2025年鲁教版选择性必修3生物上册月考试卷

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年鲁教版选择性必修3生物上册月考试卷981考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五总分得分评卷人得分一、选择题(共5题，共10分)1、生物技术发展速度很快，已灭绝生物的“复生”将不再是神话。如果世界上最后一只野马刚死亡，下列提供的“复生”野马个体的方法中能够成功的是（）A.将野马的体细胞取出，利用组织培养技术，经脱分化、再分化，培育成新个体B.将野马的体细胞两两融合，再经组织培养培育成新个体C.取出野马的体细胞核移植到母家马的去核卵母细胞中，经孕育培养成新个体D.将野马基因导入家马的受精卵中，培育成新个体2、《细胞—干细胞》杂志在线发表了中国科学院上海生命科学研究院诱导人成纤维细胞重编程为肝细胞（hihep细胞）的成果。hihep细胞具有肝细胞的许多功能，包括分泌血清白蛋白、积累糖原、代谢药物、药物转运等。下列相关叙述正确的是（）A.人成纤维细胞与hihep细胞的DNA和RNA基本相同B.人成纤维细胞重编程为hihep细胞过程中遗传物质发生了改变C.hihep细胞诱导成功彻底解决了人类重症肝病的治疗D.研究表明，分化的细胞其分化后的状态是可以改变的3、研究表明渐冻症是因为突变基因使神经元合成了毒蛋白，从而阻碍了轴突内营养物质的流动。将诱导多能干细胞（iPS细胞）移植给渐冻症实验鼠，能延长其寿命。下列相关叙述错误的是（）A.可通过DNA分子杂交技术来对渐冻症疑似患者进行排查B.可通过导入某种调节因子抑制突变基因表达来治疗渐冻症C.iPS细胞具有组织特异性，能分化成特定的细胞或组织D.理论上，iPS细胞用来治疗渐冻症可避免免疫排斥反应4、下列关于基因工程成果的概述，不正确的是（）A.在医药卫生方面，主要用于诊断治疗疾病B.在农业上主要是培育高产、稳产、品质优良和具有抗的活性的农作物C.在畜牧养殖业上培育出了品质优良的动物D.在环境保护方面主要用于环境监测和对污染环境的净化5、紫杉醇是存在于红豆杉属植物体内的一种次生代谢物，具有较高的抗癌活性。生产紫杉醇的传统方法是从濒危植物红豆杉的树皮和树叶中提取，但这种方法不利于红豆杉的保护。目前，科学家已研究出通过植物细胞工程相关技术获得紫杉醇的新途径，下列相关叙述错误的是（）

A.所选外植体宜为红豆杉的茎尖等幼嫩部位B.①过程为“脱分化”，一般不需要光照C.上述利用植物细胞工程技术生产紫杉醇的过程体现了植物细胞的全能性D.该生产技术不受季节、天气限制，对社会、经济、环境保护具有重要意义评卷人得分二、多选题(共9题，共18分)6、在纪录片《舌尖上的中国》中多次讲到了利用不同微生物发酵来制作美味食品。桑葚果实富含多种营养成分及黄酮类化合物（一般难溶或不溶于水，易溶于乙醇等有机溶剂），目前以桑葚为原料开发的桑葚酒深受大众欢迎。酱豆是人们利用大豆制作的一道地方美食，具体做法如下：大豆煮熟→霉菌发酵→加入蔬菜→加盐、加调味酒和香辛料→乳酸发酵。下列相关内容的叙述，错误的是（）A.桑葚酒制作时榨出的果汁需经过高压蒸汽灭菌后，才能装进发酵瓶密闭发酵B.若要提取桑葚中的黄酮苷，可以采用萃取的方法C.酱豆最后在环境温暖、氧气充足的条件下发酵形成D.酱豆中有机物的种类和含量均减少7、下列关于DNA粗提取与鉴定、DNA片段的扩增及电泳鉴定的原理的叙述正确的是（）A.利用DNA不溶于酒精，但蛋白质均溶于酒精的原理，可分离DNA与蛋白质B.利用在一定温度下DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色的原理对粗提取的DNA进行鉴定C.PCR技术利用了DNA的热变性原理，通过调节温度来控制DNA双链的解聚与结合D.电泳鉴定DNA利用了DNA在电场中会向着它所带电荷相反的电极移动的原理8、甲品种青花菜具有由核基因控制的多种优良性状；但属于胞质雄性不育品种。通过体细胞杂交，成功地将乙品种细胞质中的可育基因引入甲中，下图为该操作示意图。下列相关叙述正确的是（）

