2024年华东师大版选修3生物下册月考试卷含答案

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A.①～③过程中发生了有丝分裂和减数分裂B.①阶段需要生长素而③阶段仅需要细胞分裂素C.①阶段细胞增殖能力强，细胞分化速度快D.X阶段的细胞高度液泡化，排列疏松而无规则2、科研人员通过PCR获得肝细胞特异性启动子——白蛋白启动子，将该启动子与Cre重组酶基因结合构建表达载体，培育出在肝细胞特异性表达Cre重组酶的转基因小鼠。下列叙述正确的是A.将该表达载体导入肝细胞以获得转基因小鼠B.PCR获得白蛋白启动子需设计特异性的引物C.构建该表达载体需要限制酶和DNA聚合酶D.通过核酸分子杂交技术检测目的基因是否完成表达3、利用细菌大量生产人的胰岛素，下列叙述错误的是A.用适当的酶对运载体与人的胰岛素基因进行切割与黏合B.用适当的化学物质处理受体细菌表面，将重组DNA导入受体细菌C.通常通过检测目的基因产物来检测重组DNA是否已导入受体细菌D.重组DNA必须能在受体细菌内进行复制与转录，并合成人的胰岛素4、大肠杆菌pUC118质粒具有氨苄青霉素抗性基因；某限制酶唯一切点位于该质粒的lacZ基因中。在特定的选择培养基中，若lacZ基因没有被破坏，则大肠杆菌菌落呈蓝色；若lacZ基因被破坏，则菌落呈白色。图表示转基因操作过程。下列有关叙述错误的是。

A.应选择白色菌落的大肠杆菌进行扩大培养B.若大肠杆菌的菌落为蓝色，则导入的是普通质粒C.作为受体的大肠杆菌应含氨苄青霉素抗性基因，以便于筛选D.选择培养基中除必需的营养物质外，还应加入适量氨苄青霉素5、治疗性克隆对解决供体器官缺乏和器官移植后免疫排斥反应具有重要意义。与下图所示流程相关的叙述不正确的是（）

A.去核卵细胞一般取自处于减数分裂I中期的卵母细胞B.过程①需要提供CO2主要作用是维持培养液的酸碱度C.胚胎干细胞可取自囊胚的内细胞团，具有分化为各种类型细胞的能力D.图中获得的组织器官移植给个体B理论上不会发生免疫排斥反应6、抗体-药物偶联物（ADC）通过将细胞毒素类药物与单克隆抗体结合；实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤，过程如图所示。下列表述正确的是（）

A.ADC可通过主动运输进入肿瘤细胞B.抗体进入细胞后激活溶酶体酶，导致细胞凋亡C.单克隆抗体携带细胞毒素与肿瘤细胞特异性结合D.肿瘤细胞凋亡是细胞主动死亡的过程，所以不会产生新蛋白质7、哺乳动物在自然条件下受精和早期胚胎的发育规律是胚胎工程重要的理论基础。下列相关叙述错误的是（）A.精子获能后，才具有与卵母细胞受精的能力B.精子入卵后，透明带会迅速发生生理反应，阻止其他精子入卵C.受精卵早期在透明带内进行卵裂，进一步发育形成桑葚胚D.囊胚期的内细胞团将发育成胎儿的各种组织8、下列关于采用胚胎工程技术实现某良种肉用牛快速繁殖的叙述，正确的是（）A.采取激素注射等方法对良种母牛作超数排卵处理B.体外培养发育到原肠胚期的胚胎即可进行移植C.使用免疫抑制剂以避免代孕牛对植入胚胎的排斥反应D.利用胚胎分割技术，同卵多胎较同卵双胎成功率更高评卷人得分二、多选题(共7题，共14分)9、下列关于细胞工程的有关叙述，不正确的是A.利用花药离体培养得到单倍体植株，从紫草的愈伤组织中提取紫草素，利用细胞工程培育“番茄-马铃薯”杂种植株，都利用了植物组织培养技术，而利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗得到多倍体植株没有采用植物组织培养技术B.在进行组织培养时，由根尖细胞形成愈伤组织的过程中，可能会发生细胞脱分化，染色体变异或基因突变，而不可能发生细胞分化和基因重组C.动物细胞融合与植物体细胞杂交相比，诱导融合的方法，所用的技术手段，所依据的原理均相同，都能形成杂种细胞和杂种个体D.单克隆抗体的制备采用了动物细胞融合技术和动物细胞培养技术10、辣椒素作为一种生物碱广泛用于食品保健；医药工业等领域；其获得途径如下图所示。下列叙述正确的是。

