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实验二环境因素对微生物的影响

P.188-204（一）实验目的1.了解温度对微生物生长的影响；2.了解抗生素（青霉素、氨苄青霉素）的抗菌范围，学习抗菌谱试验的基本方法。3、了解消毒剂（酒精）对微生物分布的影响。4、了解紫外线杀菌对微生物的作用特点（二）实验原理1.温度:温度是影响微生物生长与存活的最重要因素。自然界的微生物可根据对温度的适应性分为低温型、中温型和高温型。但不管哪一种温度型的微生物，都有生长温度范围。分为最高、最适和最低生长温度。在最适宜温度里生长良好：超过最高温度细胞死亡；低于最低温度细胞被抑制或死亡。比如本实验中用到的氨苄青霉素，对革兰氏阳性球菌、变形杆菌、沙门氏菌、痢疾杆菌、产气荚膜杆菌、大肠杆菌及流感杆菌等都有很好的抗菌效果。3、化学消毒剂对微生物分布的影响人体皮肤分布着一定种类与数量的微生物。使用化学消毒剂对皮肤进行表面消毒是医院里进行无菌操作常用的方法之一。4、紫外线的杀菌作用波长为200-300nm的紫外线都有杀菌能力，其中以260nm的杀菌能力最强。其杀菌机理是抑制DNA复制，以及产生臭氧和H2O2而产生一定的杀菌作用。但紫外线穿透力弱，一般适用于表面消毒和空气消毒。（三）实验步骤1.温度对微生物生长的影响（每组）：A.菌种：大肠杆菌、枯草芽孢杆菌；B.取肉汤培养基5支（液体培养基）；C.分别接种大肠杆菌和枯草芽孢杆菌各2支试管，余下一支不接种作阴性对照；D.分别取接种的培养基各1管，于100℃作用15min后取出，37℃培养；E.培养24h后观察现象。2.抗生素对微生物生长的影响A.菌种：大肠杆菌（G－）、金黄色葡萄球菌（G＋）B.用接种环取菌体，轻放在平板上（大培养皿）；C.将无菌的棉签在无菌水中润湿；D.用湿润的无菌棉签将平板上的菌体均匀涂布；E.用无菌镊子取4种不同的抗生素药敏片各1个，贴在平板上

注意：在贴滤纸条时不要在培养基上拖动滤纸条，避免抗生素溶液在培养基中扩散时分布不均匀。F.2种不同的菌各做1个平板，每组2个平板。G.平板于37℃培养24h后观察实验现象。3、化学消毒剂对微生物分布的影响A.将1个营养琼脂平板平板分为4个区域；B.2名同学直接用手指在平板的2个区域划之字形，待用碘酒/酒精消毒后，稍候片刻，再在另外2个区域划之字形；2人1个平板，每组2个平板。C.平板于37℃培养24h后观察实验现象。4、紫外线的消毒作用（穿透作用）A.菌种：大肠杆菌（也可作2种菌）B.用接种环取菌体，轻放在平板上；C.将无菌的棉签在无菌水中润湿；D.用湿润的无菌棉签将平板上

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