2025年人教版选择性必修3生物下册月考试卷

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年人教版选择性必修3生物下册月考试卷127考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五总分得分评卷人得分一、选择题(共6题，共12分)1、番茄叶片受害虫的损伤后；叶肉细胞迅速合成蛋白酶抑制剂，抑制害虫的消化作用。人们尝试将番茄的蛋白酶抑制剂基因导人玉米，以对付猎獗的玉米螟。下图为培育转基因抗虫玉米的流程图，下列叙述正确的是（）

A.用限制性核酸内切酶切割番茄的DNA得到的产物就是蛋白酶抑制剂基因B.用氯化钙处理玉米受体细胞，有利于含目的基因的重组质粒导入C.重组Ti质粒应有DNA聚合酶识别和结合的部位，以启动蛋白酶抑制剂基因的转录D.若将目的基因导入二倍体玉米的花粉细胞，通过花药离体培养，再用秋水仙素处理单倍体植株，可获得稳定遗传的转基因玉米2、下列关于基因工程中操作工具的叙述，不正确的是（）A.限制性内切酶识别并在特定位置断开磷酸二酯键B.处理载体和处理目的基因的限制酶通常是相同的C.载体中常以抗生素抗性基因作为标记基因D.HIV病毒可以直接作为基因工程的载体3、关于微生物的实验室培养和菌种保存的叙述，正确的是（）A.平板划线法和稀释涂布平板法分别用的接种工具是涂布器和接种环B.若液体培养基需震荡培养，其目的是使微生物分布均匀以便涂布C.长期保存的菌种，需放在-20℃的冷冻箱中保存D.斜面培养基中含有大量营养物，可以长期保存菌种4、CRISPR基因编辑技术；是利用CRISPR工具特异性对DNA分子进行编辑的技术。如图所示，利用定制的RNA序列特异性识别目标DNA，再由Cas9蛋白将目标DNA进行剪切。这样便可以对其进行拼接与编辑。下列有关CRISPR基因编辑技术的叙述错误的是（）

A.该技术利用了碱基互补配对的原理B.定制RNA序列可识别、切割DNA上的目标位点C.Cas9蛋白相当于--种限制性核酸内切酶D.运用该技术也可以使基因沉默（不再表达）5、下列有关菊花组织培养的叙述，错误的是（）A.菊花组织培养的全过程都要在有光条件下进行B.为防止杂菌污染，所用器械需灭菌，实验人员需进行无菌操作C.切取幼嫩的菊花茎段，因为该部位容易诱导形成愈伤组织D.实验中，用酒精和次氯酸钠溶液对外植体消毒6、下图表示核移植与克隆动物的相关图解，有关叙述错误的是（）

A.用于核移植的供体细胞①一般都选用传代10代以内的细胞B.选用去核卵母细胞的主要原因是其细胞质可使体细胞核的全能性表达C.采集的卵母细胞培养到的②时期表示减数第二次分裂中期D.图示过程说明高度分化的动物细胞仍具有发育的全能性评卷人得分二、多选题(共7题，共14分)7、2019年，中国科学院神经科学研究所利用CRISPR—Cas9基因编辑技术，用基因敲除的猴的体细胞通过克隆技术培育出5只克隆疾病猴。下列相关叙述错误的是（）A.克隆猴基因组成差异小，可减少个体差异对实验的干扰B.受精卵经基因编辑后形成的胚胎都成功发育为克隆疾病猴C.克隆疾病猴有助于研究该疾病致病机制和开发相应药物D.可以运用该基因编辑技术进行生殖性克隆人的研究8、下列有关生殖细胞的发生和受精过程的叙述正确的是（）A.雄原核形成的同时，卵子完成减数第二次分裂B.透明带反应是防止多精入卵的第一道屏障C.精子与卵细胞膜相互融合，精子入卵D.卵子是从动物的初情期开始，经过MⅠ和MⅡ两次连续分裂形成的9、科研人员利用甲、乙两种植物的各自优势，通过植物细胞工程技术培育高产、耐盐杂种植物的过程中，相关操作不合理的是（）A.利用胰蛋白酶分别处理甲、乙植物以获得原生质体B.利用电激或灭活的病毒诱导甲、乙原生质体的融合C.利用秋水仙素诱导组织培养中愈伤组织细胞壁再生D.将组培苗种在高盐环境中以便筛选中所需杂种植株将组培苗种在高盐环境中以便筛选出所需杂种植株10、RNA经逆转录后再进行PCR扩增的技术称为RT－PCR，过程如图所示。下列相关叙述正确的是（）

