaCl（高盐）肉汤培养基进行选择培养，可进一步提高金黄色葡萄球菌的浓度。

（2）振荡培养的目的是使微生物与营养物质充分接触，增加O2浓度；更有利于微生物生长。

（3）因为无菌脱纤维羊血上有红细胞；而高温会破坏红细胞。故添加无菌脱纤维羊血是在高压蒸汽灭菌之后。

（4）根据图中最右边的图示可知；接种方法是平板划线法。已知金黄色葡萄球菌可破坏菌落周围的红细胞，产生透明的溶血圈。故若要初步证明鲜牛奶中存在金黄色葡萄球菌，则血平板上要均出现周围出现透明溶血圈的菌落。本实验缺乏对照组，实验不完善，还需要设置不加（鲜）牛奶但其他操作和培养条件均相同的对照组。

【点睛】

本题旨在考查学生理解选择培养基的原理和应用、平板划线法的使用要点，把握知识的内在联系并应用相关知识综合解决问题的能力。【解析】选择金黄色葡萄球菌的浓度使微生物与营养物质充分接触/增加O2之后防止高温破坏红细胞平板划线法周围出现透明溶血圈设置不加（鲜）牛奶但其他操作和培养条件均相同的对照组24、略

【分析】【分析】

微生物的分离：①利用该分离对象对某一营养物质的“嗜好”；专门在培养基中加入该营养物质，使该微生物大量增殖。这些物质主要是一些特殊的碳源；氮源，如纤维素可用来富集纤维素分解微生物，尿素可用来富集尿素分解微生物。②利用该分离对象对某种抑制物质的抗性，在混合培养物中加入该抑制物质，经培养后，由于原来占优势的它种微生物的生长受到抑制，而分离对象却可趁机大量增殖，使之在数量上占优势。如筛选酵母菌和霉菌，在培养基中加入青霉素，因青霉素可抑制细菌和放线菌的细胞壁的合成，从而抑制两类微生物的生长，而酵母菌和霉菌正常生长增殖。

【详解】

（1）微生物的生长需要碳源；氮源、水和无机盐；①中木糖含有C、H、O元素，故能提供碳源，硝酸钾中含有N元素，可以提供氮源和无机盐。

（2）分离筛选枯草芽孢杆菌需要得到单菌落；②→③中梯度稀释的目的是将聚集在一起的微生物分散成单个细胞，从而能在固体培养基表面形成单个菌落。

（3）制作的平板需要倒置的目的除了防止培养基中水分过快蒸发之外；还可以防止冷凝水落入培养基造成污染。

（4）分析题意可知，A处接种黑腐皮壳菌，在距离A处等距离的B1~B4处分别接种等量的4个枯草芽孢杆菌品系；在适宜条件下培养3－5天，由于枯草芽孢杆菌能抑制黑腐皮壳菌生长，通过观测黑腐皮壳菌菌落的形状（黑腐皮壳菌菌落边缘与4个枯草芽孢杆菌菌落的距离），就能筛选出抑菌更好的枯草芽孢杆菌菌株。

（5）在利用稀释涂布平板法统计土样中活菌的数目时；为了保证结果准确，一般选择菌落数在30~300的平板进行计数。当两个或多个细菌连在一起时平板上观察到的只是一个菌落，故该方法所得结果往往比实际细菌的数目要少。

【点睛】

本题考查微生物的分离和计数的相关知识，意在考查考生利用所学知识解决实际问题的能力，难度中等。【解析】提供碳源，提供氮源和无机盐将聚集在一起的微生物分散成单个细胞，从而能在固体培养基表面形成单个菌落防止冷凝水落入培养基造成污染观测黑腐皮壳菌菌落的形状（黑腐皮壳菌菌落边缘与4个枯草芽孢杆菌菌落的距离）30～300当两个或多个细菌连在一起时平板上观察到的只是一个菌落25、略

【分析】【分析】

1；基因工程的四个步骤：目的基因的筛选与获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。

2、在基因工程操作中，常用原核生物作为受体细胞，其中以大肠杆菌应用最为广泛。研究人员一般先用Ca2＋处理大肠杆菌细胞；使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，然后再将重组的基因表达载体导入其中。

【详解】

（1）利用RNA通过①过程（逆转录）获得cDNA需要逆转录酶；已知真核生物基因的mRNA在3'端加有PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）保护尾部不被降解。逆转录第一步以mRMA为模板合成DNA单链；新链与模板链反向平行，由于新链只能由5'端向3'端延伸，所以逆转录第一步的引物应与mRNA尾部的PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）互补配对，即用多聚胸腺嘧啶脱氧核苷酸序列为引物；设计引物的目的是使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸。

