2025年华东师大版选择性必修3生物上册阶段测试试卷

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年华东师大版选择性必修3生物上册阶段测试试卷457考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五六总分得分评卷人得分一、选择题(共5题，共10分)1、实验人员利用矮牵牛（二倍体，2n=14）的红色花瓣细胞（液泡呈红色）与枸杞（四倍体，4n=48）叶肉细胞，制备了相应的原生质体，并诱导其融合，经筛选、培养获得杂种植株。下列有关叙述错误的是（）A.获得该杂种植株时不用考虑两种高等植物间的生殖隔离问题B.可利用聚乙二醇、灭活的病毒等作为融合剂诱导原生质体融合C.可利用光学显微镜观察，筛选出杂种原生质体D.若原生质体均为两两融合，则融合后的细胞中染色体数目可能为28、96或62条2、生物武器不包括（）A.致病菌及经过基因重组的致病菌B.生化毒剂C.病毒D.所有微生物3、成纤维细胞生长因子（FGF20）会在肺癌、胃癌及结肠癌细胞中过量表达，可作为潜在的肿瘤标志物。因此抗FCF20抗体可以用于癌症早期诊断筛查及预后评估。研究者设计如下流程制备抗FCF20单克隆抗体。下列叙述错误的是（）

A.①过程可用胰蛋白酶处理剪碎后的小鼠脾脏B.②过程应先用聚乙二醇或灭活病毒诱导细胞融合C.②③过程筛选相关细胞时都需用选择培养基D.④过程可将细胞注射到小鼠腹腔内或体外培养4、生物技术在食品加工中具有广泛的应用，如利用微生物酿制果酒。下列有关利用葡萄酿制果酒过程的叙述，错误的是（）A.适当增加酵母菌的接种量，可以缩短发酵的时间B.酒精积累是导致发酵液中细菌数量降低的原因之一C.酿酒过程中发酵罐要始终处于密封状态，以保证无氧的环境D.葡萄的品质、酵母菌菌种的纯度都会影响果酒的品质5、广式高盐稀态酱油发酵工艺中盐分含量对于发酵过程和产品风味至关重要，其作用之一是防腐抑菌，淘汰非耐盐野生杂菌或有害微生物。随着健康中国建设的推进，酱油的减盐成为一种趋势。科研人员研究了不同盐分条件下不同发酵阶段微生物群落结构的变化，结果如下表所示。下列说法错误的是（）

不同盐分杂件下不同发酵阶段各类微生物菌落总数。样品菌落总数/（1gCFU/mL）细菌真菌乳酸菌乳酸菌LI6.954.876.18LⅡ6、656.466.37LⅢ5.874.724.60MI6.934.034.70MⅡ6.416.325.52MⅢ5.574.075.11HI6.823.484.60HⅡ6.155.785.84HⅢ5.392.434.93

注，L、M、H分别表示低盐组（120g/L）、中盐组（150g/L）、高盐组（170g/L），I、Ⅱ、Ⅲ分别表示发酵第5天、发酵第25天、发酵第55天A.高浓度盐分能通过提高培养液的渗透压来实现防腐抑菌B.在发酵初期，盐浓度的提高对真菌及乳酸菌形成有效抑C.在发酵过程中，细菌、真菌、乳酸菌的数量的显现降低趋势D.随时检测培养液中的微生物数量，可以更好地了解发酵进程评卷人得分二、多选题(共7题，共14分)6、下列动物细胞培养过程中属于原代培养的是（）A.通常将动物组织消化后的初次培养称为原代培养B.从机体取得细胞后立即进行培养的过程C.出现接触抑制现象后接下来的细胞培养过程D.哺乳动物细胞在培养基中的悬浮生长过程7、有关质粒的叙述，下述说法不正确的为（）A.质粒是细菌细胞不可缺少的遗传物质B.质粒可用于基因的扩增和蛋白质的表达C.每个细菌细胞都都含有一个质粒D.质粒都由4种脱氧核糖核苷酸脱水缩合而成8、下图是我国科学家制备小鼠孤雄单倍体胚胎干细胞的相关研究流程；其中Oct4基因在维持胚胎干细胞全能性和自我更新中发挥极其重要的作用。下列叙述正确的是（）

A.受精卵发育过程中桑椹胚前的细胞都是全能性细胞B.推测Oct4基因的表达有利于延缓衰老C.过程③胚胎干细胞细胞核大、核仁明显D.从卵巢中获取的卵母细胞可直接用于过程①9、甲流试剂盒中的抗血凝素单克隆抗体能与甲流病毒的血凝素蛋白（HA）特异性结合，发挥诊断作用。利用小鼠制备抗HA单克隆抗体的流程如图，下列叙述正确的是（）

A.制备抗HA单克隆抗体使用的B淋巴细胞取自注射过HA的小鼠脾脏B.在特定的选择培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡C.放入96孔板的细胞为多种杂交瘤细胞，均能产生所需抗体D.将图中细胞群a在体外大规模培养，可以提取出大量的抗HA单克隆抗体10、某植物有甲、乙两品种，科研人员在设计品种乙组织培养实验时，参照品种甲的最佳激素配比（见下表）进行预实验。为确定品种乙的II阶段的最适细胞分裂素浓度，参照表中α2（α2>2．0μmol·L-1），以0．5μmol·L-1为梯度，设计5个浓度水平的实验，其中细胞分裂素最高浓度设为M。下列有关叙述正确的是（）。品种甲组织培养阶段细胞分裂素/（μmol·L-1）生长素/（μmol·L-1）I诱导形成愈伤组织α1b1II诱导形成幼芽α2b2Ⅲ诱导生根α3b3

