2024年苏教新版选择性必修3生物上册阶段测试试卷

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2024年苏教新版选择性必修3生物上册阶段测试试卷556考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五六总分得分评卷人得分一、选择题(共9题，共18分)1、下列各组生物中均是通过基因工程方法获得的是（）A.向日葵豆和无籽西瓜B.超级小鼠和克隆羊C.超级绵羊和无籽番茄D.超级鱼和抗虫棉2、用于核移植的供体细胞一般都选用（）A.受精卵B.10代以内的细胞C.传代10~50代以内的细胞D.处于减数分裂第二次分裂中期的次级卵母细胞3、下列关于人类与环境的叙述，正确的是（）A.生物圈是地球表面有生物存在的连续的薄层B.控制人口增长的唯一出路是设法降低出生率C.大气平流层中臭氧含量的减少导致温室效应D.防治酸雨最有效的办法是限制二氧化碳的排放4、下列观点支持转基因产品会引发安全性问题的是（）A.生殖隔离使转基因作物与其他植物很难杂交B.花粉的传播距离有限，不会引起安全性问题C.植物花粉存活时间有限，不会散失到其他环境，威胁其他生物D.转基因产品有可能成为“入侵的外来物种”5、在筛选纤维素分解菌的培养基中加入刚果红染料；研究者观察到几个有透明圈的菌落。据图分析正确的是（）

A.透明圈内的刚果红染料已被分解B.能产生淀粉酶的微生物菌落周围可形成模糊的透明圈C.菌落②中的菌株降解纤维素能力最强D.图中培养基可用牛肉膏、蛋白胨配制6、桑椹胚和囊胚的比较，以下说法正确的是（）A.囊胚期细胞分化是由于遗传物质突变引起的B.囊胚期的细胞出现了细胞分化，但遗传物质未发生改变C.桑椹胚的各细胞结构功能基本不相同D.囊胚期内细胞团和滋养层细胞差异是复制水平上的差异7、下列关于动物细胞体外培养的叙述，错误的是（）A.需要无毒、无菌的培养环境B.配制培养基时需添加血清C.培养温度与动物体温相近D.向培养液中加入酸碱物质调节PH8、肿瘤坏死因子（TNF）在体内和体外均能杀死某些肿瘤细胞或抑制肿瘤细胞的增殖，科研人员欲利用乳腺生物反应器大量生产TNF，用于临床上疾病的治疗。已知HindⅢ、BamHI、BglⅡ和PstI为限制性内切核酸酶，识别的序列均不相同。下列关于基因工程中重组质粒构建的说法，正确的是（）

A.可选用PstI，BglⅡ和HindⅢ、BglⅡ两种组合切割质粒和目的基因B.可用DNA连接酶或DNA聚合酶连接TNF基因和切割开的质粒C.启动子指的就是起始密码子，可驱动TNF基因的转录过程D.四环素抗性基因属于标记基因，便于鉴别受体细胞中是否含有目的基因9、通过大量试验，在多种候选基因中筛选得出Sox2、Klf4、Oct4、c-Myc（简称SKOM）4种基因。将这些基因导入高度分化的体细胞，可使其重编程，形成类似胚胎干细胞（ES细胞）的一种细胞类型，称为iPS细胞。下列说法正确的是（）A.不同类型的干细胞分裂和分化潜能基本相同B.胚胎干细胞因需要从胚胎中获取涉及伦理问题而限制了其应用C.诱导产生iPS细胞的过程中需用到基因工程技术和核移植技术D.iPS细胞和ES细胞具有相同的基因组成且都能体现出细胞的全能性评卷人得分二、多选题(共5题，共10分)10、科学家运用基因工程技术，将人凝血因子基因导入山羊的受精卵中，培育出山羊乳腺生物反应器，使山羊乳汁中含有人凝血因子。以下有关叙述错误的是（）A.可用显微注射技术将含有人凝血因子基因的重组DNA分子导入山羊的受精卵B.在该转基因羊中，人凝血因子存在于乳腺细胞，而不存在于其他细胞C.人凝血因子基因开始转录后，DNA聚合酶以DNA分子的一条链为模板合成mRNAD.科学家将人凝血因子基因与乳腺蛋白基因重组在一起，从而使人凝血因子基因只在乳腺细胞中特异表达11、在单克隆抗体的制备过程中，杂交瘤细胞（即瘤细胞和B淋巴细胞的融合细胞）的筛选是必不可少的步骤。筛选杂交瘤细胞所用的HAT培养基成分和细胞增殖时所需的核苷酸的两条形成途径（D途径，S途径）如下表所示。已知融合所用的瘤细胞是经毒性培养基选出的中间合成途径缺失株，即只有起始合成途径，效应B细胞有两条核苷酸合成途径。若仅考虑细胞的两两融合，下列说法错误的是（）。HAT培养基成分水，糖类、无机盐、次黄嘌呤、氨基糖呤（叶酸拮抗剂），胸腺嘧啶脱氧核苷等起始合成途径（D途径）由氨基酸及其他小分子化合物合成核苷酸，叶酸作为重要的辅酶参与这一过程中间合成途径（S建径）利用次黄嘌呤一鸟嘌呤磷酸核苷转移酶（HGPRT）和胸腺嘧啶核苷激酶（TK）催化次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷生成相应的核苷酸

