2025年统编版选择性必修3生物上册月考试卷

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年统编版选择性必修3生物上册月考试卷54考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五六总分得分评卷人得分一、选择题(共8题，共16分)1、为拓宽白菜育种的基因资源；改良白菜品质，研究人员以白菜(2n=20，AA)和甘蓝(2n=18，CC)为材料进行植物体细胞杂交，以期得到杂种植物。对两种亲本和某融合植株进行细胞DNA含量检测，结果如下图。下列说法正确的是（）

A.白菜的DNA相对含量较少说明其基因数量比甘蓝少B.操作中需要用灭活的病毒诱导原生质体融合C.该技术需要再生细胞壁后才能进行植物组织培养D.检测结果说明待检测植株为白菜-甘蓝杂种植株2、拟利用番茄表达人类凝血因子Ⅸ；操作步骤排序正确的是（）

①制备工程农杆菌②构建植物表达载体。

③获取人类凝血因子Ⅸ基因④番茄植株中凝血因子Ⅸ基因的检测。

⑤用农杆菌转化番茄植株并筛选⑥提取凝血因子Ⅸ并检测活性A.③①②⑤⑥④B.⑥③①②⑤④C.④③②①⑤⑥D.③②①⑤④⑥3、在DNA提取过程中，下列浓度的NaC1溶液中能使DNA析出最彻底的是（）A.0.14mol/LB.2mol/LC.0.15mol/LD.0.3mol/L4、某同学在①；②、③三种条件下培养大肠杆菌；这三种条件是：

①以葡萄糖为碳源的培养基；不断补充培养基，及时去除代谢产物。

②以葡萄糖为碳源的培养基；不断补充培养基，不去除代谢产物。

③以葡萄糖和乳糖为碳源的培养基；不补充培养基，不去除代谢产物。

根据培养结果绘制的一段时间内菌体数的对数随时间变化的趋势图如下：

假设三种培养基中初始总糖量相等，则①、②、③三种条件依次对应的趋势图是A.甲、乙、丙B.乙、丙、甲C.丙、甲、乙D.丙、乙、甲5、下图表示牛的受精作用及早期胚胎发育的部分过程。下列有关叙述正确的是（）

A.图1中各细胞内的DNA分子数目相同B.图3表明受精作用已经完成C.同期发情处理能使供体产生更多的图4结构D.图1到图4的过程发生在输卵管和子宫中6、下列关于动物体细胞培养过程中细胞的活动或特性的表述，错误的是（）A.细胞通常贴壁生长B.细胞进行有丝分裂C.细胞之间一定会出现接触抑制现象D.有些细胞可以悬浮培养7、为评估外源基因Vgb在菊花中的稳定性以及对生态环境的影响，研究人员在种植转基因菊花的第二年，随机选取转基因菊花株系及周边非转基因菊花和各种杂草，提取DNA。根据Vgb设计特异性引物进行PCR扩增，电泳结果如图。下列说法不正确的是（）

注:CK表示质粒阳性对照，1为空白对照，2～10为转基因株系，11～15为不同种类杂草，16～20为非转基因菊花A.设置空白实验是为了排除实验操作、试剂污染等对结果的影响B.结果表明2年内Vgb基因在菊花细胞中稳定，且未发生向周边植物的扩散C.转基因植物与周边其他植物之间不可能通过花粉发生基因交流D.将Vgb基因转入其他植物时同样要经过安全性评价8、新冠疫情的快速控制，离不开我国政府的科学决策和对新冠病毒（一种RNA病毒）的快速检测能力。荧光定量PCR可定量检测样本中DNA含量，其原理是在PCR反应体系中加入引物的同时，加入与某条模板链互补的荧光探针，当耐高温的DNA聚合酶催化子链延伸至探针处会水解探针并生成荧光分子，即DNA每扩增一次，就有一个荧光分子生成（如图），荧光监测系统随时接收荧光信号变化。每个反应管内的荧光信号到达设定阈值时所经历的循环次数称为循环阈值（Ct值）。下列说法正确的是（）

A.细胞内DNA复制的引物种类与PCR所用引物种类相同B.一个初始DNA分子经过4次循环后，得到6个等长的DNA分子C.Ct值越大，被检测样本中病毒数目越多，对被检测者的危害性越大D.最终监测的荧光强度与起始时反应管内样本DNA的含量呈正相关评卷人得分二、多选题(共7题，共14分)9、利用基因工程技术生产羧酸酯酶（CarE）制剂的流程如图所示；下列叙述正确的是（）

A.过程①需使用逆转录酶B.过程②需使用解旋酶和PCR获取目的基因C.过程③使用的感受态细胞可用NaCl溶液制备D.过程④可利用DNA分子杂交鉴定目的基因是否已导入受体细胞10、运用细胞工程技术获得单克隆抗体时，必要的操作是（）A.对小动物注射特定抗原B.融合并筛选杂交瘤细胞C.原代培养效应B细胞D.将胰蛋白酶注入小动物腹腔11、下图表示选用具有同一外源目的基因对某品种奶牛进行遗传特性改造的三种途径；下列有关叙述正确的是（）

A.获得奶牛1通常采用显微注射法导入外源基因B.奶牛2体内不同组织细胞的基因组成一定相同C.成功获得奶牛1、2、3表明三个受体细胞都具有全能性D.奶牛1、2、3的获得均需在体外进行早期胚胎培养12、下图为胚胎干细胞获取及培养简图；据图示信息判断，下列相关叙述错误的是（）

A.通过③过程可定向培育人造组织器官，用于器官移植B.研究细胞分化和细胞凋亡的机理可选择图中②或③途径C.胚胎干细胞培养过程中5%CO2的主要作用是促进细胞呼吸D.②过程只能在饲养层细胞上进行，该细胞可作为干细胞的营养细胞13、下列关于“DNA粗提取与鉴定”实验的叙述，正确的是（）A.DNA既溶于2mol/LNaCl溶液也溶于蒸馏水B.洗涤剂能瓦解植物细胞壁并增加DNA在NaCl溶液中的溶解度C.调节NaCl溶液浓度或加入冷酒精后过滤，都可以去除部分杂质D.在酸性条件下，DNA与二苯胺会发生反应，最终产生蓝色物质14、下图表示利用细胞融合技术进行基因定位的过程，在人-鼠杂种细胞中人的染色体会以随机方式丢失，通过分析基因产物进行基因定位。现检测细胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中人的4种酶活性，只有Ⅱ具有芳烃羟化酶活性，只有Ⅲ具有胸苷激酶活性，Ⅰ、Ⅲ都有磷酸甘油酸激酶活性，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均有乳酸脱氢酶活性。下列相关叙述正确的有（）

