2025年冀少新版选择性必修3生物上册月考试卷含答案

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A.过程①获取的目的基因，可用于基因工程和比目录基因组测序B.多个抗冻基因编码去依次相连成能表达的新基因，不能得到抗冻性增强的抗冻蛋白C.过程②构成的重组质粒缺乏标记基因，需要转入农杆菌才能进行筛选D.应用DNA探针技术，可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其完全表达4、培育克隆牛的过程中，如果供体细胞来自同一头牛，培育出的这些个体在性状上也不完全相同，分析其原因，下列说法不正确的是（）A.性状变异可由环境条件引起B.基因可能会发生突变C.受体细胞的细胞质基因不同D.细胞核基因发生了重组5、dMAb技术是一种通过DNA编码产生单克隆抗体的技术，比传统单克隆抗体制备方法更有发展潜力。此前发表的研究显示，以埃博拉病毒为目标且高度优化的基于DNA的单克隆抗体，单次给药在小鼠血液中产生了高水平的抗体表现。下图是dMAb技术在埃博拉病毒感染疾病的临床研究中的操作流程。相关叙述错误的是（）

A.dMAb技术需要通过抗体结构1和结构2的氨基酸序列来人工合成目的基因1、2B.构建重组质粒时所需的工具是限制酶和DNA连接酶C.与传统利用杂交瘤细胞生产单克隆抗体的技术相比，dMAb技术的优势之一是产生抗体的细胞种类不局限于免疫细胞D.过程②是基因工程的核心步骤，重组质粒导入埃博拉病毒感染者的肌肉细胞常用方法是显微注射法6、黄酒是中国特产，与啤酒、葡萄酒并称世界三大古酒。关于黄酒酿造方法，古遗六法中描述道∶黍米必齐、曲蘖必时、水泉必香、陶器必良、湛炽必洁、火剂必得（注∶曲蘖主要指酒曲，湛炽是指浸泡和蒸煮）。下列叙述错误的是（）A.黄酒中的酒精是酵母菌利用"黍米"经无氧呼吸产生的代谢产物B."曲藜"制作的季节不同，可能会影响到酵母菌的种类和数量C."陶器必良"和"火剂必得"是为了控制发酵过程的环境条件D."湛炽"的目的是灭菌，确保发酵过程中无杂菌污染7、植物细胞工程包括植物组织培养、植物体细胞杂交等技术，具有广泛的应用前景和实用价值。下列对这些操作或应用的描述错误的是（）A.可用PEG诱导植物原生质体融合，再生出细胞壁是融合成功的标志B.植物体细胞杂交技术去壁前，需对两种植物细胞进行灭菌处理，以防止杂菌污染C.植物培养基中常用的植物生长调节剂，一般可以分为生长素类，细胞分裂素类和赤霉素类D.获取植物原生质体时，需在与细胞液浓度相当的缓冲液中进行评卷人得分二、多选题(共8题，共16分)8、蛋白质工程就是通过对蛋白质化学、蛋白质晶体学和蛋白质动力学的研究，获得有关蛋白质理化特性和分子特性的信息，在此基础上对编码蛋白质的基因进行有目的的设计和改造，通过基因工程技术获得可以表达蛋白质的转基因生物，中华鲟是一种濒危野生动物。研究者试图通过蛋白质工程改造中华鲟体内的某些蛋白质，使其更加适应现在的水域环境。下列有关说法错误的是（）A.蛋白质工程可定向改变蛋白质分子的结构B.改造蛋白质可通过改变基因结构实现C.改造后的中华鲟和现有中华鲟不再是同一物种D.改造后的中华鲟的后代不具有改造的蛋白质9、下图表示动物细胞培养的基本流程。有关叙述正确的是（）

A.在C瓶中进行的细胞培养称为原代培养B.培养瓶D可以通过松盖处理满足细胞培养的气体环境需要C.培养瓶D无需放置在CO2培养箱中，但需要保持恒温D.D瓶细胞出现接触抑制时，用胰蛋白酶处理，再用离心法收集细胞分瓶培养10、在单克隆抗体的制备过程中，杂交瘤细胞（即瘤细胞和B淋巴细胞的融合细胞）的筛选是必不可少的步骤。筛选杂交瘤细胞所用的HAT培养基成分和细胞增殖时所需的核苷酸的两条形成途径（D途径，S途径）如下表所示。已知融合所用的瘤细胞是经毒性培养基选出的中间合成途径缺失株，即只有起始合成途径，效应B细胞有两条核苷酸合成途径。若仅考虑细胞的两两融合，下列说法错误的是（）。HAT培养基成分水，糖类、无机盐、次黄嘌呤、氨基糖呤（叶酸拮抗剂），胸腺嘧啶脱氧核苷等起始合成途径（D途径）由氨基酸及其他小分子化合物合成核苷酸，叶酸作为重要的辅酶参与这一过程中间合成途径（S建径）利用次黄嘌呤一鸟嘌呤磷酸核苷转移酶（HGPRT）和胸腺嘧啶核苷激酶（TK）催化次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷生成相应的核苷酸

A.HAT培养基中瘤细胞可利用氨基酸及其他小分子化合物合成核苷酸B.杂交瘤细胞能被筛选的原因为既具备增殖能力，又可进行S途径C.筛选出来的杂交瘤细胞分泌的均为同一种特异性抗体D.在放入HAT培养基之前的融合细胞的培养液中，有D途径的细胞有3种11、为探究不同糖源（蜂蜜、黄冰糖）对蓝莓酒发酵产物的影响，某研究小组研发出如下的蓝莓酒发酵工艺，其中“主发酵”时酵母菌会繁殖、大部分糖的分解和代谢物会生成，“后发酵”是在低温、密闭的环境下蓝莓酒会成熟。下列叙述错误的是（）