A.HAT培养基中瘤细胞可利用氨基酸及其他小分子化合物合成核苷酸B.杂交瘤细胞能被筛选的原因为既具备增殖能力，又可进行S途径C.筛选出来的杂交瘤细胞分泌的均为同一种特异性抗体D.在放入HAT培养基之前的融合细胞的培养液中，有D途径的细胞有3种12、在进行拟矮牵牛和矮牵牛的种间原生质体融合时，利用亲本材料对药物抗性的差异来选择杂种细胞的过程如图所示。下列说法错误的是（）

A.只有杂种细胞能在含放线菌素D的MS培养基上正常生长B.同一株植物的不同细胞经离体培养获得的再生苗基因型可能不相同C.②中的融合过程一定要在无菌水中进行，防止杂菌污染D.通过③得到的愈伤组织等材料用人工薄膜包装后可得到人工种子13、细菌X合成的tcel蛋白和tcil蛋白使其在与其他细菌的竞争中占优势，其中tcel蛋白是一种有毒性的分泌蛋白。研究人员利用野生型细菌X及其不同突变体进行了实验：在固体培养基表面放置一张能隔离细菌的滤膜，将一种菌（下层菌）滴加在滤膜上后再放置第二张滤膜，滴加等量的另一种菌（上层菌），共同培养后，对上、下层菌计数得到如图结果。下列分析正确的是（）

A.实验中的培养皿、固体培养基和滤膜均需要进行灭菌处理B.对上、下层菌计数时应采用稀释涂布平板法而不能用显微镜直接计数C.由甲、乙、丙三组结果可推测tcil蛋白能够中和tcel蛋白的毒性D.野生型细菌X在与tcel-tcil双突变体和tcel突变体的竞争中均占优势14、下列关于微生物发酵的叙述，错误的是（）A.制备培养基过程中，需要在灭菌后进行pH的调节B.制作果酒时适当加大接种量可以提高发酵速率，抑制杂菌生长C.现代发酵工程选育出性状优良的菌种后即可进行发酵罐内的发酵D.醋酸菌能将乙醇变成乙醛而后变为乙酸，故夏天开瓶后的红酒容易变酸评卷人得分三、填空题(共9题，共18分)15、体细胞核移植技术存在的问题：

克隆动物存在着健康问题、表现出______缺陷等。16、酶是细胞合成的生物催化剂。随着生物科学技术的发展；酶已经走出实验室，走进人们的生产和生活。请回答下面有关酶的问题：

（1）在腐乳制作的过程中；利用毛霉等微生物产生的蛋白酶将豆腐中的蛋白质分解成________，____________将脂肪水解为甘油和脂肪酸。加酶洗衣粉里添加的酶制剂中，应用最广泛；效果最明显的是____________。

（2）果胶酶包括_____________________________；生产中如果要固定果胶酶；最好采用______________________________________法固定化。

（3）酶提取和分离原理：需要用__________法去除相对分子质量大的杂质蛋白，以纯化酶；利用_________________________法对酶进行纯度鉴定。17、基因工程的原理是_____，又叫_____或_____。通俗地说，就是按照_____，把一种生物的_____提取出来，加以_____，然后放到_____，_____地改造生物的遗传性状。18、_________℃左右最适合酵母菌繁殖，酒精发酵时一般将温度控制在_______________℃。19、现代的腐乳生产是在严格的____________条件下，将优良__________菌种直接接种在豆腐上，这样可以避免__________________的污染，保证产品的质量。20、对于DNA的粗提取而言，就是利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在__________方面的差异，提取DNA，去除杂质。（人教P54）21、随着现代生物技术的飞速发展；转基因动物；克隆动物和试管动物相继问世，请回答下列问题：

（1）转基因动物、克隆动物和试管动物培育过程中都要用到的生物技术包括______。

（2）核移植是动物克隆的第一步，包括体细胞核移植和胚胎细胞核移植，其中后者更易成功，原因是______。核移植常用处于______（填时期）的______为受体细胞。

（3）在“试管动物”的培育过程中，常采用______（填激素名称）处理可使雌性个体一次排出多枚卵母细胞。从雄性个体采集的精子需______后才能进行受精作用；防止多精入卵的两道屏障依次为______；卵细胞膜反应。

（4）若考虑环境承载力，转基因动物、克隆动物和试管动物不宜放置到自然环境中，这遵循了生态工程的______原理。22、蛋白质工程是指以______作为基础，通过______，对现有蛋白质进行_____，或制造一种______，以满足人类的生产和生活的需求。（基因工程在原则上只能生产______的蛋白质）

23、请写出基因工程的概念：_________________。请写出胚胎移植的概念：_____________________。请分别写出植物组织培养和动物细胞培养的原理_________。评卷人得分四、判断题(共1题，共4分)24、培养动物细胞一般使用液体培养基，培养基通常需要加入血清等一些天然成分。()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共4题，共20分)25、［生物——选修1生物技术实践］

某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基；灭菌、接种及培养、菌落观察与计数。请回答与此实验相关的问题。

（1）培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了___________________和___________________。除此之外，培养基还必须含有基本成分是___________________和___________________。

（2）对培养基进行灭菌，应该采用的方法是___________________。

（3）为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于___________________中培养，培养的温度设定在37℃。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种___________________作为对照进行实验。

（4）培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有___________________种细菌。一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越___________________。

（5）如果提高培养基中NaCl的浓度，可以用于筛选耐___________________细菌，这种培养基被称为___________________。26、炭疽；是一种由炭疽芽孢杆菌引起的人兽共患性传染病，也是我国规定的乙类传染病。回答下列有关问题：