A.加入灭活仙台病毒的作用是促进细胞融合B.细胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ分别为人-人、人-鼠、鼠-鼠融合细胞C.芳烃羟化酶基因位于2号染色体上，乳酸脱氢酶基因位于11号染色上D.胸苷激酶基因位于17号染色体上，磷酸甘油酸激酶基因位于X染色体上15、基因工程在农牧业、医药卫生和食品工业等多方面的应用发展迅速，如图表示利用基因工程技术生产人血清白蛋白的两条途径。下列叙述错误的是（）

A.若某基因是从人的细胞内提取mRNA经逆转录形成的，则该基因中不含启动子序列B.扩增目的基因时，利用耐高温的DNA聚合酶从引物a、b的3'－端进行子链合成C.导入人血清白蛋白基因的绵羊受体细胞是乳腺细胞D.利用农杆菌转化法可将含有目的基因的重组质粒整合到植物受体细胞的染色体DNA上评卷人得分三、填空题(共9题，共18分)16、20世纪70年代以后；以基因工程为代表的一大批生物技术成果，进入人类的生产和生活，特别是在医药和农业生产上发挥了极大的作用，但是与其他高新技术一样，生物技术也同样具有双刃剑效应。如同其他高新技术一样，转基因成果和转基因技术也需要你的理性看待。在转基因生物安全方面；

（1）你认为转基因生物有哪些优点，①____________②___________③__________。

（2）你认为转基因生物有哪些缺点，①____________②___________③__________。

（3）你对于转基因生物的态度是__________。17、酶是细胞合成的生物催化剂。随着生物科学技术的发展；酶已经走出实验室，走进人们的生产和生活。请回答下面有关酶的问题：

（1）在腐乳制作的过程中；利用毛霉等微生物产生的蛋白酶将豆腐中的蛋白质分解成________，____________将脂肪水解为甘油和脂肪酸。加酶洗衣粉里添加的酶制剂中，应用最广泛；效果最明显的是____________。

（2）果胶酶包括_____________________________；生产中如果要固定果胶酶；最好采用______________________________________法固定化。

（3）酶提取和分离原理：需要用__________法去除相对分子质量大的杂质蛋白，以纯化酶；利用_________________________法对酶进行纯度鉴定。18、两种DNA连接酶（E·coliDNA连接酶和T4DNA连接酶）的比较：

①相同点：都缝合______键。

②区别：E·coliDNA连接酶来源于T4噬菌体，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。19、目的：使目的基因在受体细胞中_____，并且可以______，使目的基因能够______作用。20、沙门氏菌是一种常见的食源性致病菌；被感染了沙门氏菌的人或带菌者的粪便污染的食品，会使人发生食物中毒。沙门氏菌的最适繁殖温度为37°C，在20℃以上即能大出繁殖，其对热抵抗力不强，在60℃的条件下15min就能被杀死。肉桂精油是从肉桂树中提炼获得的，具有不溶于水；易溶于有机溶剂且易挥发的特性，能抑制沙门氏菌的繁殖。回答下列问题：

（1）培养沙门氏菌时要进行无菌操作，常用的灭菌方法有________（答出两种）。用平板培养沙门氏菌时一般需要将平板________（填“倒置”或“正置”）。单个细菌在平板上会形成菌落，研究人员通常可根据菌落的形状、大小和颜色等特征来初步区分不同种的微生物，原因是________。

（2）从鸡粪便取样，经选择培养后需要经过一系列________才能将样品涂布到鉴别培养基上。对获得的沙门氏菌常采用________的方法长期保存。

（3）根据题干信息，为避免食用被沙门氏菌污染的食品而引发的食物中毒，家庭中储存、加工食品的方法是________。

（4）根据肉桂精油的化学特性，可采用________法来提取，提取过程中影响精油品质的因素有________。21、植物繁殖的新途径。

微型繁殖：可以高效快速地实现种苗的大量繁殖。

作物脱毒：采用______组织培养来除去病毒（因为植物分生区附近的病毒______）

人工种子：以植物组织培养得到的______、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，经_____包装得到的种子。优点：完全保持优良品种的遗传特性，______；方便储藏和运输。

人工种子的结构包括：______、_____和______。22、蛋白质工程在生物制药上有广泛的应用。如果已经确认某种新蛋白质可能具有特殊的抗癌功能，其氨基酸序列也已经确认，如何通过蛋白质工程生产这种新药？如果回答有困难，可以向老师请教或通过互联网查找答案。_____23、应用分析与比较的方法，对生殖性克隆与治疗性克隆进行列表阐述｡

生殖性克隆与治疗性克隆的比较。比较项目生殖性克隆治疗性克隆含义__________用到的技术__________目的__________24、在日常生活中，我们还遇到哪些有关生物技术安全与伦理问题？我们能基于所学生物学知识参与这些问题的讨论吗？尝试举一个实例加以说明______。评卷人得分四、判断题(共4题，共28分)25、转基因生物可能会破坏生态平衡（______）A.正确B.错误26、培养动物细胞一般使用液体培养基，培养基通常需要加入血清等一些天然成分。()A.正确B.错误27、生物武器包括致病菌类、病毒类和生化毒剂类等。（选择性必修3P111）()A.正确B.错误28、转入油菜的抗除草剂基因，可能通过花粉传入环境中。()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共1题，共7分)29、单克隆抗体在防治H7N9型禽流感上具有显著疗效。下图是科研人员制备H7N9病毒的单克隆抗体X的过程。回答下列问题：

（1）上图中B淋巴细胞是取自______________的动物或人。融合的M细胞先用选择培养基进行筛选，再进行克隆化培养和_______________以得到符合要求的N细胞，N细胞的名称是______________。