A.菌种甲在产生CO2的同时会产生酒精B.切片后需对发酵液进行消毒然后再分组C.倒罐均需保留空间以促进菌种有氧呼吸D.主发酵要控制无氧，后发酵要控制有氧12、2022年6月10日；世界首例体细胞克隆北极狼在北京呱呱坠地。克隆北极狼的供体细胞来自哈尔滨极地公园引进的一只野生北极狼的皮肤样本，卵母细胞来自一只处于发情期的母犬，代孕母体则是一只比格犬。克隆过程如图所示，下列有关叙述正确的是（）

A.体细胞核移植技术比胚胎干细胞核移植技术更易成功B.用电刺激、Ca2+载体等方法激活重构胚，促进其分裂发育C.图中细胞分裂、分化形成克隆胚胎的过程中发生了基因重组D.体细胞核移植技术有望用于增加濒危动物的种群数量13、甲图为牛胚胎移植示意图，乙图为胚胎发育某时期示意图，下列叙述错误的是（）

A.甲图中冲卵的目的是获取受精卵B.对供体母牛和受体母牛注射性激素，进行同期发情处理C.性别鉴定时需将图乙②处细胞做染色体分析D.受精卵形成乙的过程中进行卵裂，每个细胞的体积变小14、生活垃圾分类就是通过回收有用物质减少生活垃圾的处置量，提高可回收物质的纯度增加其资源化利用价值，减少对环境的污染。目前，各地陆续颁布实施《生活垃圾管理条例》，生活垃圾分类已成为市民的日常生活方式。处理垃圾的有效方法之一是用微生物对其进行降解。下图表示筛选高效降解淀粉菌种的过程。下列叙述正确的是（）

A.剩余饭菜、玻璃碎片、果皮果壳属于湿垃圾B.菌落①②透明圈大小不同是两个菌群对碘液分解能力不同C.若垃圾分类不当混入过期的抗生素或电池等会抑制微生物生长D.图中将菌液接种到培养基的方法是释涂布平板法15、荧光原位杂交可用荧光标记的特异DNA片段为探针；与染色体上对应的DNA片段结合，从而将特定的基因在染色体上定位。下列说法正确的是（）

A.由图1可知，DNA探针的本质是荧光标记的DNA片段，其基本单位是脱氧核苷酸B.由图2可知，高温可以使双链DNA分子中的氢键断裂形成DNA单链C.图2中两条姐妹染色单体中最多可有2条荧光标记的DNA片段D.若C分别代表不同来源的一个染色体组，已知AA和BB中各有一对同源染色体可被荧光探针标记。若植物甲（AABB）与植物乙（AACC）杂交，则F1有丝分裂中期的细胞中可观察到6个荧光点评卷人得分三、填空题(共7题，共14分)16、统计的菌落数往往比活菌的实际数目_____________。这是因为______________________。因此，统计结果一般用而不是用活菌数来表示。除了上述的活菌计数法外，______________也是测定微生物数量的常用方法。17、其它载体：_______18、95%的______________以使DNA析出，用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起的丝状物的颜色是____________。获取的丝状物后加入到质量浓度为______________mol/L浓度的NaCL溶液的试管中，使丝状物重新溶解。19、_______mol/L浓度下，DNA溶解度最大。20、细胞产物的工厂化生产。

组织培养技术除了在农业上的应用外，还广泛应用于另一个重要的领域，即______。21、干细胞的应用：有着_____能力及_____的干细胞，与组织、器官的发育、_____和_____等密切相关。22、首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了______，方法是采用______。评卷人得分四、实验题(共3题，共18分)23、《本草纲目》记载；“蝉花可治疗惊痫，夜啼心悸，功同蝉蜕”。蝉花是蝉拟青霉寄生于蝉若虫后形成的虫菌复合体，内含虫草多糖；甘露醇和必需氨基酸等活性成分。研究人员从天然蝉花中分离纯化蝉拟青霉菌株进行人工培养。

(1)制备培养基：

①该实验选择马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）培养基，配方如下：马铃薯200g，葡萄糖20g，KH2PO42g，MgSO40.5g，琼脂20g，用蒸馏水定容至1000mL，自然pH，培养基中的马铃薯可为蝉拟青霉生长提供_____等营养成分（至少写出2种），该培养基的自然pH为______性范围。

②为了便于筛选蝉拟青霉菌株，培养基中还应加入氯霉素等抗生素以抑制_____的生长。该培养基从功能上分类属于______培养基。

③配制的培养基必须进行灭菌处理，目的是_______。检测固体培养基灭菌效果的常用方法是_____。

(2)蝉拟青霉的分离纯化：取新鲜蝉花，挑取虫体胸腔中的少量菌丝采用_______法接种至PDA培养基上进行培养。

(3)发酵生产：发酵生产中常用液体培养基扩大培养。下表为发酵菌丝体和天然蝉花的主要成分及含量的测定结果，据表判断_______（填“能”或“不能”）用发酵菌丝体替代天然蝉花，判断的理由是_______。粗蛋白（%）粗纤维（%）灰份（%）水分（%）虫草多糖（mg/g）甘露醇（mg/g）发酵菌丝体25．388．327．878．9233．278．9天然蝉花19．653．127．849．8128．553．624、化合物S被广泛应用于医药、食品和化工工业、用菌株C可生产S，S的产量与菌株C培养所利用的碳源关系密切。为此，某小组通过实验比较不同碳源对菌体生长和S产量的影响，结果见表。碳源细胞干重（g/L）S产量（g/L）葡萄糖3.120.15淀粉0.010.00制糖废液2.300.18

