2025年湘教新版选择性必修3生物上册阶段测试试卷

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年湘教新版选择性必修3生物上册阶段测试试卷305考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五六总分得分评卷人得分一、选择题(共7题，共14分)1、关于DNA粗提取与鉴定实验的叙述，错误的是（）A.DNA不溶于体积分数为95%的预冷酒精B.香蕉、鱼卵或猪血都是理想的实验材料C.提取植物材料的DNA需先研磨破碎细胞D.沸水浴中二苯胺试剂与DNA反应呈蓝色2、小鼠胚胎干细胞可从小鼠的囊胚中获取，经定向诱导可获得多种功能细胞。下列叙述正确的是（）A.为获得更多的囊胚，需采用激素注射促进雄鼠产生更多的精子B.胚胎干细胞和其他细胞的全能性不同是由于含有的核基因不同C.用胰蛋白酶将胚胎组织细胞的膜蛋白消化后可获得分散的细胞D.胚胎干细胞和诱导出的各种细胞都需在CO2培养箱中进行培养3、关于利用细胞工程方法，以H7N9病毒的核衣壳蛋白为抗原制备单克隆抗体，下列相关叙述正确的是（）A.用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体B.体外培养单个已免疫的B淋巴细胞可以获得大量抗H7N9病毒的单克隆抗体C.将等量已免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞混合，经PEG诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞D.利用该单克隆抗体与H7N9病毒的核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出H7N9病毒感染者4、已知刚果红是一种染料，它可以与纤维素反应形成红色复合物，但并不与水解后的纤维二糖、葡萄糖等发生这种反应。为纯化菌种，在含有刚果红的鉴别培养基上划线接种纤维素降解细菌，培养结果如图所示。下列叙述正确的是（）

A.倒平板后需间歇晃动，以保证表面平整B.图中Ⅰ、Ⅱ区的细菌数量均太多，应从Ⅲ区挑取单菌落C.该实验结果因单菌落太多，不能达到菌种纯化的目的D.菌落周围的纤维素被降解后，可与刚果红反应发成砖红色5、某课题组为得到青蒿素产量高的新品系，通过一定的技术，使青蒿素合成过程的某一关键酶基因fps在野生青蒿中得到了过量表达，其过程如图所示。下列叙述错误的是（）

A.PCR过程中，温度需要控制在90℃以上的目的是破坏氢键B.构建重组质粒过程中，目的基因需插入Ti质粒的T-DNA上C.基因表达载体包括目的基因、启动子、终止密码子和标记基因等D.用荧光标记的fps基因作为探针可以检测目的基因是导入成功6、用PCR方法检测转基因植株是否成功导入目的基因时，得到以下电泳图谱。其中1号为DNA标准样液（Marker），10号为蒸馏水，PCR时加入的模板DNA如图所示。据此作出的分析，不合理的是（）

A.PCR产物的分子大小在250-500bp之间B.3号样品为不含目的基因的载体DNAC.9号样品对应植株不是所需的转基因植株D.10号确定反应体系等对结果没有干扰7、动物细胞培养是动物细胞工程的基础，相关叙述正确的是（）A.因为动物血清成分已研究清楚，所以在动物细胞培养基中加入动物血清B.悬浮培养的杂交瘤细胞会因细胞密度过大、发生接触抑制等因素而分裂受阻C.体外培养从牛卵巢采集的卵母细胞，细胞表面相互接触时细胞才停止分裂增殖D.将小鼠成纤维细胞诱导为多能干细胞，体外分化后可治疗小鼠的镰状细胞贫血评卷人得分二、多选题(共6题，共12分)8、研究人员从土壤中筛选得到酵母菌纤维素酶高产菌株；并对其降解纤维素的条件进行了研究。据图分析正确的是（）

A.筛选该高产菌株需要在纤维素为唯一碳源的培养基中培养B.探究最适温度时应尽可能将发酵液的pH控制在9左右C.该酵母菌高产菌株产生纤维素酶的最适温度是35℃D.利用该高产菌株降解纤维素时需严格保持厌氧环境9、营养缺陷型菌株是野生型菌株经过人工诱变或自发突变失去合成某种生长因子的能力，只能在补充了相应的生长因子的基本培养基中才能正常生长的变异菌株。某研究小组对酵母菌用紫外线照射后将其接种到甲培养皿的培养基上，一段时间后将甲培养皿的菌落影印接种（不改变菌落位置）到乙、丙两培养皿的培养基中，进一步培养得到如下图所示结果。下列分析正确的是（）