A.过程①需要RN逆转录酶、引物、核糖核苷酸等条件B.真核细胞的mRNA经过程①②获得的DNA无内含子片段C.过程③PCR扩增时引物中的CG含量会影响退火温度D.RT－PCR技术可应用于新冠病毒（RNA病毒）的核酸检测11、利用胶体金检测技术检测抗原最常用的是双抗夹心法。双抗夹心法需要准备待测抗原的配对抗体；一个抗体用胶体金标记（即胶体金标记抗体）并固定在结合垫上，另一个抗体固定在NC膜的检测线（T线）上。另外，还需要准备能与金标抗体特异性结合的二抗并固定于NC膜的控制线（C线）上，如图所示。下列说法错误的是（）

A.样品中含有待测抗原时，T线和C线均会显色B.图中的抗体都需要与抗原结合C.结合垫是为了固定金标抗体D.若T线不显色说明检测结果无效12、下列关于现代生物技术的叙述正确的是（）A.从酵母菌细胞中提取到人干扰素说明相应的目的基因完成了在受体细胞中的表达B.在植物细胞与组织培养中，花药不能作为组织培养的材料C.在动物细胞培养中，用胰蛋白酶处理肝组织可获得单个肝细胞D.多种显微操作和处理技术使体外受精、胚胎移植和胚胎分割成为可能13、下列关于试管婴儿和克隆猴的叙述，错误的是（）A.受精过程中，透明带和卵细胞膜的反应保证了受精卵染色体数目的正常B.克隆猴的性状表现与细胞核供体的一模一样，体现了动物细胞核具有全能性C.试管婴儿的生殖方式属于无性生殖，克隆猴的生殖方式属于有性生殖D.“设计试管婴儿”与“试管婴儿”在操作上唯一的区别是前者需要进行遗传学诊断评卷人得分三、填空题(共6题，共12分)14、最常用的载体是______，它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外，并具有______能力的_____。15、目的基因是指：______16、纯化DNA，去除杂质有________________个方案。17、在___________条件下，DNA与___________反应呈现______________，因此_____________可以作为鉴定DNA的试剂。18、在我国市场上究竟有多少种转基因产品呢？一位同学带着这样的问题，进行了调查并将结果归纳成下图｡

对该同学的调查和归纳结果，有人表示认同，有人提出质疑｡质疑者认为：目前我国市场上根本没有大豆､玉米或甜菜的转基因产品｡我们的观点是什么_____？19、某种微生物合成的一种蛋白酶与人体消化液中某种蛋白酶的结构和功能很相似，只是前者热稳定性较差，进入人体后容易失效。尝试根据本节课所学知识提出改造该种微生物蛋白酶的思路_________。评卷人得分四、判断题(共2题，共18分)20、制备单克隆抗体时，2次筛选的目的不同。()____A.正确B.错误21、要对蛋白质的结构进行设计改造，最终必须通过改造氨基酸序列来完成。（选择性必修3P94）()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共4题，共32分)22、为生产具有特定性能的α-淀粉酶；研究人员从某种海洋细菌中克隆了α-淀粉酶基因（1656个碱基对），利用基因工程大量制备琢α-淀粉酶，实验流程见下图。请回答下列问题：

（1）利用PCR技术扩增α-淀粉酶基因前；需先获得细菌的_________。

（2）为了便于扩增的DNA片段与表达载体连接；需在引物的____端加上限制性酶切位点，且常在两条引物上设计加入不同的限制性酶切位点，主要目的是________________。