回答下列问题。

(1)通常在实验室分离纯化培养微生物时，需要设置对照实验，如果自变量设为培养基不同，则是检测____________________________。如果自变量设为_________________；则是检测培养基灭菌是否彻底。

(2)由实验结果可知，菌株C生长的最适碳源是______；用菌株C生产S的最适碳源是______。菌株C的生长除需要碳源外，还需要______（答出2点即可）等营养物质。

(3)由实验结果可知，碳源为淀粉时菌株C不能生长，其根本原因是______。

(4)若以制糖废液作为碳源，为进一步确定生产S的最适碳源浓度，某同学进行了相关实验。请简要写出实验思路：______。

(5)为测定菌株C的含量，常用_________________进行接种，统计的菌落数往往比活菌的实际数目少，原因是_____________。25、黏多糖贮积症是由IDUA基因突变导致的遗传病。科研人员对此病的治疗进行相关研究。

(1)黏多糖贮积症患者细胞中IDUA基因由于碱基对___________造成突变，转录出的mRNA长度不变但提前出现终止密码子，最终导致合成的IDUA酶分子量___________；与正常IDUA酶的空间结构差异显著而失去活性，积累过多的黏多糖无法及时清除，造成人体多系统功能障碍。

(2)抑制性tRNA（sup-tRNA）与普通tRNA的结构、功能相同，但它的反密码子可以与终止密码子配对。在上述这一类突变基因的翻译过程中，加入sup-tRNA可以发挥的作用是___________；从而诱导通读获得有功能的全长蛋白。

(3)不同的sup-tRNA可以携带不同氨基酸；为比较它们的通读效果，科研人员进行了相关研究，实验结果如图。

注：“-”代表未加入。

据图分析，实验组将___________基因导入受体细胞，并采用___________技术检测导入基因的表达情况。据结果分析，携带酪氨酸的sup-tRNA能___________。

(4)科研人员利用携带酪氨酸的sup-tRNA对IDUA突变基因纯合小鼠及IDUA基因敲除小鼠进行治疗，检测肝脏细胞IDUA酶活性和组织黏多糖的积累量，与不治疗的小鼠相比较，实验结果为_____________，表明携带酪氨酸的sup-tRNA可以治疗黏多糖贮积症。评卷人得分五、综合题(共3题，共6分)26、在拟南芥种子发育过程中；由受精极核（相当于含有一套精子染色体和两套卵细胞染色体）发育的胚乳到一定时期会被子叶完全吸收。在拟南芥种子萌发过程中，子叶的功能是为胚发育成幼苗提供营养。

（1）M基因具有抑制胚到发育的作用。研究者利用______法将T-DNA插入到拟南芥的M基因中；使M基因功能丧失（记为m），导致胚乳发育过度，而使种子败育。

（2）M基因具有MD、MR两种等位基因；为研究基因的遗传规律，研究者用不同基因型的拟南芥进行杂交实验（如下表）。

。实验一实验二实验三实验四母本MDMDMRMRMDMDMDm父本MRMRMDMDMDmMDMDF1种子育性可育可育可育1/2可育1/2败育表中的实验三与实验四互为____实验。分析实验一和实验二，可得出的结论是MD和MR不影响_____。依据实验三和四的结果推测，来自______（选填“母本”或“父本”）的M基因不表达。

（3）为进一步用杂交实验验证上述推测，将实验三的F1植株全部进行自交，若推测成立，F1植株所结种子中能发育成植株的占____。

（4）为从分子水平再次验证上述推测；研究者对实验一和实验二中所结种子的M基因的转录水平进行鉴定；结果如图1。

鉴定杂交结果时，分别提取种子中胚和胚乳的总RNA，通过____获得cDNA，进行PCR扩增后电泳。结果表明M基因在____细胞中均可转录，来自____的M基因在__细胞中不转录。27、肿瘤相关成纤维细胞（CAF）存在于各种实体肿瘤中；对肿瘤发生；发展和转移起促进作用。树突状细胞（DC）是一种抗原呈递细胞，其部分作用机理如图。科研人员通过细胞融合技术制备了DC/CAF融合细胞疫苗，用于靶向CAF的肿瘤免疫治疗。

(1)DC将抗原摄取、加工处理后，在其表面形成的______与辅助性T细胞表面的受体特异性结合，在CD80或CD86等分子的共同作用下，激活辅助性T细胞。活化的辅助性T细胞参与_____（细胞免疫/体液免疫/细胞免疫和体液免疫）。

(2)科研人员分别从肿瘤组织和骨髓中分离出CAF和DC诱导融合，与诱导植物原生质体融合相比，其特有的诱导方法是_______。筛选得到的DC/CAF融合细胞，置于含有_______的混合气体的CO2培养箱中进行培养，其中CO2的主要作用是________，进而可获得DC/CAF融合细胞疫苗。该融合细胞疫苗的特点包括_______（填选项字母）

A．只对单一肿瘤的治疗有效。

B．DC来自患者自身；不会引起免疫排斥。

C．通过激活自身免疫系统特异性杀伤CAF而发挥作用。

D．融合细胞呈递的抗原种类比转入特定CAF抗原基因的DC更多。

(3)研究人员发现未活化的DC与CAF融合后表现出活化DC的特性，可能的原因是_______。如果将DC/CAF融合细胞与辅助性T细胞共培养，以______为对照，一段时间后检测______（写出两项）等相关指标，通过结果可判断融合细胞是否能更有效地活化辅助性T细胞。28、酵母菌液泡的功能类似于动物细胞的溶酶体，可进行细胞内“消化”。API蛋白是一种存在于酵母菌液泡中的一种蛋白质，前体API（pro-API）蛋白进入液泡后才能形成成熟蛋白（m-API）。已知API蛋白通过生物膜包被的小泡进入液泡；途径有两种。

