2025年人教版PEP选择性必修3生物上册阶段测试试卷

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年人教版PEP选择性必修3生物上册阶段测试试卷33考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五总分得分评卷人得分一、选择题(共7题，共14分)1、下列有关植物组织培养的技术操作，正确的是（）A.培养基在使用之前要放在烤箱中高温干热灭菌B.接种操作可在普通房间的酒精灯火焰旁边进行C.解剖刀在火焰上灼烧后需冷却才能用于切割外植体D.外植体用化学试剂消毒后需经蒸馏水多次冲洗才可用于接种2、下面是四种不同质粒的示意图，其中ori为复制必需的序列；amp为氨苄青霉素抗性基因，tet为四环素抗性基因，箭头表示同一种限制性内切酶的酶切位点。下列有关叙述正确的是（）

A.基因amp和tet是一对等位基因，常作为基因工程中的标记基因B.质粒指细菌细胞中能自我复制的小型环状的DNA和动植物病毒的DNAC.限制性核酸内切酶的作用部位是DNA分子中特定的两个核苷酸之间的氢键D.用质粒4将目的基因导入大肠杆菌，该菌不能在含四环素的培养基上生长3、如图为腐乳制作过程的流程图；下列说法不正确的是（）

豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制A.毛霉为好氧型真菌，为避免其无氧呼吸，码放豆腐时要留出一定缝隙B.加盐腌制的目的是析出豆腐中的水分使之变硬，同时能抑制微生物的生长C.加卤汤密封腌制中，毛霉不断增殖，并产生大量的酶，分解蛋白质D.豆腐上生长的白毛是毛霉的直立菌丝4、CD47是一种跨膜糖蛋白。它可与巨噬细胞表面的信号调节蛋白结合；从而抑制巨噬细胞的吞噬作用。为证明抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，科学家按照如下流程进行了实验。

下列叙述不正确的是（）A.多次进行步骤①以获得更多分泌抗CD47抗体的浆细胞B.应选用特殊生物技术去核的骨髓瘤细胞与B细胞进行融合C.步骤②中可以利用聚乙二醇或灭活的病毒诱导完成细胞融合D.经筛选可得到既能产生抗CD47抗体又能无限增殖的杂交瘤细胞5、为了加快良种牛的繁殖速度；科学家采用了以下两种方法。下列说法正确的是（）

A.方法Ⅰ获得公牛的新鲜精液，可直接用于受精作用B.胚胎体外培养过程中不需要利用相关技术去除透明带C.E和F的培育过程中均用到了胚胎移植技术，均属于有性生殖D.如图方法Ⅱ，产生的F牛的性别与C牛相同，性状也与C牛完全一致6、1958年，美国科学家斯图尔德应用植物组织培养技术，将二倍体胡萝卜韧皮部的一些细胞进行离体培养，最终发育成完整的新植株（如图）。关于这一科学事实，下列叙述中错误的是（）

①实验需要无菌和人工控制的条件②培养基中需添加植物激素、无机盐、糖类等物质③取胡萝卜的其他部分（如茎、叶、花）不能培养成小植株④图中培养瓶1和试管2中的成分相同A.①②B.③④C.②③D.①④7、生物安全是国家安全体系的重要组成部分。下列关于保障生物安全的说法，不正确的是（）A.谨慎使用抗生素，减少对耐药菌的选择B.转基因技术已经成熟，可以任意改造生物C.面对新冠疫情，积极注射疫苗建立免疫屏障D.加强对高风险实验室的监管，避免病原微生物的泄漏评卷人得分二、多选题(共5题，共10分)8、下列有关利用不同材料进行“DNA粗提取与鉴定实验”的叙述，正确的是（）A.鸡血细胞液中，加入0．14mol/L的NaCl溶液有利于瓦解细胞膜B.洋葱鳞片叶碎片中，加入沐浴液和食盐后研磨有利于去除细胞壁C.鱼白（精巢）提取的DNA滤液中，加入嫩肉粉有利于去除蛋白质D.菜花提取的DNA滤液中，加入冷酒精有利于析出DNA9、下面为制备单克隆抗体过程示意图，下列相关叙述错误的是（）