A.接种到甲培养皿采用的是稀释涂布平板法B.甲、丙两培养皿中的培养基是基本培养基C.甲培养皿中菌落数有可能比接种的酵母菌数少D.乙中生长的酵母菌都不属于营养缺陷型菌株10、白地霉侵染是导致柑橘酸腐病的主要原因，实验证明桔梅奇酵母通过分泌普切明酸对白地霉具有生物防治能力。已知铁是真菌生长的必需元素，是胞内重要酶活性中心的组成部分。普切明酸是桔梅奇酵母产生的一种水溶性铁螯合剂，能快速在培养基中扩散并与其中的Fe3+形成稳定红色复合物。研究配制的含有不同浓度FeCl3的培养基如下表所示。实验结果为随FeCl3浓度增大，抑菌圈红色加深但变窄，如下图所示。相关叙述正确的是（）。成分MgSO4NaH2PO4蛋白胨FeCl3溶液水琼脂用量5g7g15g500mL7g20g

A.蛋白胨可以提供碳源、氮源、维生素，琼脂不是营养物质B.白地霉采用了平板划线法，桔梅奇酵母采用了涂布平板法C.结果表明，FeCl3浓度增大，普切明酸与Fe3+结合的数量减少D.结果表明，FeCl3能降低桔梅奇酵母对白地霉的防治效果11、茯砖茶的制作包括发酵与发花等工序，发酵前要下“诱水”，下“诱水”就是将原有老茶煮水后喷洒在料堆之上。发花可使砖茶原料在加工过程中形成“金花”，学名“冠突散囊菌”——茶界“益生菌”，也是国家茶业界二级机密保护菌种。下列相关叙述错误的是（）A.茯砖茶的制作需利用酵母菌等多种细菌进行发酵B.下“诱水”相当于微生物培养过程中的“接种”，推测相关菌种可耐热C.发酵过程涉及多种酶催化，发酵后饮用有利于营养物质的吸收D.茯砖茶发酵完成后要灭菌并密封，有利于长期保存12、玉米秸秆转化为绿色能源酒精是解决能源危机的措施之一，具体的工艺流程如图所示。下列叙述正确的是（）

A.用酸或碱预处理有利于酶与底物充分接触，提高催化效率B.步骤③中，酵母菌在发酵初期更多分布在发酵液的上层C.随培养次数的增加，分离出的菌落类型越少表示纯度越高，其遗传基因型越稳定D.发酵过程中酒精浓度升高会抑制酵母菌代谢活动，同时使发酵液pH降低，发酵停止13、克隆动物常用的核移植方法主要有细胞质内注射法和透明带下注射法两种。前者是用微型注射针将供体细胞的细胞核吸出注入去核卵母细胞质内；后者是直接将供体细胞注入去核卵母细胞透明带内，然后促使两个细胞融合。世界首例体细胞克隆北极狼的供体细胞来自哈尔滨极地公园的一只野生北极狼的皮肤样本，卵母细胞来自一只处于发情期的母犬，代孕母体则是一只比格犬。下列叙述错误的是（）A.克隆北极狼的性状由野生北极狼、发情期的母犬和比格犬的基因共同决定B.相比之下，透明带下注射法对供体细胞核和卵母细胞的损伤更小C.供体细胞注入卵母细胞透明带内后，就可自行进入卵母细胞D.细胞分裂、分化形成克隆胚胎的过程中发生了基因重组评卷人得分三、填空题(共8题，共16分)14、20世纪70年代以后；以基因工程为代表的一大批生物技术成果，进入人类的生产和生活，特别是在医药和农业生产上发挥了极大的作用，但是与其他高新技术一样，生物技术也同样具有双刃剑效应。如同其他高新技术一样，转基因成果和转基因技术也需要你的理性看待。在转基因生物安全方面；

（1）你认为转基因生物有哪些优点，①____________②___________③__________。

（2）你认为转基因生物有哪些缺点，①____________②___________③__________。

（3）你对于转基因生物的态度是__________。15、统计的菌落数往往比活菌的实际数目_____________。这是因为______________________。因此，统计结果一般用而不是用活菌数来表示。除了上述的活菌计数法外，______________也是测定微生物数量的常用方法。16、基因进入受体细胞的______——“分子运输车”17、功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中______部位的两个核苷酸之间的______断开，因此具有______。18、去除DNA中的杂质，可以在滤液中加入2mol/L浓度的NaCL溶液，目的是____去除__________________；再调节NaCL溶液浓度为0．14mol/L，目的是_______________，_______________去除_______________；最后用浓度为2mol/L的NaCL溶液重新溶解________________19、植物繁殖的新途径。