A.表中发生基因选择性表达的是II和Ⅲ阶段B.实验中共配制了2种不同的培养基，即生根培养基和生芽培养基C.确定品种乙II阶段最适细胞分裂素浓度的实验中，M为α2+2μmol·L-1D.生长素和细胞分裂素的配比是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键因素11、某种物质S（一种含有C；H、N的有机物）难以降解；会对环境造成污染，只有某些细菌能降解S。研究人员按照下图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解S的细菌菌株。实验过程中需要甲，乙两种培养基，甲的组分为无机盐、水和S，乙的组分为无机盐、水、S和Y下列分析正确的是（）

A.Y物质是琼脂，甲和乙均需采用高压蒸汽灭菌B.若摇瓶甲细菌细胞估算数为2×107个/mL，每个平板接种量为0．1mL，菌落平均数为200个，则摇瓶内菌液至少稀释104倍C.③过程所使用的接种环，需采用灼烧灭菌法进行灭菌D.⑤过程中若S的浓度超过某一浓度时，菌株对S的降解量可能会下降12、据统计，从20世纪90年代至今，全世界包括基因制药在内的生物技术药物的销售额以年均30%的速度增长，生物制药已成为21世纪的朝阳产业。下列有关说法正确的是（）A.利用转基因技术还可以进行基因治疗，现在技术已经完全成熟B.对于基因制药，我们应该科学地认识和评估，保障公众的知情权C.由于转基因产品的安全问题，国家应建立相应的评估及预警机制D.我们可以利用转基因工程技术使哺乳动物本身变成“批量生产药物的工厂”评卷人得分三、填空题(共9题，共18分)13、一般包括______、______等技术14、哺乳动物核移植可以分为______核移植（比较容易）和______核移植（比较难）。15、基因工程操作一般经历如下四个步骤：_____。16、假设PCR反应中，只有一个DNA片段作为模板，请计算在30次循环后，反应物中大约有个这样的_______个DNA片段，一共需要加入______________个引物。17、PCR技术的DNA体外复制环境有DNA解旋酶、耐热DNA聚合酶、DNA母链、4种脱氧核苷酸和__________，它能使DNA聚合酶能够从引物的________端开始连接脱氧核苷酸。（人教P58列表），而引物是一段______________片段，用于PCR的引物长度通常为____个核苷酸。18、科学家采用定点诱变的方法构建T4溶菌酶的新蛋白质，发现其中一种新蛋白质的第9和第164位氨基酸残基被转换为半胱氨酸残基，并形成一个二硫键。这种新蛋白质的热稳定性会有什么变化？这项技术的要点是什么？_________19、不同国家的政府对待生殖性克隆人的态度是不同的｡我们认同我国政府对待生殖性克隆人研究的态度吗？为什么？_____。20、基因表达载体的组成及其作用。

一个基因表达载体的组成，除了______________、_______________外，还必须有__________、______________等(如图所示)。

①______________②______________③______________

④______________⑤______________⑥______________

⑦______________21、有时还需进行______的鉴定。如转基因抗虫植物是否出现______。评卷人得分四、判断题(共2题，共4分)22、内细胞团将来发育成胎儿的各种组织，滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘。（选择性必修3P58）()A.正确B.错误23、要对蛋白质的结构进行设计改造，最终必须通过改造氨基酸序列来完成。()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共4题，共16分)24、单克隆抗体特异性强；灵敏度高，用于诊疗疾病具有准确；高效等特点。下图表示单克隆抗体制备过程。

回答下列问题：

（1）若细胞B是小鼠的骨髓瘤细胞；则A是_________________细胞，诱导d过程常用的因素是_________________（答出一个即可）。

（2）用于筛选细胞D的培养基必需满足两个条件：一是_________________细胞都会死亡；二是保证_________________细胞能生长。

（3）使用合成培养基体外培养杂交瘤细胞时；通常需要加入_________________等一些天然成分，并置于含有_________混合气体的培养箱中进行培养。

（4）制备抗新冠病毒单克隆抗体检测试剂，可用_________________（选填数字标号：①新冠病毒灭活疫苗、②新冠病毒RNA疫苗、③新冠病毒灭活疫苗或RNA疫苗）免疫小鼠，以获得图中的A细胞。25、（1）在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑______、______和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、______、______等优点；因此常作为遗传学研究的实验材料。

（2）在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行________（消毒、灭菌）；操作者的双手需要进行清洗和______；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能__________。

（3）若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的_______。

（4）通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的____________。

（5）培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_________。

（6）若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过_______处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。26、丙肝病毒引起的丙型肝炎可导致肝脏慢性炎症坏死和纤维化；部分患者可能发展为肝硬化甚至肝癌。为研制丙肝病毒的单克隆抗体，某研究者以小鼠为实验材料设计了以下实验流程。回答下列问题：

(1)为使单细胞悬液中的B淋巴细胞产生的抗体中一定含有能与丙肝病毒结合的抗体，需要进行的操作是______。融合之前的两种细胞中，能通过动物细胞培养大量增加数量的是____

(2)诱导细跑融合时利用的病毒表面含有的糖蛋白和一些酶，能够与细胞膜上的______（填化学本质）发生作用，使得细胞互相凝聚，细胞膜上的______重新排布，细胞发生融合。筛选1利用______进行筛选，而筛选2通过多次的_______来完成。