A.①表示B淋巴细胞和骨髓瘤细胞均是从小鼠的脾脏中提取的B.④中的筛选是通过抗原—抗体反应进行的C.④中的筛选是为了获得能产生多种抗体的杂交瘤细胞D.⑤可以无限增殖10、为探究不同糖源（蜂蜜、黄冰糖）对蓝莓酒发酵产物的影响，某研究小组研发出如下的蓝莓酒发酵工艺，其中“主发酵”时酵母菌会繁殖、大部分糖的分解和代谢物会生成，“后发酵”是在低温、密闭的环境下蓝莓酒会成熟。下列叙述错误的是（）

A.菌种甲在产生CO2的同时会产生酒精B.切片后需对发酵液进行消毒然后再分组C.倒罐均需保留空间以促进菌种有氧呼吸D.主发酵要控制无氧，后发酵要控制有氧11、下列有关动物细胞培养的表述错误的是（）A.培养环境中需要O2，不需要CO2B.细胞要经过脱分化形成愈伤组织C.培养液通常含有糖类，氨基酸，无机盐，维生素和动物血清D.培养瓶中的细胞培养到一定阶段后分瓶后才能继续增殖12、下列关于试管婴儿和克隆猴的叙述，错误的是（）A.受精过程中，透明带和卵细胞膜的反应保证了受精卵染色体数目的正常B.克隆猴的性状表现与细胞核供体的一模一样，体现了动物细胞核具有全能性C.试管婴儿的生殖方式属于无性生殖，克隆猴的生殖方式属于有性生殖D.“设计试管婴儿”与“试管婴儿”在操作上唯一的区别是前者需要进行遗传学诊断评卷人得分三、填空题(共7题，共14分)13、统计的菌落数往往比活菌的实际数目_____________。这是因为______________________。因此，统计结果一般用而不是用活菌数来表示。除了上述的活菌计数法外，______________也是测定微生物数量的常用方法。14、______——“分子缝合针”15、醋酸菌的最适生长温度为____________________℃。16、目的：使目的基因在受体细胞中_____，并且可以______，使目的基因能够______作用。17、纯化DNA，去除杂质有________________个方案。18、请写出基因工程的概念：_________________。请写出胚胎移植的概念：_____________________。请分别写出植物组织培养和动物细胞培养的原理_________。19、研究表明，转基因抗虫棉的大面积种植有效遏制了棉铃虫害，也显著地降低了化学农药的使用量｡但是，科研人员也发现，棉田中一种体型很小的盲蝽蟓却容易爆发成灾｡有人认为这与大面积种植转基因抗虫棉有关｡我们应如何看待这种观点_____？如果回答问题有困难，可以请教老师或通过互联网寻找答案。评卷人得分四、判断题(共1题，共2分)20、植物细胞培养的原理是植物细胞的全能性。()A.正确B.错误评卷人得分五、综合题(共4题，共16分)21、生物反应器是利用生物体所具有的生物功能；在体外或体内通过生化反应或生物自身的代谢获得目标产物的装置系统；细胞、组织或器官等。微生物因其繁殖速度快、代谢效率高等优点被广泛应用于生物反应器，但也存在生产过程易染菌、大量消耗淡水等缺点。科学家计划从自然环境中筛选耐高温、耐盐碱的微生物菌株来解决这些缺点，流程如下。请回答：

样品→选择培养→梯度稀释→接种到鉴别培养基上→挑选保存。

（1）获得纯净微生物的关键是___________________________。在筛选微生物菌株时，应配制_______培养基；以阻止或抑制其他种类微生物的生长。

（2）上述流程中，鉴定微生物时用_______________法接种，此方法可对微生物进行计数，原理是_______________________。

（3）筛选得到的菌种若要临时保藏，应接种到试管的_______斜面培养基上。欲降低生产成本，可将筛选得到的菌种利用________法进行固定；以便在生产中反复利用。

（4）用筛选得到的耐高温、耐盐碱菌种作为生物反应器，生产过程不易染菌，原因是________________________________________________________________。22、CD47是一种跨膜糖蛋白；肺癌；结肠癌等多种肿瘤细胞表面的CD47含量明显高于正常细胞。研究发现，利用抗体抑制肿瘤细胞表面的CD47蛋白的活性，可促进巨噬细胞吞噬肿瘤细胞。为制备抗CD47的单克隆抗体，科学家按如下流程进行相关实验。请回答下列问题：