（3）进行扩增时；反应的温度和时间需根据具体情况进行设定，下列选项中_______的设定与引物有关，________的设定与扩增片段的长度有关。（填序号）

①变性温度②退火温度③延伸温度④变性时间⑤退火时间⑥延伸时间。

（4）下图表示筛选获得的工程菌中编码α-淀粉酶的mRNA的部分碱基序列：

图中虚线框内mRNA片段包含___个密码子；如虚线框后的序列未知，预测虚线框后的第一个密码子最多有__种。

（5）获得工程菌表达的α-淀粉酶后；为探究影响酶活性的因素，以浓度为1%的可溶性淀粉为底物测定酶活性，结果如下：

。缓冲液。

50mmol/LNa2HPO4-KH2PO4

50mmol/LTris-HCl

50mmol/LGly-NaOH

pH

6．0

6．5

7．0

7．5

7．5

8．0

8．5

9．0

9．0

9．5

10．0

10．5

酶相对活性%

25．4

40．2

49．8

63．2

70．1

95．5

99．5

85．3

68．1

63．7

41．5

20．8

根据上述实验结果，初步判断该α-淀粉酶活性最高的条件为______。23、厨余垃圾废液中的淀粉；蛋白质、脂肪等微溶性物质可以被微生物分解并利用；但由于初期有益微生物数量相对较少，存在发酵周期长、效率低等缺点，极易对环境造成污染。

（1）为探究圆褐固氮菌和巨大芽孢杆菌处理某厨余垃圾废液的最佳接种量比；用于制备微生物菌剂，研究者做了如下实验：

①将两种菌液进行不同配比分组处理；如下表所示：

。编号R0R1R2R3圆褐固氮菌∶巨大芽孢杆菌1∶00∶11∶12∶1将等量上表菌液分别接种于100mL_____中进行震荡培养。本实验中对照组的处理应为_____。

②培养3天后测定活菌数。取各组菌液采用_____法接种于基本培养基中，培养一段时间后选取菌落数在_____范围内的平板进行计数；并依据菌落的形态特征对两种菌进行区分，实验结果见图。

由实验结果可知，两种菌混合接种时有效菌落数均大于单独接种，从代谢产物角度分析，原因可能是______________。接种量比例为_____________时；废液中两菌的有效活菌数最多。

（2）为进一步探究菌种比例对该厨余垃圾废液中蛋白质；脂肪等有机物的降解效果；测得15天内废液中蛋白质、脂肪的含量变化如下图所示：

由实验结果可知，对该厨余垃圾废液中蛋白质、脂肪的降解效果最好的两种菌接种比分别为_____、_____。

（3）固态厨余垃圾因富含粗纤维、蛋白质、淀粉等物质，可以通过蒸发、碾磨、干燥等方式进行加工，使加工后的产物在微生物的作用下形成有机复合肥等肥料；收集微生物处理后的厨余垃圾残渣，经晾晒干后制成蛋白饲料；通过以上处理可实现_____（选填选项前的符号）。

A．物质循环再生B．能量多级利用C．提高能量传递效率24、玉米是重要的粮食作物；其叶片细胞中的P蛋白是一种水通道蛋白，由P基因编码，在植物生长发育过程中对水分的吸收具有重要的调节功能。科研人员成功培育出超量表达P蛋白转基因玉米，所用DNA片段和Ti质粒的酶切位点如图所示，请回答下列问题：

(1)强启动子是一段有特殊结构的DNA片段，能被_______识别并结合，驱动基因的持续转录，如将强启动子插入到玉米叶绿体某基因内部，可获得该基因_______突变株。为使P基因在玉米植株中超量表达，应优先选用_______酶组合，将Ti质粒切开后构建重组表达载体。T-DNA在该实验中的作用是_______。