(3)得到大量丙肝病毒单克隆抗体的方法之一是将杂交瘤细胞在体外培养液中进行培养，接入培养液中杂交瘤细胞的量是单克隆抗体产量的重要影响因素之一，为探究一定培养液中接种杂交瘤细胞的最佳数量，实验思路为_______。27、被称为“水中小白鼠”的斑马鱼是一种体长4厘米左右的热带淡水鱼；与人类基因同源性高达87%，并有相似的器官；生理功能和信号通路。由于发育周期短、费用低、体外受精、透明等优点，斑马鱼现在越来越广泛地应用于毒性检测、疾病模型创制、药物筛选等领域中。

研究人员欲通过使胰岛素基因表达受阻从而构建糖尿病模型斑马鱼。吗啉反义寡核苷酸是一种RNA剪接抑制剂；通过将其注入斑马鱼受精卵可阻碍相关基因的表达。针对其作用原理，现有两种假说：

假说1：吗啉反义寡核苷酸导致RNA前体上内含子2的对应序列不能被剪切。

假说2：吗啉反义寡核苷酸导致RNA前体上内含子2和外显子3的对应序列同时被剪切。

为了验证上述假说；研究人员进行了如下实验：

(1)从受精卵发育了3天的实验组和对照组的细胞中提取总RNA，再通过逆转录获得cDNA。若假说1成立，选择上图所示引物2和引物3进行PCR后的结果为______（填字母）。A．实验组有杂交带B．实验组无杂交带C．对照组有杂交带D．对照组无杂交带(2)若要证明假说2成立，进行PCR时，需要选择上图所示引物有____________。

(3)采用PCR技术扩增DNA需要引物的原因是__________________。

(4)为了获取大量斑马鱼胚胎干细胞用于药物筛选，可加入__________________，用于分散斑马鱼囊胚中的__________________。再取分散细胞作为初始材料进行______培养，然后分瓶继续培养。培养瓶中添加输卵管上皮细胞作为______细胞，以提高斑马鱼胚胎干细胞的数量。评卷人得分六、综合题(共4题，共12分)28、由西班牙研究团队在《Science》杂志上刊登的一项最新研究成果表明；当T淋巴细胞的代谢能力发生变化时，体内积累的炎症会让动物未老先衰，出现各种“老年病”。这一成果表明了T淋巴细胞在动物体衰老进程中的重要作用。回答下列问题：

（1）对于多细胞生物而言个体的衰老意味着体内大多数细胞的衰老，生物体内衰老细胞的及时清除体现了免疫系统的___________功能。

（2）有科学家提出可利用人体细胞培养出T淋巴细胞；再通过向人体内适当输入T淋巴细胞来延缓衰老。下面是该设想的流程图。

过程①的培养液中除合成培养基的成分外，还需添加___________等天然成分，同时要保证被培养的细胞处于___________的环境中。进行过程②时，需要先利用___________技术将四种目的基因扩增。iPS细胞是一类具有胚胎干细胞特性的细胞。哺乳动物的胚胎干细胞是由___________中分离出来的一类细胞，在功能上具有发育的___________。过程③的实质是___________。29、玉米是重要经济作物；常受到玉米螟危害而减产。研究人员发现玉米螟若食用某种原核生物分泌的γ—蛋白后将会死亡，由此他们将γ—蛋白基因转入到玉米体内，使玉米获得抗玉米螟危害的能力。据图回答下列问题：

（1）若用限制酶E和F从原核生物基因组DNA上切下γ—蛋白的基因，并将之取代质粒Z1上相应的E—F区域（0.4kb，1kb＝1000对碱基）。图中E、F、G、H是4种识别序列完全不同的限制酶及其部分识别位点，已知用限制酶G切割Z1，只能得到大小为2.5kb的DNA片段，用限制酶E和F切割Z1时，可得到0.4kb和4.6kb的DNA片段。

①质粒Z1上有________个限制酶G的酶切位点，有________个限制酶E的酶切位点。

②若图中所形成的重组质粒Z2的大小为5.4kb，则目的基因的大小是________。

（2）构建的基因表达载体一般具有目的基因和________及标记基因、复制原点等结构，将目的基因导入农杆菌时，需先拼接到特定质粒的________上。最后用接虫法检测玉米是否获得抗玉米螟的能力。

（3）标记基因的作用是________________________。将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是________________。30、尿素是一种重要的农业氮肥；但尿素并不能直接被农作物吸收，土壤中的细菌将尿素分解成氨之后，才能被植物利用。某课题小组从土壤中分离能够分解尿素的细菌并进行计数的过程如图所示。请分析回答下列问题：

(1)图中甲培养基与乙培养基的物理状态不同，二者在成分上的主要区别是______________。乙培养基中为微生物的生长提供氮源的是______________。

(2)调pH之后，通常利用高压蒸汽灭菌锅对培养基进行灭菌。为了确定培养基灭菌效果是否达到要求，可随机取若干_________________，在适宜条件下培养一段时间，观察该培养基是否出现______________；若没有出现，则证明培养基灭菌合格。

(3)在涂布平板前需要对甲中的菌液进行稀释，为确定对菌液的稀释程度是否合适，可采取的方法是________________。

(4)图中所用的计数方法是_______________。利用该方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，原因是____________________________。31、肠道微生物对宿主健康具有重要影响；但目前缺乏对特定菌株进行基因编辑的有效手段。科研人员尝试使用M13噬菌体作为载体，对大肠杆菌进行基因编辑。M13噬菌体与T2噬菌体相似；能够侵染大肠杆菌，但被M13噬菌体侵染的大肠杆菌不发生裂解。