(1)上图EcoRI等均为限制酶，Kanr、Tcr分别为卡那霉素抗性基因、四环素抗性基因。为了构建基因表达载体，应该选用___________酶切割外源DNA和质粒DNA。

(2)为筛选成功导入重组质粒的大肠杆菌，利用图中两种标记基因，筛选出_________________的大肠杆菌；利用该菌种获得大量CD47蛋白。

(3)下图①是指从小鼠________中获得免疫后B细胞，经过选择性培养的杂交瘤细胞，还需进行操作②______________才可获得能分泌抗CD47抗体的杂交瘤细胞。体外培养该细胞获得大量单克隆抗体，需要满足以下条件：无菌无毒环境，充足的营养和适宜温度与pH，含有____________的气体环境。

(4)为验证抗CD47抗体对巨噬细胞吞噬肿瘤细胞的促进作用，研究人员将巨噬细胞和肿瘤细胞共同培养，加入适量抗CD47抗体，测定巨噬细胞的吞噬能力。要得出该结论还需要进行的操作是________________________________。23、科研人员将能产生药物A的植物甲叶肉细胞与能产生药物B的植物乙叶肉细胞融合后；过植物组织培养技术获得了能同时产生药物A；B的植物丙回答下列关于植物细胞工程的问题：

（1）将甲、乙植物的叶肉细胞融合前，须先利用________________________酶除去细胞壁，获得具有活力的________________________；再借助一定的技术手段进行诱导融合，诱导融合的方法可分为____________两大类，由此方法获得的细胞称为____________。

（2）利用植物组织培养技术培养融合细胞可获得植物丙的完整植株，该技术所依据的原理是____________。请用流程简图的形式概括出该过程____________。

（3）若将上述方法获得的细胞培养得到的____________为材料，经人工薄膜包装可得到人工种子。24、研究发现，实体肿瘤内部通常是缺氧的环境，蓖麻毒素蛋白（RTA）可作用于核糖体，使蛋白合成受阻，从而引起细胞死亡。TAT是一种短肽，可转导蛋白进入细胞，含有氧依赖性降解区域ODD（多肽）的融合蛋白可以适应低氧条件稳定存在，但在常氧条件下会被蛋白酶降解。科研人员以RTA作为抑制肿瘤细胞增殖的活性分子，利用TAT的作用将融合蛋白转运进入肿瘤细胞，并利用ODD的作用减轻RTA对正常细胞的毒性，分别构建了含TAT-RTA（660bp）和TAT-RTA-ODD（870bp）融合基因的表达载体；并成功得到相关融合蛋白。

(1)可采用PCR的方法获取融合基因TAT-RTA，需要根据TAT和RTA基因设计引物，引物的作用是____________。已知RTA基因和欲得到的TAT-RTA融合基因的结构如图1所示，TAT基因编码链序列5'ATGAGCTACGGCCGTAAAAAGAGACGCCAACGTAGA3′，为顺利构建表达载体，需要在引物1的5′端加入____________酶切位点，引物2的5′端加入____________酶切位点，利用TAT和RTA核酸序列设计引物时，要求在RTA蛋白的前端引人TAT短肽，请根据要求写出引物1____________（写出引物5′端的12个碱基即可）。

(2)载体的部分结构如图2所示，His标签由连续的6个组氨酸构成，可用于对重组融合蛋白进行分离纯化，将PCR得到的TAT-RTA融合基因和载体双酶切后，再用____________酶连接。但是在研究时，发现融合蛋白中没有His标签蛋白，据图分析原因是____________。可通过引物2的特殊设计使His标签正常表达，请结合图1和图2写出引物2____________（引物中如需添加碱基补足对应的密码子；可以添加任意碱基）。

(3)科研人员将得到的重组融合蛋白经腹腔给药荷瘤小鼠（患实体肿瘤的小鼠称为荷瘤小鼠）；研究荷瘤小鼠肿瘤体积变化，结果如图3所示；

请写出本实验的结果____________。

产生该实验结果的原因是____________。参考答案一、选择题(共7题，共14分)1、C【分析】【分析】

植物组织培养技术利用了植物细胞的全能性；培养过程中除给外植体提供必要的营养物质；植物激素外，应注意避免杂菌感染。

【详解】

A；培养基在使用之前应进行高压蒸汽灭菌；A错误；

B；接种操作接种室或接种台的酒精灯火焰旁边进行；B错误；

C；解剖刀在火焰上灼烧后需冷却才能用于切割外植体；避免高温导致细胞死亡，C正确；

D；外植体用化学试剂消毒后需经无菌水清洗2-3次后才可用于接种；D错误。

故选C。

【点睛】2、D【分析】【分析】

分析题图：图示质粒都含有氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因；其中1中复制原点被破坏，2中复制原点和两种抗性基因都完好，3中氨苄青霉素抗性基因被破坏，4中四环素抗性基因被破坏。