微型繁殖：可以高效快速地实现种苗的大量繁殖。

作物脱毒：采用______组织培养来除去病毒（因为植物分生区附近的病毒______）

人工种子：以植物组织培养得到的______、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，经_____包装得到的种子。优点：完全保持优良品种的遗传特性，______；方便储藏和运输。

人工种子的结构包括：______、_____和______。20、有时还需进行______的鉴定。如转基因抗虫植物是否出现______。21、某种微生物合成的一种蛋白酶与人体消化液中某种蛋白酶的结构和功能很相似，只是前者热稳定性较差，进入人体后容易失效。尝试根据本节课所学知识提出改造该种微生物蛋白酶的思路_________。评卷人得分四、判断题(共2题，共8分)22、要对蛋白质的结构进行设计改造，最终必须通过改造氨基酸序列来完成。（选择性必修3P94）()A.正确B.错误23、转入油菜的抗除草剂基因，可能通过花粉传入环境中。()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共1题，共8分)24、【生物技术实践】

科学家发现家蝇体内存在一种抗菌活性蛋白；这种蛋白质具有极强的抗菌能力，受到研究者重视。

（1）分离该抗菌蛋白可用电泳法，其原理是根据蛋白质分子的______________、大小及形状不同，在电场中的________不同而实现分离。

（2）可用金黄色葡萄球菌来检验该蛋白的抗菌特性。抗菌实验中所用培养基中的牛肉膏和蛋白胨主要为细菌生长提供_________和_______________。

（3）分别在加入和未加入该抗菌蛋白的培养基中接种等量菌液。培养一定时间后，比较两种培养基中菌落的_____________；确定该蛋白质的抗菌效果。

（4）细菌培养常用的接种方法有_______和___________。实验结束后，对使用过的培养基应进行_____________处理。评卷人得分六、综合题(共4题，共24分)25、根据基因工程的有关知识；回答下列问题：

（1）限制性内切酶切割DNA分子后产生的片段，其末端类型有________________和_________________。

（2）质粒运载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如图：

为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外，还可用另一种限制性内切酶切割，该酶必须具有的特点是________________________________________。

（3）根据来源的不同，基因工程中所使用的DNA连接酶有两类，即_______DNA连接酶和________DNA连接酶。

（4）基因工程中除质粒外，________________和_____________也可作为运载体。

（5）若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，原因是________________________________。

（6）基因工程核心的步骤是____________________________，这一过程需要用到的工具酶主要是_______________________________________。26、通过细胞工程技术；利用甲；乙两种植物的各自优势（甲耐盐、乙高产），培育高产耐盐的杂种植株。请完善下列实验流程并回答问题：

（1）A是________________酶，D是具有________优良性状的幼芽。D长成的幼苗需要选择的原因是______________________________________。

（2）由C形成植株的过程利用了________________技术，愈伤组织形成D需要经过________过程。整个培养过程要在________的条件下进行。

（3）植物体细胞融合成功的标志是__________________。这项新技术具有的重要意义是_____________________。

（4）已知甲、乙植物分别为四倍体、二倍体，则“甲——乙植株”属于________倍体植株。27、迄今为止新型冠状病毒仍在全球传播；接种疫苗是预防新型冠状病毒的有效手段。

(1)某科研单位以新型冠状病毒的S蛋白及此蛋白上受体结合域（RBD）作为免疫原靶点成分，设计研制重组蛋白疫苗。构建重组RBD基因时加入了GP67信号肽基因序列，然后以及Bac-to-Bac杆状病毒作为重组基因的_____，以昆虫细胞作为_____表达RBD蛋白；加入独有的AddaVax佐剂，制备了RBD蛋白二聚体疫苗。

(2)我国科兴及北京生物两款新冠灭活疫苗均使用Vero细胞（非洲绿猴肾细胞的传代细胞系）进行病毒扩增培养。

①Vero细胞的合成培养基中通常加入_____等天然成分，Vero细胞的传代培养过程中需要使用_____使细胞分傲。

②采用细胞工程技术生产新型冠状病毒的单克隆抗体，需要从已痊愈的志愿者体内获得一定量的_____细胞，并将其与小鼠的_____细胞进行融合。融合后的细胞经筛选后还需要进行_____处理，并通过_____检测才能获得所需的杂交瘤细胞。