A.人工诱导原生质体融合可使用离心法B.融合的原生质体再生出细胞壁后再进行组织培养C.杂种细胞经过一定激素和营养的诱导，发育成为杂种植株D.筛选出的杂种植株含有控制甲青花菜优良性状的基因，但只能通过母本进行传递9、以纯化鉴定后的重组大肠杆菌RecQ解旋酶免疫小鼠（2n=40），融合免疫小鼠的脾细胞及骨髓瘤细胞（2n=62-68），筛选杂交瘤细胞，制备抗RecQ解旋酶单克隆抗体（mAb），相关检测结果如图A、B所示。有关说法正确的是（）

图A杂交瘤细胞染色体数目图B不同浓度mAb对RecQ蛋白结合DNA活性的影响A.重组大肠杆菌RecQ解旋酶可刺激相应B淋巴细胞增殖分化B.单克隆抗体的制备过程中需要进行2次筛选和2次抗原检测C.杂交瘤细胞在融合的过程中可能会发生染色体数目的丢失D.该mAb能特异性与RecQ解旋酶结合，在稀释度为1/800时可显著抑制RecQ解旋酶与DNA的结合10、如图是单克隆抗体制备过程示意图，1～3代表相关过程，a～e代表相关细胞，其中c是两两融合的细胞。以下叙述错误的是（）

A.过程1是给小鼠注射特定抗原蛋白，可刺激小鼠产生特异性免疫反应B.过程2的促融方法可采用电融合技术，该技术能击穿核膜促使核融合C.c细胞有三种，每种细胞染色体组数不相等，e细胞是杂交瘤细胞D.过程3是进行抗体检测，并克隆产生阳性细胞的过程11、自生固氮菌是土壤中能独立固定空气中N2的细菌，将玉米种子用自身固氮菌拌种后播种，可显著提高产量并降低化肥的使用量。科研人员进行了土壤中自生固氮菌的分离和固氮能力测定的研究，部分实验流程如图。以下叙述正确的是（）

A.步骤①土样应取自当地表层土壤；步骤③将土壤悬浮液稀释了1000倍B.自生固氮菌是自养型生物，不可用血细胞计数板来计数土壤悬浮液中的菌体数C.步骤②需充分振荡20min，主要目的是使土壤中的微生物充分释放到无菌水中D.步骤④所用的接种工具是涂布器，该选择培养基的特点是不添加氮源12、世界首例免疫艾滋病的基因编辑婴儿用到了能够精确定位并修饰基因的基因编辑技术，即基因编辑时用约为头发二十分之一细的针把Cas9蛋白和特定的RNA引导序列注入受精卵中，对CCR5基因进行修改，预期婴儿出生后能天然抵抗人类免疫缺陷病毒，关于该技术的安全性问题，下列说法正确的是（）A.基因编辑时，引导序列可能发生变异，导致剪切错误，造成不可预知的后果B.经过基因编辑的个体，有可能影响基因选择性表达，而导致其他疾病的产生C.将基因编辑技术应用于治疗性克隆，符合人类伦理道德D.只要加强监管、完善法律法规、完善技术手段，不需担心基因编辑技术的安全性13、农杆菌Ti质粒上的T-DNA可以转移并随机插入到被侵染植物的染色体DNA中。研究者将下图中被侵染植物的DNA片段连接成环；并以此环为模板，利用PCR技术扩增出T-DNA插入位置两侧的未知序列，以此可确定T-DNA插入的具体位置。下列说法正确的是（）

A.进行PCR扩增的依据是DNA分子双链复制的原理B.进行PCR扩增需要的酶有解旋酶和热稳定DNA聚合酶C.利用图中的引物②、③组合可扩增出两侧的未知序列D.通过与受体细胞的基因组序列比对，可确定T-DNA的插入位置14、某对美国夫妇将用他们精子、卵子形成的胚胎冷藏在澳大利亚墨尔本一家不孕症治疗中心。在一次外出时，他们因飞机失事而去世。于是有亲人提出，可以将该夫妇冷藏的胚胎植入某个受体母亲子宫，生下一个孩子来继承遗产。下列相关叙述正确的是（）A.用精子、卵子形成胚胎需要借助人工授精技术B.若实施胚胎移植，需要受体母亲处于合适的生理状态C.受体母亲与胚胎的主要HLA的相似程度要大于50%D.该件事反映了“胚胎冷藏”技术可能带来伦理问题评卷人得分三、填空题(共7题，共14分)15、酶是细胞合成的生物催化剂。随着生物科学技术的发展；酶已经走出实验室，走进人们的生产和生活。请回答下面有关酶的问题：