A.图中愈伤组织、脱毒苗和高产细胞系的获得都体现了植物细胞的全能性B.图中①和②分别表示辣椒组织培养中细胞的脱分化和再分化过程C.②过程中需用适宜配比的生长素和细胞分裂素溶液处理D.用酶解法将愈伤组织分离成单细胞时，常用的酶是纤维素酶和果胶酶11、如图为杂交瘤细胞制备示意图。下列叙述正确的是（）

A.骨髓瘤细胞和免疫B细胞可用仙台病毒诱导融合B.骨髓瘤细胞在HAT筛选培养液中不能正常增殖C.免疫B细胞的种类不唯一所以杂交瘤细胞仍需进一步筛选D.筛选出的杂交瘤细胞体外培养时需添加抗生素防止真菌污染12、甲图为牛胚胎移植示意图，乙图为胚胎发育某时期示意图，下列叙述错误的是（）

A.甲图中冲卵的目的是获取受精卵B.对供体母牛和受体母牛注射性激素，进行同期发情处理C.性别鉴定时需将图乙②处细胞做染色体分析D.受精卵形成乙的过程中进行卵裂，每个细胞的体积变小13、下列关于小鼠体外受精及胚胎发育的叙述，错误的是（）A.精子在获能液中培养的目的是使精子获取能量B.注射到囊胚腔中的胚胎干细胞可以参与个体器官的发育C.小鼠在特定光控周期条件下饲养，注射相关激素有促进超数排卵的作用D.分割的胚胎细胞有相同的遗传物质，因此发育成的个体没有形态学差异14、蚯蚓分解处理技术可实现固体废物的减量化和资源化。下图为某农业生态系统的示意图；下列叙述正确的是（）

A.该生态系统中的蚯蚓和各种微生物均属于分解者B.该生态工程设计突出体现了物质循环再生的原理C.农作物、果树等植物获取的物质和能量主要来自有机肥D.影响蚯蚓分解处理效率的因素有温度、含水量等15、科研人员对某地富营养化水体实施生态恢复，向水体引入以藻类为食的某些贝类，引种芦苇、香蒲等水生植物，以及放养植食性鱼类等。经治理后实现了（）A.水体中溶解氧含量升高B.物质和能量的良性循环C.生态系统稳定性提高D.经济和社会效益的共同提高评卷人得分三、填空题(共9题，共18分)16、生物学家利用基因工程技术通过生物反应器生产人的血清蛋白。请根据相关知识回答下列问题：

（1）在基因工程的操作中的“分子手术刀”是_______________________________

（2）在基因工程的操作中的“分子缝合针”是________

（3）基因工程中最常用的运载体是______

（4）人的基因在牛体内能表达，说明人和牛______17、自然条件下；奶牛的繁殖率非常低，一般一头奶牛一年只能繁殖一头牛犊。通过胚胎工程技术可以快速繁育优良个体，其主要步骤如图所示。回答下列问题：

（1）从供体奶牛获得的精子，需对其进行___________处理才具有受精能力。

（2）通常奶牛每次只排出一枚卵母细胞，为使其超数排卵常使用____________激素处理；采集到卵母细胞后，在体外将其培养到___________期；使其成熟。

（3）步骤甲、乙分别指___________、___________。为筛选出具有优良性状的母牛，步骤乙之前应鉴定胚胎中与___________有关的基因。

（4）进行步骤乙时，受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生___________，这为胚胎在代孕母牛体内的存活提供了可能。18、基因治疗：基因治疗是指用正常基因_______或______患者细胞中有缺陷的基因，从而达到治疗疾病的目的。19、根据课本知识填空：

（1）神经元的轴突末梢经过多次分支；最后每个小枝末端膨大，呈杯状或球状，叫做________。

（2）抗体可以与病原体结合；从而抑制病原体的繁殖或___________________________。

（3）要检测目的基因是否转录出了mRNA；可以用____________________________做探针。

（4）所谓人工种子就是以植物组织培养得到的________________________（写出2个即可）等为材料；经过人工薄膜包装得到的种子。

（5）胰岛素能促进组织细胞加速_______________葡萄糖。20、今年年初；爆发了全球性新型肺炎疫情。初步研究表明，新型冠状病毒通过其表面的S-蛋白与人细胞膜上的ACE2相互识别，感染人的呼吸道上皮细胞。请分析回答问题：