(1)科研人员将绿色荧光蛋白基因特异性序列（sgfp）；Cas酶基因与利用特定方法得到的M13噬菌体的环状DNA进行重组；构建重组基因编辑质粒（pCG）、如图1。

①构建pCG需要用到的工具酶有_____。

②以pCG的绿色荧光蛋白基因特异性序列（sgfp）经_____过程形成的RNA；会靶向结合绿色荧光蛋白基因，从而使Cas酶能够切割绿色荧光蛋白基因。

(2)科研人员将绿色荧光蛋白基因和红色荧光蛋白基因导入大肠杆菌，获得GS菌株。先用添加GS菌株的饲料喂养小鼠，一段时间后，将小鼠分为实验组和对照组。其中，实验组小鼠用添加含_____的M13噬菌体和的_____饲料喂养，以筛选获得肠道微生物被基因编辑的小鼠。本实验对照组使用的质粒不包括图1中的_____。

(3)为确认M13噬菌体作为载体对大肠杆菌进行基因编辑的可行性和特异性；科研人员检测肠道微生物的变化，结果如图2；3所示。

①图2中，标号为b、c的区域分别代表含有红绿叠加色荧光的微生物和无荧光的微生物，a区代表含有_____荧光的微生物。

②解释实验组第0天到第14天肠道微生物荧光类型发生变化的原因：_____。参考答案一、选择题(共5题，共10分)1、B【分析】【分析】

诱导植物细胞融合前；先要采用酶解法（纤维素酶和果胶酶）去除细胞壁，获得原生质体；诱导植物原生质体融合时，可以采用物理方法（电激；振动等）和化学方法（聚乙二醇）；若原生质体均为两两融合，则会形成3种细胞，即矮牵牛细胞自身融合的细胞、枸杞细胞自身融合的细胞，杂种细胞。可利用显微镜筛选得到融合后的杂种原生质体。

【详解】

A；植物体细胞杂交技术能克服远源杂交不亲和的障碍；因此获得该杂种植株时不用考虑两种高等植物间的生殖隔离问题，A正确；

B；诱导植物原生质体融合时不能用灭活的病毒作为诱导剂；B错误；

C；显微镜下可以观察到染色体；因此可利用光学显微镜观察，筛选出杂种原生质体，C正确；

D；若原生质体均为两两融合；则有三种情况，即矮牵牛细胞自身融合、枸杞细胞自身融合、矮牵牛细胞和枸杞细胞融合，因此融合后的细胞中染色体数目可能为28、96或62条，D正确。

故选B。2、D【分析】【分析】

生物武器种类：包括致病菌；病毒、生化毒剂；以及经过基因重组的致病菌等。把这些病原体直接或者通过食物、生活必需品等散布到敌方，可以对军队和平民造成大规模杀伤后果。

【详解】

结合分析可知；生物武器种类包括致病微生物；病毒、生化毒剂，以及经过基因重组的致病菌等，不包括所有微生物，D符合题意。

故选D。3、C【分析】【分析】

1；单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应；之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞，诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养,即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。

2；两次筛选：第一次筛选得到杂交瘤细胞(去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞)；第二次筛选出能够产生特异性抗体的细胞群。

3；杂交瘤细胞的特点：既能大量增殖；又能产生特异性抗体。

4；诱导动物细胞融合的方法有：物理法(离心、振动)、化学法(聚乙二醇)、生物法(灭活的病毒)。

5；单克隆抗体与常规的血清抗体相比；最大的优势在于特异性强，灵敏度高，可大量制备。

【详解】

A；①过程可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理剪碎后的小鼠脾脏；获得分散的细胞，A正确；

B；②过程属于动物细胞融合；诱导动物细胞融合的方法包括化学法(聚乙二醇)和生物法(灭活的病毒)，B正确；

C；②过程属于第一次筛选；需要用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，③过程需要进行抗体阳性检测，无需选择培养基，C错误；

D；④过程属于单克隆抗体扩增；可将细胞注射到小鼠腹腔内或体外培养，从而获得大量单克隆抗体，D正确。

故选C。4、C【分析】【分析】

参与果酒制作的微生物是酵母菌；其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。

【详解】

A；若适当增加酵母菌的接种量；则可以缩短发酵的时间，A正确；

B；酵母菌无氧呼吸产生酒精；酒精具杀菌作用，发酵液中酒精积累是细菌数量降低的原因之一，B正确；

C、酿制果酒时，一般先通入空气，以利于酵母菌大量繁殖。酒精发酵过程中会产生CO2；应适时排放，C错误；

D；葡萄的品质、酵母菌菌种的纯度都会影响果酒的品质；D正确。

故选C。5、C【分析】【分析】

1；盐分能通过提高培养液的渗透压使微生物失水死亡；从而实现防腐抑菌；

2；在发酵初期；盐浓度的提高对真菌及乳酸菌形成有效抑制；

3；发酵过程中；随时检测培养液中的微生物数量，可以更好地了解发酵进程。

【详解】

A；高浓度盐分能通过提高培养液的渗透压使微生物失水死亡；从而实现防腐抑菌，A正确；

B；由表格内容可知；在发酵初期提高盐浓度，对真菌及乳酸菌形成有效抑制，B正确；

C；由表中数据可知；低盐组、中盐组和高盐组的细菌数量随发酵时间推移数量减少；而真菌和乳酸菌数量随着发酵时间的推移呈现先增后减的趋势，C错误；

D；发酵过程中；随时检测培养液中的微生物数量，可以更好地了解发酵进程，D正确。

故选C。二、多选题(共7题，共14分)6、A:B【分析】【分析】

动物细胞培养时；取幼龄动物的组织，剪碎后，用胰蛋白酶处理分散成单个细胞，制成细胞悬浮液，转入细胞培养液中进行的培养是原代培养；当细胞贴满瓶壁，在用胰蛋白酶处理分散成单个细胞，制成细胞悬浮液，转入培养液中进行的是传代培养。