（1）在腐乳制作的过程中；利用毛霉等微生物产生的蛋白酶将豆腐中的蛋白质分解成________，____________将脂肪水解为甘油和脂肪酸。加酶洗衣粉里添加的酶制剂中，应用最广泛；效果最明显的是____________。

（2）果胶酶包括_____________________________；生产中如果要固定果胶酶；最好采用______________________________________法固定化。

（3）酶提取和分离原理：需要用__________法去除相对分子质量大的杂质蛋白，以纯化酶；利用_________________________法对酶进行纯度鉴定。16、原核基因采取______获得，真核基因是______。人工合成目的基因的常用方法有______和______。17、来源：主要是从______中分离纯化出来的。18、植物体细胞杂交的意义：_____。19、植物繁殖的新途径。

微型繁殖：可以高效快速地实现种苗的大量繁殖。

作物脱毒：采用______组织培养来除去病毒（因为植物分生区附近的病毒______）

人工种子：以植物组织培养得到的______、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，经_____包装得到的种子。优点：完全保持优良品种的遗传特性，______；方便储藏和运输。

人工种子的结构包括：______、_____和______。20、首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了______，方法是采用______。21、科学家采用定点诱变的方法构建T4溶菌酶的新蛋白质，发现其中一种新蛋白质的第9和第164位氨基酸残基被转换为半胱氨酸残基，并形成一个二硫键。这种新蛋白质的热稳定性会有什么变化？这项技术的要点是什么？_________评卷人得分四、实验题(共3题，共6分)22、使用日益广泛的手机；在方便人们通讯联络的同时也成为细菌等病原体传播的途径。为了解手机上细菌的情况，某兴趣小组进行了如下实验，请回答相关问题：

(1)取附着在手机上细菌进行取样培养后，对菌液进行系列梯度稀释的目的是_______。

(2)A平板上生长的菌落有多种形态，说明附着在手机细菌有____种。若要使菌落能在A平板上生长，下列培养基组分中最合理的是_____(选填“甲、乙、丙”)，原因是_____。可采取____________来检测培养基A制备是否合格。培养基编号培养基组分甲蔗糖、NaC1、琼脂、水乙牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂、水丙蛋白胨、NaCl、蔗糖、水

(3)初筛后将平板B的菌落通过“影印”方法接种到C培养基上培养，使C培养基对应位置上出现相同菌落。然后用伊红-美蓝染液对C进行染色，根据染色后D中出现的结果，可判断平板B中______(选填图中数字)是大肠杆菌的菌落。

(4)某同学采用平板划线法进一步纯化大肠杆菌，接种培养一段时间后，发现第一划线区不间断长满菌落，第二划线区上几乎无菌落，产生此情况的可能原因____________。23、干燥综合征（SS）是临床常见的一种自身免疫病；患者血清中存在多种抗体，其中以SSB抗体特异性最强。下图表示科研人员利用基因工程技术获得SSB蛋白及利用SSB蛋白对小鼠进行免疫的过程。回答下列问题：

(1)利用RNA通过①过程获得cDNA需要________酶。已知真核生物mRNA在3'端加有PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）保护尾部不被降解。为了针对性获得cDNA，应如何设计逆转录第一步时的DNA引物______，设计引物的目的是______。

(2)为确保与pET41a质粒定向连接，对逆转录得到的cDNA扩增时，应在相应引物的_______（填“5'”或“3'”）端加上______酶切位点。

(3)③过程用重组质粒转染大肠杆菌时，需要用Ca2+处理大肠杆菌，目的是______，然后将处理后的大肠杆菌先接种在添加_______的培养基（A）上培养，待长出菌落后再利用无菌膜同位置转移到添加______的培养基（B）上培养，收集_______菌落进一步纯化后将菌体破碎处理；筛选得到SSB蛋白。

(4)将改造后的大肠杆菌生产的SSB蛋白注入到小鼠体内是为了检测该蛋白是否具有抗原性，则后续实验内容应为抽取小鼠血液_______。24、三氯生是一种抑菌物质，具有优异的贮存稳定性，可以替代抗生素用于基因工程中筛选含目的基因的受体细胞。已知fabV（从霍乱弧菌中发现的烯脂酰ACP还原酶）基因可以使大肠杆菌抵抗三氯生。

(1)通过PCR方法扩增fabV基因时，先要根据_____设计两种特异性引物序列，以确保Taq酶从引物的3′端延伸DNA链，至少需要经过_____次扩增才能获得8个双链等长的目的基因。

(2)基因工程的核心步骤是_____；某科研团队将可以受温度调控的基因插入上述选出的重组质粒中，构建了温度调控表达质粒（如图2）。其中C基因在低温下会抑制P2，R基因在高温下会抑制P1，如果将lacZ基因和GFP（绿色荧蛋白）基因插入图2质粒中，使得最后表现为低温下只表达GFP蛋白，而高温下只表达lacZ蛋白。则lacZ基因插在_____之间，GFP基因的插入位置及注意点是_____。