(2)将农杆菌浸泡过的玉米愈伤组织去菌后进行组织培养，培养基中需加入_______进行筛选，此物质属于氨基糖苷类抗生素，它能抑制蛋白质在叶绿体和线粒体中合成，使植物的光合作用和_______受到干扰；从而引起植物细胞死亡。

(3)愈伤组织是一种相对没有分化的_______团，经液体悬浮培养叮以分散成胚性细胞，在适宜的培养基中，这种单细胞可以发育成_______；再继续发育成转基因玉米株系。

(4)影响玉米愈伤组织能否成功再生出植株的因素有植物激素的配比、愈伤组织继代次数以及_______等。目前，组织培养过程中培养瓶常用透气封口膜封口，目的是_______。25、番茄果实在成熟的过程中；多聚半乳糖醛酸酶（PG）合成显著增加，以降解果胶使细胞壁破损，从而使果实变红变软，但不利于保鲜。科学家利用基因工程得到转基因番茄，大大延长果实保质期。操作流程如下，回答下列问题：

（1）利用RT—PCR技术即逆转录—多聚酶链式反应制备PG基因，最好从番茄的_____细胞中提取mRNA，此技术所需要的酶主要有_____。

（2）据图可知，转基因番茄主要通过抑制PG基因的_____过程；使PG合成量减少，从而延长果实保质期。

（3）图中的农杆菌。能够在含_____的培养基中生存，而在含_____的培养基中不能生存的即为已转化的所需农杆菌。

（4）图中将反向连接PC基因导入番茄细胞的方法称为_____。要检测感染农杆菌后的番茄细胞染色体DNA上是否插入了反向连接PC基因，_____（填“能”或“不能”）用标记的PG基因的单链作为探针进行检测，理由是_____。

（5）在将转化的番茄细胞通过植物组织培养技术形成番茄幼苗过程中，培养基_____（填“要”或“不要”）添加有机营养物质，原因是_____。参考答案一、选择题(共6题，共12分)1、D【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因；启动子、终止子和标记基因等。

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同；导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法；基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

（4）目的基因的检测与鉴定：

分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。

个体水平上的鉴定：抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

A；用限制性核酸内切酶切割番茄的DNA得到的产物不一定是蛋白酶抑制剂基因；需要进行筛选，A错误；

B；将番茄的蛋白酶抑制基因转入玉米细胞时；最常采用的方法是农杆菌转化法，氯化钙用于处理微生物，B错误；

C；重组Ti质粒应有RNA聚合酶识别和结合的部位；即启动子，以启动蛋白酶抑制剂基因的转录，C错误；

D；若将目的基因导入玉米花粉细胞；通过花药离体培养和秋水仙素处理可获得稳定遗传的转基因玉米，D正确。

故选D。

【点睛】2、D【分析】【分析】

基因工程的操作工具有限制酶；DNA连接酶和运载体。

【详解】

A；一种限制酶只能识别特定的DNA序列；且在特定的位点打开磷酸二酯键，A正确；

B；常用同种限制酶处理载体和目的基因；以产生相同的黏性末端，B正确；

C；载体中常以抗生素抗性基因作为标记基因；在培养基中添加相应的抗生素以筛选含目的基因的细胞，C正确；

D；HIV病毒需要经过改造才能作为基因工程的载体；D错误。

故选D。

【点睛】3、C【分析】【分析】

微生物常见的接种的方法：

①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在划线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后；均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

菌种保藏的原理：是为了达到长期保持菌种的优良特性；核心问题是必须降低菌种变异率，而菌种的变异主要发生于微生物旺盛生长；繁殖过程，因此必须创造一种环境，使微生物处于新陈代谢最低水平，生长繁殖不活跃状态；常用的方法有临时保存法和甘油管藏法。