【详解】

A；通常将动物组织经处理后的初次培养称为原代培养；A正确；

B；从机体取得细胞后立即进行培养过程是原代培养；B正确；

C；出现接触抑制现象后；接去下的细胞的培养过程是传代培养，C错误；

D；无论原代培养和传代培养细胞过程；细胞都有在培养基中的悬浮生长过程，D错误。

故选AB。7、A:C【分析】【分析】

质粒是细胞染色体外能够复制得很小的环状DNA分子。广义上说几乎所有的细胞都有质粒(比如线粒体DNA)；狭义上指存在于许多细菌酵母菌；放线菌等生物中的质粒。质粒与染色体DNA一样都是双链DNA分子，质粒亦可携带遗传信息，质粒上面一般含有几个到几百个基因，控制着细菌的抗药性、固.氮、抗生素生成等性状。然而质粒也有一些与染色体DNA不同的特性。

质粒具有以下特点；质粒可以独立复制；质粒很小细菌质粒的分子量乙般较小，约为细菌DNA的0.5%~3%；质粒的存在与否对宿主细胞生存没有决定性作用。

【详解】

A；细菌的遗传物质是DNA；质粒是某些细菌细胞质中小型的环状DNA，质粒的存在与否对宿主细胞生存没有决定性作用，因此，质粒不是细菌细胞不可缺少的遗传物质，A错误；

B；质粒可以独立复制；因此，目的基因与质粒连接后形成重组质粒之后，目的基因可随着质粒DNA的复制而复制，质粒上有基因存在，如质粒上有抗性基因的存在，因此质粒还可控制蛋白质的表达，B正确；

C；细菌细胞不都含有质粒；且每个细菌细胞不都含有一个质粒，C错误；

D；质粒是小型的环状DNA分子；因此，是由4种脱氧核糖核苷酸脱水缩合而成的，D正确。

故选AC。

【点睛】8、A:B:C【分析】【分析】

分析图示可知；将卵子去核，然后注入Oct4转基因小鼠的精子，用氧化锶激活，可使该换核的细胞形成雄原核，并分裂分化形成单倍体囊，最终形成孤雄单倍体胚胎干细胞。

【详解】

A；由于桑椹胚期的细胞没有出现分化；桑椹胚前的细胞都具有发育成完整胚胎的潜能，是全能性细胞，A正确；

B；从题干可知；Oct4基因在维持胚胎干细胞全能性和自我更新中发挥极其重要的作用，可推测Oct4基因的表达有利于延缓衰老，B正确；

C；过程③胚胎干细胞具有胚胎细胞的特性；体积较小，细胞核大，核仁明显，C正确；

D；卵巢中取出来的是未成熟的卵细胞；要进行培养到减数第二次分裂的中期才能受精，不能直接用于过程①，D错误。

故选ABC。

【点睛】9、A:B:D【分析】【分析】

单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应；之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。

【详解】

A；抗原与抗体的结合具有特异性；为制备抗HA单克隆抗体，则使用的B淋巴细胞应取自注射过HA的小鼠脾脏，A正确；

B；在特定的选择培养基上；未融合的亲本细胞（B淋巴细胞类型、骨髓瘤细胞类型）和融合的具有同种核的细胞（B淋巴细胞-B淋巴细胞型和骨髓瘤-骨髓瘤细胞型）都会死亡，B正确；

C；将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后；放入96孔板，不一定都能产生所需抗体，还需进行抗体阳性检测，C错误；

D；据图可知；图中细胞群a在加入HA抗原后呈阳性，说明细胞群a产生了抗HA抗原的抗体，故将图中细胞群a在体外大规模培养，可以提取出大量的抗HA单克隆抗体，D正确。

故选ABD。10、A:B:D【分析】【分析】

植物组织培养中植物激素使用：物组织培养中关键性激素是生长素和细胞分裂素；同时使用生长素和细胞分裂素时；两者用量的比例影响植物细胞的发育方向；先使用细胞分裂素，后使用生长素，细胞既分裂又分化。

【详解】

A；Ⅰ阶段为脱分化；II阶段和Ⅲ阶段为再分化，Ⅰ、II、Ⅲ阶段中会发生基因的选择性表达，A错误；

B；实验至少配制了3种不同的培养基；即形成愈伤组织的培养基、生根培养基和生芽培养基，B错误；

C、由于参照品种B的激素配比（a2＞2.0），以0.5μmol/L为梯度，设计5个浓度水平的实验，则细胞分裂素浓度依次为a2-1.0μmol/L、a2-0.5μmol/L、a2μmol/L、a2+0.5μmol/L、a2+1.0μmol/L，可见细胞分裂素的最高浓度M应设为a2+1.0μmol/L；C错误；