（2）为了进一步研究H7N9病毒的单克隆抗体X（以下简称抗体X）的效果及作用机制；科学家开展了如下实验：

实验一：在体外将抗体X与HA蛋白（H7N9病毒表面的一种蛋白）混合，检测抗体X对HA蛋白的亲和力。实验结果如下表所示。（注：KD值越小，抗体和HA蛋白的亲和力越高；机体Y为一种已知的H7N9病毒的抗体。）。抗体种类KD抗体X5．32×10-9M抗体Y1．95×10-9M

实验二：以一定浓度的H7N9病毒感染小鼠；一天后向小鼠腹腔分别注射一定剂量的抗体X；Y；14天后测定小鼠存活情况和体重变化。实验结果表明：抗体X的体内治疗效果优于抗体Y。

①实验一结果表明：对H7N9病毒HA蛋白亲和力更高的抗体是__________。

②分析实验一和实验二的结果差异，研究人员提出假说：抗体除了中和病毒活性之外，还可以通过和巨噬细胞表面的受体相结合，从而增强巨噬细胞的吞噬作用，进而清除被病毒感染的靶细胞。请以巨噬细胞、感染了H7N9病毒的肺上皮细胞、细胞培养液、抗体X、抗体Y和无关抗体等为材料，设计实验验证上述假说。写出实验思路__________。评卷人得分六、综合题(共3题，共12分)30、近年来；一种名为“爱媛橙”的柑橘类水果因皮薄易剥；细腻多汁、口感似果冻等优点，被网友们称为“果冻橙”，并迅速成为网红水果。“爱媛橙”由柑橘品种南香与西子香杂交获得。某科研小组欲利用细胞融合技术培育“爱媛橙”，其部分流程如下图所示，回答下列问题：

（1）过程①应将两种植物细胞分别置于含有_________酶的_________（填“低渗”“等渗”或“高渗”）溶液中制备原生质体。

（2）过程②常用到的促融合剂是_________；与动物细胞融合相比，过程②不能使用的融合方法是_______________。

（3）过程③杂种细胞形成的标志是_______；过程④需要在培养基中添加的植物激素的种类及比例为_______，愈伤组织的细胞最突出的特征是_________；过程⑤称为______。

（4）与通过南香与西子香杂交培育成的“爱媛橙”相比，该育种方法具有的优点是________；该育种技术遵循的生物学原理是_______________（填序号）。

①细胞膜的流动性②细胞膜的选择透过性③植物细胞的全能性④细胞增殖31、萝卜的蛋白A具有广泛的抗植物病菌作用；而且对人体没有影响。我国科学家欲获得高效表达蛋白A的转基因大肠杆菌作为微生物农药，做了相关研究。

（1）研究者将重组质粒置于经__________处理的大肠杆菌细胞悬液中；获得转基因大肠杆菌。

（2）检测发现；转入的蛋白A基因在大肠杆菌细胞中表达效率很低，研究者推测不同生物对密码子具有不同的偏好，因而设计了与蛋白A基因结合的两对引物（引物B和C中都替换了一个碱基），并按图中方式依次进行4次PCR扩增，以得到新的蛋白A基因。

①这是一种定点的__________技术。

②图2所示的4次PCR应该分别如何选择图1中所示的引物？请填写以下表格（若选用该引物划“√”；若不选用该引物则划“×”）__________。

。引物A引物B引物C引物DPCR1________________________________________PCR2________________________________________PCR3________________________________________PCR4________________________________________（3）研究者进一步将含有新蛋白A基因的重组质粒和__________分别导入大肠杆菌；提取培养液中的蛋白质，用__________方法检测并比较三组受体菌蛋白A的表达产物，判断新蛋白A基因表达效率是否提高。为检测表达产物的生物活性，研究者将上述各组表达产物加入到长满了植物病菌的培养基上，培养一段时间后，比较__________的大小，以确定表达产物的生物活性大小。

（4）作为微生物农药，使用时常喷洒蛋白A基因的发酵产物而不是转蛋白A基因的大肠杆菌，其优点是__________。32、中国甜柿的自然脱涩与乙醛代谢关键酶基因（PDC）密切相关；推测涩味程度可能与PDC基因的表达情况有关。

（1）启动子位于基因首端，是RNA聚合酶识别和结合的位点，同时启动子区域还存在着许多调控蛋白的结合位点，RNA聚合酶和调控蛋白共同影响了基因的___________。

（2）为筛选PDC基因的调控蛋白；科研人员进行了下列实验。

①PDC基因的启动子序列未知，为获得大量该基因启动子所在片段，可利用限制酶将基因组DNA进行酶切，然后在___________的作用下将已知序列信息的接头片段连接在PDC基因的上游，根据___________和PDC基因编码序列设计引物进行PCR．利用质粒A(图1）构建含有PDC基因启动子片段的重组质粒并导入代谢缺陷型酵母菌，用不含___________的培养基可筛选出成功转化的酵母菌Y1H。

②质粒G(图2）上的AD基因表达出的AD蛋白与启动子足够靠近时，能够激活后续基因转录，因此需获得待测蛋白与AD蛋白的融合蛋白用于后续筛选。科研人员从中国甜柿中提取RNA，将逆转录形成的各种cDNA与质粒G连接后导入酵母菌，此时应选择质粒G中的位点______（填序号1~5）作为cDNA的插入位点；最终获得携带不同cDNA片段的酵母菌群Y187。

③重组酵母Y187与Y1H能够进行接合生殖，形成的接合子含有两种酵母菌质粒上的所有基因。若接合子能在含有金担子素的培养基中生存，则推测待测蛋白是PDC基因的调控蛋白，请结合图示阐述作出该推测的理由______。

参考答案一、选择题(共8题，共16分)1、C【分析】【分析】

植物体细胞杂交过程：1；酶解法去壁获取原生质体；2、人工诱导原生质体融合；3、再生出新细胞壁；标志着原生质体融合完成；4、经脱分化和再分化过程，通过组织培养把杂种细胞培育成杂种植株。