（1）新型冠状病毒表面的S-蛋白作为_________剌激淋巴细胞，使机体产生_________性免疫反应，人细胞膜上的ACE2的化学本质是_________。

（2）感染病毒后，免疫系统对肺细胞强烈攻击引发肺炎，此时可通过适度使用_________对病人进行治疗；使其免疫功能下降，以避免肺部严重受损。

（3）科学家采集了感染新型冠状病毒并已康复的甲、乙两人的血液，检测相关抗体的水平，结果如图1。据此分析，应选取_________的B淋巴细胞用以制备单克隆抗体（单抗）。

（4）将制备的多种单抗分别与病毒混合，然后检测病毒对宿主细胞的感染率，结果如图2。据此分析，对病毒抑制效果最好的单抗是__________号。

（5）患者康复后一段时间，若再次受到该病毒的攻击，机体内相应的__________细胞迅速增殖分化，产生大量的浆细胞和细胞毒性T细胞。21、下图表示哺乳动物精子和卵细胞发生和成熟的示意图。请据图回答下列问题：

（1）③过程中精子头部的顶体是由__________发育来的；④过程在__________内完成。

（2）在④过程中发生顶体反应；释放顶体酶，溶解卵丘细胞之间的物质和透明带。为了阻止多精入卵，会发生__________反应和__________反应。

（3）精子的发生开始的时期是__________；雌性动物卵泡的形成的时期是__________。

（4）初级卵母细胞进行Ⅰ过程是在__________时期完成的，Ⅱ过程是在__________过程中完成的。22、请写出基因工程的概念：_________________。请写出胚胎移植的概念：_____________________。请分别写出植物组织培养和动物细胞培养的原理_________。23、自然条件下；奶牛的繁殖率非常低，一般一头奶牛一年只能繁殖一头牛犊。通过胚胎工程技术可以快速繁育优良个体，其主要步骤如图所示。回答下列问题：

（1）从供体奶牛获得的精子，需对其进行___________处理才具有受精能力。

（2）通常奶牛每次只排出一枚卵母细胞，为使其超数排卵常使用____________激素处理；采集到卵母细胞后，在体外将其培养到___________期；使其成熟。

（3）步骤甲、乙分别指___________、___________。为筛选出具有优良性状的母牛，步骤乙之前应鉴定胚胎中与___________有关的基因。

（4）进行步骤乙时，受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生___________，这为胚胎在代孕母牛体内的存活提供了可能。评卷人得分四、判断题(共5题，共40分)24、一般情况下一个卵细胞只能由一个精子发生融合形成受精卵()A.正确B.错误25、精子入卵后形成雄原核；同时卵子完成减数分裂Ⅱ，排出第二极体后，形成雌原核()A.正确B.错误26、受精包括受精前的准备阶段和受精阶段，在自然状态下，哺乳动物的受精在子宫内完成。（选择性必修3P56）()A.正确B.错误27、下图表示哺乳动物发育过程的几个阶段；请判断下列题的叙述是否正确？

（_____）（1）从A到C的过程中有机物的含量减少。

（_____）（2）A；B时期胚胎中的细胞都是全能细胞。

（_____）（3）胚胎移植必须使用处于B或C时期的胚胎。

（_____）（4）图示过程细胞通过有丝分裂增殖，遗传物质可能会发生改变。A.正确B.错误28、在生态工程建设中，只能遵循“先污染、破坏、再治理”的发展思路______A.正确B.错误评卷人得分五、非选择题(共2题，共16分)29、黄连素具有促进排卵和提高受孕率的生殖疗效。作为一种重要的生物碱；黄连素可从中草药黄连；黄柏、三颗针等植物中提取。临床常用来治疗细菌性胃肠炎、痢疾等消化道疾病。请回答下列有关问题。

（1）某生物科研小组利用植物组织培养技术快速大量繁殖含黄连素的黄连等植物。该技术利用的原理是____________________。在培养过程中；离体的黄连茎切段需经过__________；__________，然后培养出根、芽，才能形成完整的黄连小植株。