途径一：在饥饿条件下；细胞质基质中会形成较大的双层膜包被的自噬小泡，自噬小泡携带着API蛋白及细胞质中其他物质与液泡膜融合。

途径二：在营养充足时；酵母菌中会形成体积较小的Cvt小泡，该小泡仅特异性地携带API与液泡膜融合。

PMSF是一种液泡蛋白酶抑制剂；可以使液泡中的自噬小体膜无法被分解而出现自噬小体堆积，这种现象可在光学显微镜下观察到。请据图回答下列问题：

(1)研究API蛋白转移途径时，有同学认为：除了利用放射性同位素3H标记氨基酸，还需要用到抗原—抗体杂交技术。原因是_______________________________________。

(2)利用基因工程将酵母菌API蛋白基因导入大肠杆菌，生产的相关蛋白质却没有成熟。从细胞类型和结构角度考虑，这种差异产生的原因是___________________________________________。

(3)自噬小体包含了部分细胞质基质和部分细胞器。若要证明线粒体可通过途径一进入液泡，需要检测的酶、实验组选用的材料、处理的方法及分析结果的方式依次是______。A．催化葡萄糖分解为丙酮酸的酶XB．催化丙酮酸分解为酒精的酶YC．催化NADH与O2反应生成水的酶ZD．营养充足的酵母菌E．饥饿处理的酵母菌F．用药物PMSF处理G．不用药物PMSF处理H．裂解酵母菌细胞获得上清液进行分析I．裂解酵母菌细胞后分离液泡进行分析(4)途径一和途径二分别由两个国家的实验室独立发现，两个实验室交流后，发现这两种途径存在许多相似之处，因此推测有部分基因同时影响了这两个途径。为探讨a、b基因是否同时影响了这两种途径，利用诱导的突变株Ⅰ（途径一障碍的菌株，基因型为a）、突变株Ⅱ（途径二障碍的菌株，基因型为b）进行了如下的相关实验。

实验一：饥饿条件下的突变株Ⅱ用PMSF处理，若_______________，说明b基因在途径一中也有作用。

实验二：检测营养充足条件下的突变株Ⅰ中的API蛋白，若_______________；说明a基因在途径二中也有作用。

(5)为进一步探究a与b基因是否为同一位点的突变；进行了以下实验：

已知野生型酵母菌是单倍体，酵母菌可以进行结合生殖，即两个酵母菌细胞结合后形成二倍体酵母菌，再进行减数分裂后形成单倍体酵母菌。如果a和b酵母菌结合后形成的二倍体酵母菌______________________________，说明a与b基因不是同一位点的突变。参考答案一、选择题(共7题，共14分)1、D【分析】【分析】

转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应；过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。抗虫棉的种植；减少了农药的使用，有利于保护农田的土壤环境；但是抗虫棉不抗蚜虫、盲椿象、红蜘蛛等害虫，导致这些害虫大面积的爆发，破坏了自然界的生态平衡，对环境造成了负面影响；另外棉铃虫对抗性频率越来越大．重组的微生物在降解污染物的过程中可能产生一些中间产物，产生二次污染。

【详解】

A；种植转基因抗虫作物；可以减少农药的使用量是转基因生物的优点，A错误；

B；种植抗除草剂农作物可以保护农田土壤环境是转基因生物的优点；B错误；

C；重组的微生物在降解某些化合物的过程中所产生的中间产物；可能会造成第二次污染与题干要求不符，C错误；

D；转基因生物不会改变生物原有的分类地位；充其量只能说明它具有某种新特征的同一物种，不会破坏生态系统的稳定性，该观点与转基因生物对生态系统的稳定性造成破坏相反，D正确。

故选D。2、C【分析】【分析】

该过程利用了动物细胞核移植技术；该技术体现了动物细胞核的全能性；由胚胎干细胞发育成组织是细胞分裂和分化的结果，所以①②过程中都存在细胞的分裂，都会进行DNA的复制和蛋白质的合成。

【详解】

A；治疗性克隆是指利用克隆技术产生特定的细胞、组织和器官；用它们来修复或替代受损的细胞，组织和器官，从而达到治疗疾病的目的。上述过程利用了动物细胞核移植技术、动物细胞培养技术，A错误；

B；上述过程涉及到核移植技术；但没有发育成完整个体，则不能体现动物细胞的细胞核具有全能性，即便发育成个体也不能体现动物细胞的全能性，只能体现动物细胞核的全能性，B错误。

C；胚胎干细胞具有发育的全能性；经过分裂和分化，可以得到能用于移植的各种组织、细胞，因此，胚胎干细胞的不断增殖和分化潜能保证①过程的进行，C正确；

D、图示所示技术为治疗性克隆，而非生殖性克隆，我国政府的“四不”原则针对的是生殖性克隆，D错误。

故选C。

【点睛】3、B【分析】【分析】

【详解】

A；图中①是获取目的基因的过程；获取的目的基因，可用于基因工程，但不能用于比目鱼基因组测序，A错误；

B；将多个抗冻基因编码区相连形成的能表达的新基因不再是抗冻基因；所以得不到抗冻性增强的抗冻蛋白，B正确；

C；②是基因表达载体的构建过程；基因表达载体通常由启动子、目的基因、终止子和标记基因构成，其中标记基因的作用是筛选重组质粒，利用农杆菌转化法只能将质粒导入受体细胞，不能对重组质粒进行筛选，C错误；