(3)若以大肠杆菌为受体细胞，筛选上述插入了GFP基因的受体细胞的依据是：大肠杆菌能在含_____的培养基上生长，且_____。评卷人得分五、综合题(共1题，共2分)25、用DNA重组技术可以赋予生物以新的遗传特性；创造出更符合人类需要的生物产品。在此过程中需要使用多种工具酶，其中4种限制性核酸内切酶的切割位点如图所示。

回答下列问题：

（1）常用的DNA连接酶有E.coliDNA连接酶和T4DNA连接酶。上图中__________酶切割后的DNA片段可以用E.coliDNA连接酶连接。上图中___________酶切割后的DNA片段可以用T4DNA连接酶连接。

（2）DNA连接酶催化目的基因片段与质粒载体片段之间形成的化学键是____________。

（3）DNA重组技术中所用的质粒载体具有一些特征，如质粒DNA分子上有复制原点，可以保证质粒在受体细胞中能___________；质粒DNA分子上有______________，便于外源DNA插入；质粒DNA分子上有标记基因（如某种抗生素抗性基因），利用抗生素可筛选出含质粒载体的宿主细胞，方法是______________。

（4）表达载体含有启动子，启动子是指__________________。参考答案一、选择题(共5题，共10分)1、C【分析】【分析】

1.动物核移植的概念：将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中；使其重组并发育成一个新的胚胎．这个新的胚胎最终发育为动物个体。核移植得到的动物称克隆动物。

2.植物细胞的全能性可以通过植物组织培养来实现；动物细胞的全能性受到限制，不能用动物细胞复制动物。

【详解】

A；由于动物细胞的全能性受到限制；目前动物的体细胞还不能直接培养成动物个体，A错误；

B；由于动物细胞的全能性受到限制；目前动物细胞融合技术还不能产生生物体，B错误；

C；将野驴的体细胞核移植到母家马的去核卵母细胞中；形成重组细胞，进而经过培养获得重组胚胎，可以克隆形成野马，该过程利用核移植技术，为体细胞克隆的例子，C正确；

D；将野马的基因导入家马的受精卵中；属于基因工程，可培育成新性状的家马，不能让野马复生，D错误。

故选C。

【点睛】2、D【分析】【分析】

细胞分化是指在个体发育中；相同细胞的后代，在形态；结构和生理功能上发生稳定性差异的过程。细胞分化过程遗传物质不变，只是基因选择性表达的结果。

【详解】

A；人成纤维细胞与hihep细胞的DNA基本相同；由于基因的选择性表达，RNA不完全相同，A错误；

B；人成纤维细胞重编程为hihep细胞过程中遗传物质没有发生改变；B错误；

C；由题干信息可知：hihep细胞具有肝细胞的许多功能；但并未完全代替肝脏细胞，故hihep细胞诱导成功不能彻底解决人类重症肝病的治疗，C错误；

D；根据题干信息可知；人成纤维细胞重编程为肝细胞的实验成功，说明分化的细胞其分化后的状态是可以改变的，D正确。

故选D。3、C【分析】【分析】

DNA分子杂交的基础是；具有互补碱基序列的DNA分子，可以通过碱基对之间形成氢键等，形成稳定的双链区。在进行DNA分子杂交前，先要将两种生物的DNA分子从细胞中提取出来，再通过加热或提高pH的方法，将双链DNA分子分离成为单链，这个过程称为变性。然后，将两种生物的DNA单链放在一起杂交，其中一种生物的DNA单链事先用同位素进行标记，如果两种生物DNA分子之间存在互补的部分就能形成双链区。由于同位素被检出的灵敏度高，即使两种生物DNA分子之间形成百万分之一的双链区也能够被检出。