(1)人通常是通过接触患炭疽的动物或动物制品被感染，皮肤炭疽病在人类炭疽病中最为常见，这类患者的皮肤渗出物中含有炭疽芽孢杆菌。皮肤炭疽病疑似患者就医时，医生先要取患者的皮肤渗出物稀释后涂布到固体培养基上，经过一段时间的培养获得的平板可能是_____。A．B．C．D．(2)挑取上述培养基上的菌落进行如图所示实验（注：实验组中的噬菌体能特异性地侵染炭疽芽孢杆菌）。

①该实验的目的是_____。

②对照组试管中应加入_____，实验过程中为避免杂菌污染进行的操作包括_____（至少写出两点）。

③实验结果为_____时；表明该疑似患者被炭疽芽孢杆菌感染。

④实验过程中需将锥形瓶固定在摇床上，在35℃下振荡培养24h，直至液体培养基变浑浊。振荡培养说明炭疽芽孢杆菌的代谢类型是_____，振荡培养的目的是_____。液体培养基变浑浊的原因是_____。

(3)对炭疽芽孢杆菌进行计数时，选用10-4、10-5、10-6三个稀释度的菌液，各取0．2mL涂布，每个稀释度作三次重复，经24h恒温培养后结果如表。稀释度10-410-510-6平板编号A1A2A3B1B2B3C1C2C3菌落数31529830245535112911

由表可知，最适合计数的稀释度为_____，原因是_____。27、玉米是重要的粮食作物；其叶片细胞中的P蛋白是一种水通道蛋白，由P基因编码，在植物生长发育过程中对水分的吸收具有重要的调节功能。科研人员成功培育出超量表达P蛋白转基因玉米，所用DNA片段和Ti质粒的酶切位点如图所示，请回答下列问题：

(1)强启动子是一段有特殊结构的DNA片段，能被_______识别并结合，驱动基因的持续转录，如将强启动子插入到玉米叶绿体某基因内部，可获得该基因_______突变株。为使P基因在玉米植株中超量表达，应优先选用_______酶组合，将Ti质粒切开后构建重组表达载体。T-DNA在该实验中的作用是_______。

(2)将农杆菌浸泡过的玉米愈伤组织去菌后进行组织培养，培养基中需加入_______进行筛选，此物质属于氨基糖苷类抗生素，它能抑制蛋白质在叶绿体和线粒体中合成，使植物的光合作用和_______受到干扰；从而引起植物细胞死亡。

(3)愈伤组织是一种相对没有分化的_______团，经液体悬浮培养叮以分散成胚性细胞，在适宜的培养基中，这种单细胞可以发育成_______；再继续发育成转基因玉米株系。

(4)影响玉米愈伤组织能否成功再生出植株的因素有植物激素的配比、愈伤组织继代次数以及_______等。目前，组织培养过程中培养瓶常用透气封口膜封口，目的是_______。28、有研究表明CDKN2B基因与小鼠的寿命有关；科学家将该基因导入小鼠体内，统计其寿命是否高于正常小鼠。图1表示CDKN2B基因与相关限制酶酶切位点，该基因转录出的mRNA碱基序列与A链的碱基序列相同（T；U视为相同的碱基），图2为质粒简图，请回答下列有关问题：

（1）科学家首先采用PCR技术对目的基因进行扩增。PCR过程中每一循环有两次升温一次降温，其中降温的目的是_______________________________________________________。

（2）科学家在构建基因表达载体过程时，目的基因应插在___________和___________之间才能正常表达。单独使用限制酶HindⅢ分别切割目的基因和载体后产生黏性末端。携带CDKN2B基因的重组质粒成功导入细胞后，发现约一半的细胞中没有检测到CDKN2B蛋白，原因是___________。为了避免这种现象的发生，应对以上方法进行改进，改进措施为___________。

（3）若想让一个转入了目的基因的受精卵发育成多个个体，可以采用___________技术，操作时应注意做到_______________________________________________________。评卷人得分六、综合题(共2题，共6分)29、文化污染（如日本的动漫）；转基因技术、生化武器、生物技术的伦理和生态安全等问题成了2014年两会科技界代表热烈讨论的课题；请回答下列问题：

（1）转基因食品是将含有的________________生物及其产生的产品制成的食品。生产转基因食品首先要培育转基因生物。若培育转基因动物最好以____________作为目的基因表达载体的受体细胞。植物可以对体细胞和生殖细胞进行培养直接产生试管植株，但动物的体细胞不能直接培养成动物新个体的原因是______________________________________________；克隆羊多利（dolly）培育成功说明______________________________________具有全能性。在培育转入胰岛素基因酵母菌过程中，若用反转录法获取目的基因，则提供RNA的供体细胞为____________________________（填“胰岛A细胞”“胰岛B细胞”“受精卵”或“干细胞”）。人大代表对转基因食品可能带给人类健康和环境方面的风险忧心忡忡，因为转基因生物存在________________________；如生物入侵；破坏原来的生态平衡、过敏反应、抗生素抗性、疾病流行、使人不育等。

（2）中国有时发现不明的病原体，可能是某些国家蓄意带入的生物武器实验品，生物武器是一种大规模的杀伤性武器，它与常规武器相比有许多特点：①____________、②____________、③________________。l998年6月27日，中美两国元首在关于《禁止生物武器公约》议定书的联合声明中，重申在任何情况下___________、____________、__________生物武器。

（3）中国政府对克隆人持反对态度，但认可对早期胚胎培养用于科学研究。用于人体细胞培养的培养基属于液体培养基，不使用固体培养基的原因之一是动物细胞存在__________抑制。这种液体培养基一定要添加动物的__________；细胞培养需要在95%的空气和5%的二氧化碳混合气体培养箱中进行，其中5%的二氧化碳的作用是______________________________。30、下面是古代家庭酿酒的具体操作过程：先将米煮熟；待冷却至30℃时，加少许水和一定量的酒酿（做实验是用酵母菌菌种）与米饭混用后置于一瓷坛内（其他容器也可），在中间要挖一个洞，加盖后置于适当的地方保温（28℃），12h即成。现请你从以下几个方面对其发酵过程作一个简单的分析：