【详解】

A；基因amp和tet在同一个DNA分子上；不是一对等位基因，A错误；

B；质粒指细菌细胞中或酵母菌细胞中能自我复制的小型环状的DNA；动植物病毒的DNA不属于质粒，B错误；

C；限制性核酸内切酶的作用部位是DNA分子中特定的两个核苷酸之间的磷酸二酯键；C错误；

D；重组质粒4中；氨苄青霉素抗性基因完好，四环素抗性基因被破坏，因此用质粒4将目的基因导入大肠杆菌，该菌不能在含四环素的培养基上生长，D正确。

故选D。

【点睛】3、C【分析】【分析】

原理（1）腐乳的发酵在多种微生物的协同作用下进行；其中起主要作用的是毛霉，它是一种丝状真菌，新陈代谢类型是异养需氧型。（2）毛霉等微生物产生的蛋白酶可以将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可以将脂肪水解成甘油和脂肪酸。

【详解】

A；毛霉为好氧菌；为避免其无氧呼吸，码放豆腐时要注意留出一定的缝隙，A正确；

B；加盐腌制可以析出豆腐中的水分使之变硬；同时也能抑制微生物的生长，B正确；

C；加卤汤、密封腌制；具有防腐杀菌的作用，同时使腐乳具有一定的香味，在此条件下毛霉不能生长增殖，C错误；

D；豆腐上生长的白毛是毛霉的直立菌丝；D正确。

故选C。

【点睛】4、B【分析】【分析】

单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应；之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。

【详解】

A；步骤①是用CD47注射到小鼠体内使其产生体液免疫；产生能分泌抗CD47抗体的浆细胞，多次重复的目的是为了获得更多分泌抗CD47抗体的浆细胞，用于与骨髓瘤细胞融合，A正确；

B；骨髓瘤细胞的细胞核内有控制细胞连续增殖的基因；浆细胞内有能分泌抗CD47抗体的基因，将骨髓瘤细胞与浆细胞融合，可获得既能产生抗体，又能连续增殖的杂交瘤细胞，所以不能将骨髓瘤细胞去核，B错误；

C；步骤②为诱导动物细胞融合；可以利用聚乙二醇或灭活的病毒诱导完成细胞融合，C正确；

D；经过在特殊培养基上培养可将杂交瘤细胞筛选出来；再用专一性抗体检测，可将既能产生抗CD47抗体又能无限增殖的杂交瘤细胞筛选出来，D正确。

故选B。5、B【分析】【分析】

试管动物属于有性生殖；克隆动物属于无性生殖。

【详解】

A；在体外受精前；要对精子进行获能处理，通常采用的体外获能方法有培养法和化学诱导法两种，A错误；

B；动物胚胎发育的早期有一段时间是在透明带中完成的；胚胎体外培养过程中不需要利用相关技术去除透明带，B正确；

C；E和F的培育过程中均用到了胚胎移植技术；但是E是通过体外受精得到的，属于有性生殖，F是通过核移植得到的，属于无性生殖，C错误；

D；如图方法Ⅱ；产生的F牛的性别与C牛相同，但是性状不与C牛完全一致，一方面是因为性状还与所处环境有关，另外一方面是卵细胞中的质基因也会对牛的性状有所影响，D错误。

故选B。6、B【分析】【分析】

植物组织培养就是在无菌和人工控制的条件下；将离体的植物器官；组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。

【详解】

①植物组织培养需要在无菌；无毒的条件下进行；培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，①正确；

