嵌合抗原受体修饰T细胞(CAR-T细胞)制剂制备质量管理规范(征求意见稿)

嵌合抗原受体修饰T细胞（CAR-T细胞）制剂制备质量管理规范（征求意见稿）中国医药生物技术协会发布目次前言II引言III1范围12术语和定义13基本要求23.1基本原则23.2人员的要求23.3场所和设施23.4物料24载体制备34.1质粒制备34.2非病毒载体制备的基本要求34.3病毒载体制备的基本要求35细胞制备过程中的要求35.1样本的要求35.2T细胞的采集和分离45.3操作的要求45.4细胞转导及扩增的要求45.5安全性及有效性检测55.6CAR-T细胞制剂的质量要求55.7CAR-T细胞冻存、运输与复苏的要求56CAR-T制剂的质量控制与放行57追溯58保密原则69附则6参考文献7前言本标准按照GB/T1.1—2009《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写》给出的规则起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由中国医药生物技术协会制定，由中国医药生物技术协会实施。本标准起草单位：中国医药生物技术协会医药生物技术临床应用专业委员会。本标准主要起草人：。本标准为首次发布。引言近年来，免疫治疗经历了一系列突飞猛进的发展，以特异性过继免疫细胞疗法及免疫检查点抗体疗法为代表的新型免疫治疗技术因其在临床研究中取得的显著疗效而成为学术界和产业界共同关注的焦点。其中，嵌合抗原受体T细胞免疫疗法（ChimericAntigenReceptorT-CellImmunotherapy，CAR-T疗法）因其在白血病、淋巴瘤、多发性骨髓瘤的治疗中展现出显著的治疗效果而成为国内外研究的热点。随着我国对CAR-T技术的研究不断深入，国内企业的积极布局和产业链的延伸，我国的CAR-T细胞治疗技术也在紧随国际趋势的发展。然而，目前国内关于CAR-T细胞的制备和质量控制缺乏统一的标准和管理规范，各制备机构或应用机构之间无法进行正常的评估和交流，一定程度上不利于细胞治疗产业的专业化发展。只有确立了安全、规范、稳定、可追溯的行业规范，才能从源头保证整个CAR-T细胞治疗产业的规范性和安全性。为了适应我国CAR-T细胞治疗产业的需要，加强CAR-T细胞治疗的管理，规范细胞制备过程，保证CAR-T细胞制品在临床应用的安全性，促进国际间同行的交流，有必要制定中国医药生物技术行业的CAR-T细胞制剂制备质量管理规范。嵌合抗原受体修饰T细胞（CAR-T细胞）制剂制备质量管理规范1范围1.1为协助CAR-T细胞制剂制备机构（以下简称机构）在制备过程中避免污染、交叉污染、混淆及差错，且保证CAR-T细胞制剂的安全性、生物学效应，参照《免疫细胞制剂制备质量管理自律规范》等相关规定和指导原则，制定本规范。1.2本规范所称的CAR-T指用于治疗的、经体外基因导入后表达嵌合型抗原受体的人源T细胞，T细胞来源于患者自体或异体外周血淋巴细胞。1.3本规范适用于CAR-T细胞制剂制备的所有阶段。2术语和定义下列术语和定义适用于本文件。2.1嵌合抗原受体T细胞（CAR-T细胞）ChimericAntigenReceptorTCell，CAR-Tcell经过基因工程修饰的，可表达被导入的含有抗原识别片段、T细胞受体活化分子、共刺激信号等信号分子的CAR基因的T细胞。2.2外周血单个核细胞PeripheralBloodMononuclearCell，PBMC血液中具有单个核的细胞，主要包括淋巴细胞，单核细胞，巨噬细胞，树突状细胞和少量其他细胞类型。2.3质粒Plasmid是一类存在于细菌和真菌细胞中独立于染色体DNA而自主复制的共价、闭合、环状DNA分子，是基因工程最常见的运载体。2.4目的基因TargetGene人工构建的具有明确功能的基因或基因片段。2.5载体Vector在基因工程重组DNA技术中将DNA片段（目的基因）转移至受体细胞中进行复制和表达其他添加成分残余量进行检测，如细胞因子等。5.6.4使用磁珠抗体刺激T细胞的，应检测细胞中的残余磁珠量。5.6.5应对细胞存活率和回输数量进行检测。5.6.6应对终产品中CAR-T细胞转导率、免疫表型进行检测。5.6.7应检测CAR-T细胞制剂对特异性肿瘤细胞的杀伤作用。如果制备的是异体CAR-T细胞，还应检测CAR-T细胞对正常细胞的杀伤。5.6.8用病毒转导细胞并对病毒RCR完成检测之后，应留取部分CAR-T细胞以备将来需要时对RCR的检测。应进行RCR的长期随访检测。5.7CAR-T细胞冻存、运输与复苏的要求5.7.1CAR-T产品应用之前可先冻存，待质控试验结束证实结果无问题后再复苏并进行回输。5.7.2冻存、运输与复苏的方法、冻存液以及冻存容器等应经过验证，保证细胞质量和安全性。6CAR-T制剂的质量控制与放行6.1机构应具有CAR-T细胞制剂的检测能力，并配备相关专业技术人员和设备，建立制剂质量控制检测标准和操作规程，确立制剂质量检验和放行的操作规程，所有的检测方法应经过验证。对整个制备过程中各个环节的质量控制均符合标准方可进行临床应用。6.2每批次的CAR-T细胞制剂质量标准的检测项目应至少包括：无菌检测、支原体检测、内毒素检测、外源血清残留、细胞存活率、细胞数量、细胞表型、效应细胞比率、CAR转导效率、复制型病毒等，检测方法参见现行版《中国药典》生物制品相关规程。7追溯应建立完整的细胞制备过程记录系统以及标识标签系统和免疫细胞制剂编码系统，以确保CAR-T细胞制剂的辨识并防止制剂混杂，确保其唯一性和可追溯性。记录和标识应当遵循相关法律和规范的要求。细胞制备记录包括每天的细胞状况，细胞数量，转导条件，细胞因子浓度等具体信息。标识系统应记录患者姓名、病历号、病种、细胞制剂名称、批号、收获日期及时间、规格（细胞数量/体积）、储存条件、效期（精确时间）等。每个患者的信息应当双人复核。每份CAR-T细胞制剂必须编制唯一的编码，通过它能追溯到患者信息以及该细胞制剂操作和最终处理的所有记录，并建立相关程序能够关联新旧编码。8保密原则应采取措施，保证病人的隐私信息不被泄露。9附则其他关于免疫细胞制备的要求以及人员、设备、样品储存与运输、标识与追溯系统等细则，参见中国医药生物技术协会制定的《免疫细胞制剂制备质量管理自律规范》。参