【详解】

A；基因是具有遗传效应的DNA片段；白菜的DNA相对含量较少，不一定其基因数量比甘蓝少，A错误；

B；操作中需要用PEG诱导原生质体融合；灭活的病毒是诱导动物细胞融合，B错误；

C；该技术需要再生细胞壁后才能进行植物组织培养；C正确；

D；据图可知；白菜DNA相对含量为50，甘蓝DNA相对含量为75，检测结果DNA相对含量为150，说明待检测植株为甘蓝-甘蓝四倍体植株，D错误。

故选C。2、D【分析】【分析】

利用番茄表达人凝血因子属于基因工程的技术范畴。

【详解】

基因工程的基本步骤：获取目的基因；构架表达载体，受体细胞的转化，目的基因的表达及检测。

对植物细胞进行转化通常用农杆菌转化法。

综合可知正确的排序应为：③②①⑤④⑥，故选D。3、A【分析】【分析】

DNA粗提取和鉴定的原理：

（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液；但细胞中的某些蛋白质溶于酒精；DNA对酶；高温和洗涤剂的耐受性。

（2）DNA的鉴定：在沸水浴的条件下；DNA遇二苯胺会被染成蓝色。

【详解】

DNA在0.14mol/LNaCl溶液中的溶解度最低；因此用0.14mol/L氯化钠溶液可以初步析出DNA。A正确。

故选A。4、C【分析】【分析】

葡萄糖是细胞能直接利用的糖类；如果在葡萄糖不足的情况下，才会利用其他的糖类作为能源物质。

【详解】

①条件下培养大肠杆菌；可认为是一种理想状态下的培养，所以大肠杆菌的数量会不断增加，对应图像丙；

②条件下；不断补充培养基则可看成是大肠杆菌所需要的营养物质充足，但是由于不去除代谢产物，则由于代谢产物的逐渐积累，使得大肠杆菌生存的环境变得恶劣，则会抑制大肠杆菌数量的增长，甚至使其数量达到一定值后就会减少，对应图像甲；

③条件下；在用葡萄糖和乳糖作碳源的培养基上培养大肠杆菌，开始时，大肠杆菌只利用葡萄糖而不利用乳糖，只有当葡萄糖被消耗完毕后，大肠杆菌才开始利用乳糖，所以在③条件下，大肠杆菌的数量开始时会增多，当葡萄糖被消耗完毕后，大肠杆菌由于没有碳源而使得数量暂不变化，当其开始利用乳糖时，其数量又开始增多，当乳糖消耗完毕后，大肠杆菌的数量则开始减少，对应图乙。

故选C。5、D【分析】【分析】

分析题图：图为受精作用和胚胎发育过程；图中1为受精作用；2为核融合；3是表示2个细胞的卵裂期细胞；4为早期胚胎发育过程中形成的原肠胚。

【详解】

A；图1中精子和卵细胞内的DNA分子数目相同；但比体细胞减少一半，故图1中各细胞内的DNA分子数目并不均相同，A错误；

B；图3表示2个细胞的卵裂期细胞。受精作用完成的标志是雌、雄原核的融合；B错误；

C；同期发情处理的目的是使得供体和受体具有相同的生理环境；便于胚胎移植；超数排卵的目的是产生更多的卵细胞（而非图4结构），进而可产生更多的受精卵，C错误；

D；图1到图3的过程发生在输卵管；图4形成发生在子宫中，D正确。

故选D。6、C【分析】【分析】

动物细胞培养的特点：贴壁生长；有接触抑制现象。

【详解】

A；动物细胞培养过程中；悬液中分散的细胞很快贴壁生长，A正确；

B；动物细胞培养是细胞增多的过程；细胞增殖的方式为有丝分裂，B正确；

C；动物细胞在培养过程中；当贴壁细胞分裂生长到表面相互抑制时，细胞才会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制，C错误；

D；动物细胞培养时；可将组织分散成单个细胞进行悬浮培养，D正确。

故选C。7、C【分析】【分析】

据题意可知，1为空白对照，2～10为转基因株系，11～15为不同种类杂草，16～20为非转基因菊花，图中2～10含有Vgb基因，其他植物都不含Vgb基因，说明2年内Vgb基因在菊花细胞中稳定；且未发生向周边植物的扩散。

【详解】

A；设置空白实验目的是排除无关变量对实验结果的干扰；本实验无关变量为实验操作、试剂污染等，A正确；

B、据题意可知，11～15为不同种类杂草，16～20为非转基因菊花，图中它们都没有外源基因Vgb，因此推测2年内Vgb基因在菊花细胞中稳定；且未发生向周边植物的扩散，B正确；

C；外源基因若转入细胞核就有可能通过花粉进行传播；发生基因交流，C错误；

D、不同基因具有不同表达模式和功能，对植物自身和环境造成的影响以及带来的安全性问题，因此将Vgb基因转入其他植物时同样要经过安全性评价；D正确。

故选C。8、D【分析】【分析】

PCR全称为聚合酶链式反应；是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。荧光定量PCR技术可定量检测样本中某种DNA含量的原理是在PCR体系中每加入一对引物的同时加入一个与某条模板链互补的荧光探针，当耐高温的DNA聚合酶催化子链延伸至探针处，会水解探针，使荧光监测系统接收到荧光信号，即每扩增一次，就有一个荧光分子生成，实现了荧光信号的累积与PCR产物的形成完全同步。

【详解】

A；细胞内DNA的复制时；引物是通过RNA聚合酶合成的RNA链，而PCR反应中所需的引物是人工合成的DNA或RNA链，A错误；

B；一个初始DNA分子经过4次循环后；得到8个等长的DNA分子，B错误；

C、Ct值越小，说明所需循环的次数越少，可以理解为样本中的病毒含量相对较高，越容易被检测到，而Ct值越高，说明所需循环的次数越多，检测到时需要更多的时间与循环，提示样本中病毒的含量相对较少，即新冠病毒含量越少，Ct值越高，新冠病毒含量越多，Ct值越低；C错误；

D；题干中提出“加入一个与某条模板链互补的荧光探针”；并且“每扩增一次，就有一个荧光分子生成”，因此反应最终的荧光强度与起始状态模板DNA含量呈正相关，D正确。

故选D。二、多选题(共7题，共14分)9、A:D【分析】【分析】

过程①是以mRNA为模板合成DNA的过程；即逆转录过程；过程②表示利用PCR扩增目的基因；过程③表示将重组质粒导入大肠杆菌；过程④培养并筛选转基因大肠杆菌，级工程菌。