【详解】

A；渐冻症是因为突变基因使神经元合成了毒蛋白；因此可通过DNA分子杂交技术对渐冻症患者进行排查，A正确；

B；导入某种调节因子抑制突变基因表达；使神经元细胞不能合成毒蛋白，从而达到治疗疾病的目的，B正确；

C；iPS细胞不具有组织特异性；可分化成多种不同的细胞或组织，C错误；

D；理论上；iPS细胞可增值分化形成正常的神经细胞，用来治疗渐冻症还可避免免疫排斥反应，D正确。

故选C。4、A【分析】【分析】

基因工程成果：

（1）在农业上主要是培育高产；稳产、品质优良和具有抗性的农作物；

（2）在畜牧养殖业上培育出品质优良的动物；

（3）在环境保护方面主要用于环境监测和对污染环境的净化；

（4）在医药卫生方面；主要用于生产蛋白类药物。基因治疗现在处于临床试验阶段。

【详解】

A；基因工程在医药卫生方面；主要用于生产蛋白类药物，而不是主要用于诊断治疗疾病，A错误；

B；基因工程能在农业上主要是培育产量高的、品质优良和具有抗性的一些农作物；B正确；

C；上述分析可知；基因工程能在畜牧养殖业上培育出了品质优良的动物，C正确；

D；基因工程在环境保护方面；可以应用于环境监测和环境净化领域，D正确。

故选A。5、C【分析】【分析】

植物组织培养中生长素和细胞分裂素使用比例对植物细胞发育的影响：生长素用量比细胞分裂素用量；比值高时，有利于根的分化；抑制芽的形成；比值低时，有利于芽的分化、抑制根的形成；比值适中时，促进愈伤组织的形成。

【详解】

A；由于红豆杉的茎尖等幼嫩部位分化程度低；容易诱导，所以所选外植体宜为红豆杉的茎尖等幼嫩部位，A正确；

B；①表示脱分化形成愈伤组织；生长素和细胞分裂素二者比值适中时，有利于促进愈伤组织的形成，一般不需要光照，B正确；

C；上述利用植物细胞工程技术获得了高产细胞群；并没有培育成植株，故没有体现细胞的全能性，C错误；

D；植物细胞培养技术的条件可以认为控制；具有快速，高效、不受季节、外部环境等条件的限制的特点，对社会、经济、环境保护具有重要意义，D正确。

故选C。二、多选题(共9题，共18分)6、A:C:D【分析】【分析】

根据题意可知；酱豆制作时，首先要利用霉菌进行发酵，霉菌等微生物产生的酶可以将大分子物质分解成小分子物质，最后进行乳酸发酵时所需的乳酸菌是厌氧生物，需要在无氧条件下进行。

【详解】

A；桑葚酒制作时榨出的桑葚汁不能进行高压蒸汽灭菌；否则会杀死桑葚表皮上的酵母菌菌种，A错误；

B；因桑葚中的黄酮苷一般难溶或不溶于水；易溶于乙醇等有机溶剂，所以提取桑葚中的黄酮苷可采用萃取的方法，B正确；

C；酱豆制作最后是进行乳酸发酵；乳酸发酵中的乳酸菌为厌氧型生物，故乳酸发酵应在无氧条件下进行，C错误；

D；在微生物的作用下；大豆所含的蛋白质、脂肪等大分子物质被分解成易于吸收的小分子物质，同时微生物的呼吸要消耗大豆中的营养物质，并形成多种中间产物，所以酱豆中有机物的种类增加，含量减少，营养价值增加，D错误。

故选ACD。

【点睛】7、B:C:D【分析】【分析】

DNA粗提取和鉴定的原理：

（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液；但细胞中的某些蛋白质溶于酒精；DNA对酶；高温和洗涤剂的耐受性。

（2）DNA的鉴定：在沸水浴的条件下；DNA遇二苯胺会被染成蓝色。

【详解】

A；DNA不溶于酒精溶液；但细胞中的某些蛋白质溶于酒精，可将DNA与蛋白质分离，A错误；

B；在沸水浴的条件下；DNA遇二苯胺会被染成蓝色，B正确；

C；PCR是一种体外扩增DNA片段的技术；利用了DNA热变性原理，通过调节温度来控制DNA双链的解聚与结合，包括：高温变性（解链）→低温复性→中温延伸三个步骤，C正确；

D；由于同性相斥、异性相吸；带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动，电泳鉴定DNA利用了DNA在电场中会向着它所带电荷相反的电极移动的原理，D正确。

故选BCD。8、A:B:C【分析】【分析】

题图分析：该图为体细胞杂交过程；其中A为去除细胞壁，制备原生质体，可以用酶解法，B为诱导原生质体融合，可以用聚乙二醇处理，融合的杂种细胞应该具备乙品种细胞质中的可育基因，甲品种的控制多种优良性状的核基因，该过程的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。

【详解】

A；人工诱导原生质体融合的方法有化学法（聚乙二醇）和物理法（离心、振动、电刺激等）两大类；A正确；

B；杂种细胞再生出细胞壁是细胞融合成功的标志；融合成功之后再进行组织培养，B正确；

C；杂种细胞经过外源生长素和细胞分裂素的诱导；脱分化形成愈伤组织，再分化形成胚状体，进一步成为杂种植株，C正确；

D；甲品种青花菜具有由核基因控制的多种优良性状；杂种植株细胞核内含有控制甲青花菜优良性状的基因，具备乙品种细胞质中的可育基因，因此精子中具备一半核基因，并可通过父本（精子）进行传递，D错误。