【详解】

A；平板划线法的接种工具是接种环；稀释涂布平板法的接种工具是涂布器，A错误；

B；若液体培养基需震荡培养；其目的是增加培养液的溶氧，为微生物呼吸作用提供充足的氧气，B错误；

C；长期保存的菌种；采用甘油管藏的方法，需放在-20℃的冷冻箱中保存，C正确；

D；斜面培养基保存菌种的方式是临时保存的；菌种容易发生突变，所以不能长期保存菌种，D错误。

故选C。

【点睛】4、B【分析】【分析】

限制性核酸内切酶是可以识别并附着特定的核苷酸序列；并对每条链中特定部位的两个脱氧核糖核苷酸之间的磷酸二酯键进行切割的一类酶，简称限制酶。

【详解】

A、该技术能利用RNA与目标DNA相互识别，利用了RNA与DNA的碱基互补配对，A正确；

B、利用定制的RNA序列特异性识别目标DNA，再由Cas9蛋白将目标DNA进行剪切，B错误；

C、Cas9蛋白能对目标DNA进行剪切，相当于一种限制性核酸内切酶，C正确；

D、如果对目标基因的启动子序列进行编辑，当然有可能使其无法转录表达，D正确。

故选B。5、A【分析】【分析】

植物组织培养的过程为：离体的植物组织；器官或细胞经过脱分化（避光）形成愈伤组织；愈伤组织经过再分化（需光）过程形成胚状体，进一步发育形成植株。

【详解】

A；对于菊花的组织培养来说；在外植体脱分化形成愈伤组织的过程中不需要光照，A错误；

B；无菌技术包括消毒和灭菌；植物组织培养需要无菌操作，防止杂菌污染，所用器械需灭菌，实验人员需消毒操作，B正确；

C；菊花组织培养时；切取幼嫩的菊花茎段，因此这部分分裂能力强，容易诱导形成愈伤组织，C正确；

D；对外植体消毒所用的试剂是体积分数为70%的酒精和质量分数为5%左右的次氯酸钠溶液；D正确。

故选A。6、D【分析】【分析】

全能性是指已经分化的细胞仍然具有发育成完整个体的潜能。每个细胞都含有该个体的整个基因组；这是细胞具有全能性的基础。选用去核卵（母）细胞的原因：卵（母）细胞大，容易操作；卵（母）细胞质多，营养丰富；含有促使细胞全能性表达的物质。

【详解】

A；用于核移植的供体细胞一般都选用传代10代以内的细胞；原因是10代以内的细胞能保持正常的二倍体核型，A正确；

B；在目前现有技术条件下；还不能将从动物体内分离出来的成熟的体细胞直接培养成一个新个体，而是必须将体细胞的细胞核移植到去核的卵细胞中才能发育成新个体，因为卵细胞的细胞质可使体细胞细胞核全能性得到表达，B正确；

C；体外受精时精子需要经过获能处理；采集的卵母细胞培养到②减数第二次分裂中期，才具有受精能力，C正确；

D；供体细胞核移入去核卵母细胞中；能发育成有克隆动物，这说明分化的动物细胞核具有全能性，D错误。

故选D。二、多选题(共7题，共14分)7、B:D【分析】【分析】

动物细胞核移植技术是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中；使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。

【详解】

A；5只克隆疾病猴是由猴的体细胞通过克隆技术（属于无性繁殖）获得的；所以其基因组成差异小，可减少个体差异对实验的干扰，A正确；

B；经基因编辑后形成的胚胎不一定都能发育成克隆疾病猴；B错误；

C；克隆疾病猴有助于研究该疾病致病机制和开发相应药物；C正确；

D；不能利用该技术进行克隆人的研究；D错误。

故选BD。

【点睛】8、A:B:C【分析】【分析】

在受精作用过程中；精子头部的顶体首先释放顶体酶，发生顶体反应；然后精子穿越放射冠和透明带，此时透明带发生透明带反应，这是防止多精入卵的第一道屏障；接着精子进入卵黄膜，此时会发生卵黄膜封闭作用；此时卵细胞才真正完成减数分裂，并释放第二极体；精子的细胞核和卵细胞的细胞核分别形成雄原核和雌原核，即雌；雄原核的形成；最后核膜消失，雌、雄原核融合，标志着受精作用的完成。