【详解】

A；过程①是以mRNA为模板合成DNA的过程；即逆转录过程，需要逆转录酶的催化，故A正确；

B；过程②表示利用PCR扩增目的基因；在PCR过程中，不需要解旋酶，是通过控制温度来达到解旋的目的，故B错；

C；利用氯化钙处理大肠杆菌；使之成为感受态细胞，故C错；

D；检测目的基因是否成功导入受体细胞的染色体DNA中；可以采用DNA分子杂交技术，故D正确。

故选AD。

【点睛】10、A:B【分析】【分析】

在制备单克隆抗体的过程中；需要先对小鼠进行特定抗原免疫，使机体产生相应的浆细胞；在诱导细胞融合时，除了异种细胞融合外，还有同种细胞融合，因此需要在培养基中筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞；效应B细胞不能分裂；在获得能分泌所需抗体的杂交瘤细胞时，可以将其注入小鼠腹腔中，以备获得大量的单克隆抗体。

【详解】

A；在制备单克隆抗体的过程中；需要先对小鼠进行特定抗原免疫，使机体产生相应的浆细胞，A正确；

B；在诱导细胞融合时；除了异种细胞融合外，还有同种细胞融合，因此需要在培养基中筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞，B正确；

C；效应B细胞不能分裂；C错误；

D；在获得能分泌所需抗体的杂交瘤细胞时；可以将其注入小鼠腹腔中，以备获得大量的单克隆抗体，而不需要将胰蛋白酶注入小动物腹腔，D错误。

故选AB。11、A:D【分析】【分析】

分析题图：奶牛1的培育采用了基因工程技术；早期胚胎培养技术和胚胎移植技术；奶牛2的培育采用可基因工程技术、早期胚胎培养技术和胚胎移植技术；奶牛3的培育采用了核移植、早期胚胎培养技术和胚胎移植技术。

【详解】

A；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；A正确；

B；奶牛2的培育过程中；在囊胚阶段注入了含有外源基因的受体细胞，因此其体内不同组织细胞的基因型可能不同，B错误；

C；奶牛3表明受体细胞的细胞核具有全能性；C错误；

D；结合分析可知；奶牛1、2、3的获得均需在体外进行早期胚胎培养，D正确。

故选AD。12、B:C:D【分析】【分析】

1；胚胎干细胞具有胚胎细胞的特性；在形态上表现为体积小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。另外，在体外培养的条件下，可以增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，也可进行遗传改造。

2；识图分析可知；图中①为早期胚胎的囊胚阶段，②为胚胎干细胞在体外培养的条件下，可以增殖而不发生分化，如在饲养层细胞上培养，③表示在胚胎干细胞体外诱导，分裂、分化形成各种组织和器官，培育出各种人造组织器官的过程。

【详解】

A.图中③过程为干细胞的诱导分化；通过该过程可定向培育人造组织器官，用于器官移植，解决供体器官不足和移植后免疫排斥的问题，A正确；

B.图中途径②没有发生细胞分化；所以研究细胞分化和细胞凋亡的机理可选择图中③途径，B错误；

C.细胞培养过程中，5%CO2的主要作用是调节培养液的pH；C错误；

D.②过程胚胎干细胞只分裂而不分化的培养；可在饲养层细胞上进行，饲养层细胞可作为干细胞分裂；增殖的营养细胞，也可在添加抑制因子的培养液中培养，使干细胞只分裂而不分化，D错误。

故选BCD。13、A:C:D【分析】【分析】

DNA粗提取和鉴定的原理：

1；DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同（DNA在0.14mol/L的氯化钠中溶解度最低）；DNA不溶于酒精溶液；但细胞中的某些蛋白质溶于酒精。

2；DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性不同。

3；DNA的鉴定：在沸水浴的条件下；DNA遇二苯胺会被染成蓝色。

【详解】

A；DNA不溶于酒精溶液；但DNA既溶于2mol/L的NaCl溶液，也溶于蒸馏水，A正确；

B；洗涤剂能瓦解细胞膜；但不能增加DNA在NaCl溶液中的溶解度，B错误；

C；DNA在浓度为0.14mol/LNaCl溶液中的溶解度最低；因此用蒸馏水将NaCl溶液浓度调至0.14mol/L或加入冷酒精后过滤，都可以去除部分杂质，C正确；

D；在酸性条件下；DNA与二苯胺试剂反应，最终产生蓝色物质，因此常用二苯胺试剂鉴定DNA，D正确。

故选ACD。14、A:C:D【分析】【分析】

分析题干信息：Ⅰ保留X；11号染色体；Ⅱ保留2、11号染色体，具有芳烃羟化酶活性，Ⅲ，保留X、11、17号染色体具有胸苷激酶活性，Ⅰ、Ⅲ都有磷酸甘油酸激酶活性，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均有乳酸脱氢酶活性，所以支配芳烃羟化酶合成的基因位于2号染色体上，支配胸苷激酶合成的基因位于17号染色体上；支配磷酸甘油酸激合成的基因位于X号染色体上；支配乳酸脱氢酶合成的基因位于11号染色体上。

【详解】

A；动物细胞融合过程中；可以利用灭活的仙台病毒或聚乙二醇作诱导剂促进细胞融合，A正确；

B；细胞Ⅲ中保留了人的X、11、17号染色体；故不会是鼠-鼠融合细胞，B错误；

CD；根据分析可知；芳烃羟化酶基因位于2号染色体上，乳酸脱氢酶基因位于11号染色上，胸苷激酶基因位于17号染色体上，磷酸甘油酸激酶基因位于X染色体上，CD正确。

故选ACD。15、C:D【分析】【分析】

将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法；农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可整合到受体细胞的染色体DNA上。基因表达载体常包括目的基因；启动子、终止子、标记基因。标记基因是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。

【详解】

A；启动子是位于DNA上RNA聚合酶的结合部位；mRNA是由基因启动子后面的序列编码而来的，若某基因是从人的细胞内提取mRNA经逆转录形成的，则该基因中不含启动子序列，A正确；

