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文档简介
考点一微生物的试验室培育1.(2022·苏、锡、常、镇调研,32)微生物的分别和培育是现代生物工程应用中的重要环节。下图甲、乙是大肠杆菌分别和培育过程中部分操作和试验结果示意图,请据图回答有关问题:(1)上图甲所示的是制备固体培育基时的试验操作步骤之一,它称为________,若用该培育基培育大肠杆菌,除考虑养分条件外,还要考虑________、________和渗透压等条件。(2)培育大肠杆菌时,在接种前需要检测培育基是否被污染。对于固体培育基应接受的检测方法是_______________。(3)上图乙是平板划线法接种操作示意图,正确的操作挨次是A→B→________(用字母和箭头表示);找出图乙中两处错误的操作________、________(用字母表示)。解析(1)上图甲所示的试验操作步骤之一为倒平板,若用该培育基培育大肠杆菌,还要考虑温度、氧气、pH和无菌操作等一系列相关条件。(2)培育大肠杆菌时,在接种前需要检测培育基是否被污染,因此要设置对比试验,对于固体培育基应接受的检测方法是将未接种的培育基在适宜的温度下放置适宜的时间,观看培育基上是否有菌落产生,若有则说明培育基已被污染,应重新配制培育基进行试验。(3)上图乙是平板划线法接种操作示意图,正确的操作挨次是A→B→G→F→E→C→D→H;图乙中两处错误的操作是C——未在酒精灯火焰旁进行操作,D——将第五区域内的划线与第一区相连。答案(1)倒平板温度(氧气)pH(无菌)(2)将未接种的培育基在适宜的温度下放置适宜的时间,观看培育基上是否有菌落产生(3)G→F→E→C→D→HCD2.为了从泡菜汁中筛选分别动身酵产酸速度快、亚硝酸盐降解力量强的乳酸菌,科研人员做了如下试验。请回答问题:(1)在无菌操作下,使用无菌水对泡菜汁进行________,将不同稀释度的泡菜汁涂布于添加了CaCO3的乳酸菌培育基(MRS培育基)平板上。在适宜条件下培育后,挑取有________的菌落,连续在MRS平板上用________法分别,得到单菌落。(2)取分别到的乳酸菌分别接种到MRS液体培育基中,间隔取样测定pH,目的是筛选出________的乳酸菌。(3)取上一步筛选出的乳酸菌接种到含有NaNO2的MRS培育基中,培育一段时间后,用________法测定NaNO2的含量,筛选出________的菌株。解析筛选分别出的菌种需要满足两个条件:①发酵产酸速度快,②亚硝酸盐降解力量强。先筛选分别出产酸速度快的乳酸菌,再从产酸速度快的乳酸菌中筛选分别出亚硝酸盐降解力量强的乳酸菌。产酸速度快的乳酸菌在含有CaCO3的选择培育基上可较快形成透亮 圈。测定NaNO2的含量通常用比色法。答案(1)梯度稀释透亮 圈划线(2)产酸速度较快(3)比色亚硝酸盐降解力量强3.(2022·河北衡水中学二模,39)请回答下列相关问题。(1)在腐乳的制作时,用来腌制腐乳的玻璃瓶,洗刷洁净后要用________消毒;在提取植物细胞的DNA时,需要先用洗涤剂溶解________。(2)葡萄皮、籽中含有原花青素、葡萄皮红素和大量葡萄风味物质等,这些物质易溶于乙醇、乙酸乙酯中,因此常接受________法来分别提取,还可以用________和________等提取植物芳香油的方法。(3)为了检测某致病菌对于抗生素的敏感性,取该单菌落适当稀释,接种于固体培育基表面,在37℃培育箱中培育24h,使其均匀生长,布满平板。将分别含有A、B、C三种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置,培育一段时间后,含A的滤纸片四周消灭透亮 圈,说明该致病菌对抗生素A________(填“敏感”或“不敏感”);含B的滤纸片四周没有消灭透亮 圈,说明该致病菌对抗生素B________(填“敏感”或“不敏感”(4)用来推断某选择培育基是否起到了选择分解纤维素的细菌的作用,要设置的对比是()A.