③杂交瘤细胞所产生的单克隆抗体具有的优点是_____。28、非霍奇金淋巴瘤是一种起源于淋巴组织的血液系统恶性肿瘤（细胞表面高表达CD19蛋白）治疗方法是利用基因工程的方法使T细胞表达能足够靶定抗原的受体（CAR）；改造后的T细胞被称为CAR-T，可以识别并攻击带有特定抗原的癌细胞，同时激活机体自免疫从而达到抗癌的效果。请回答下列问题：

(1)目前制造CAR-T细胞大部分是采用慢性病毒感染的方式使T细细胞表达CAR。

①获得CAR基因（实质为抗CD19蛋白的抗体基因）：将抗CD19蛋白的抗体基因作为PCR反应的模板；并依据_____设计一个对特殊性引物来扩大应该的原因。

②构建基因表达载体：图1为所用载体示意图；表格为限制酶的序列及切割位置。为使目标与载体正确连接，在扩增目标基因时，应在其引物的_____端别引入_____两种不同限制酶的序列。目的基因和载体连接时，可选_____（选填“E.coliDNA连接酶”或“T4DNA连接酶”）。

③将目的基因导入受体细胞：将重组质粒通过_____技术导入T细胞。

④重组质粒的筛选与确定：将转化后的T细胞置于含_____培养基础上进行培养；通过流式细胞试验证明CAR-T细胞的结构是否成功。

。限制酶识别顺序HindIIIA↓AGCTTPvit2CAG↓CTGKpnIG↓GTACCEcoRIG↓AATTCPstICTGCA↓GBamHIG↓GATCC

(2)采用病毒作为传递体存在随机插入的安全隐患；CRISPR/Cas9技术作为第三代基因编译工具（图2），sgRNA可引导Cas9蛋白在特定位置进行切割来完成基因的编辑。科学家利用该技术制作的CAR-T细胞，在非霍奇金淋巴瘤临床前的治疗中取得理想成效。其操作原理如图3所示。

①sgRNA能与基因特异识别；结合的原理是_____；基因编辑工具中对基因进行剪切的是_____。

②细胞表面的PD-L1蛋白和T细胞表面的PD-1受体结合；发出免疫抑制信号，现实免疫逃逸。该研究小组利用CRISPR/Cas9技术切割T细胞中PD-1基因的同时导入靶向PD-1基因的同源重组序列，利用同源重组修复的原理将_____重组在PD-1基因内部，制作了非病毒定点整合的CAR-T细胞，如图3。

③综上所述信息分析，与病毒感染的CAR-T细胞相比较，该方法产生的CAR-T细胞在非霍奇金淋巴瘤的治疗中的优势有：可以_____插入抗CD19蛋白的抗体基因，降低随机插入的安全隐患，提高CAR-T细胞的安全性；可以使PD-1基因突变，降低肿瘤细胞_____的可能性，提高CAR-T细胞的有效。参考答案一、选择题(共7题，共14分)1、B【分析】【分析】

DNA粗提取和鉴定的原理：

1；DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于冷酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质溶于酒精。

2；DNA的鉴定：在沸水浴的条件下；DNA遇二苯胺会被染成蓝色。

【详解】

A、根据以上分析可知，DNA不溶于95%的冷酒精，但溶于2mol•L-1的NaCl溶液；A正确；

B；猪为哺乳动物；其成熟的红细胞中不含细胞核和细胞器，即不含DNA，因此不能作为该实验的材料，B错误；

C；利用植物组织提取DNA时；须先破碎细胞，破碎细朐时需添加食盐和洗涤剂进行研磨，添加该物质的目的是瓦解细胞膜，而加入食盐的目的是溶解并提取DNA，C正确；

D；在沸水浴的条件下；DNA遇二苯胺会被染成蓝色，D正确。

故选B。2、D【分析】【分析】

1；胚胎干细胞简称ES或EK细胞；来源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的内细胞团）。

2；ES细胞在饲养层细胞上或在添加抑制因子的培养液中；能够维持不分化的状态。在培养液中加入分化诱导因子，如牛磺酸、丁酰环腺苷酸等化学物质时，就可以诱导ES细胞向不同类型的组织细胞分化，这为揭示细胞分化和细胞凋亡机理提供了有效的手段。