（1）在中间挖一个洞的目的是__________。

（2）发酵坛没有密封，那么坛内无氧发酵的环境是由什么造成的？__________。写出发酵反应式__________。

（3）在具体操作过程中，要根据米饭的多少加适量的酒酿，如把握不住，宁多而不能少，如果加少了将引起什么后果？为什么？___________。

（4）如下图简单表示了葡萄酒的酿制过程；请据图分析：

随着发酵程度的加深，液体密度会逐渐变低（可用密度计测量），原因是__________。

（5）结合图分析，下列叙述中不正确的是（）。A．在甲中进行搅拌是为了增加氧溶量B．在甲中，酵母菌的能量来源将全部消耗C．甲与乙放出的气体主要是二氧化碳D．揭开丙容器的盖子，可能会有醋酸产生参考答案一、选择题(共9题，共18分)1、D【分析】【分析】

1；植物基因工程的应用：（1）抗虫转基因植物；（2）抗病转基因植物；（3）抗逆转基因植物；（4）转基因改良植物品质．总之基因工程在农业上用于生产高产、稳产和具有优良品质的品种；能产生抗逆性品种。

2；动物基因工程的成果：（1）提高动物的生长速度：外源生长激素基因；（2）改善畜产品的品质；（3）转基因动物生产药物；（4）转基因动物作器官移植的供体；（5）基因工程药物；如人胰岛素、细胞因子、抗体、疫苗、生长激素、干扰素等.

【详解】

A；向日葵豆的培育需要采用植物体细胞杂交技术；无籽西瓜的培育采用了多倍体育种的方法，A错误；

B；超级小鼠的培育需要采用基因工程技术；而克隆羊的培育采用的是核移植、胚胎移植等技术，B错误；

C；超级绵羊的培育需要采用基因工程技术；而无子番茄的培育采用生长素促进果实发育的原理，并没有采用基因工程技术，C错误；

D；超级鱼和抗虫棉的培育都需要采用基因工程技术；D正确。

故选D。2、B【分析】【分析】

1；动物细胞核移植的概念：将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中；使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。

2；原理：动物细胞核的全能性。

【详解】

A；核移植的供体细胞一般为体细胞；A错误；

B；传代10代以内的细胞能保持正常的二倍体核型；适宜作为核移植的供体细胞，B正确；

C；传代10～50代以内的细胞；绝大多数细胞已死亡，存活的部分细胞的核型发生变化，所以不适宜用于核移植的供体细胞，C错误。

D；处于减数第二次分裂中期的次级卵母细胞是核移植的受体细胞；D错误。

故选B。

【点睛】

本题考查动物体细胞核移植、动物细胞培养等知识，明确核移植的供体细胞是体细胞、受体细胞是去核卵母细胞是解决本题的关键。3、B【分析】【分析】

1；生物圈是地球上的所有生物与其生存的环境形成的一个统一整体；生物圈的范围：以海平面为标准来划分，生物圈向上可到达约10千米的高度，向下可深入10千米左右深处，厚度为20千米左右的圈层，包括大气圈的底部、水圈的大部和岩石圈的表面．

2；臭氧层破坏（1）臭氧层作用：吸收日光中的紫外线；对地球生物具有保护作用．（2）破坏原因：空气中的氟利昂等物质的大量排放。

3；酸雨（1）形成原因：主要是硫和氮的氧化物溶于雨水而降落至土壤或水体中；酸雨的pH＜5.6；（2）来源：煤、石油等化石燃料的大量燃烧等。

【详解】

A；生物圈指地球有生物存在的部分；包括所有生物及其生存环境，它是地球表面不连续的一个薄层，A错误；

B；地球的资源是有限的；食物的生产也是有限的，那么人类生存的唯一出路就是设法降低出生率，做到自我控制，B正确；

C；温室效应是由于温室气体增多引起的；C错误；

D；防治酸雨最有效的办法是限制二氧化硫和一氧化氮的排放量；或者从燃料中把这些物质去掉，D错误。

故选B。

【点睛】4、D【分析】【分析】

转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应；过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。对待转基因技术的利弊；正确的做法应该是趋利避害，不能因噎废食。

【详解】

A；生殖隔离使转基因植物与其他植物很难杂交；支持转基因生物不引发生物安全性问题，A错误；

B；花粉的传播距离有限；不会引起生物安全，支持转基因生物不引发生物安全性问题，B错误；

C；植物花粉存活时间有限；不会散失到其他环境，威胁其他生物，支持转基因生物不引发生物安全性问题，C错误；

D；转基因植物有可能像“入侵的外来物种”而引发生物安全问题；不支持转基因生物不引发生物安全性问题，D正确。

故选D。

【点睛】5、B【分析】【分析】

分解纤维素的微生物的分离的实验原理：①土壤中存在着大量纤维素分解酶；包括真菌；细菌和放线菌等，它们可以产生纤维素酶．纤维素酶是一种复合酶，可以把纤维素分解为纤维二糖，进一步分解为葡萄糖使微生物加以利用，故在用纤维素作为唯一碳源的培养基中，纤维素分解菌能够很好地生长，其他微生物则不能生长。②在培养基中加入刚果红，可与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，红色复合物不能形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，从而可筛选纤维素分解菌。