②培养基中需添加植物激素（主要是生长素和细胞分裂素）调节生命活动；无机盐、蔗糖等营养物质满足植物代谢的需求；②正确；

③植物组织培养利用植物细胞的全能性；胡萝卜的其他部分（如茎；叶、花）也具有全能性，因此能培养成小植株，③错误；

④图中培养瓶1中进行的是脱分化过程；而试管2中是再分化过程，因此二者的成分不完全相同，④错误。

③④错误。

故选B。7、B【分析】【分析】

疫苗是指用各类病原微生物制作的用于预防接种的生物制品。其中用细菌或螺旋体制作的疫苗亦称为菌苗。抗生素是指能抑制或者杀灭细菌；病毒等病原体繁殖的一类药物。

【详解】

A；抗生素能杀灭细菌；留下耐药菌，过多使用抗生素，会增加耐药菌的比例，因此需要谨慎使用抗生素，减少对耐药菌的选择，A正确；

B；转基因技术存在一定的安全争议；也不能任意改造生物，B错误；

C；疫苗可以使机体产生更多的记忆细胞和抗体；有利于更好地与病毒作斗争，因此面对新冠疫情，积极注射疫苗建立免疫屏障，C正确；

D；高风险实验室中的病原微生物一旦流出；会导致人群中增加患病风险，因此需要加强监管，避免病原微生物的泄露，D正确。

故选B。二、多选题(共5题，共10分)8、C:D【分析】【分析】

DNA粗提取和鉴定的原理：1；DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同（DNA在0.14mol/L的氯化钠中溶解度最低）；DNA不溶于酒精溶液；但细胞中的某些蛋白质溶于酒精。

2；DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性不同。

3；DNA的鉴定：在沸水浴的条件下；DNA遇二苯胺会被染成蓝色。

【详解】

A；鸡血细胞液加入蒸馏水；使得鸡血细胞的细胞膜吸水涨破，A错误；

B；洋葱鳞片叶碎片中；加入沐浴液有利于去除细胞膜，食盐能溶解DNA，B错误；

C；向DNA粗提取物中加入嫩肉粉；嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能破坏其中的蛋白质，有利于去除蛋白质，获得较纯净DNA，C正确；

D；由于DNA不溶于酒精；蛋白质溶于酒精，因此需向DNA滤液中加入冷酒精有利于析出DNA，一步纯化DNA，D正确。

故选CD。

【点睛】9、A:C【分析】据图分析；①过程表示获取B淋巴细胞和骨髓瘤细胞；②过程促进细胞融合，采用离心；电刺激、聚乙二醇、灭活病毒等试剂诱导，筛选出杂交瘤细胞；④过程通过专一抗体检验阳性，筛选出能够产生特异性抗体的细胞群；⑥过程表示动物细胞培养。

【详解】

A；B淋巴细胞是从小鼠的脾脏中提取的；骨髓瘤细胞不是，A错误；

B；④中筛选能产生特定抗体的杂交瘤细胞；可以通过检测抗原、抗体反应，如果有反应说明表达了抗体，B正确；

C；④中的筛选是为了获得能产生一种抗体的杂交瘤细胞；C错误；

D；⑤可以无限增殖；也能产生特异性抗体，D正确。

故选AC。10、A:C:D【分析】【分析】

酵母菌是一类单细胞真菌；能以多种糖类作为营养物质和能量的来源，因此在一些含糖量较高的水果；蔬菜表面经常可以发现酵母菌的存在。酵母菌是兼性厌氧微生物，在无氧条件下能进行酒精发酵，可用于酿酒、制作馒头和面包等。温度是影响酵母菌生长的重要因素，酿酒酵母的最适生长温度约为28℃。

【详解】

A、发酵产生果酒的菌种是酵母菌，酵母菌在有氧呼吸产生CO2；但不产生酒精，A错误；

B；切片后对发酵液进行消毒；防止杂菌污染，再进行分组，B正确；

C；压榨倒罐用于主发酵需保留空间以促进酵母菌的有氧呼吸；二次倒罐时菌种是进行无氧呼吸，C错误；

D；主发酵先有氧促进酵母菌大量繁殖；后无氧进行酒精发酵，后发酵要控制无氧，D错误。

故选ACD。11、A:B【分析】【分析】

动物细胞培养需要满足以下条件：①无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。②营养：合成培养基成分：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常需加入血清、血浆等天然成分。③温度：适宜温度。④气体环境：95%空气+5%CO2。

