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文档简介

动物遗传学实验实验六琼脂糖凝胶电泳

一、实验原理

琼脂糖是一种天然聚合长链状分子，可以形成具有刚性的滤孔，凝胶孔径的大小决定于琼脂糖的浓度DNA分子在碱性缓冲液中带负电荷，在外加电场作用下向正极泳动DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时，有电荷效应与分子筛效应。不同DNA的分子量大小及构型不同，电泳时的泳动率就不同，从而分出不同的区带二、实验目的

掌握琼脂糖凝胶电泳分离DNA的原理和方法猪基因组DNA及PCR产物电泳仪，电泳槽，电子天平，移液器，枪头，微波炉，紫外透射检测仪等。

琼脂糖，1XTAE电泳缓冲液，溴化乙锭（EB），6X载样缓冲液：Ⅰ0.25%溴酚蓝，0.25%二甲苯青，40%蔗糖水溶液;Ⅱ0.25%溴酚蓝，0.25%二甲苯青，30%甘油水溶液三、实验材料、器具及药品(4)用移液器吸取总DNA或质粒样品4μl于封口膜上，再加入2μl的6X载样缓冲液，混匀后，小心加入点样孔。⑸打开电源开关，调节电压至3-5V/cm，可见到溴酚蓝条带由负极向正极移动，电泳约30min-60min。⑹将凝胶放入EB染液中染色5-10min,用清水稍微漂洗。⑺将染色后的凝胶置于紫外透射检测仪上，盖上防护观察罩，打开紫外灯，可见到发出荧光的DNA条带。四、实验步骤(2)结果与分析

图1猪基因组DNA1%琼脂凝胶电泳图结果与分析

图2PCR产物琼脂凝胶电泳图

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