D；利用DNA探针技术检测目的基因是否导入到受体细胞；利用抗原-抗体杂交技术检测目的基因是否表达出来，D错误。

故选B。4、D【分析】【分析】

体细胞核移植培育克隆牛的大致过程是：高产奶牛（提供体细胞）进行细胞培养；同时采集卵母细胞；在体外培养到减二分裂中期的卵母细胞，去核（显微操作）；将供体细胞注入去核卵母细胞；通过电刺激使两细胞融合，供体核进入受体卵母细胞，构建重组胚胎；将胚胎移入受体（代孕）母牛体内；生出与供体奶牛遗传基因相同的犊牛。

【详解】

A；由体细胞核移植培育克隆牛的大致过程可知；体细胞来自同一头牛，细胞核遗传物质相同。生物的性状是由基因与环境共同决定的，环境不同可能是克隆牛性状不完全相同的原因，A正确；

B；在克隆牛的培育过程中基因发生突变；可能会使克隆牛性状不完全相同，B正确；

C；受体细胞的细胞质基因不同；也可能是克隆牛性状不完全相同的原因，C正确；

D；核基因发生重组发生在有性生殖产生生殖细胞的过程中；克隆牛的细胞核基因没有发生基因重组，D错误。

故选D。5、B【分析】【分析】

1.传统单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应；之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。

2.蛋白质工程是指在基因工程的基础上；结合蛋白质结晶学，计算机辅助设计和蛋白质化学等多学科的基础知识，通过对基因的人工定向改造等手段，对蛋白质进行修饰；改造和拼接，以生产出能满足人类需要的新型蛋白质的技术。

【详解】

A、dMAb技术涉及到蛋白质工程；需要通过抗体结构1和结构2的氨基酸序列人工合成目的基因1和2，再将目的基因1和2导入患者细胞，使其合成埃博拉病毒的抗体，从而与埃博拉病毒的抗原结合，A正确；

B；重组质粒的构建所需的工具有限制酶、DNA连接酶以及质粒（载体）；B错误；

C；传统利用杂交瘤细胞产生单克隆抗体利用的是B细胞和骨髓瘤细胞形成的杂交瘤细胞；图示中将抗体基因（基因1和2）导入骨骼肌细胞，也能产生抗体，不再局限于免疫细胞，C正确；

D；过程②是重组质粒即重组表达载体的构建；是基因工程的核心步骤，重组质粒导入埃博拉病毒感染者的肌肉细胞（动物细胞）常用方法是显微注射法，D正确。

故选B。6、D【分析】【分析】

果酒和果醋的制作原理。

【详解】

A；酵母菌无氧呼吸产酒精；黄酒中的酒精是酵母菌利用"黍米"经无氧呼吸产生的代谢产物，A正确；

B."曲藜"制作的季节不同；温度；湿度等环境条件会有所改变，可能会影响到酵母菌的种类和数量，B正确；

C."陶器必良"是为了有良好的容器从而控制好发酵过程气体条件；"火剂必得"也是为了控制发酵过程的环境条件，C正确；

D."湛炽"的目的是消毒；发酵过程酒精的产生和培养液的酸性环境会抑制其他杂菌生长，D错误。

故选D。7、B【分析】1；植物组织培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织；然后再分化生成根、芽，最终形成植物体。植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。2、植物的体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞，进而利用植物的组织培养将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株。植物体细胞杂交依据的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。

【详解】

A；PEG可以破环细胞间相互排斥的表面作用力；从而使相邻细胞聚集而促进融合，故可用PEG诱导植物原生质体融合，再生出细胞壁是融合成功的标志，A正确；

B；植物体细胞杂交技术去壁前；不能对两种植物细胞进行灭菌处理，因为灭菌后植物细胞会死亡而不能得到杂种细胞，B错误；

C；植物培养基中常用的植物生长调节剂一般可以分为生长素类、细胞分裂素类和赤霉素类；C正确；

D；获取植物原生质体时；除使用纤维素酶和果胶酶外，还需要在蔗糖浓度与细胞液浓度相当的缓冲液中进行，以免细胞过度失水或吸水，此时原生质体已无细胞壁，D正确。

故选B。二、多选题(共8题，共16分)8、C:D【分析】【分析】

蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础；通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。也就是说，蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程，是包含多学科的综合科技工程领域。

基本流程：从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的核糖核苷酸序列（RNA）→找到相对应的脱氧核糖核苷酸序列（DNA）。

【详解】

A；蛋白质工程可以通过改造基因来定向改变蛋白质分子的结构；A正确；

B；因为基因指导蛋白质的合成；所以改造蛋白质可通过改变基因结构实现，B正确；

C；改造后的中华鲟具有新的性状；但其和现有中华鲟之间没有生殖隔离，仍是同一物种，C错误；

D；蛋白质工程改造的是基因；可以遗传给子代，因此改造后的中华鲟的后代也具有改造的蛋白质，D错误。

故选CD。9、A:B:D【分析】【分析】

动物细胞培养的过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞；制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。

【详解】

A；将动物组织分散为单个细胞制成细胞悬液中进行的第一次培养为原代培养；因此在C瓶中进行的细胞培养称为原代培养，A正确；

BC、进行动物细胞培养时，通常采用培养皿或松盖培养瓶，将其置于含95%空气和5%CO2的混合气体的培养箱中进行培养，以满足细胞培养的气体环境需要，其中氧气是细胞呼吸必需的，CO2是为了维持培养液的pH；B正确；C错误；