【详解】

A、动物细胞培养中，培养环境中需要O2，也需要CO2（用来维持培养液的pH）；A错误；

B；动物细胞培养不需要脱分化；植物细胞要经过脱分化才形成愈伤组织，B错误；

C；动物细胞培养中常用含糖类、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清的液体培养基；C正确；

D；动物细胞培养过程中会出现接触抑制现象而停止分裂增殖；故培养瓶中的细胞培养到一定阶段后要用胰蛋白酶处理，分瓶后才能继续增殖，D正确。

故选AB。12、B:C:D【分析】【分析】

1；“试管婴儿”是利用体外授精和胚胎移植的方法；解决不孕夫妇的生育问题。

2；设计试管婴儿概念：是指体外受精形成的胚胎在植入母体孕育前；根据人们的需要，将胚胎的一个细胞取出，进行某些设计，当检测结果符合人们需要时，再把胚胎植入母体孕育。

【详解】

A；透明带和卵细胞膜的反应可以防止多精入卵；从而保证受精卵染色体数目的正常，A正确；

B；由于细胞质中也存在基因控制生物性状；所以克隆猴的性状不完全与细胞核供体的相同，B错误；

C；试管婴儿技术与正常的生殖过程相比仅仅是受精和早期胚胎发育的场所不同；实质没有变化，属于有性生殖；而克隆猴是将动物体细胞的细胞核移植到去核的卵细胞后发育成的新个体，属于无性生殖的范畴，C错误；

D；设计试管婴儿与试管婴儿的主要区别是前者在胚胎植入前需进行遗传学诊断；设计试管婴儿有时除体外受精、胚胎培养和胚胎移植外还需要借助其它技术，D错误。

故选BCD。三、填空题(共7题，共14分)13、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】低当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落菌落数14、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】DNA连接酶15、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】30～3516、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】稳定存在遗传至下一代表达和发挥17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】318、略

【分析】【分析】

动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织；将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。植物组织培养又叫离体培养，指从植物体分离出符合需要的组织；器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在无菌条件下接种在含有各种营养物质及植物激素的培养基上进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。

【详解】

1；基因工程又称基因拼接技术和DNA重组技术；是以分子遗传学为理论基础，以分子生物学和微生物学的现代方法为手段，将不同来源的基因按预先设计的蓝图，在体外构建杂种DNA分子，然后导入活细胞，以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品的遗传技术。

2；胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎；或者通过体外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其它雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术。

3；动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织；将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖，其原理是细胞增殖。

4；植物组织培养又叫离体培养；指从植物体分离出符合需要的组织、器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在无菌条件下接种在含有各种营养物质及植物激素的培养基上进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性。

【点睛】

本题考查基因工程概念、胚胎移植、动植物细胞培养等相关知识，意在考察考生对知识点的理解掌握程度。【解析】①.又叫基因拼接技术或DNA重组技术②.又称受精卵移植，是指将雌性动物体内的的早期胚胎，或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状况相同的其他雌性动物体内，使之继续发育为新个体的技术③.植物细胞全能性、细胞增殖19、略

【分析】【详解】

生物之间存在（种间）竞争多关系，该区域的棉铃虫与盲蝽蟓之间共同以棉花为食，种植转基因抗虫棉后，棉铃虫不能存活，盲蝽蟓的食物等资源充足，故大量繁殖，爆发成灾。【解析】该区域的棉铃虫与盲蝽蟓之间存在竞争关系，种植转基因抗虫棉后，棉铃虫不能存活，盲蝽蟓大量繁殖四、判断题(共1题，共2分)20、B【分析】【详解】

植物组织培养是指将离体的植物器官、组织或细胞等，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其形成完整植株的技术，最终获得了完整的植株，体现了植物细胞的全能性，而植物细胞培养的目的使获得大量的植物细胞，从而获得次生代谢物，利用的原理是细胞增殖，故错误。五、综合题(共4题，共16分)21、略

【分析】【分析】

1；实验室中无菌操作的要求一般有：对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行灭菌消毒；将培养器皿、接种用具和培养基等进行灭菌；为避免周围环境中微生物的污染；实验操作应在酒精灯火焰附近进行；实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品相接触。

2；分离纯化微生物常采用的接种方法有两种：平板划线法和稀释涂布平板法；但前者只能分离纯化得到单菌落，后者不仅可以得到单菌落，还能用于活菌计数。

（1）

获得纯净微生物反应器的关键是防止外来杂菌入侵；为了阻止或抑制其他种类微生物的生长，在筛选微生物菌株时，应配制选择培养基。

（2）

根据题中流程信息；鉴定微生物时用稀释涂布平板法接种菌种，利用稀释涂布平板法可对微生物进行计数的原理是当样品稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。