故选ABC。9、A:C:D【分析】【分析】

单克隆抗体的制备过程是：对小动物注射抗原；从该动物的脾脏中获取效应B细胞，将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，克隆化培养杂交瘤细胞(体内培养和体外培养)，最后获取单克隆抗体。

【详解】

A；重组大肠杆菌RecQ解旋酶相当于抗原；能刺激机体产生相应的体液免疫应答，则在人体内可刺激B细胞增殖分化为浆细胞和记忆B细胞，A正确；

B；单克隆抗体的制备过程中需要进行2次筛选和1次抗原检测；第一次是用选择性培养基筛选出杂交瘤细胞；第二次是通过克隆化培养和抗体检测，进一步筛选出能产生人们所需要抗体的杂交瘤细胞，B错误；

C；据图1分析；染色体数目有为80-93的细胞，免疫小鼠中B淋巴细胞染色体数目为40，骨髓瘤细胞染色体数目为62-68，两者之和大于80-93，故杂交瘤细胞在融合的过程中可能会发生染色体数目的丢失，C正确；

D、据图2分析，单抗稀释度为1/800时RecQ解旋酶结合DNA活性最低，可知mAb能特异性与RecQ解旋酶结合可显著抑制RecQ解旋酶与DNA的结合；D正确。

故选ACD。10、B:C【分析】【分析】

单克隆抗体的制备涉及细胞融合；细胞培养和细胞筛选；从题干信息图可看出，过程1代表的是注射特异性抗原使小鼠免疫，从而获得能产生相应抗体的B淋巴细胞；过程2是将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的过程；过程3是克隆培养筛选后的阳性细胞，一共需要进行两次，最终获得能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，此后在培养基或小鼠腹腔中培养。

【详解】

A；图中过程1是通过注射抗原或抗原蛋白来获得产生相应抗体的B淋巴细胞；A正确；

B；过程2是促进细胞融合的过程；其中电融合技术是用低压电流击穿细胞膜促使细胞融合，B错误；

C；c细胞为杂交瘤细胞；有三种，分别是骨髓瘤细胞-骨髓瘤细胞、骨髓瘤细胞-B淋巴细胞、B淋巴细胞-B淋巴细胞，其中骨髓瘤细胞和B淋巴细胞都有两个染色体组，融合后的细胞都含有4个染色体组，其中e细胞是杂交瘤细胞，C错误；

D；过程3是专一抗体检测及克隆培养筛选后获得阳性细胞；该过程需要多次进行，D正确。

故选BC。11、A:C:D【分析】【分析】

微生物常见的接种的方法。

（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后；均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

【详解】

A；自生固氮菌是需氧型生物；步骤①土样应取自表层的土壤，步骤③中的稀释梯度分别为10，100，1000倍，所以土壤悬浮液稀释了1000倍，A正确；

B；自生固氮菌是异养型生物；可用血细胞计数板或稀释涂布平板法来计数土壤悬浮液中的菌体数，B错误；

C；步骤②需充分振荡20min；主要目的是使土壤中的微生物充分释放到无菌水中，C正确；

D；步骤④为稀释涂布平板法接种；所用的接种工具是涂布器，该选择培养基的特点是不添加氮源，利用的是空气中的氮气，D正确。

故选ACD。12、A:B:C【分析】【分析】

基因编辑技术是指通过核酸酶对靶基因进行定点改造；实现特定DNA的定点敲除；敲入以及突变等，最终下调或上调基因的表达，以使细胞获得新表型的一种新型技术。

【详解】

A；基因编辑时的引导序列是RNA；RNA的碱基序列改变可能导致识别错误，导致剪切错误，造成不可预知的后果，A正确；

B；基因编辑后；基因的序列发生改变，基因的表达具有选择性，可以相互影响，基因选择性表达受干扰后，容易导致某些疾病的产生，B正确；

C；依据我国法律；生殖性克隆不符合人类伦理道德，治疗性克隆符合人类伦理道德，C正确；

D；加强监管、完善法律法规、完善技术手段；但基因编辑技术仍存在一定的安全性，所以要理性看待，D错误。

故选ABC。13、A:D【分析】【分析】

PCR技术：

1；概念：PCR全称为聚合酶链式反应；是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。

2；原理：DNA复制。

3；前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物。

4；条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）。

5；过程：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶；高温条件下氢键可自动解开）；低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。