【详解】

A；为了获得更多的囊胚；可以采用激素促进成熟雌性个体超数排卵，然后将卵细胞从母体内取出，在试管内与人工采集的精子进行体外受精，培育成胚胎，A错误；

B；胚胎干细胞和其他细胞含有的核基因是相同的；而两者的全能性不同是由于分化程度不同，B错误；

C；运用细胞培养技术可以从哺乳动物的早期胚胎中获得胚胎干细胞；首先必须用胰蛋白酶处理内细胞团，分解细胞间的胶原蛋白等，使之分散成单个细胞，C错误；

D、动物细胞培养时需要在5%CO2的培养箱中进行培养；以维持培养液的pH，D正确；

故选D。3、D【分析】【分析】

单克隆抗体的制备过程是：对小动物注射抗原；从该动物的脾脏中获取效应B细胞；将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞；克隆化培养杂交瘤细胞（体内培养和体外培养），最后获取单克隆抗体。诱导动物细胞融合的方法有：物理法（离心；振动）、化学法（聚乙二醇）、生物法（灭活的病毒）。

【详解】

A；用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内；产生的血清抗体化学性质不单一，不是单克隆抗体，A错误；

B、体外培养单个已免疫的B淋巴细胞，由于该B淋巴细胞不能无限繁殖，所以无法获得大量针对H7N9病毒的单克隆抗体；B错误；

C；将等量B细胞和骨髓瘤细胞混合；经PEG诱导融合后的细胞不都是杂交瘤细胞，还有B细胞自身融合的细胞、骨髓瘤细胞自身融合的细胞，C错误；

D、由于抗体具有专一性，该单克隆抗体是以H7N9病毒核衣壳蛋白为抗原制备出的，所以利用该单克隆抗体与H7N9病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者；D正确。

故选D。

【点睛】

本题考查了单克隆抗体制备的有关知识，考生要能够识记制备过程以及制备过程中的相关注意点，注意细胞融合后产生的融合细胞不一定是杂交瘤细胞，筛选得到的杂交瘤细胞也不一定能够产生单克隆抗体。4、B【分析】【分析】

微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在划线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

【详解】

A；倒平板时需左三圈；右三圈的轻轻晃动，以保证表面平整，A错误；

B；图中Ⅰ、Ⅱ区的细菌数量均太多；应从Ⅲ区挑取单菌落，B正确；

C；由图可知；该实验的Ⅲ区已经出现由单个细菌繁殖而形成的菌落，所以该实验结果能达到菌种纯化的目的，C错误；

D；刚果红可以与纤维素形成红色复合物；纤维素分解菌产生的纤维素酶可以水解纤维素而使菌落周围出现无色透明圈，D错误。

故选B。

【点睛】5、C【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。目的基因的检测与鉴定。

【详解】

A；利用PCR技术扩增目的基因时；使反应体系中的模板DNA解旋为单链的条件是加热至90℃以上，目的是破坏DNA分子中的氢键，A正确；

B；构建重组Ti质粒的过程中；需将目的基因插入Ti质粒的T-DNA上，B正确；

C；基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等；终止密码子位于mRNA上，C错误；

D；检验目的基因是否格合到青蒿基因组中；可用DNA分子杂交法，即将fps基因制成基因探针，与青蒿基因组DNA杂交，而检测目的基因是否表达，常用抗原-抗体杂交法，D正确。

故选C。6、B【分析】【分析】

PCR过程中，可以通过设计特定的引物来扩增特定的DNA片段。4～9号是转基因植株，理论上应包含目的基因。9号PCR结果不包含250～500bp片段；所以不是所需转基因植株。

【详解】

A、PCR过程中，可以通过设计特定的引物来扩增特定的DNA片段。4～9号是转基因植株，理论上应包含目的基因，结合2号野生型和10号蒸馏水组的结果，推测包含目的基因的片段大小应为250～500bp；A正确；

B、3号PCR结果包含250～500bp片段；应包含目的基因，B错误；

C、9号PCR结果不包含250～500bp片段；所以不是所需转基因植株，C正确；

D；10号放入蒸馏水；可排除反应体系等对结果的干扰，D正确。

故选B。7、D【分析】【分析】

动物细胞培养是指从动物体中取出相关的组织；将它分散成单个细胞，然后在适宜的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。

【详解】

A；由于对动物血清成分尚未全部研究清楚；因此在动物细胞培养基中加入动物血清，A错误；

B；杂交瘤细胞具备肿瘤细胞可无限增殖的特点；因此不会发生接触抑制等现象，B错误；

C；体外培养从牛卵巢采集的卵母细胞；需要培养到减数第二次分裂才具备受精的能力，在受精过程中完成减数第二次分裂，因此体外培养的卵母细胞不会增殖分裂，C错误；

D；将小鼠成纤维细胞诱导为多能干细胞；体外分化后可治疗小鼠的镰状细胞贫血，D正确。

故选D。二、多选题(共6题，共12分)8、A:B【分析】【分析】

分解纤维素微生物的分离实验原理：

（1）土壤中存在着大量纤维素分解酶；包括真菌；细菌和放线菌等，它们可以产生纤维素酶。纤维素酶是一种复合酶，可以把纤维素分解为纤维二糖，进一步分解为葡萄糖使微生物加以利用，故在用纤维素作为唯一碳源的培养基中，纤维素分解菌能够很好地生长，其他微生物则不能生长。