（2）对逆转录得到的cDNA扩增时；引物的5'端结合母链的3'端之后DNA聚合酶开始扩增DNA。为确保其与pET41a质粒定向连接，应使用不同种的限制酶切割质粒和目的基因，由图可知，使用EcoRI酶会破环SSB基因，故应在相应引物的5'端加上BamHI和XhoⅠ酶切位点。

（3）由题图分析可知：质粒上存在卡那霉素和氯霉素抗性基因，由于XhoⅠ酶破坏了氯霉素抗性基因，所以成功组装的重组质粒不能在添加了氯霉素的培养基上生长，③过程用重组质粒转染大肠杆菌时，需要用Ca2+处理大肠杆菌；目的是使大肠杆菌成为易于吸收外源DNA的状态，然后分别将处理后的大肠杆菌先接种在添加卡那霉素的培养基（A）上培养，待长出菌落后再利用无菌膜同位置转移到添加氯霉素的培养基（B）上培养，收集能在含卡那霉素的培养基上生长而不能在含氯霉素培养基上生长的菌落进一步纯化后将菌体破碎处理，经筛选即可得到SSB蛋白。

（4）将改造后的大肠杆菌生产的SSB蛋白注入到小鼠体内是为了检测该蛋白是否具有抗原性，如果该蛋白有抗原性，会引起机体的免疫反应，产生相应抗体。则后续实验内容应为抽取小鼠血液提取其中的抗体，利用抗原—抗体杂交的方法检测其是否含有抗SSB的抗体。【解析】(1)逆转录用多聚胸腺嘧啶脱氧核苷酸序列为引物

使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸

(2)5’BamHⅠ和XhoI

(3)使大肠杆菌成为易于吸收外源DNA的状态卡那霉素氯霉素能在含卡那霉素的培养基上生长而不能在含氯霉素培养基上生长的。

(4)提取其中的抗体，利用抗原—抗体杂交的方法检测其是否含有抗SSB的抗体26、略

【分析】【分析】

图1可知：T-2毒素是一种常见的菌素；CYP3A是降解T-2毒素的关键酶，T-2毒素可诱导其表达水平升高，当用两种调控序列同时连接启动子，启动子的活性最高。

图2可知：野生型探针能与NF-Y结合；突变型探针不能与NF-Y结合，NF-Y抗体一定能与NF-Y结合。

【详解】

（1）初级代谢产物一般是霉菌生命活动所必需的，大多存在于细胞内。次级代谢产物不是霉菌生命活动必需的，并且分泌到体外，故T-2毒素是霉菌的次级代谢产物。T-2毒素是一种由霉菌分泌的脂溶性小分子，脂溶性小分子以自由扩散的方式进入细胞。

（2）实验的自变量是有无调控序列；根据单一变量原则，对照组的目的是为了排除无光变量的影响，除了没有调控序列，其他处理和实验组相同，所以对照组和实验组猪肝细胞均导入含CYP3A基因启动子及LUC基因的表达载体，然后向各组猪肝细胞培养液中加入加入等量T-2毒素，适宜条件下进行培养。从图中信息可知，缺失两个调控序列和对照组活性一致，缺失一个比对照组活性略强，两个都存在活性最高，说明这两个调控序列是CYP3A基因响应T-2毒素的核心元件。故缺失两个调控序列或其中任一个，T-2毒素都不能诱导启动子活性明显增强。

（3）①实验的目的是要验证NF-Y能与B1结合；根据第2组和第3组结果，依据B1序列制备的NF-Y结合位点野生型探针能与NF-Y结合，根据第4组结果，突变型探针不能与NF-Y结合。第5组加入了NF-Y抗体，一定能与NF-Y结合。故可以解释为：结合位点突变的探针不能结合核蛋白中的NF-Y，也不会竞争NF-Y与标记探针的结合，所以第4组与第2组同样位置出现阻滞带。第5组，NF-Y的抗体结合NF-Y，因此第5组中出现标记探针；NF-Y和NF-Y抗体的结合物，结合物分子量大，阻滞带的位置更靠后。

②假设NF-Y和Sp1通过互作共同发挥调控功能，它们之间的距离是发挥作用的最佳距离，故增大或缩小B1和B2两者之间的距离都会降低CYP3A基因的启动子的活性。【解析】(1