【详解】

A；雄原核形成与卵子完成减数第二次分裂是同时进行的；A正确；

B；精子触及卵黄膜的瞬间；发生透明带反应，阻止其他精子进入，是防止多精入卵受精的第一道屏障，B正确；

C；精子的细胞膜与卵黄膜融合后；精子入卵，C正确；

D；卵子的发生开始于胎儿期性别分化之后；减数第一次分裂和减数第二次分裂是不连续的，D错误。

故选ABC。

【点睛】9、A:B:C【分析】【分析】

植物体细胞杂交的过程：在融合前需要使用酶解法（纤维素酶和果胶酶）去除植物的细胞壁；再用化学法（聚乙二醇）或物理法（振动；离心、电刺激）诱导原生质体融合，需要注意的是诱导植物原生质体的融合时不用生物方法（灭活的病毒）；细胞融合完成的标志是融合细胞再生出新的细胞壁；获得融合细胞后需利用植物的组织培养技术将细胞培育成植株，故植物体细胞杂交技术的最终目的是培育具有优良性状的植物新品种。

【详解】

A；由于植物细胞壁的成分主要是纤维素和果胶；根据酶的专一性特点，应利用纤维素酶和果胶酶处理甲乙植物以获得原生质体，A错误；

B；灭活的病毒是诱导动物细胞融合的特有方法；不能用于诱导植物原生质体的融合，B错误；

C；秋水仙素可以抑制纺锤体的形成从而诱导植物染色体数目加倍；不能用于诱导愈伤组织细胞壁的再生，C错误；

D；因本操作的目的是培育高产、耐盐杂种植物；故将组培苗种在高盐环境中以便筛选中所需杂种植株将组培苗种在高盐环境中以便筛选出所需杂种植株，属于个体生物学水平的检测，D正确。

故选ABC。10、B:C:D【分析】【分析】

PCR技术：1；概念：PCR全称为聚合酶链式反应；是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。2、原理：DNA复制。3、前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物。4、条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）5、过程：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开）；低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。

【详解】

A；过程①是由mRNA形成单链DNA的过程；表示逆转录，需要RNA、逆转录酶、引物、脱氧核苷酸等条件，A错误；

B；真核细胞中DNA的外显子部分转录的RNA拼接形成mRNA；因此真核细胞的mRNA经过程①②逆转录过程获得的DNA无内含子片段，B正确；

C；CG含量越高；氢键越多，结构越稳定，因此过程③PCR扩增时引物中的CG含量会影响退火温度，C正确；

D；新冠病毒遗传物质是RNA；RT-PCR技术可应用于新冠病毒的核酸检测，D正确。

故选BCD。

【点睛】11、B:D【分析】【分析】

T线和C线处同时显示横杠；即阳性，若样品中不含病毒，样品经过结合垫时由于不存在病毒抗原，则不存在抗原抗体特异性结合，显色组分仍会随样品继续向前运动，由于不存在病毒抗原，抗体不能与待测抗原结合，故在T线不会显色。

【详解】

A；分析题图可知；若有抗原存在，T线上的抗体能够结合抗原（该抗体经过结合垫时已经与胶体金抗体结合），则T线显色，过量的胶体金抗体会移动到C线处与二抗结合，C线也会显色，故样品中含有待测抗原时，两条线均会显色，A正确；

B；题图中过量的胶体金抗体没有结合抗原；而是与二抗结合，B错误；

C；据题意可知；样本中含有某种抗原，就会首先被结合垫上的胶体金标记抗体结合，形成“抗原—金标抗体”复合物，所以结合垫中固定了金标抗体，C正确；

D；若T线不显色；说明样品中没有抗原，D错误。

故选BD。12、A:C:D【分析】【分析】

1；动物细胞培养过程：取动物组织块--剪碎组织--用胰蛋白酶处理分散成单个细胞--制成细胞悬液--转入培养液中（原代培养）--放入二氧化碳培养箱培养--贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞；制成细胞悬液--转入培养液（传代培养）--放入二氧化碳培养箱培养。