D；D瓶细胞出现接触抑制时；应用胰蛋白酶处理使其分散为单个细胞，再用离心法收集细胞分瓶以进行传代培养，D正确。

故选ABD。10、A:C:D【分析】【分析】

诱导植物细胞原生质体融合物理方法包括离心；振动、电激；化学方法用聚乙二醇，诱导动物细胞融合除了以上物理化学方法可用生物方法，即灭活的病毒。

在HAT培养基中；氨甲蝶呤是叶酸的拮抗剂阻断DNA合成的主途径，未融合的瘤细胞；融合的瘤细胞--瘤细胞不能合成次黄嘌呤磷酸核糖转化酶，合成DNA的S途径也不能进行，所以最终死亡。

HAT培养基中筛选出的杂交瘤细胞；经选择性培养在适宜条件下可无限增值，然后进行单克降抗体检测，筛选出能分泌特定抗体的杂交瘤细胞。

【详解】

A；HAT培养基中含叶酸拮抗剂；其中不能进行D途径，A错误；

B；杂交瘤细胞为瘤细胞和B淋巴细胞的融合细胞；既具备增殖能力，又可在HAT培养基中进行S途径，B正确；

C；最终筛选出来的可能有多种杂交瘤细胞；分泌的可能不是同一种特异性抗体，还需进行进一步筛选，C错误；

D；仅考虑细胞的两两融合；在放入HAT培养基之前的融合细胞的培养液中，会有融合的B淋巴细胞—瘤细胞、融合的B淋巴细胞—B淋巴细胞、融合的瘤细胞—瘤细胞、未融合的B淋巴细胞、未融合的瘤细胞等多种形式的细胞，这几种形式的细胞均可进行D途径，D错误。

故选ACD。11、A:C:D【分析】【分析】

酵母菌是一类单细胞真菌；能以多种糖类作为营养物质和能量的来源，因此在一些含糖量较高的水果；蔬菜表面经常可以发现酵母菌的存在。酵母菌是兼性厌氧微生物，在无氧条件下能进行酒精发酵，可用于酿酒、制作馒头和面包等。温度是影响酵母菌生长的重要因素，酿酒酵母的最适生长温度约为28℃。

【详解】

A、发酵产生果酒的菌种是酵母菌，酵母菌在有氧呼吸产生CO2；但不产生酒精，A错误；

B；切片后对发酵液进行消毒；防止杂菌污染，再进行分组，B正确；

C；压榨倒罐用于主发酵需保留空间以促进酵母菌的有氧呼吸；二次倒罐时菌种是进行无氧呼吸，C错误；

D；主发酵先有氧促进酵母菌大量繁殖；后无氧进行酒精发酵，后发酵要控制无氧，D错误。

故选ACD。12、B:D【分析】【分析】

克隆是指生物体通过体细胞进行的无性繁殖；以及由无性繁殖形成的基因型完全相同的后代个体。通常是利用生物技术由无性生殖产生与原个体有完全相同基因的个体或种群。

【详解】

A；体细胞的分化程度比胚胎干细胞的分化程度高；与体细胞核移植技术相比，胚胎干细胞核移植技术更易成功，A错误；

B；在体细胞核移植过程中；用物理方法或化学方法（如电脉冲、钙离子载体、乙醇、蛋白质合成酶抑制剂等）激活受体细胞，使其完成细胞分裂和发育进程，B正确；

C；基因重组发生在有性生殖的生物进行减数分裂产生配子的过程中(狭义上的基因重组)以及基因工程技术中（包含在广义的基因重组内）；而细胞分裂、分化的过程一般不会发生基因重组，C错误；

D；体细胞核移植技术是无性繁殖；有望用于增加濒危动物的种群数量，D正确。

故选BD。13、A:B:C【分析】【分析】

分析甲图：甲图为牛胚胎移植示意图；胚胎移植的具体过程为：对供；受体的选择和处理；配种或人工授精；对胚胎的收集、检查、培养或保存；胚胎进行移植；移植后的检查；对受体母牛进行是否妊娠的检查。分析乙图：①是滋养层；②是内细胞团；③是囊胚腔。

【详解】

A；冲卵是指把供体母牛子宫内的胚胎冲洗出来；甲图中冲卵的目的是获取早期胚胎，A错误；

B；为使供体和受体处于相同的生理状态；通常需要注射孕激素等激素使其同期发情，B错误；

C；进行性别鉴定需要取囊胚的①滋养层细胞做DNA分析；C错误；

D；受精卵形成乙囊胚的过程中进行卵裂；每个细胞的体积变小，细胞总体积不变或略有减少，D正确。

故选ABC。14、C:D【分析】【分析】

1；根据《上海市生活垃圾管理条例》第四条本市生活垃圾按照以下标准分类规定：湿垃圾；即易腐垃圾，是指食材废料、剩菜剩饭、过期食品、瓜皮果核、花卉绿植、中药药渣等易腐的生物质生活废弃物；干垃圾，即其它垃圾，是指除可回收物、有害垃圾、湿垃圾以外的其它生活废弃物。

2；由题图信息分析可知；该实验的目的是为了筛选获得高效降解淀粉的菌种，在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，属于选择培养基，接种方法是稀释涂布平板法。

【详解】

A；剩余饭菜、果皮果壳属于湿垃圾；玻璃碎片属于干垃圾，A错误；

B；菌落①②透明圈大小不同是两个菌群对淀粉的分解能力不同；透明圈大的分解能力强，B错误；

C；抗生素或电池等会抑制微生物生长；不利于微生物的分解，C正确；

D；图中出现透明圈；因此将菌液接种到培养基的方法是释涂布平板法，D正确。

故选CD。15、A:B:D【分析】【分析】

1；基因探针是用放射性同位素、荧光分子等标记的DNA分子作为探针；原理是DNA分子杂交。

2；DNA分子是一个独特的双螺旋结构；是由两条平行的脱氧核苷酸长链盘旋而成，外侧由脱氧核糖和磷酸交替连接构成基本骨架，内侧是碱基对（A-T；C-G）通过氢键连接。