【详解】

A；PCR扩增依据的是DNA分子双链复制的原理；A正确；

B；进行PCR扩增需要热稳定DNA聚合酶（TaqDNA聚合酶）；但不需要解旋酶，B错误；

C；DNA的两条链反向平行；子链从引物的3′端开始延伸，则利用图中的引物①、④组合可扩增出两侧的未知序列，C错误；

D；通过与受体细胞的基因组序列比对；即可确定T-DNA的插入位置，D正确。

故选AD。

【点睛】14、B:D【分析】【分析】

胚胎移植的生理学基础：①动物发情排卵后；同种动物的供；受体生殖器官的生理变化是相同的，这就为供体的胚胎移入受体提供了相同的生理环境。②早期胚胎在一定时间内处于游离状态，这就为胚胎的收集提供了可能。③受体对移入子宫的外来胚胎不发生免疫排斥反应，这为胚胎在受体的存活提供了可能。④供体胚胎可与受体子宫建立正常的生理和组织联系，但供体胚胎的遗传特性在孕育过程中不受影响。

【详解】

A；人工授精技术是辅助生殖技术；在临床上利用工具把精液放置进入子宫内，合成受精卵，用精子、卵子形成胚胎需要借助的是体外受精技术，不是人工授精技术，A错误；

B；若实施胚胎移植；需要受体母亲处于受孕状态，即处于合适的生理状态，B正确；

C；子宫对外来胚胎一般不发生免疫排斥反应；因此不需要受体母亲与胚胎的主要HLA相似，C错误；

D；“胚胎冷藏”技术所引起的这些争论；实质是冷冻胚胎的道德与法律地位的争论，即带来的伦理问题，D正确。

故选BD。三、填空题(共7题，共14分)15、略

【分析】【分析】

1；腐乳制作过程中多种微生物参与了发酵；其中起主要作用的是毛霉，毛霉等微生物产生蛋白酶能将豆腐中的蛋白质转化成小分子肽和氨基酸，脂肪酶将脂肪转化成甘油和脂肪酸。

2；果胶酶能够分解果胶；瓦解植物的细胞壁及胞间层，使榨取果汁变得容易，而果胶分解成可溶性的半乳糖醛酸，也使得浑浊的果汁变得澄清。果胶酶并不特指某一种酶，而是分解果胶的一类酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶。

【详解】

（1）在腐乳制作的过程中；利用毛霉等微生物产生的蛋白酶将豆腐中的蛋白质分解成小分子肽和氨基酸，脂肪酶将脂肪水解为甘油和脂肪酸；加酶洗衣粉里添加的酶制剂中，应用最广泛；效果最明显的是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶。

（2）果胶酶并不特指某一种酶；而是分解果胶的一类酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶；果胶分解酶和果胶酯酶；在果汁生产过程中如果要固定果胶酶，最好采用化学结合和物理吸附法固定化，这是因为酶分子小，体积小的酶容易从包埋材料中漏出。

（3）酶提取和分离原理：需要用凝胶色谱法去除相对分子质量大的杂质蛋白；以纯化酶；利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法对酶进行纯度鉴定。

【点睛】

本题考查腐乳制作和酶提取等知识，对于此类试题，需要考生注意的细节较多，如实验的原理、实验步骤、实验采用的试剂及试剂的作用等，需要考生在平时的学习过程中注意积累。【解析】小分子肽和氨基酸脂肪酶碱性蛋白酶和碱性脂肪酶半乳糖醛酸酶、果胶分解酶、果胶酯酶化学结合法和物理吸附凝胶色谱（分配色谱）聚丙烯酰胺凝胶电泳16、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】直接分离人工合成反转录法化学合成法17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】原核生物18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】克服了远缘杂交不亲和的障碍。19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】茎尖极少或没有）胚状体人工薄膜不受季节的限制人工种皮；胚状体和人工胚乳。

（2）20、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】目的基因DNA分子杂交技术。21、略

【分析】【详解】

蛋白质形成二硫键，使蛋白质的结构更加稳定，因此T4溶菌酶的热稳定性会提高。这项技术属于蛋白质工程技术，其步骤为从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获得所需的蛋白质。【解析】会提高T4溶菌酶的耐热性。这项技术属于蛋白质工程技术，该技术的要点是从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获得所需的蛋白质。四、实验题(共3题，共6分)22、略

【分析】【分析】

1、微生物常见的接种的方法：

（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后；均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

2、实验室常用的灭菌方法

①灼烧灭菌：将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属工具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，此外，在接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰燃烧来灭菌；

②干热灭菌：能耐高温的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具等，可以采用这种方法灭菌；

③高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内；为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100kPa，温度为121℃的条件下，维持15～30min。

(1)