D；生长素和细胞分裂素的配比是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键因素；D正确。

故选ABD。11、A:B:D【分析】【分析】

由题图信息分析可知；通过过程①获得菌悬液，此过程中的淤泥不需要灭菌操作，过程②可以使分解S的细菌大量繁殖（选择培养），过程③通过稀释涂布获得分解S物质的单菌落，过程④再次对各种单菌落进行筛选，经过过程⑤多次筛选后获得高效降解S的菌体。

【详解】

A；甲和乙的培养基均需采用高压蒸汽灭菌；乙与甲不同的是Y，乙的培养基上有菌落生长，说明是固体培养基，因此Y是凝固剂琼脂，A正确；

B、利用稀释涂布平板法对细菌进行计数，要保证每个平板上长出的菌落数为200个，假设稀释倍数为a，在每个平板上涂布100μL（0.1ml）稀释后的菌液，则有200×a÷0.1=2×107，则稀释倍数a=104；B正确；

C；③过程采用的是稀释涂布平板法；其接种工具为涂布器，涂布器需采用灼烧灭菌法进行灭菌，C错误；

D；⑤过程中若S的浓度超过某一浓度时；会导致细菌细胞由于渗透作用失水过多，会抑制菌株的生长，使得菌株对S的降解量可能会下降，D正确。

故选ABD。12、B:C:D【分析】【分析】

转基因动物生产药物中基因来源是药用蛋白基因和乳腺组织特异性表达的启动子；成果是乳腺生物反应器。基因治疗是把正常基因导入病人体内有缺陷的细胞中，使该基因的表达产物发挥功能，从而达到治疗疾病的目的，目前还处于初期的临床试验阶段。转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应；过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。

【详解】

A；转基因技术可以进行基因治疗；但现在技术还不成熟，A错误；

B；由于人们对基因药物持不同观点；所以应科学地认识和评估，保障公众的知情权，B正确；

C；转基因生物的安全性包括食物安全、生物安全和环境安全问题；国家应该设立多环节、严谨的安全性评价机制，C正确；

D；利用转基因工程技术可以使哺乳动物本身变成“批量生产药物的工厂”；如有人将α-抗胰蛋白酶基因转到羊体内生产α-抗胰蛋白酶，D正确；

故选BCD。

【点睛】三、填空题(共9题，共18分)13、略

【解析】①.动物细胞培养和核移植技术、②.动物细胞融合与单克隆抗体14、略

【解析】①.胚胎细胞②.体细胞15、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】提取目的基因、目的基因与运载体结合、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。16、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】2030×22030×2－217、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】2种引物DNA或RNA20—3018、略

【分析】【详解】

蛋白质形成二硫键，使蛋白质的结构更加稳定，因此T4溶菌酶的热稳定性会提高。这项技术属于蛋白质工程技术，其步骤为从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获得所需的蛋白质。【解析】会提高T4溶菌酶的耐热性。这项技术属于蛋白质工程技术，该技术的要点是从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获得所需的蛋白质。19、略

【分析】【详解】

对待生殖性克隆人的研究，我国政府一再重申四不原则：不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验。因为生殖性克隆（也就是克隆人），违反人类繁衍的自然法则，损害人类作为自然人的尊严，会引起严重的道德、伦理、社会和法律问题。所以，现阶段生殖性克隆绝对不可以应用于人类本身。【解析】认同。因为生殖性克隆（也就是克隆人），违反人类繁衍的自然法则，损害人类作为自然人的尊严，会引起严重的道德、伦理、社会和法律问题。所以，现阶段生殖性克隆绝对不可以应用于人类本身。20、略

【分析】略【解析】目的基因标记基因启动子终止子启动子上游RNA聚合酶终止子下游转录标记21、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】个体生物学水平抗虫性状。四、判断题(共2题，共4分)22、A【分析】【详解】

内细胞团将来发育成胎儿的各种组织；滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘。

正确。23、B【分析】【详解】

要对蛋白质的结构进行设计改造；最终必须通过改造基因中的碱基序列来完成，因为基因能指导蛋白质的生物合成。

故错误。五、实验题(共4题，共16分)24、略

【分析】【分析】

1；动物细胞培养注意事项：

（1）原理：细胞增殖。

（2）培养基性质：液体培养基。动物细胞培养所用的培养基的成分与体内细胞基本相同；如需要有葡萄糖；氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、动物血清或血浆，还有适量的抗生素以保证无菌环境。

（3）需要使用动物血清。

（4）适宜的温度：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4。

（5）无菌条件下进行。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素；以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。

（6）气体环境：95%空气+5%CO2。O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。

2；单克隆抗体的制备：

（1）单克隆抗体制备的原理包括：①免疫原理：B淋巴细胞能产生特异性抗体。②细胞融合原理：利用病毒对宿主细胞的穿透性使B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合。③动物细胞培养技术：对杂交瘤细胞进行体内；体外培养。

（2）单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应；之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。

（3）制备单克隆抗体过程中的几种细胞：①免疫B细胞（浆细胞）：能产生单一抗体；但不能无限增殖。②骨髓瘤细胞：能无限增殖，但不能产生抗体。③杂交瘤细胞：既能产生单一抗体，又能在体外培养条件下无限增殖。

（4）动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性；细胞的增殖。动物细胞融合诱导手段有电刺激、聚乙二醇、灭活的病毒等；结果产生杂交细胞。