【详解】

A；透明圈内的纤维素已被分解；而不是刚果红染料被分解，A错误；

B；能产生淀粉酶的微生物菌落周围可形成模糊的透明圈；B正确；

C；菌落①中的菌株降解纤维素能力最强；C错误；

D；图中培养基应该以纤维素为唯一碳源；因此不可用牛肉膏、蛋白胨配制，D错误。

故选B。6、B【分析】【分析】

胚胎发育过程：

（1）卵裂期：细胞进行有丝分裂；数量增加，胚胎总体积不增加；

（2）桑椹胚：32个细胞左右的胚胎（之前所有细胞都能发育成完整胚胎的潜能属全能细胞）；

（3）囊胚：细胞开始分化；其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔（囊胚的扩大会导致透明带的破裂，胚胎伸展出来，这一过程叫孵化）；

（4）原肠胚：内细胞团表层形成外胚层；下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔。（细胞分化在胚胎期达到最大限度）

【详解】

A；细胞分化的实质是基因的选择性表达；遗传物质没有发生改变，A错误；

B；囊胚期的细胞出现了细胞分化；但遗传物质未发生改变，B正确；

C；桑椹胚时期还未发生细胞分化；因此桑椹胚的各细胞结构功能基本相同，C错误；

D；囊胚期内细胞团和滋养层细胞差异不是复制水平上的差异而是转录水平上的差异引起的；D错误。

故选B。

【点睛】7、D【分析】【分析】

动物细胞培养在培养过程中要求一定的培养条件：（1）无菌；无毒的环境：①消毒、灭菌②添加一定量的抗生素③定期更换培养液；以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）适宜的温度和PH。（4）气体环境。

【详解】

A；动物细胞培养需要无菌、无毒的环境；A正确；

B；合成培养基中通常需加入动物血清；B正确；

C；温度会影响酶活性；因此培养过程中需要温度与动物体温相近，C正确；

D；培养液中调节pH是通过通入5%的二氧化碳实现的；D错误。

故选D。8、D【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。（4）目的基因的检测与鉴定。

【详解】

A；据图可知；限制酶PstI切割质粒时，会将质粒切成两段，且会破坏标记基因，切掉启动子，因此不能选用PstI．BglⅡ这一组合，A错误；

B；不能使用DNA聚合酶连接目的基因和切割开的质粒；应使用DNA连接酶，B错误；

C；起始密码子位于mRNA上；启动子是一段具有特殊序列结构的DNA片段，是RNA聚合酶识别和结合的位点，可驱动TNF基因的转录过程，C错误；

D；四环素抗性基因属于标记基因；便于鉴别受体细胞中是否含有目的基因，D正确。

故选D。9、B【分析】【分析】

胚胎干细胞(简称ES)是早期胎或原始性腺中分离出来的一类细胞；它具有体外培养无限增殖；自我更新和多向分化的特性，无论在体外还是体内环境，ES细胞都能被诱导分化为机体几乎所有的细胞类型。

【详解】

A；不同类型的干细胞；它们的分化潜能是有差别的，如胚胎干细胞的分化潜能大于多能干细胞，A错误；

B；胚胎干细胞全能性较高；仍会涉及伦理问题，其在医学上的应用还是有一定的限制，B正确；

C；根据题意将Sox2、Klf4、Oct4、c-Myc基因导入高度分化的体细胞可使其重编程；形成iPS细胞，需要用到基因工程，没有核移植技术，C错误；

D；ES直接从胚胎提取；iPS是通过体细胞导入Sox2、Klf4、Oct4、c-Myc基因诱导产生，基因组成不同，但是都能体现出细胞全能性，D错误。

故选B。二、多选题(共5题，共10分)10、B:C:D【分析】【分析】

转基因动物生产药物：

(1)基因来源：药用蛋白基因+乳腺组织特异性表达的启动子(原理：基因的选择性表达)。

(2)成果：乳腺生物反应器。

(3)过程：将药物蛋白基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起；导入哺乳动物的受精卵中，最终培育的转基因动物进入泌乳期后，可以通过分泌的乳汁生产所需要的药物。(只有在产下雌性动物个体中，转入的基因才能表达)。

【详解】

A；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；因此可用显微注射技术将含有人凝血因子基因的重组DNA分子导入羊的受精卵，A正确；

B；在该转基因羊中；人凝血因子存在于所有细胞中，但只在乳腺细胞中表达，B错误；

C；人凝血因子基因开始转录后；RNA聚合酶以DNA分子一条链为模板合成mRNA，C错误；

D；科学家将人凝血因子基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起；从而使人凝血因子基因只在乳腺细胞中特异表达，D错误。

故选BCD。11、A:C:D【分析】【分析】

诱导植物细胞原生质体融合物理方法包括离心；振动、电激；化学方法用聚乙二醇，诱导动物细胞融合除了以上物理化学方法可用生物方法，即灭活的病毒。

在HAT培养基中；氨甲蝶呤是叶酸的拮抗剂阻断DNA合成的主途径，未融合的瘤细胞；融合的瘤细胞--瘤细胞不能合成次黄嘌呤磷酸核糖转化酶，合成DNA的S途径也不能进行，所以最终死亡。