（3）

菌种的临时保藏；应接种到试管的固体斜面培养基上。可以利用包埋法将筛选得到的菌种进行固定，以便在生产中反复利用，降低生产成本。

（4）

筛选得到的菌种具有耐高温；耐盐碱的特性；生产过程可以设置高温、高盐碱的培养条件，在此条件下杂菌一般无法存活，实现降低杂菌污染的概率。

【点睛】

本题考查了微生物实验中的无菌操作技术需要注意的问题，微生物的分离与培养的有关知识，要求考生能够识记培养基的成分，掌握微生物分离和计数的方法，能够根据实验要求进行实验补充与判断等。【解析】（1）防止外来杂菌入侵选择。

（2）稀释涂布平板当样品稀释度足够高时；培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。

（3）固体包埋。

（4）在高温、高盐碱条件下，杂菌一般无法存活22、略

【分析】【分析】

限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列；并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。标记基因的作用是用于重组DNA的鉴定和选择，以便把含有目的基因的受体细胞筛选出来。

(1)

用BamHI和XhoI进行酶切；构建重组质粒，既可以获得完整的目的基因，又可以获得含有卡那霉素抗性基因的重组质粒。

(2)

根据（1）中分析可知；重组质粒中的四环素抗性基因被破坏，而卡那霉素抗性基因未被破坏，所以重组质粒导入成功的大肠杆菌含有卡那霉素抗性基因，而不含四环素抗性基因，故该大肠杆菌能在含卡那霉素的培养基上生长；而不能在含四环素的培养基上生长。

(3)

在制备单克隆抗体过程中，首先要将特定的抗原蛋白注入小鼠体内，然后从小鼠脾脏中获得已免疫的B淋巴细胞（浆细胞）；经过选择性培养的杂交瘤细胞，随后进行克隆化培养和抗体检测才可获得相应的杂交瘤细胞；培养细胞时，通常将培养瓶置于含95%空气加5%CO2的混合气体的培养箱中培养，CO2的主要作用是维持培养液的pH；氧气进行细胞代谢。

(4)

本实验中还需进行共同培养巨噬细胞和肿瘤细胞；但不加入抗CD47抗体，测定巨噬细胞的吞噬能力，当做对照。

【点睛】

本题考查基因工程、动物细胞培养和单克隆抗体的制备等知识，要求考生识记基因工程的操作过程，动物细胞培养的原理、过程及意义；识记单克隆抗体的制备过程。【解析】(1)BamHI和XhoI

(2)能在含卡那霉素的培养基上生长；而不能在含四环素的培养基上生长。

(3)脾脏克隆化培养和抗体检测95%空气加5%CO2

(4)共同培养巨噬细胞和肿瘤细胞，但不加入抗CD47抗体，测定巨噬细胞的吞噬能力23、略

【分析】【分析】

植物体细胞杂交技术过程：

（1）诱导融合的方法：物理法包括离心；震动、电刺激等。化学法一般是用聚乙二醇（PEG）作为诱导剂；（2）细胞融合完成的标志是新的细胞壁的生成；（3）植物体细胞杂交的终点是培育成杂种植株；而不是形成杂种细胞就结束；（4）杂种植株的特征：具备两种植物的遗传特征，原因是杂种植株中含有两种植物的遗传物质。

【详解】

（1）植物体细胞杂交技术中；在诱导叶肉细胞融合前，需先用酶解法去除细胞壁，即利用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，获得有活力的原生质体；诱导植物原生质体融合的方法有物理法（如离心；震动、点击等）和化学法（主要是聚乙二醇）两大类；由此获得的细胞称为杂种细胞。

（2）将融合细胞培养获得植物丙的过程主要为植物组织培养技术；该过程依据的原理是植物细胞具有全能性；该过程中需要及时调整更换培养基，具体流程图可表示为：杂种细胞→接种到诱导培养基→愈伤组织→接种到分化培养基→幼苗→完整植株。

（3）制备人工种子需要在上述过程获得的胚状体基础上经人工薄膜包装而成。

【点睛】

本题主要考查植物体细胞杂交等知识，要求考生识记植物体细胞杂交技术的过程、条件及应用，再结合所学的知识答题。【解析】纤维素