【详解】

（1）若细胞B是小鼠的骨髓瘤细胞；则此过程可以为单克隆抗体的制备过程。故A是已经免疫的B淋巴细胞或能产生特定抗体的B细胞。动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性；细胞的增殖。动物细胞融合诱导手段（诱导d过程）有电刺激、聚乙二醇、灭活的病毒等，结果产生杂交细胞。

（2）一般来说；诱导A细胞和B细胞融合，形成C细胞后，必须利用选择培养基来筛选出目的细胞。那么满足的条件必须是：未融合的（亲本）细胞和融合的同种（核的）细胞都会死亡，而杂交（瘤）细胞（或杂种细胞）能够在选择培养基上生长。

（3）动物细胞培养注意事项：一是液体培养基。动物细胞培养所用的培养基的成分与体内细胞基本相同，如需要有葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、动物血清或血浆，还有适量的抗生素以保证无菌环境。二是气体环境：95%空气+5%CO2。

（4）选用免疫原性好的细菌；病毒、立克次体、螺旋体等；经人工培养，再用物理或化学方法将其杀灭制成疫苗，即为灭活疫苗。而新冠病毒为RNA病毒，选用RNA疫苗都可以。故选③新冠病毒灭活疫苗或RNA疫苗。

【点睛】

本题考查动物细胞培养、单克隆抗体制备的相关知识，意在考查考生理解所学知识要点，把握知识间内在联系的能力；能运用所学知识与观点，对某些现实生活中的生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或得出正确的结论。【解析】经过（抗原、病原体）免疫的（小鼠）B（淋巴）细胞（或浆细胞，或已免疫的B细胞，或能产生特定抗体的B细胞）聚乙二醇（PEG）、灭活的（仙台）病毒、电激（或电融合）未融合的（亲本）细胞和融合的同种（核的）细胞杂交（瘤）细胞（或杂种细胞））血清（或血浆）95%空气和5%CO2③25、略

【分析】【分析】

1；大肠杆菌属于细菌；是原核生物。微生物营养成分主要有碳源、氮源、水和无机盐等，另外还需要注意渗透压、温度、pH等条件。大肠杆菌常作为遗传学研究的实验材料．微生物培养的关键是无菌技术，防止外来杂菌的污染。

2；微生物培养的关键是无菌操作。使用强烈的理化因素杀死物体内外一切微生物的细胞、芽孢和孢子的过程称为灭菌；常用的方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌。消毒是指用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体体表或内部的一部分微生物的过程。常用的方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线或化学药物消毒法等。

【详解】

（1）大肠杆菌具有体积小；结构简单、变异类型容易选择、易培养、生活周期短等优点；培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑温度、酸碱度和渗透压等条件。

（2）灭菌使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物；所以对培养基和培养皿进行灭菌；消毒使用较为温和的物理或化学方法，仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物，操作者的双手需要进行清洗和消毒，紫外线能使蛋白质变性，还能损伤DNA的结构。

（3）稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释；然后将不同稀释度的菌液，分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，应保证样品稀释的比例适合。

（4）对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状；大小等菌落特征对细菌进行初步的鉴定。

（5）培养大肠杆菌时；在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生。

（6）因为有的大肠杆菌会释放一种强烈的毒素；并可能导致肠管出现严重症状，使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。

【点睛】

本题主要考查微生物培养的相关知识，要求考生能够识记大肠杆菌的培养条件以及其作为遗传实验的优点，区分掌握不同材料消毒和灭菌的方法，识记菌种鉴定的方法等，属于基础题。【解析】①.温度②.酸碱度③.易培养④.生活周期短⑤.灭菌⑥.消毒⑦.损伤DNA的结构⑧.比例合适⑨.鉴定(或分类)⑩.将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生.⑪.灭菌26、略

【分析】【分析】

单克隆抗体的制备过程：（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原；然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。（2）获得杂交瘤细胞：①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合；②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。（3）克隆化培养和抗体检测。（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。

【详解】

（1）用丙肝病毒对小鼠进行免疫后；小鼠的B淋巴细胞能产生抗丙肝病毒的抗体，从该小鼠的脾细胞中能获得产生该抗体的B淋巴细胞。B淋巴细胞在体外培养条件下不能无限增殖，而骨髓瘤细胞能无限增殖，故融合之前的两种细胞中，能通过动物细胞培养大量增加数量的是骨髓瘤细胞。

（2）诱导细胞融合的病毒表面含有的糖蛋白和一些酶；能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使得细胞互相凝聚，细胞膜具有一定的流动性，在灭活病毒的诱导下，其上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜会发生融合。细胞融合后产生的融合细胞有B细胞间的融合；骨髓瘤细胞间的融合及B细胞和骨髓瘤细胞的融合，会产生三类细胞。筛选1是指利用选择培养基进行筛选得到杂交瘤细胞。由于杂交瘤细胞产生的抗体除了抗丙肝病毒的抗体外，还可能有其他类型，故筛选2是指进行多次的克隆化培养和专一性抗体检测，以得到能产生所需抗体的杂交瘤细胞。

（3）实验的自变量是培养液中接种杂交瘤细胞的数量，因变量为一定时间内抗丙肝病毒抗体的数量，除自变量外，其他条件要相同且适宜。所以实验思路为：将适宜的动物细胞培养液分为体积相同的几组（可自设组数）。在不同组别中接种不同量的能产生丙肝病毒的单克隆抗体的杂交瘤细胞，一定时间后测定培养液中的抗体含量。【解析】(1)给小鼠注射丙肝病毒使小鼠产生免疫反应骨髓瘤细胞。