HAT培养基中筛选出的杂交瘤细胞；经选择性培养在适宜条件下可无限增值，然后进行单克降抗体检测，筛选出能分泌特定抗体的杂交瘤细胞。

【详解】

A；HAT培养基中含叶酸拮抗剂；其中不能进行D途径，A错误；

B；杂交瘤细胞为瘤细胞和B淋巴细胞的融合细胞；既具备增殖能力，又可在HAT培养基中进行S途径，B正确；

C；最终筛选出来的可能有多种杂交瘤细胞；分泌的可能不是同一种特异性抗体，还需进行进一步筛选，C错误；

D；仅考虑细胞的两两融合；在放入HAT培养基之前的融合细胞的培养液中，会有融合的B淋巴细胞—瘤细胞、融合的B淋巴细胞—B淋巴细胞、融合的瘤细胞—瘤细胞、未融合的B淋巴细胞、未融合的瘤细胞等多种形式的细胞，这几种形式的细胞均可进行D途径，D错误。

故选ACD。12、C:D【分析】【分析】

人工种子是以植物组织培养的胚状体；不定芽、顶芽和腋芽为原料,用人工薄膜包装而成的种子。

【详解】

A；由图可知；只有杂种细胞能在含放线菌素D的MS培养基上正常生长得到杂种植物，A正确；

B；同一株植物的不同细胞的基因型可能不同；比如：配子的基因型与体细胞的基因型不同，离体培养获得的再生苗基因型可能不相同，B正确；

C；②是原生质体的融合过程；原生质体放入无菌水中可能会吸水涨破，C错误；

D；通过③得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等材料用人工薄膜包装后可得到人工种子；D错误。

故选CD。13、A:B:C【分析】【分析】

微生物常见的接种的方法：

①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后；均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

【详解】

A；为避免杂菌的污染；实验中的滤膜、培养皿、固体培养基等均需灭菌处理，A正确；

B；对活菌进行计数的方法是稀释涂布平板法；具体方法是：先将菌体进行梯度稀释，再涂布到滤膜的表面，待菌落数稳定时进行计数，不能用显微镜直接计数的原因是显微镜直接计数不能区分死菌和活菌，B正确；

C；tcel蛋白是一种有毒性的分泌蛋白；乙组中野生型可产生tce1蛋白作用于tcel-tcil双突变体，后者无法产生tci1蛋白中和tcel蛋白的毒性，使野生菌在竞争中占据优势；而在丙组中，野生型可产生tce1蛋白作用于tcel突变体，后者可以产生tci1蛋白中和tcel蛋白的毒性，使野生型的生长受到抑制，由此推测，tcil蛋白能够中和tcel蛋白的毒性，C正确；

D；由甲组、乙组可知；野生型细菌X在与tcel-tcil双突变体的竞争中均占优势，由甲组、丙组可知，野生型细菌X在与tcel突变体的竞争中不占优势，D错误。

故选ABC。14、A:C【分析】【分析】

果酒的制作利用酵母菌的无氧呼吸产生酒精；醋酸菌在糖源；氧气充足时；直接将葡萄糖氧化为醋酸；在糖源不足、氧气充足时，可利用酒精，即乙醇作为呼吸底物，先将乙醇变成乙醛而后变为乙酸（醋酸）。

【详解】

A；制备培养基过程中；pH的调节应在灭菌前进行，A错误；

B；制作果酒时适当加大接种量；酵母菌菌体的基数增大，可使其快速形成优势菌群，抑制杂菌生长，提高发酵速率，B正确；

C；现代发酵工程选育出性状优良的菌种后；为满足发酵过程的需要，还要对菌种进行扩大培养，之后才可进行发酵罐内的发酵，C错误；

D；醋酸菌能够氧化酒精产生醋酸；造成葡萄酒的败坏。首先，乙醇被氧化生成乙醛，然后乙醛再被氧化生成醋酸（乙酸），故夏天开瓶后的红酒容易变酸，D正确。

故选AC。三、填空题(共9题，共18分)15、略

【解析】遗传和生理16、略

【分析】【分析】

1；腐乳制作过程中多种微生物参与了发酵；其中起主要作用的是毛霉，毛霉等微生物产生蛋白酶能将豆腐中的蛋白质转化成小分子肽和氨基酸，脂肪酶将脂肪转化成甘油和脂肪酸。

2；果胶酶能够分解果胶；瓦解植物的细胞壁及胞间层，使榨取果汁变得容易，而果胶分解成可溶性的半乳糖醛酸，也使得浑浊的果汁变得澄清。果胶酶并不特指某一种酶，而是分解果胶的一类酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶。

【详解】

（1）在腐乳制作的过程中；利用毛霉等微生物产生的蛋白酶将豆腐中的蛋白质分解成小分子肽和氨基酸，脂肪酶将脂肪水解为甘油和脂肪酸；加酶洗衣粉里添加的酶制剂中，应用最广泛；效果最明显的是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶。

（2）果胶酶并不特指某一种酶；而是分解果胶的一类酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶；果胶分解酶和果胶酯酶；在果汁生产过程中如果要固定果胶酶，最好采用化学结合和物理吸附法固定化，这是因为酶分子小，体积小的酶容易从包埋材料中漏出。

（3）酶提取和分离原理：需要用凝胶色谱法去除相对分子质量大的杂质蛋白；以纯化酶；利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法对酶进行纯度鉴定。

【点睛】

本题考查腐乳制作和酶提取等知识，对于此类试题，需要考生注意的细节较多，如实验的原理、实验步骤、实验采用的试剂及试剂的作用等，需要考生在平时的学习过程中注意积累。【解析】小分子肽和氨基酸脂肪酶碱性蛋白酶和碱性脂肪酶半乳糖醛酸酶、果胶分解酶、果胶酯酶化学结合法和物理吸附凝胶色谱（分配色谱）聚丙烯酰胺凝胶电泳17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】基因重组基因拼接技术DNA重组技术人们意愿某种基因修饰改造另一种生物细胞里定向18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】2018～2519、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】无菌毛霉其他菌种20、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】物理和化学性21、略