（2）黄连素具有促进排卵的疗效。卵子在发生过程中；减数第二次分裂是在__________的过程中完成的。获能的精子与卵子相遇时，首先发生____________________反应，使顶体内的酶释放出来。卵子完成受精的标志是____________________。

（3）某生物科研小组想利用基因工程的方法获取催化合成黄连素的酶。基因工程操作过程中的核心步骤是__________；将目的基因导入大肠杆菌细胞内，首先要用__________处理细胞，使之成为感受态细胞。30、白僵菌可感染农业害虫；常作为防治害虫的菌剂。由于白僵菌对除草剂草丁膦敏感，且杀死害虫的能力较弱，科研人员对其进行基因工程改造，流程如图所示。

（1）苏云金芽孢杆菌产生的毒蛋白能有效杀死害虫。从苏云金芽孢杆菌中获取毒蛋白基因；通过PCR技术可在体外大量扩增。该扩增过程需要________种引物，所需添加的酶是________。

（2）将毒蛋白基因和质粒连接获得重组质粒1的过程需要用到的限制酶是________；其作用是破坏DNA分子中的________键。

（3）重组质粒1和Bar基因（草丁膦抗性基因）各自用XbaI酶处理；得到酶切片段。重组质粒1的酶切片段再用去磷酸化酶处理，使末端游离的磷酸基团脱离，目的是防止__________。

（4）将重组质粒2导入经_______处理成为感受态的白僵菌，一段时间后用含有_______的平板培养基进行筛选，获得含有Bar基因的重组白僵菌。

（5）科研人员将重组白僵菌喷涂于植物叶片上；以此饲喂饥饿处理的害虫，记录单位时间内的_____，以判断重组白僵菌的杀虫效果。

（6）分析利用基因工程获得的重组白僵菌对生态环境可能造成的影响：_____________。评卷人得分六、实验题(共4题，共8分)31、某些糖尿病患者因胰岛B细胞被完全破坏；分泌胰岛素的功能丧失，需要通过注射胰岛素来补充。目前，该类患者对胰岛素的需求量越来越大。回答下列问题：

(1)在利用基因工程大规模生产胰岛素时；将胰岛素合成基因与质粒重组后导入大肠杆菌进行了表达。以上过程除了证明质粒可以作为载体外，还证明了_______；_________等。

(2)构建基因表达载体时；常用的工具酶是_________，他们作用的化学键是___________。基因工程中，不能将胰岛素合成基因直接导入大肠杆菌，其原因是__________。

(3)检测胰岛素合成基因是否导入受体菌时；常用_______作探针。

(4)胰岛素合成基因在大肠杆菌细胞内表达时，遗传信息的传递方向是_____。经检测，胰岛素合成基因的表达产物未能达到预期的生物活性，导致这种差异的原因可能是表达产物未经______的加工。32、某些膜内蛋白以紧密排列的方阵形式存在称为OAPs；OAPs的分布异常与某些神经性和神经肌肉性疾病相关。研究AQP4（一种水通道蛋白）与OAPs结构形成的关系，有助于揭示上述疾病的机制。请回答问题：

(1)AQP4有M1和M23两种分子量相近的亚型，二者均可独立构成四聚体发挥作用。科研人员发现导入并稳定表达M23基因的细胞；其细胞膜上有OAPs形成，而敲除该基因的细胞中未见OAPs的形成，该结果表明______。

(2)科研人员继续对M1与OAPs形成的关系进行了研究。

①提取大鼠脑组织的总RNA，通过______法获得cDNA，并通过______技术获得M1基因。

②将M1基因与质粒用______酶构建基因表达载体，导入中国仓鼠卵巢细胞（CHO）中，用______技术检测到受体细胞已成功表达M1蛋白。

③科研人员继续实验；方案及结果如下。

。实验分组。

1对照组。

2对照组。

3实验组。

实验处理。

____

____

导入M1基因的CHO细胞。

培养一段时间后裂解细胞并离心；取上清液中蛋白。

培养一段时间后裂解细胞并离心；取上清液中蛋白。

检测指标。

用电泳技术检测____的形成情况。

请将表格中的实验方案补充完整。a：______，b：______；c：______。

(3)综合上述实验结果，AQP4与OAPs形成的关系为______。33、为研究野生型拟南芥抗盐机理；研究人员利用T-DNA插入拟南芥基因组中，得突变体Y。

（1）种植野生型拟南芥，将地上部分浸入______菌悬浮液中以实现转化，该菌的T-DNA上需带有抗除草剂基因以便筛选。在适宜条件下培养，收获种子（称为T1代）。

（2）假设所处理植株为T-DNA单拷贝插入，则T1代植株自交后所结种子中具有抗除草剂性状的占______。继续种植具有抗除草剂性状的种子，长成植株后进行自交，若______；表明获得了纯合的转基因突变体植株Y。