取附着在手机上细菌进行取样培养后；对菌液进行系列梯度稀释的目的是将微生物分散成单个细胞，进而获得单个的菌落。

(2)

A平板上生长的菌落有多种形态；说明附着在手机细菌种类较多。牛肉膏；蛋白胨提供的主要营养是氮源、维生素和生长因子。培养基乙含有碳源、氮源、水、无机盐这几类营养物质，且加入了琼脂作为凝固剂，可以达到实验效果；培养基甲不含蛋白胨（氮源），菌落无法在该培养基上生长；培养基丙不含凝固剂（琼脂），无法形成固体培养基，无法在培养基表面形成菌落。检测培养基A制备是否合格，可将培养基置于适宜条件下培养一段时间，检测其是否杂菌生成。

(3)

伊红为酸性染料；美蓝为碱性染料。当大肠杆菌分解乳糖产酸时细菌带正电荷被染成红色，再与美蓝结合形成紫黑色菌落，并带有绿色金属光泽。由图可知3号菌落为大肠杆菌菌落。

(4)

采用平板划线法接种培养一段时间后；发现第一划线区域上都不间断长满菌落，第二划线区域几乎无菌落，原因可能是接种环灼烧后未冷却就划线或未从第一区域末端开始划线。

【点睛】

本题考查微生物的分离和培养，要求考生识记微生物接种的方法、菌落计数、以及菌种保存等知识，意在考查考生对基础知识的掌握和灵活运用基础知识的能力。【解析】(1)将微生物分散成单个细胞；进而获得单个的菌落。

(2)多乙培养基乙含有碳源；氮源、水、无机盐这几类营养物质；且加入了琼脂作为凝固剂，可以达到实验效果将培养基置于适宜条件下培养一段时间，检测其是否杂菌生成。

(3)3

(4)第一次划线后接种环灼烧后没有冷却；未从第一次划线区开始划线23、略

【分析】【分析】

1；基因工程的四个步骤：目的基因的筛选与获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。

2、在基因工程操作中，常用原核生物作为受体细胞，其中以大肠杆菌应用最为广泛。研究人员一般先用Ca2＋处理大肠杆菌细胞；使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，然后再将重组的基因表达载体导入其中。

【详解】

（1）利用RNA通过①过程（逆转录）获得cDNA需要逆转录酶；已知真核生物基因的mRNA在3'端加有PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）保护尾部不被降解。逆转录第一步以mRMA为模板合成DNA单链；新链与模板链反向平行，由于新链只能由5'端向3'端延伸，所以逆转录第一步的引物应与mRNA尾部的PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）互补配对，即用多聚胸腺嘧啶脱氧核苷酸序列为引物；设计引物的目的是使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸。

（2）对逆转录得到的cDNA扩增时；引物的5'端结合母链的3'端之后DNA聚合酶开始扩增DNA。为确保其与pET41a质粒定向连接，应使用不同种的限制酶切割质粒和目的基因，由图可知，使用EcoRI酶会破环SSB基因，故应在相应引物的5'端加上BamHI和XhoⅠ酶切位点。

（3）由题图分析可知：质粒上存在卡那霉素和氯霉素抗性基因，由于XhoⅠ酶破坏了氯霉素抗性基因，所以成功组装的重组质粒不能在添加了氯霉素的培养基上生长，③过程用重组质粒转染大肠杆菌时，需要用Ca2+处理大肠杆菌；目的是使大肠杆菌成为易于吸收外源DNA的状态，然后分别将处理后的大肠杆菌先接种在添加卡那霉素的培养基（A）上培养，待长出菌落后再利用无菌膜同位置转移到添加氯霉素的培养基（B）上培养，收集能在含卡那霉素的培养基上生长而不能在含氯霉素培养基上生长的菌落进一步纯化后将菌体破碎处理，经筛选即可得到SSB蛋白。

（4）将改造后的大肠杆菌生产的SSB蛋白注入到小鼠体内是为了检测该蛋白是否具有抗原性，如果该蛋白有抗原性，会引起机体的免疫反应，产生相应抗体。则后续实验内容应为抽取小鼠血液提取其中的抗体，利用抗原—抗体杂交的方法检测其是否含有抗SSB的抗体。【解析】(1)逆转录用多聚胸腺嘧啶脱氧核苷酸序列为引物

使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸

(2)5’BamHⅠ和XhoI

(3)使大肠杆菌成为易于吸收外源DNA的状态卡那霉素氯霉素能在含卡那霉素的培养基上生长而不能在含氯霉素培养基上生长的。

(4)提取其中的抗体，利用抗原—抗体杂交的方法检测其是否含有抗SSB的抗体24、略

【分析】【分析】

1；基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因；启动子、终止子