3；目的基因的检测与鉴定：

分子水平上的检测：

①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；

②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；

③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。

个体水平上的鉴定：

抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

A；由图1可知；DNA探针是用荧光分子标记的DNA分子，DNA的基本组成单位是脱氧核苷酸，因此荧光标记的DNA探针的基本单位是脱氧核糖核苷酸，A正确；

B；由图2可知；高温（煮沸）可以使双链DNA分子中的氢键断裂形成DNA单链，B正确；

C；图中两条姐妹染色单体中含有2个DNA分子共有4条链；所以最多可有4条荧光标记的DNA片段，C错误；

D、由于AA和BB中各有一对同源染色体可被荧光探针标记，若植物甲（AABB）与植物乙（AACC）杂交，则其F1（AABC）含有3个荧光点；经间期复制加倍，有丝分裂中期的细胞中可观察到6个荧光点，D正确。

故选ABD。三、填空题(共7题，共14分)16、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】低当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落菌落数17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】噬菌体、动植物病毒18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】冷酒精白色219、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】0．1420、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】细胞产物的工厂化生产。21、略

【分析】略【解析】自我更新分化潜能再生修复22、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】目的基因DNA分子杂交技术。四、实验题(共3题，共18分)23、略

【分析】【分析】

为了杀灭培养基中的微生物；实验所配制的培养基必须进行灭菌处理；可将灭菌后的固体培养基放置在适宜的温度下培养一段时间，以检测培养基的灭菌效果，若培养基中无菌落长出，说明培养基的灭菌是合格的；在固体培养基上接种微生物的方法有平板划线法或稀释涂布平板法。

【详解】

（1）①马铃薯中含有淀粉；蛋白质和无机盐等物质；故培养基中的马铃薯可为蝉拟青霉生长提供碳源、氮源、无机盐等营养成分；

培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性；培养细菌时需将pH调至中性或微碱性，即培养蝉拟青霉的培养基的自然pH为酸性范围。

②氯霉素等抗生素可以通过抑制肽聚糖（细菌细胞壁的主要成分）的合成来抑制细菌的生长；而对真菌的生长无影响。为了便于筛选蝉拟青霉（真菌）菌株，培养基中还应加入氯霉素等抗生素以抑制细菌的生长，该培养基从功能上分类属于选择培养基。

③为了杀灭培养基中的微生物；配制的培养基必须进行灭菌处理；将灭菌后的固体培养基放置在适宜的温度下培养一段时间，若培养基中无菌落长出，说明固体培养基的灭菌是合格的。

（2）蝉拟青霉的分离纯化：由（1）的题干信息可知；PDA为固体培养基，在固体培养基上接种微生物的方法有平板划线法或稀释涂布平板法。

（3）根据题意“蝉花是蝉拟青霉寄生于蝉若虫后形成的虫菌复合体，内含虫草多糖、甘露醇和必需氨基酸等活性成分”，并结合表格信息可知，发酵菌丝体中各种活性成分的含量明显高于天然蝉花，故能用发酵菌丝体来替代天然蝉花。【解析】(1)碳源；氮源、无机盐酸细菌选择杀灭培养基中的微生物将灭菌的固体培养基放置在适宜的温度下培养一段时间；观察是否长出菌落。

(2)平板划线（稀释涂布平板）

(3)能发酵菌丝体活性成分的含量明显高于天然蝉花24、略

【分析】【分析】

微生物的接种方法包括稀释涂布平板法和平板划线法，二者都可以用于筛选单菌落，但是前者可以用于计数，后者不行。培养基：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质，是进行微生物培养的物质基础。微生物培养基需要为微生物繁殖提供碳源、氮源、水、无机盐等营养物质，此外还要满足微生物对特殊营养物质，pH和O2的需求。稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的梯度稀释；然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。利用稀释涂布平板法得到数值往往偏小，因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。

【详解】

（1）在实验室分离纯化培养微生物时；常见的对照实验有两种，当用不同的培养基作为自变量进行对照实验时，常用来检测所配制的培养基是否具有选择作用，例如以牛肉膏蛋白胨培养基和以尿素为唯一氮源的培养基进行对照实验，可以后者筛选分解尿素的微生物，验证其起到选择培养基的作用；当用同一种培养基进行接种和不接种微生物的对照实验时，则可检验培养基灭菌是否合格，若未接种的空白培养基上生长出部分菌落，说明该培养基灭菌不合格。

（2）由实验结果可知；当碳源为葡萄糖时，菌株C的细胞干重最大，为3.12g/L，因此，菌株C生长的最适碳源是葡萄糖。当碳源为制糖废液时，S产量最大，为0.18g/L，因此菌株C生产S的最适碳源是制糖废液。

微生物生长所需的营养物质包括碳源；氮源、无机盐、水等。

（3）碳源为淀粉时菌株C细胞干重为0.01g/L；几乎不能生长，其直接原因是该菌细胞内不含有分解淀粉的酶，因此无法分解淀粉作为碳源，根本原因是菌株C缺少合成淀粉酶的基因。

（4）若要探究生产S的最适制糖废液的浓度；则实验自变量为不同浓度的制糖废液，因变量为S产量，因此需要配制一系列不同浓度梯度的制糖废液为唯一碳源的培养基，接种菌株C，然后将其置于相同且适宜的环境中进行培养，一段时间后，测定并比较不同浓度制糖废液中的S产量，S产量最高时对应的制糖废液浓度即为生产S的最适碳源浓度。