（2）在培养基中加入刚果红；可与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，红色复合物不能形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，从而可筛选纤维素分解菌。

【详解】

A；筛选该高产菌株需要在纤维素为唯一碳源的培养基中培养；A正确；

B；由pH与纤维素酶活性的曲线图分析可知；当pH为9时，纤维素酶的活性最高，故在探究最适温度时应尽可能将发酵液的pH控制在9左右，B正确；

C；由温度与纤维素酶活性的曲线图分析可知；当温度为35℃时纤维素酶的活性最大，但是由于缺少35℃之后的温度实验组，故无法判断该酵母菌高产菌株产生纤维素酶的最适温度是35℃，C错误；

D；酵母菌是兼性厌氧微生物；在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，故在降解初期需要给酵母菌提高有氧环境，以保证酵母菌的数量，D错误。

故选AB。

【点睛】9、A:C:D【分析】【分析】

微生物常见的接种的方法：

（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种；划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后；均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

【详解】

A；由甲平板观察可知；平板中菌落分布均匀，采用的是稀释涂布平板法，A正确；

B；由题图信息分析可知；甲、丙培养基菌落数目多，含有野生型酵母菌菌株和某种营养缺陷型酵母菌菌株，而乙培养皿菌株是某种营养缺陷型酵母菌菌株，据此推测，乙培养皿的培养基是基本培养基，甲和丙是补充了相应的生长因子的培养基，B错误；

C；由于基因突变具有不定向性；因此接种到甲培养皿的酵母菌可能还有其他营养缺陷型，且有些菌落不一定由一个酵母菌形成，故甲培养皿中菌落数有可能比接种的酵母菌数少，C正确；

D；由题图信息分析可知；乙培养皿的培养基是基本培养基，故该培养皿中能够形成的菌落是野生型菌株，不属于营养缺陷型菌株，D正确。

故选ACD。10、A:D【分析】【分析】

1；培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求；配制出供其生长繁殖的营养基质；根据物理性质分为固体培养基和液体培养基，培养基中一般含有水、碳源、氮源和无机盐。在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质和氧气的要求。

2；微生物常见的接种的方法：

（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后；均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

【详解】

A；蛋白胨可以提供碳源、氮源、维生素；琼脂是凝固剂的一种，并不是营养物质，在培养液中加入琼脂可以使液体培养基成为琼脂固体培养基，A正确；

B；白地霉、桔梅奇酵母的接种都采用了涂布平板法；B错误；

C、随培养基中FeCl3浓度的增加，普切明酸与Fe3+的结合增强；抑菌圈的红色加深，C错误；

D、普切明酸与Fe3+形成红色复合物，但随培养基中FeCl3浓度的增加，抑菌圈变窄，说明FeCl3能降低桔梅奇酵母对白地霉的防治效果；D正确。

故选AD。11、A:D【分析】【分析】

根据题意分析：茯砖茶的制作包括发酵与发花等工序；发酵过程涉及多种酶催化，发酵后饮用有利于营养物质的吸收。

【详解】

A；酵母菌是真菌；不是细菌，A错误；

B；下“诱水”就是将原有老茶煮水后喷洒在料堆之上；相当于微生物培养过程中的“接种”，推测相关菌种可耐热，B正确；

C；发酵过程涉及多种酶催化；发酵后富含多种小分子营养物质，因此发酵后饮用有利于营养物质的吸收，C正确；

D；茯砖茶在储藏过程中仍然继续自然发酵；因此灭菌并密封处理，不利于长期保存，D错误。

故选AD。12、A:B:C【分析】【分析】

用玉米秸秆生产燃料酒精是利用微生物进行生物发酵的过程；所利用的微生物为酵母菌，通过酒精发酵将葡萄糖转化为酒精，玉米秸秆中含有的糖类主要是纤维素，因此需要先将纤维素水解成葡萄糖，再进行发酵。

【详解】

A；由于纤维素组成成分复杂、结构稳定；生物降解时难以迅速进行，常用酸或碱进行预处理，初步打断纤维素内部的化学键，降低聚合度，利于酶与底物充分接触，提高催化效率，A正确；