(2)糖蛋白蛋白质分子和脂质分子选择培养基克隆化培养和抗体检测。

(3)将适宜的动物细胞培养液分为体积相同的几组（可自设组数）。在不同组别中接种不同量的能产生丙肝病毒的单克隆抗体的杂交瘤细胞，一定时间后测定培养液中的抗体含量27、略

【分析】【分析】

根据题干信息分析；糖尿病模型斑马鱼的构建的原理是使胰岛素基因表达受阻，而使胰岛素基因表达受阻是通过给斑马鱼受精卵注射吗啉反义寡核苷酸实线的；吗啉反义寡核苷酸是一种RNA剪接抑制剂，其作用的机理有两种假说：可能是导致RNA前体上内含子2的对应序列不能被剪切，也可能是导致RNA前体上内含子2和外显子3的对应序列同时被剪切。

(1)

根据引物2和引物3在胰岛素基因片段上的位置；通过PCR扩增能得到内含子2的序列，若假说1成立，即吗啉反义寡核苷酸导致RNA前体上内含子2的对应序列不能被剪切，故实验组中应含有内含子2的序列，而对照组的该片段被切除了，因此用引物2和引|物3进行PCR反应，其结果为实验组中有杂交带，而对照组中无杂交带。

故选AD。

(2)

若要证明假说2成立；即RNA前体上内含子2和外显子3的对应序列同时被剪切下去，则可以选择图示引物5和引物2；引物5和引物6进行PCR，观察是否有杂交带出现。

(3)

由于DNA聚合酶不能从头合成DNA；而只能从引物3′端延伸DNA链，因此DNA复制需要引物。

(4)

用胰蛋白酶处理斑马鱼囊胚中的内细胞团；可以获得分散的斑马鱼胚胎干细胞，然后对其进行原代培养，接着分瓶继续培养。培养瓶中添加输卵管上皮细胞作为饲养层细胞，以提高斑马鱼胚胎干细胞的数量。

【点睛】

解答本题的关键是掌握基因的表达的相关知识点，明确基因转录出来的mRNA是要经过加工成为成熟的mRNA才能作为翻译的模板的，并能够根据题干提取有效信息进行答题。【解析】(1)AD

(2)5、65；2

(3)DNA聚合酶不能从头合成DNA；只能从3′端延伸DNA链，因此DNA复制需要引物。（得分点：“只能从3′端延伸DNA链”）

(4)胰蛋白酶内细胞团原代饲养层六、综合题(共4题，共12分)28、略

【分析】【分析】

动物细胞培养需要满足以下条件：

（1）充足的营养供给--微量元素；无机盐、糖类、氨基酸、促生长因子、血清等。

（2）适宜的温度：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4。

（3）无菌；无毒的环境：培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素；以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。

（4）气体环境：95%空气+5%CO2。O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。

（1）

生物体内衰老细胞的及时清除体现了免疫系统的监控和清除功能。

（2）

过程①是动物细胞培养；其培养液中除合成培养基的成分外，还需添加一定量的血清；血浆等天然成分，同时要保证被培养的细胞处于无菌、无毒的环境中。过程②是将目的基因导入受体细胞，导入前需要先利用PCR技术将四种目的基因扩增。iPS细胞是一类具有胚胎干细胞特性的细胞。哺乳动物的胚胎干细胞是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞，在功能上具有发育的全能性特点。过程③是细胞分化，其实质是基因的选择性表达。

【点睛】

本题以输入T细胞延缓衰老为情境，考查T细胞、动物细胞培养和基因工程技术的流程等知识，旨在考查考生的理解能力、实验与探究能力和综合运用能力，以及生命观念和科学思维的核心素养。【解析】（1）监控和清除。

（2）血清或血浆无菌、无毒PCR早期胚胎或原始性腺全能性基因的选择性表达29、略

【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：1；目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成；2、基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等；3、将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法；4、目的基因的检测与鉴定：（1）分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术；（2）个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

（1）①据题意质粒Zl大小为0.4+0.8+3.2+0.6=5.0kb。已知用限制酶G切割Z1，只能得到大小为2.5kb的DNA片段，可知质粒Z1上有5.0÷2.5=2个限制酶G的酶切位点。由用限制酶E和F切割Z1时，可得到0.4kb和4.6kb的DNA片段；结合图解可知，质粒Z1上有1个限制酶E的酶切位点。

②据题意，用限制酶E和F切割Z1后得到的Z1片段大小为4.6kb，若图中所形成的重组质粒Z2的大小为5.4kb，则目的基因的大小是5.4-4.6=0.8kb。

（2）基因表达载体的组成包括启动子；终止子、目的基因、标记基因和复制原点等结构。农杆菌中的Ti质粒上的T−DNA可转移至受体细胞；并且整合到受体细胞染色体的DNA上，故将目的基因导入农杆菌时，需先拼接到特定质粒的T—DNA。最后用接虫法检测玉米是否获得抗玉米螟的能力。

（3）标记基因的作用是检测目的基因是否导入受体细胞；将含有目的基因的受体细胞筛选出来。将目的基因导入受体细胞时；根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是农杆菌转化法。

【点睛】

本题考查基因工程的有关知识，解答本题的关键是识记基因工程的操作工具及具体的操作步骤，掌握各步骤中的相关细节，能结合题干