2；胚胎工程是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术；如体外受精、胚胎分割、胚胎移植、胚胎干细胞培养等技术。

【详解】

A；干扰素是人体的蛋白质；故从酵母菌细胞中提取到人的干扰素，说明目的基因已经完成了在受体细胞中的表达，A正确；

B；在植物细胞和组织培养中；花药可以进行离体培养成单倍体植株，B错误；

C；使用酶解法可以获得单个细胞；故在动物细胞培养中，用胰蛋白酶处理肝组织可获得单个肝细胞，C正确；

D；对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术；使体外受精、胚胎移植和胚胎分割成为可能，D正确。

故选ACD。

【点睛】13、B:C:D【分析】【分析】

1；“试管婴儿”是利用体外授精和胚胎移植的方法；解决不孕夫妇的生育问题。

2；设计试管婴儿概念：是指体外受精形成的胚胎在植入母体孕育前；根据人们的需要，将胚胎的一个细胞取出，进行某些设计，当检测结果符合人们需要时，再把胚胎植入母体孕育。

【详解】

A；透明带和卵细胞膜的反应可以防止多精入卵；从而保证受精卵染色体数目的正常，A正确；

B；由于细胞质中也存在基因控制生物性状；所以克隆猴的性状不完全与细胞核供体的相同，B错误；

C；试管婴儿技术与正常的生殖过程相比仅仅是受精和早期胚胎发育的场所不同；实质没有变化，属于有性生殖；而克隆猴是将动物体细胞的细胞核移植到去核的卵细胞后发育成的新个体，属于无性生殖的范畴，C错误；

D；设计试管婴儿与试管婴儿的主要区别是前者在胚胎植入前需进行遗传学诊断；设计试管婴儿有时除体外受精、胚胎培养和胚胎移植外还需要借助其它技术，D错误。

故选BCD。三、填空题(共6题，共12分)14、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】质粒自我复制双链环状DNA分子15、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】是人们所需要转移或改造的基因16、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】317、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】沸水浴二苯胺蓝色二苯胺18、略

【分析】【详解】

目前我国市场上的转基因食品，从原料来源看，进口的主要有大豆、油菜籽和玉米及相关产品，国内生产的有棉籽油和番木瓜，故我国市场上有大豆等的转基因产品。【解析】目前我国市场上的转基因食品，从原料来源看，进口的主要有大豆、油菜籽和玉米及相关产品，国内生产的有棉籽油和番木瓜。19、略

【分析】【详解】

要提高酶的热稳定性，可采用蛋白质工程技术替换少数氨基酸，改善其功能，需要从改造控制该酶合成的基因着手，具体做法为从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列→获得所需的蛋白质。【解析】采用蛋白质工程技术替换少数氨基酸，提高该酶的热稳定性，从改造控制该酶合成的基因着手，具体做法为从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列→获得所需的蛋白质。四、判断题(共2题，共18分)20、A【分析】【详解】

制备单克隆抗体时，第一次筛选的目的是获得杂交瘤细胞，第二次筛选目的是获得能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，故正确。21、B【分析】【详解】

要对蛋白质的结构进行设计改造，最终必须通过改造基因中的碱基序列来完成，因为基因能指导蛋白质的生物合成，故说法错误。五、实验题(共4题，共32分)22、略

【分析】【分析】据图分析；图示为利用基因工程大量制备α-淀粉酶的过程，目的基因是α-淀粉酶基因，与体构建基因表达载体，然后将目的基因导入大肠杆菌，接着对目的基因进行检测与鉴定，最后利用工程菌培养获得大量的α-淀粉酶产品。

【详解】（1）α-淀粉酶基因来自于海洋细菌；因此为了利用PCR技术扩增α-淀粉酶基因，必须先获得细菌的基因组DNA。

（2）目的基因与运载体结合前需要用限制酶对两者进行切割；延伸是在引物的3’端延伸，为了保证目的基因的完整性，因此需在引物的5’端加上限制性酶切位点，且为了使DNA片段能定向插入表达载体，减少自连，常在两条引物上设计加入不同的限制性酶切位点。