B；在有氧的条件下酵母菌进行出芽生殖；上层培养液与空气接触部位氧气较多，短时间内酵母菌更多分布在发酵液的上层，B正确；

C；在选择培养基中经多次培养；分离出的菌落类型越少表示纯度越高，其遗传基因型越稳定，C正确；

D、发酵液pH下降是因为产生了CO2；D错误。

故选ABC。13、A:C:D【分析】【分析】

动物核移植是指将动物的一个细胞的细胞核；移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成为动物个体。

【详解】

A；克隆北极狼的供体细胞来自野生北极狼；卵母细胞来自发情期的母犬，因此性状由野生北极狼、发情期的母犬的基因共同决定，比格犬只是代孕母体，不提供遗传物质，A错误；

B；透明带下注射法不抽取供体细胞的细胞核；操作简单且对供体细胞核损伤小，同时注射的位置是卵母细胞外的透明带，然后诱导两个细胞融合，对卵母细胞的损伤小，B正确；

C；供体细胞注入卵母细胞透明带内后；还需要电融合法等诱导才能使供体细胞进入卵母细胞形成重构胚，C错误；

D；细胞分裂、分化形成克隆胚胎的过程是有丝分裂过程；而基因重组发生在减数分裂过程，D错误。

故选ACD。三、填空题(共8题，共16分)14、略

【分析】【分析】

基因工程是指按照人们的愿望；进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋子生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫做DNA重组技术。

基因工程的原理是基因重组；其优点是打破了生殖隔离。但由于科学发展水平的限制，目前科学家对基因的结构；基因间的相互作用以及基因的调控机制等都了解得相当有限；再加上转移的基因虽然是功能已知的基因，但不少却是异种生物的基因；同时，由于外源基因插入宿主基因组的部位往往是随机的，因此在转基因生物中，有时候会出现一些人们意想不到的后果。

【详解】

（1）转基因生物具有以下优点：

作物产量高；能解决粮食短缺问题；利用基因工程生产的抗虫作物能够减少农药使用，减少环境污染；利用基因工程培育的生长迅速；营养品丰富的生物，能增加食物营养，提高附加值；利用基因工程培育微生物，能够生产稀缺的生化药物。

（2）转基因生物受限于科学发展水平；可能会产生以下问题：

转基因生物与同种生物杂交；可能产生重组病菌；重组病毒或超级杂草；导入转基因生物的外源基因有可能与感染转基因生物的某些细菌或病毒杂交，从而重组出对人类或其他生物有害的病原体，可能使疾病的传播跨越物种障碍。

（3）转基因技术取得了巨大的成果；但科学技术是把双刃剑，面对转基因技术的利弊，正确的做法应该是趋利避害，而不能因噎废食。

【点睛】

本题考查转基因生物的安全性问题，意在考查学生对转基因生物安全性问题的识记与理解。【解析】解决粮食短缺问题减少农药使用，减少环境污染增加食物营养，提高附加值能产生有毒蛋白或新过敏原可能产生重组病菌、重组病毒或超级杂草可能使疾病的传播跨越物种障碍趋利避害不能因噎废食15、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】低当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落菌落数16、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】载体17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】特定磷酸二酯键特异性18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】不容的杂质析出DNA过滤溶液中的杂质DNA19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】茎尖极少或没有）胚状体人工薄膜不受季节的限制人工种皮；胚状体和人工胚乳。

（2）20、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】个体生物学水平抗虫性状。21、略

【分析】【详解】

要提高酶的热稳定性，可采用蛋白质工程技术替换少数氨基酸，改善其功能，需要从改造控制该酶合成的基因着手，具体做法为从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列→获得所需的蛋白质。【解析】采用蛋白质工程技术替换少数氨基酸，提高该酶的热稳定性，从改造控制该酶合成的基因着手，具体做法为从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列→获得所需的蛋白质。四、判断题(共2题，共8分)22、B【分析】【详解】

要对蛋白质的结构进行设计改造，最终必须通过改造基因中的碱基序列来完成，因为基因能指导蛋白质的生物合成，故说法错误。23、A【分析】【详解】

转入到油菜的抗除草剂基因，则可能通过减数分裂进入到花粉细胞中，进而传入环境中的其他生物体内。本说法正确。五、实验题(共1题，共8分)24、略

【分析】【详解】

（1）电泳法分离蛋白质；是根据蛋白质分子的电荷；大小及形状不同，在电场中的迁移速度不同而实现分离。

（2）牛肉膏和蛋白胨中蛋白质较多；可作为碳源和氮源。

（3）加入抗菌蛋白的培养基中；金黄色葡萄球菌应该不能生长或生长很少，未加入抗菌蛋白的培养基中金黄色葡萄球菌应该能生长，菌落较多。

（4）平板划线法、稀释涂布平板法都能使接种的菌种在固体培养上充分分散，对使用过的培养基应进行灭菌处理，是为了防止细菌扩散污染。【解析】①.电荷（带电情况）②.迁移速度③.碳源④.氮源⑤.数量⑥.平板划线法⑦.稀释涂布平板法（稀释混合平板法）⑧.灭菌六、综合题(共4题，共24分)25、略