（3）野生型拟南芥的抗盐性状与D基因密切相关，T-DNA插入到D基因中，致使该基因失活，失活后的基因记为d。收集上述突变体Y叶片并提取DNA，分别用引物“LB+RP”组合及“LP+RP”组合进行PCR扩增。已知插入完整T-DNA后，“LP+RP”不能完成PCR扩增如图．检测扩增结果中，若______，则相应植株的基因型为Dd；若______；则相应植株的基因型为dd。

（4）研究人员收集7个突变体的叶片，提取叶片总mRNA，并逆转录为cDNA，利用特异性引物进行PCR扩增，结果如图．基因actin在拟南芥中表达相对稳定，作为本实验的______，结果表明______号植株因T-DNA的插入；D基因完全沉默。

（5）将野生型和突变体种子消毒后；分别播种于含有不同浓度NaCl培养基中，观察种子萌发情况，结果见如图．

由如图可知，在不含NaCl的培养基上，野生型和突变体种子的萌发率______；随着NaCl浓度的升高，突变体种子的萌发率明显______。

（6）野生型在高浓度NaCl胁迫下，脱落酸（ABA）含量增加，并迅速参与到抗胁迫的反应中。突变体D基因由于T-DNA的插入不能正常表达，导致突变体的抗盐性下降，由此推测D基因抗盐作用的机理是______。34、回答下列(一)；(二)小题:

(一)植物在突然遭遇寒冷环境时；体内脂氨酸的含量会增加，以度过寒冷的不良环境。因此冷害处理后的植物体内脂氨酸含量可以作为不同植物品种抗冷害性能的生理指标。农业部门的科学研究者为了找到一种抗寒能力较强的水稻，对多个水稻品种进行了冷害处理，测定体内的脂氨酸含量并进行比较，从而选择出合适的品种。

(1)脂氨酸的含量可以通过让其与相应试剂反应并显色后，用__________（填仪器名称）测定其OD值来测定。测定OD值前，需要通过预实验确定所需比色杯的_________，脂氨酸的含量相同时，比色杯的该指标越大所测得的OD值越_______。可以通过OD值来确定脂氨酸含量的原理是_____________________。

(2)为了便于测定不同品种的水稻冷害处理后的脂氨酸含量，农业部门的科学研究者首先要将已知含量梯度的脂氨酸显色反应后测定其OD值，绘制好___________。

(3)后来发现该品种水稻在寒冷环境中种植容易得一种怪病，科学研究者猜想是感染了某种抗寒能力比较强的细菌，为了筛选出这种细菌，需要配制______(A.LB选择培养基B.MS选择培养基C.LB全营养培养基D.MS全营养培养基)，并需将接种后的培养基置于温度设置为________(低温中温高温)的恒温培养箱中培养；然后对菌落中的细菌进行研究。

(二)科学家通过诱导黑鼠体细胞去分化获得诱导性多功能干细胞(iPS)；继而利用iPS细胞培育出与黑鼠遗传特性相同的克隆鼠。流程如下:

(1)要获取iPS细胞，首先要进行黑鼠体细胞体外培养。为了方便实验开展，可以对黑鼠组织用胰蛋白酶处理，其目的是消化____________，以获得单个细胞的悬浮液。然后通过_____________得到纯系的细胞群。

(2)对从灰鼠的____________部位获取的2-细胞胚胎，进行体外培养至囊胚后，将其制成重组囊胚。重组囊胚移植到白鼠体内后其___________部分会发育形成胚胎的附属结构或胚外结构，而________分化出成体动物的所有组织和器官。