未接种的选择培育基B.未接种的牛肉膏蛋白胨培育基C.接种了的牛肉膏蛋白胨培育基D.接种了的选择培育基解析(1)在制作腐乳时,用来腌制腐乳的玻璃瓶,洗刷洁净后要用沸水消毒;在提取植物细胞的DNA时,需要先用洗涤剂溶解细胞膜。(2)提取植物芳香油的最常用方法有萃取法、蒸馏法和压榨法。(3)若含抗生素的滤纸片四周消灭透亮 圈,说明该致病菌对相应抗生素敏感,若含抗生素的滤纸片四周没有透亮 圈消灭说明该致病菌对此抗生素不敏感。(4)将菌液稀释相同的倍数,在牛肉膏蛋白胨培育基上生长的菌落数目应明显多于在选择培育基上生长的菌落数目,因此,牛肉膏蛋白胨培育基可以作为对比,用来推断选择培育基是否起到了选择作用。答案(1)沸水细胞膜(2)萃取蒸馏压榨(3)敏感不敏感抗生素C的耐药菌(4)C4.(2021·陕西长安五校联考)争辩者初步筛选到能合成纤维素酶的菌株MC-1,回答以下问题。(1)为了获得能合成纤维素酶的单菌落,可接受________法将初筛菌液接种在固体培育基上,这种培育基属于________培育基。(2)关于制备固体培育基的叙述,错误的是________。A.制备固体培育基时可以加入琼脂B.操作的挨次为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌C.待培育基冷却至50℃D.待平板冷却凝固约5~10min后将平板倒过来放置(3)试验过程中如何防止其他微生物的污染?________。(4)下表的培育液pH均为4.8,若对MC-1中纤维素酶的活力进行测定,则不能选择表中的________培育液。(多选)(5)分别获得了具有较高纤维素酶活性的菌株MC-1,为了在此基础上获得纤维素酶活性更高的菌株,最可行的做法是________。(6)某同学在培育过程中发觉培育基上感染了几种细菌。若在以尿素为唯一氮源的培育基中加入________指示剂培育几种菌后,指示剂变红就可以鉴定其中含有能够分解尿素的菌株;若在以纤维素为唯一碳源的培育基中加入________染料,培育后,培育基中消灭透亮 圈,就可以鉴定其中含有纤维素分解菌。答案(1)划线/涂布选择(2)B(3)培育基灭菌、接种过程无菌操作(4)A、B、C(5)人工诱变(紫外线照射等)处理菌株,再进行筛选(6)酚红刚果红5.回答下列有关微生物培育与运用的问题。KH2PO41.4gNa2HPO42.1gMgSO4·7H2O0.2gFeCl30.1gX1g维生素微量琼脂15g(1)上表是筛选异养型细菌的培育基配方。从物理性质上看该培育基属于________培育基,其中成分X除了为目的菌供应能源,还能供应________。制备该培育基的一般操作挨次是计算→称量→______→灭菌→______。对培育基进行灭菌的常用方法是________。(2)如图A、B是纯化微生物培育的两种接种方法,C、D是接种后培育的效果。某同学接种培育后获得图C所示效果,则其接受的接种方法是[]________([]选填“A”“B”);接种时可能的失误操作是________。(3)微生物强化采油是利用某些微生物能降解石油、增大石油的乳化度、降低石油黏度的原理,通过向油井中注入含微生物的水来提高采油率的新技术。为筛选和纯化该类微生物,应向培育基中添加________作为唯一碳源;培育一段时间后在培育基上形成降油圈,此时选取________就可获得高效菌株。解析(1)表中培育基的成分有凝固剂琼脂,因此该培育基为固体培育基。培育基除应含有水、无机盐、特殊养分物质(维生素等)外,还应有碳源和氮源。制备固体培育基的一般挨次是计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。(2)图A运用接种环,为平板划线法,相应培育效果如图D所示;图B运用
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