【分析】【分析】

1；动物核移植的概念：将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中；使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体，核移植得到的动物称克隆动物；

2；早期胚胎培养的培养液成分；除无机盐和有机盐外，还需要添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，并需添加动物血清等天然成分。

【详解】

（1）转基因动物；试管动物和克隆动物分别在体外得到早期胚胎后；都要通过胚胎移植获得新个体。

（2）核移植包括体细胞核移植和胚胎细胞核移植；其中后者更易成功，原因是胚胎细胞分化程度低，恢复全能性相对容易，而体细胞分化程度高，全能性不易表达；核移植常用的减数第二次分裂中期的去核卵母细胞作为受体细胞，其中去核的目的是避免原细胞核中遗传物质对克隆动物的影响，保证克隆动物的核遗传物质来自供体细胞。

（3）促性腺激素处理可促使雌性个体超数排卵；即使良种母牛一次排出多枚卵母细胞。精子需要经过获能处理才能受精；防止多精入卵的两道屏障依次为透明带反应；卵细胞膜反应。

（4）要考虑环境承载力；处理好生物与环境的协调与平衡，这体现了生态工程的协调与平衡原理。

【点睛】

本题考查细胞工程、胚胎工程和生态工程的有关知识，意在考查考生理解能力、获取信息的能力和综合运用能力。【解析】胚胎移植（或胚胎的早期培养和胚胎移植）胚胎细胞分化程度低，恢复全能性相对容易MⅡ中期去核卵母细胞促性腺激素获能透明带反应协调与平衡22、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系基因修饰或基因合成改造新的蛋白质自然界已存在23、略

【分析】【分析】

动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织；将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。植物组织培养又叫离体培养，指从植物体分离出符合需要的组织；器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在无菌条件下接种在含有各种营养物质及植物激素的培养基上进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。

【详解】

1；基因工程又称基因拼接技术和DNA重组技术；是以分子遗传学为理论基础，以分子生物学和微生物学的现代方法为手段，将不同来源的基因按预先设计的蓝图，在体外构建杂种DNA分子，然后导入活细胞，以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品的遗传技术。

2；胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎；或者通过体外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其它雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术。

3；动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织；将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖，其原理是细胞增殖。

4；植物组织培养又叫离体培养；指从植物体分离出符合需要的组织、器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在无菌条件下接种在含有各种营养物质及植物激素的培养基上进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性。

【点睛】

本题考查基因工程概念、胚胎移植、动植物细胞培养等相关知识，意在考察考生对知识点的理解掌握程度。【解析】①.又叫基因拼接技术或DNA重组技术②.又称受精卵移植，是指将雌性动物体内的的早期胚胎，或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状况相同的其他雌性动物体内，使之继续发育为新个体的技术③.植物细胞全能性、细胞增殖四、判断题(共1题，共4分)24、A【分析】【分析】

液体培养基主要是模拟动物体内环境；动物体细胞是生活在组织液当中，而且细胞要直接从组织液里获得营养和排出废物。所以液体培养基相当于组织液的液体环境。

【详解】

为了保证细胞培养时营养物质和生长因子的供给，培养基中需添加一定量的动物血清等天然成分，可以补充合成培养基中缺乏的物质，故该表述正确。五、实验题(共4题，共20分)25、略

【分析】【详解】

微生物生长繁殖过程中需要氮源、碳源、水分、无机盐等营养物质，有些微生物还需要生长因子；培养基的灭菌一般采用高压蒸汽灭菌，该过程一般在高压蒸汽灭菌锅中进行；影响微生物生长繁殖的因素主要是营养和温度，因此培养微生物时除提供适宜的营养外，还要提供合适的温度；为排除无关变量的影响，该实验要设立空白对照，可以用蒸馏水代替样品来进行对照；在培养基中加入食盐可以选择耐盐菌，如金黄色葡萄球菌等，这种培养基叫做选择培养基。【解析】氮源（碳源不作要求）碳源无机盐水高压蒸汽灭菌恒温培养箱无菌水多高盐（或NaCl）选择性培养基26、略

【分析】【分析】

1；稀释涂布平板法：将待测样品制成均匀的系列稀释液；尽量使样品中的微生物细胞分散开，使成单个细胞存在，再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中，使其均匀分布于平板中的培养基内。2、平板划线法：把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞，用接种环在平板表面上作多次由点到线的划线稀释而获得较多独立分布的单个细胞，并让其成长为单菌落的方法。

【详解】

（1）A；B、C中的菌落分布较均匀；是通过稀释涂布平板法获得的，而D是通过平板划线法获得的，划线平板法是从上一次划线的末端开始划线。故选ABC。

（2）①从整个实验过程可以看出；实验通过对皮肤渗出物稀释培养形成的菌落进行扩大培养后，利用噬菌体的作用检测其中是否含有炭疽芽孢杆菌。②对照组中加入的液体不应含有噬菌体，因此应加入等量的生理盐水；在进行微生物培养时为防止杂菌的混入，消毒和灭菌工作是关键，主要包括对操作的空间；操作者的衣着和手进行清洁和消毒；将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌；实验操作在酒精灯火焰附近进行；操作过程中避免已经灭菌的材料用具与周围物品相接触等。③若实验组液体培养基的浑浊度低于对照组，说明实验组中的炭疽芽孢杆菌被噬菌体侵染与破坏，即该疑似患者感染了炭疽芽孢杆菌。④炭疽芽孢杆菌属于细菌，能寄生在人和动物体内，说明它是异养型生物，培养时需要借助摇床振荡培养，说明它是需氧型生物；振荡培养的目的是增加培养液中的氧气含量，使细菌与营养物质充分接触，有利于炭疽芽孢杆菌的大量繁殖；培养液变浑浊表明炭疽芽孢杆菌大量繁殖。