【分析】【分析】

基因工程至少需要三种工具：限制性核酸内切酶（限制酶）、DNA连接酶、运载体；限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，形成黏性末端和平末端两种；DNA连接酶分为两类：E．coliDNA连接酶和T4DNA连接酶；基因工程常用的运载体：质粒；噬菌体的衍生物、动植物病毒。

（1）

限制性核酸内切酶（简称限制酶）切割DNA分子后；产生的片段末端类型有黏性末端和平末端。

（2）

目的基因与运载体具有相同的黏性末端才能连接；若用包括EcoRⅠ在内的两种限制酶切割目的基因，则另一种限制酶必须具有的特点是：切割产生的DNA片段末端与EcoRⅠ切割产生的相同。

（3）

按其来源不同，基因工程中所使用的DNA连接酶有两类，即E·coliDNA连接酶（来源于大肠杆菌）和T4DNA连接酶（来源于T4D噬菌体）。

（4）

基因工程中常用的运载体是质粒；此外还有λ噬菌体的衍生物和动植物病毒。

（5）

由于未处理的大肠杆菌吸收质粒（外源DNA）的能力极弱，因此若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，而通常用Ca2+处理大肠杆菌细胞；使其成为感受态细胞，此时细胞壁和细胞膜的通透性增大，容易吸收重组质粒。

（6）

基因表达载体的构建是基因工程的核心步骤；该过程需要用限制酶切出黏性末端，然后再用DNA连接酶连接形成重组DNA。

【点睛】

解答本题需熟记并理解DNA重组技术的基本工具、基因工程的基本操作程序并形成清晰的知识网络。在此基础上，结合问题情境，从题意中提取有效信息进行相关问题的解答。【解析】（1）平末端黏性末端。

（2）切割产生的DNA片段末端与EcoRⅠ切割产生的相同。

（3）T4E·coli

（4）动植物病毒λ噬菌体的衍生物。

（5）未处理的大肠杆菌吸收质粒(外源DNA)的能力极弱。

（6）基因表达载体的构建限制性核酸内切酶（限制酶）和DNA连接酶26、略

【分析】【分析】

分析图示；图为培育高产耐盐的杂种植株过程：将甲；乙两种植物细胞用A纤维素酶和果胶酶除去细胞壁，获得甲、乙原生质体，然后用PEG诱导原生质体融合，获得B融合的原生质体，再生细胞壁获得C完整杂种细胞，经过脱分化形成愈伤组织，然后再分化形成幼苗，经过高盐环境选择后获得目标植株。

（1）

由植物细胞变成原生质体；需要去掉细胞壁，细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，酶具有专一性，所以应用纤维素酶和果胶酶处理细胞壁，即A是纤维素酶和果胶酶；利用植物组织培养技术可得到愈伤组织；丛芽结构和试管苗，并非每个细胞都能表达出耐盐性状，需要利用含盐培养基进行选择，D是具有耐盐优良性状的幼芽；D长成的幼苗有耐盐高产和耐盐不高产两种，故需要进行选择。

（2）

C细胞是杂种细胞；形成植株需要利用植物组织培养技术；由愈伤组织形成D的过程称为再分化过程；为避免杂菌污染，整个培养过程要在无菌的条件下进行。

（3）

植物体细胞融合之前；需要对植物细胞去掉细胞壁，植物体细胞融合成功的标志是杂种细胞再生出新的细胞壁；植物体细胞杂交的意义是可以克服远缘杂交不亲和的障碍。

（4）

已知甲；乙植物分别为不同种植物的四倍体、二倍体；融合后的细胞内含有6个染色体组，则融合后的“甲—乙植株”属于异源六倍体。

【点睛】

本题考查植物组织培养和植物体细胞融合相关知识，意在考查考生根据对细胞工程相关技术和过程的掌握，准确分析图示过程。【解析】（1）纤维素酶和果胶耐盐有耐盐高产和耐盐不高产两种幼苗