B、引物的延伸方向为3'端，扩增目的基因时，利用耐高温的DNA聚合酶从引物a、b的3'－端进行子链合成；B正确；

C；导入人血清白蛋白基因的绵羊受体细胞不是乳腺细胞；而是受精卵或早期胚胎细胞，C错误；

D；农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞；并且整合到受体细胞染色体的DNA上，根据农杆菌的这一特点，将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以把目的基因的T-DNA整合到植物细胞中染色体的DNA上，D错误。

故选CD。三、填空题(共9题，共18分)16、略

【分析】【分析】

基因工程是指按照人们的愿望；进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋子生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫做DNA重组技术。

基因工程的原理是基因重组；其优点是打破了生殖隔离。但由于科学发展水平的限制，目前科学家对基因的结构；基因间的相互作用以及基因的调控机制等都了解得相当有限；再加上转移的基因虽然是功能已知的基因，但不少却是异种生物的基因；同时，由于外源基因插入宿主基因组的部位往往是随机的，因此在转基因生物中，有时候会出现一些人们意想不到的后果。

【详解】

（1）转基因生物具有以下优点：

作物产量高；能解决粮食短缺问题；利用基因工程生产的抗虫作物能够减少农药使用，减少环境污染；利用基因工程培育的生长迅速；营养品丰富的生物，能增加食物营养，提高附加值；利用基因工程培育微生物，能够生产稀缺的生化药物。

（2）转基因生物受限于科学发展水平；可能会产生以下问题：

转基因生物与同种生物杂交；可能产生重组病菌；重组病毒或超级杂草；导入转基因生物的外源基因有可能与感染转基因生物的某些细菌或病毒杂交，从而重组出对人类或其他生物有害的病原体，可能使疾病的传播跨越物种障碍。

（3）转基因技术取得了巨大的成果；但科学技术是把双刃剑，面对转基因技术的利弊，正确的做法应该是趋利避害，而不能因噎废食。

【点睛】

本题考查转基因生物的安全性问题，意在考查学生对转基因生物安全性问题的识记与理解。【解析】解决粮食短缺问题减少农药使用，减少环境污染增加食物营养，提高附加值能产生有毒蛋白或新过敏原可能产生重组病菌、重组病毒或超级杂草可能使疾病的传播跨越物种障碍趋利避害不能因噎废食17、略

【分析】【分析】

1；腐乳制作过程中多种微生物参与了发酵；其中起主要作用的是毛霉，毛霉等微生物产生蛋白酶能将豆腐中的蛋白质转化成小分子肽和氨基酸，脂肪酶将脂肪转化成甘油和脂肪酸。

2；果胶酶能够分解果胶；瓦解植物的细胞壁及胞间层，使榨取果汁变得容易，而果胶分解成可溶性的半乳糖醛酸，也使得浑浊的果汁变得澄清。果胶酶并不特指某一种酶，而是分解果胶的一类酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶。

【详解】

（1）在腐乳制作的过程中；利用毛霉等微生物产生的蛋白酶将豆腐中的蛋白质分解成小分子肽和氨基酸，脂肪酶将脂肪水解为甘油和脂肪酸；加酶洗衣粉里添加的酶制剂中，应用最广泛；效果最明显的是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶。

（2）果胶酶并不特指某一种酶；而是分解果胶的一类酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶；果胶分解酶和果胶酯酶；在果汁生产过程中如果要固定果胶酶，最好采用化学结合和物理吸附法固定化，这是因为酶分子小，体积小的酶容易从包埋材料中漏出。

（3）酶提取和分离原理：需要用凝胶色谱法去除相对分子质量大的杂质蛋白；以纯化酶；利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法对酶进行纯度鉴定。

【点睛】

本题考查腐乳制作和酶提取等知识，对于此类试题，需要考生注意的细节较多，如实验的原理、实验步骤、实验采用的试剂及试剂的作用等，需要考生在平时的学习过程中注意积累。【解析】小分子肽和氨基酸脂肪酶碱性蛋白酶和碱性脂肪酶半乳糖醛酸酶、果胶分解酶、果胶酯酶化学结合法和物理吸附凝胶色谱（分配色谱）聚丙烯酰胺凝胶电泳18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】磷酸二酯19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】稳定存在遗传至下一代表达和发挥20、略

【分析】【分析】

微生物实验中常用的灭菌方法有干热灭菌；高压蒸汽灭菌和灼烧灭菌；其中对于培养基一般用高压蒸汽灭菌，对于接种环一般用灼烧灭菌，对于培养皿等可以用干热灭菌。培养基放入培养箱中需要倒置培养，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染。对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法，即将菌种接种到试管的固体斜面培养基上，在合适的温度下培养，当菌落长成后将试管放入4℃的冰箱中保藏，以后每3-6个月都要重新将菌种从旧的培养基上转移到新鲜的培养基上；对于需要长期保存的菌种可以采用甘油管藏法，在3mL的甘油瓶中装入1mL甘油后灭菌，将1mL培养的菌液转移到甘油瓶中，与甘油充分混匀后放在-20℃的冷冻箱中保存。植物有效成分的提取方法主要有蒸馏法、压榨法和萃取法，如玫瑰精油的化学性质稳定，难溶于水，易溶于有机溶剂，能随水蒸气一同蒸馏，常采用蒸馏法提取；对于如橘皮精油，其主要储存在橘皮部分，由于橘皮精油的有效成分在用水蒸气蒸馏时会发生部分水解，又会产生原料焦糊问题，所以一般采用压榨法提取。

【详解】

（1）微生物培养中常用的灭菌方法有高压蒸汽灭菌法；灼烧灭菌法、干热灭菌法等。用平板培养沙门氏菌时一般需要将平板倒置；可以防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染。在一定的培养条件下，不同种微生物表现出各自稳定的菌落特征，因此单个细菌在平板上会形成菌落，通常可根据菌落的形状、大小和颜色等特征来初步区分不同种的微生物。