（3）分析表中数据可知，只有稀释度为10-5时菌落数在30~300之间，适合用于计数。【解析】(1)ABC

(2)检验皮肤炭疽病疑似患者的皮肤渗出物中是否含有炭疽芽孢杆菌与实验组等量的生理盐水对操作的空间；操作者的衣着和手进行清洁和消毒；将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌；实验操作在酒精灯火焰附近进行；操作过程中避免已经灭菌的材料用具与周围物品相接触实验组液体培养基的浑浊度比对照组低（异养）需氧型增加培养液中的氧气含量；使细菌与营养物质充分接触炭疽芽孢杆菌大量繁殖。

(3)10-5稀释度为10-5时菌落数在30~300之间27、略

【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因；启动子、终止子和标记基因等。

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同；导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法；基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因——DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA——分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质——抗原—抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

（1）启动子是RNA聚合酶识别并结合的位点；能驱动基因的转录；如将强启动子插入到玉米叶绿体某基因内部，则会破坏该基因，获得该基因沉默（失活）突变株。为使P基因在玉米植株中超量表达，则需要强启动子和P基因不被破坏，因此应优先选用BamHⅠ和SacⅠ酶组合，将Ti质粒切开后构建重组表达载体。农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上，因此T-DNA在该实验中的作用是将强启动子和P基因带入玉米细胞并整合到玉米细胞染色体DNA上。

（2）由图可知；G418抗性基因位于Ti质粒的T-DNA上，随T-DNA一起整合到玉米细胞染色体DNA上，因此将农杆菌浸泡过的玉米愈伤组织去菌后进行植物组织培养，培养基中需加入G418进行筛选，此物质属于氨基糖苷类抗生素，它能抑制蛋白质在叶绿体和线粒体中合成，其中叶绿体是光合作用的场所，线粒体是细胞有氧呼吸的主要场所，因此可使植物的光合作用和呼吸作用（能量代谢）受到干扰，从而引起植物细胞死亡。

（3）愈伤组织是一种相对没有分化的薄壁细胞团；经液体悬浮培养可以分散成胚性单细胞，在适宜的培养基中，这种单细胞可以发育成胚状体，再继续发育成转基因玉米株系。

（4）影响玉米愈伤组织能否成功再生出植株的因素有植物激素的配比、愈伤组织继代次数以及玉米的基因型等。目前，组织培养过程中培养瓶常用透气封口膜封口，目的是防止杂菌污染。【解析】(1)RNA聚合酶沉默##失活BamH和SacⅠ酶将强启动子和P基因带入玉米细胞并整合到玉米细胞的染色体DNA上。

(2)G418呼吸作用##能量代谢

(3)薄壁细胞胚状体。

(4)玉米的基因型防止杂菌污染28、略

【分析】【分析】

1；PCR扩增的过程是：目的基因DNA受热变性后解链为单链；引物与单链相应互补序列结合，然后在DNA聚合酶作用下进行延伸，如此重复循环多次。

2；构建基因表达载体过程时；目的基因应插在启动子和终止子之间才能正常表达。

【详解】

（1）PCR过程中每次循环两次升温（变性和延伸）和一次降温（复性）；其中降温（复性）的目的是让两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合。

（2）基因表达载体包括标记基因；目的基因；启动子和终止子，科学家在构建基因表达载体过程时，目的基因应插在启动子和终止子之间才能正常表达。单独使用限制酶HindⅢ切割目的基因和载体后，由于部分基因反向连接，导致携带CDKN2B基因的重组质粒成功导入细胞后，约一半的细胞中没有检测到CDKN2B蛋白。为了避免这种现象的发生，可以同时用两种酶进行切割，由于SmaⅠ会破坏CDKN2B基因，不能选用该酶切割，HindⅢ会破坏质粒的两种标记基因，不能选用该酶切，PstⅠ和EcoRⅠ能切下完整的CDKN2B基因，并不会破坏抗四环素基因基因，因此为了避免这种现象的发生，可以同时用PstⅠ、EcoRⅠ分别对目的基因和载体进行酶切。

（3）来自同一个胚胎的后代具有相同的遗传物质；因此要让一个受精卵发育成多个个体，可采用胚胎分割技术，然后经移植获得多胎。分割时应注意将囊胚的内细胞团均等分割。

【点睛】

本题考查基因工程和胚胎分隔技术相关知识，掌握基因工程和胚胎分割操作步骤是解决本题的关键。【解析】让两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合启动子终止子部分基因反向连接同时用PstⅠ、EcoRI分别对目的基因和载体进行酶切胚胎分割将囊胚的内细胞团均等分割六、综合题(共2题，共6分)29、略

【分析】【分析】

动物细胞培养过程取动物胚胎或幼龄动物器官；组织。将材料剪碎；并用胰蛋白酶（或用胶原蛋白酶）处理（消化），形成分散的单个细胞，将处理后的细胞移入培养基中配成一定浓度的细胞悬浮液。悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。当贴壁细胞分裂生长到互相接触时，细胞就会停止分裂增殖，出现接触抑制。此时需要将出现接触抑制的细胞重新使用胰蛋白酶处理。再配成一定浓度的细胞悬浮液。另外，