（5）微生物接种方法包括平板划线法和稀释涂布平板法，后者可以用于计数，前者不行，在进行稀释涂布平板法计数微生物时，当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此该计数方法得到的菌落数往往比活菌的实际数目少。【解析】(1)选择培养基是否具有选择性接种与不接种。

(2)葡萄糖制糖废液氮源；无机盐、水。

(3)菌株C缺少合成淀粉酶的基因。

(4)分别配制一系列不同浓度梯度的以制糖废液为唯一碳源的培养基；培养菌株C，其他条件相同且适宜，一段时间后，测定并比较不同浓度制糖废液中的S的产量，S产量最高时对应的制糖废液浓度即为生产S的最适碳源浓度。

(5)稀释涂布平板法当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落25、略

【分析】【分析】

基因突变是指DNA分子中发生碱基对的替换；增添和缺失；而引起的基因结构的改变。翻译是指在核糖体上，以mRNA为模板、以氨基酸为原料合成蛋白质的过程，该过程还需要tRNA来运转氨基酸。

密码子由位于mRNA上决定一个氨基酸的三个相邻的碱基组成。终止密码子的作用是终止翻译过程。

基因工程中检测目的基因在受体细胞内是否成功表达可以用抗原-抗体杂交技术。

【详解】

（1）由题干信息可知；黏多糖贮积症患者细胞中IDUA基因突变后，转录出的mRNA长度不变，说明其没有发生碱基对的增添和缺失，因为这两者改变会导致转录出的mRNA长度改变，因此推测其基因突变是由于碱基对替换。由于终止密码子提前出现，导致翻译提前终止，肽链变短，IDUA酶分子量变小，空间结构改变而失活。

（2）由题干可知；抑制性tRNA（sup-tRNA）可以最终诱导核糖体通读mRNA上的遗传信息合成具有功能的全长蛋白，并且抑制性tRNA（sup-tRNA）与普通tRNA的结构；功能相同，据此推测该抑制性tRNA可以携带氨基酸至核糖体并与终止密码子碱基配对使翻译过程继续。

（3）本实验目的是比较携带不同氨基酸的sup-tRNA的通读效果；需要保证实验组细胞含有突变IDUA基因，即其不能合成具有正常功能的IDUA酶（防止正常IDUA酶对实验结果产生干扰），同时保证在不同的实验组细胞中可以转录出携带不同中氨基酸的sup-tRNA，因此实验组中受体细胞中应该含有导入携带不同氨基酸的sup-tRNA基因和突变IDUA基因。若要判断各个实验组细胞中携带不同氨基酸的sup-tRNA是否成功诱导了具有功能的IDUA酶，可以采用该酶的特异性抗体对其进行检测，即进行抗原-抗体杂交。分析题图可知，与对照组（含正常IDUA基因的组）相比，含携带酪氨酸的sup-tRNA的受体细胞中表达的全长IDUA蛋白量比其他实验组都多，说明其能有效恢复细胞中全长IDUA蛋白的合成，且效果最好。

（4）由以上实验可知，携带酪氨酸的sup-tRNA能有效诱导核糖体对突变IDUA基因转录出的mRNA进行通读，进而产生具有正常功能的IDUA酶，因此利用携带酪氨酸的sup-tRNA对IDUA突变基因纯合小鼠进行治疗，与不进行治疗的IDUA突变基因纯合小鼠相比，治疗组小鼠的IDUA酶活性高，组织黏多糖积累量少；同时，利用携带酪氨酸的sup-tRNA对IDUA基因敲除小鼠进行治疗，与不进行治疗的IDUA基因敲除小鼠相比，由于二者都不含有IDUA基因，则其细胞内都没有相应mRNA，因此携带酪氨酸的sup-tRNA无法发挥作用，最终导致治疗组与不治疗组的IDUA酶活性与组织黏多糖积累量无明显差异。【解析】(1)替换减少。

(2)识别终止密码子并携带氨基酸至核糖体使翻译过程继续。

(3)携带不同氨基酸的suptRNA基因和变IDUA抗原一抗体杂交恢复细胞中全长IDUA蛋白的合成；且效果最好。

(4)IDUA突变基因纯合小鼠IDUA酶活性高，组织黏多糖积累量少；IDUA基因敲除小鼠IDUA酶活性与组织黏多糖积累量无明显差异五、综合题(共3题，共6分)26、略

【分析】【分析】

依题意；利用T-DNA插入M基因使M基因功能丧失，应用到农杆菌转化法。

表格中的实验一和实验二，说明MD和MR都可使种子具有正常育性；实验三和实验四，则看出父本提供的MD基因不能使种子具有正常育性。

电泳图谱可以看出在胚乳中来自父本的M基因不转录；所以提取出来的cDNA没有相应的条带。

【详解】

（1）利用T-DNA插入到双子叶植物的染色体基因中；是利用农杆菌转化法。

（2）父母本的基因型相互交换，属于正反交实验。分析实验一和实验二，可得出的结论是MD和MR不影响种子育性。依据实验三和四的结果推测；来自父本的M基因不表达。

（3）将实验三的F1植株全部进行自交。F1植株的基因型为MDMD：MDm=1:1，其中MDm个体自交时；有1/2概率为父本提供M基因或子代只有m基因纯合，导致种子不可育，故种子中能发育成植株的占3/4。

（4）RNA可通过逆转录获得cDNA。从电泳结果可以看出M基因在胚细胞中均可转录；来自父本的M基因在胚乳细胞中不转录。

【点睛】

本题考查基因的分离定律和基因工程相关知识，意在考查学生对知识的理解和记