（2）从鸡粪便取样；经选择培养后，如果要将样品涂布到鉴别培养基上，需要经过一系列梯度稀释。对获得的沙门氏菌进行长期保存常采用甘油管藏法。

（3）根据题干信息；沙门氏菌的最适繁殖温度为37°C，在20℃以上即能大出繁殖，其对热抵抗力不强，在60℃的条件下15min就能被杀死，因此为避免食用被沙门氏菌污染的食品而引发的食物中毒，家庭中可采取低温储存；高温加工方法进行处理。

（4）根据题意；肉桂精油不溶于水；易溶于有机溶剂且易挥发，故可采用水蒸气蒸馏法进行提取，提取过程中蒸馏的温度、时间都会影响精油品质。

【点睛】

本题主要考查现代生物科技的原理和运用，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力，能运用所学知识，准确判断问题的能力。【解析】灼烧灭菌法、高压蒸汽灭菌法、干热灭菌法倒置在一定的培养条件下，不同种微生物表现出各自稳定的菌落特征梯度稀释甘油管藏低温储存、高温加工水蒸气蒸馏蒸馏的温度、时间21、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】茎尖极少或没有）胚状体人工薄膜不受季节的限制人工种皮；胚状体和人工胚乳。

（2）22、略

【分析】【详解】

蛋白质工程的基本途径：从预期的蛋白质功能出发，设计预期的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的脱氧核苷酸序列，以下按照基因工程的一般步骤进行。该蛋白质的氨基酸序列已知，因此通过蛋白质工程，生产该蛋白质新药的基本过程为：根据已知的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列→合成该蛋白质新药基因→将获得的目的基因与质粒构建形成基因表达载体→将重组质粒导入受体菌→获得工程菌→生产该蛋白质新药。【解析】根据已知的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列→合成该蛋白质新药基因→将获得的目的基因与质粒构建形成基因表达载体→将重组质粒导入受体菌→获得工程菌→生产该蛋白质新药23、略

【分析】【详解】

生殖性克隆指利用克隆技术获得胚胎；并将胚胎孕育成为人类个体的克隆性技术，其目的是用于生育，获得人的复制品；治疗性克隆是指利用克隆技术产生特定细胞或组织等，用于治疗性移植的克隆性技术，其目的是用于医学研究和疾病的治疗。

据概念可知，实现生殖性克隆和治疗性克隆都会用到的技术有体细胞核移植技术、动物细胞培养技术、早期胚胎培养技术、胚胎移植技术等；治疗性克隆在获取胚胎干细胞后，根据治疗目的诱导干细胞分化形成各种组织和器官，供患者移植用，故治疗性克隆还会应用到的技术为干细胞培养技术。【解析】生殖性克隆指利用克隆技术获得胚胎，并将胚胎孕育成为人类个体的克隆性技术治疗性克隆是指利用克隆技术产生特定细胞或组织等，用于治疗性移植的克隆性技术体细胞核移植技术、动物细胞培养技术、早期胚胎培养技术、胚胎移植技术等体细胞核移植技术，早期胚胎培养技术、动物细胞培养技术、胚胎移植技术、干细胞培养技术等用于生育，获得人的复制品用于医学研究和疾病的治疗24、略

【分析】【详解】

在日常生活中；我们遇到的有关生物技术安全与伦理问题有：生殖性克隆人伦理问题；试管婴儿与设计试管婴儿伦理问题、转基因产品的安全性与伦理问题和生物武器的安全性等。

例如转基因产品的安全性：转基因技术的安全性的争议；主要集中在两个方面，一是对人是否安全，二是对环境的影响。

对人的安全方面；支持转基因技术的人认为投放市场的转基因作物都是经过充分实验的，被改变的基因仅限于增加作物的抗病；抗灾害能力，并且在北美地区转基因食品已经使用的很多年，可以说现在美国加拿大20岁左右的年轻人从小就是吃转基因食品长大的；反对转基因技术的人认为转基因食品有害，他们的证据主要是一位科学家的实验证明，用转基因食品喂养的小白鼠癌症发病率明显升高，但问题是这个实验只成功过一次，后来别的科学家在相同的条件下都没能再现这个实验结果。

在环境方面对转基因技术的争议是最大的；也是欧洲人反对转基因技术的重要依据，反对人持有的观点是，通过改良基因创造出抵抗病虫害和其他灾害的植物，这种技术如果失去控制可能会把农作物改造成适应性极强的超级植物，自然平衡使任何生物都不可能占绝对优势地位，但转基因技术产生的超级植物可能会打破自然平衡而泛滥成灾。

伦理问题：由于转基因技术创新打破了物种界限,使不同物种间的基因可以进行前所未有的新组合,其可能造成的危害难以预见,这就使转基因技术创新呈现前所未有的复杂性,并不可避免地会引发很多全新的社会伦理问题,引出种种有关生物科学家的道德责任和学术自由的哲学争论。在转基因植物技术创新中,功利主义的预设和学术自由的主张必须以人类的价值、尊严和社会公正为前提条件。相关领域的科学家必须担当起必要的道德责任,把握好伦理横杆,以促使转基因植物技术创新沿着科学的轨道健康发展。【解析】在日常生活中；我们遇到的有关生物技术安全与伦理问题有：生殖性克隆人伦理问题；试管婴儿与设计试管婴儿伦理问题、转基因产品的安全性与伦理问题和生物武器的安全性等。

例如转基因产品的安全性：转基因技术的安全性的争议；主要集中在两个方面，一是对人是否安全，二是对环境的影响。

对人的安全方面；支持转基因技术的人认为投放市场的转基因作物都是经过充分实验的，被改变的基因仅限于增加作物的抗病；抗灾害能力，并且在北美地区转基因食品已经使用的很多年，可以说现在美国加拿大20岁左右的年轻人从小就是吃转基因食品长大的；反对转基因技术的人认为转基因食品有害，他们的证据主要是一位科学家的实验证明，用转基因食品喂养的小白鼠癌症发病率明显升高，但问题是这个实验只成功过一次，后来别的科学家在相同的条件下都没能再现这个实验结果。

在环境方面对转基因技术的争议是最大的；也是欧洲人反对转基因技术的重要依据，反对人持有的观点是，通过改良基因创造出抵抗病虫害和其他灾害的植物，这种技术如果失去控制可能会把农作物改造成适应性极强的超级植物，自然平衡使任何生物都不可能占绝对优势地位，但转基因技术产生的超级植物可能会打破自然平衡而泛滥成灾。