（3）进行扩增时；退火温度的设定与引物有关，延伸时间的设定与扩增片段的长度有关。

（4）根据题意分析；虚线框内mRNA片段内含有24个碱基，每3个碱基构成一个密码子，因此包含24÷3=8个密码子；构成mRNA的碱基有4种，若虚线框后的序列未知，预测虚线框后的第一个密码子最多有4×4-3=13种。

（5）根据表格数据分析可知，在pH为8.5，缓冲液为50mmol/LTris-HCl的条件下；α-淀粉酶相对活性为99.5%，活性最高。

【点睛】解答本题的关键是基因工程的四个基本步骤以及PCR技术的过程、条件，回忆相关知识点和注意事项，结合提示分析答题。【解析】基因组DNA5’使DNA片段能定向插入表达载体，减少自连②⑥813pH为8．5，缓冲液为50mmol/LTris-HCl23、略

【分析】【分析】

常用的接种方法：平板划线法和稀释涂布平板法。在统计菌落数目时；为了保证结果准确，一般选择菌落数在30-300的平板进行计数。

【详解】

（1）①要探究圆褐固氨菌和巨大芽孢杆菌处理某餐厨垃圾废液的最佳接种量比；故需要将不同配比的菌液接种在100mL某餐厨垃圾废液中，为了保证氧气供应及目的菌与培养液充分接触，需要进行振荡培养。另外为了减小误差，还需要设置对照组，接种等量无菌水，在相同的条件下培养。

②测定活菌数；需要利用稀释涂布平板法，接种时故需要取一定量菌液进行梯度稀释，然后分别取0.1mL的菌液采用涂布法接种于基本培养基中培养。可以根据菌落的形态区分两种菌，为了保证结果准确，一般选择菌落数在30-300的平板进行计数，根据实验数据可知，两种菌混合接种时有效菌落数均大于单独接种，从代谢产物角度分析，原因可能是两种菌可以相互利用对方的代谢产物作为营养物质。当两菌种接种量比例为1：1时，废液中两种菌种的有效活菌数能够实现同步最大化。

（2）由实验数据可知，R3接种组随着时间的延长，蛋白质的含量下降最明显；R1接种组随着处理时间的延长；脂肪的含量下降最明显，即脂肪的降解效果最好。

（3）固态厨余垃圾因富含粗纤维；蛋白质、淀粉等物质；可加工形成有机复合肥、蛋白饲料等，利用了物质循环再生、能量多级利用的生态工程的原理，AB正确。故选AB。

【点睛】

本题结合图形和表格，主要考查微生物的分离和培养的相关知识，要求考生掌握稀释涂布平板法的操作流程，识记微生物计数的方法，能结合所学知识和图形信息准确答题。【解析】某厨余垃圾废液加入等量无菌水稀释涂布平板法30~300两种菌可以相互利用对方的代谢产物作为营养物质（一种菌的代谢产物是另一种菌的营养物质）1:1R3（或2:1）R1（或0:1）AB24、略

【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因；启动子、终止子和标记基因等。

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同；导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法；基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因——DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA——分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质——抗原—抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

（1）启动子是RNA聚合酶识别并结合的位点；能驱动基因的转录；如将强启动子插入到玉米叶绿体某基因内部，则会破坏该基因，获得该基因沉默（失活）突变株。为使P基因在玉米植株中超量表达，则需要强启动子和P基因不被破坏，因此应优先选用BamHⅠ和SacⅠ酶组合，将Ti质粒切开后构建重组表达载体。农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上，因此T-DNA在该实验中的作用是将强启动子和P基因带入玉米细胞并整合到玉米细胞染色体DNA上。

（2）由图可知；G418抗性基因位于Ti质粒的T-DNA上，随T-DNA一起整合到玉米细胞染色体DNA上，因此将农杆菌浸泡过的玉米愈伤组织去菌后进行植物组织