伦理问题：由于转基因技术创新打破了物种界限,使不同物种间的基因可以进行前所未有的新组合,其可能造成的危害难以预见,这就使转基因技术创新呈现前所未有的复杂性,并不可避免地会引发很多全新的社会伦理问题,引出种种有关生物科学家的道德责任和学术自由的哲学争论。在转基因植物技术创新中,功利主义的预设和学术自由的主张必须以人类的价值、尊严和社会公正为前提条件。相关领域的科学家必须担当起必要的道德责任,把握好伦理横杆,以促使转基因植物技术创新沿着科学的轨道健康发展。四、判断题(共4题，共28分)25、A【分析】【详解】

转基因生物可能会破坏生态平衡，特别是对生物多样性的影响。大自然经过亿万年的演化，各种生物相对处于一种和谐的生态平衡状态。但是，如果我们用转基因技术把某种生物人为地变得更加“强悍”，那其他物种就会衰败以至灭绝，故本题正确。26、A【分析】【分析】

液体培养基主要是模拟动物体内环境；动物体细胞是生活在组织液当中，而且细胞要直接从组织液里获得营养和排出废物。所以液体培养基相当于组织液的液体环境。

【详解】

为了保证细胞培养时营养物质和生长因子的供给，培养基中需添加一定量的动物血清等天然成分，可以补充合成培养基中缺乏的物质，故该表述正确。27、A【分析】【详解】

生物武器是利用生物战剂杀伤人员、牲畜、毁坏植物的武器。生物武器种类包括致病菌、病毒、生化毒剂以及经过基因重组的致病菌等。故该说法正确。28、A【分析】【详解】

转入到油菜的抗除草剂基因，则可能通过减数分裂进入到花粉细胞中，进而传入环境中的其他生物体内。本说法正确。五、实验题(共1题，共7分)29、略

【分析】【分析】

1；分析题图：小鼠骨體瘤细胞和取自感染病毒的人体内的浆细胞进行细胞融合；M表示融合细胞，N表示筛选出的杂交瘤细胞。

【详解】

（1）分析题图：小鼠骨體瘤细胞和取自感染病毒的人体内的浆细胞进行细胞融合，M表示融合细胞，N表示筛选出的杂交瘤细胞；B淋巴细胞是取自感染H7N9病毒的动物或人；随后将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行融合，对融合后的细胞用选择培养基进行筛选，挑选出B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的细胞，然后再进行克隆化培养和抗体检测，以得到符合要求的N细胞，N细胞的名称是杂交瘤细胞；

（2）①据题中图表分析，KD值越小，抗体和HA蛋白的亲和力越高；抗体Y的KD值小于抗体X的KD值，故对H7N9病毒HA蛋白亲和力更高的抗体是抗体Y；

②抗体X的体内治疗效果优于抗体Y，但对H7N9病毒HA蛋白亲和力更高的抗体是抗体Y，验证抗体除了中和病毒活性之外，还可以通过和巨噬细胞表面的受体相结合，从而增强巨噬细胞的吞噬作用，进而清除被病毒感染的靶细胞，需要进行抗体X和抗体Y的对照实验，并与无关抗体进行比较，可以将巨噬细胞及感染了H7N9病毒的肺上皮细胞分别加入A；B、C三组细胞培养液中；并向这三组培养液中分别加入无关抗体、抗体X和抗体Y，一段时间后检测并比较肺上皮细胞的裂解百分比。

【点睛】

对单克隆抗体制备流程、抗体效果检测原理和实验目的及用品的分析，是解决本题的关键。【解析】①.感染过H7N9病毒②.抗体检测③.杂交瘤细胞④.Y⑤.将巨噬细胞及感染了H7N9病毒的肺上皮细胞分别加入A、B、C三组细胞培养液中，并向这三组培养液中分别加入无关抗体、抗体X和抗体Y，一段时间后检测并比较肺上皮细胞的裂解百分比。六、综合题(共3题，共12分)30、略

【分析】【分析】

据图分析可知；图示为植物体细胞杂交过程示意图，其中①表示去壁获取原生质体的过程；②表示人工诱导原生质体融合；③表示再生出新细胞壁的过程；④表示脱分化过程；⑤表示再分化过程。

【详解】

（1）欲获得原生质体；需要将植物细胞去除细胞壁，细胞壁的主要成分为纤维素和果胶，因此可用纤维素酶和果胶酶处理细胞。为了保证原生质体的活性，需要将两种植物细胞分别置于含有纤维素酶和果胶酶的等渗溶液中。

（2）植物体细胞杂交技术中诱导融合的方法有：离心；振动、电激、PEG作为诱导剂等进行融合；故过程②常用到的促融合剂是PEG（聚乙二醇）。诱导动物细胞融合的方法有：PEG、灭活的病毒、离心、振动、电激等。与动物细胞融合相比，过程②原生质体融合时不具有的融合方法是灭活的病毒诱导融合。

（3）融合的原生质体形成细胞壁标志着杂种细胞的形成。过程④表示脱分化过程；生长素与细胞分裂素的用量比值应为1:1，便于促进愈伤组织的形成。杂种细胞经过脱分化，形成排列疏松无规则，没有固定的形态及功能且高度液泡化的薄壁细胞，即愈伤组织。愈伤组织通过⑤再分化，形成“爱媛橙”植株。

（4）常规的杂交育种只能整合已有的性状；不能产生新性状，不能克服远缘杂交的不亲和性。题中“爱媛橙”植株的获得利用了植物体细胞杂交技术，该技术能克服远缘杂交不亲和的障碍。植物体细胞杂交技术遵循细胞膜的流动性；植物细胞的全能性、细胞增殖等生物学原理，即①③④。

【点睛】

本题结合植物体细胞杂交过程图，考查植物体细胞杂交的相关知识，要求考生识记植物体细胞杂交的原理、过程、意义，能够准确判断各步骤的名称，再结合所学知识答题。【解析】①.纤维素酶和果胶酶②.等渗③.聚乙二醇（PEG）④.生物法（灭活的病毒