(3)制备iPS细胞的方法是把0ct4等转录因子在基因导入小鼠成纤维细胞，有道其发生转化，从而产生iPS细胞。在基因导入过程中，除了质粒外，还可以选用_____________为运载体。若将某目的基因导入的受体细胞为大肠杆菌时___(能/不能)选用T2噬菌体为运载体。参考答案一、选择题(共8题，共16分)1、D【分析】【详解】

A；①～③过程中发生了有丝分裂；但没有发生减数分裂，A错误；

B；①、③阶段都需要生长素和细胞分裂素；只是两种激素的比例不同，B错误；

C；①阶段细胞增殖能力强；细胞还未分化，C错误；

D；X是经过①脱分化过程形成的愈伤组织；其细胞高度液泡化，排列疏松而无规则，D正确。

故选D。

【点睛】

据图分析：①表示脱分化过程，形成的X是愈伤组织；②表示再分化过程，形成胚状体，整个过程中细胞进行的是有丝分裂，没有发生减数分裂。2、B【分析】将该表达载体导入受精卵以获得转基因小鼠，A错误；PCR技术需设计特异性的引物，B正确；构建该表达载体需要限制酶和DNA连接酶，C错误；检测目的基因是否完成表达常用抗原抗体杂交技术，D错误。3、C【分析】【分析】

【详解】

A；用同种限制酶对运载体与人类胰岛素基因进行切割；用DNA连接酶进行黏合，A正确。

B、用适当的化学物质Ca+处理受体细菌表面；可增大细胞壁的通透性，容易使重组DNA导入受体细菌，B正确。

C；可以通过DNA分子杂交技术检测目的基因是否已导入受体细菌；而检测目的基因产物可以检测目的基因是否可以翻译成蛋白质，C错误。

D；重组DNA必须能在受体细菌内进行复制与转录；并合成人类胰岛素，才意味着利用细菌大量生产出了人类胰岛素，D正确。

故选C。4、C【分析】【分析】

某限制酶唯一切点位于该质粒的lacZ基因中；则含有目的基因的重组质粒lacZ基因被破坏，含有重组质粒的菌落呈白色。没有插入目的基因的质粒lacZ基因没有被破坏，含有普通质粒的大肠杆菌菌落呈蓝色。

【详解】

A；根据分析可知；应选择白色菌落的大肠杆菌进行扩大培养，A正确；

B；若大肠杆菌的菌落为蓝色；说明质粒lacZ基因没有被破坏，导入的是普通质粒，B正确；

C；大肠杆菌pUC118质粒具有氨苄青霉素抗性基因；作为受体的大肠杆菌应不含氨苄青霉素抗性基因，以便于筛选含有重组质粒的大肠杆菌，C错误；

D；选择培养基中加入适量氨苄青霉素；可以选择含有重组质粒的大肠杆菌，D正确。

故选C。5、A【分析】【分析】

治疗性克隆主要应用了动物细胞核移植技术；该技术由高度分化的体细胞提供细胞核，处于减数第二次分裂中期的卵母细胞提供细胞质；胚胎干细胞可来自囊胚期的内细胞团，其具有分化为各种体细胞的能力。

【详解】

A；去核卵细胞一般取自处于减数第二次分裂中期的卵母细胞；A错误；

B、动物细胞培养需将培养液至于95%空气+5%CO2气体环境的培养箱中；B正确；

C；囊胚的内细胞团细胞具有分化为其他体细胞的能力；C正确；

D；个体B为提供细胞核的个体；和组织器官的细胞核遗传物质相同，D正确；

故选A。6、C【分析】【分析】

识图分析可知；图中抗体-药物偶联物（ADC）通过将细胞毒素类药物与单克隆抗体结合，利用抗体与抗原的特异性结合，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。图中ADC的作用机制为：携带药物的抗体与肿瘤细胞膜上的特异性受体结合，然后通过胞吞作用进入到细胞内，抗体被细胞内的溶酶体裂解，释放出药物作用于肿瘤细胞，使肿瘤细胞凋亡。

【详解】

A.根据以上分析可知；ADC可通过胞吞的方式进入肿瘤细胞，A错误；

B.识图分析可知；抗体进入细胞后被溶酶体裂解，释放的药物导致细胞凋亡，B错误；

C.根据以上分析可知；单克隆抗体携带细胞毒素与肿瘤细胞膜上的特异性受体结合，C正确；

D.肿瘤细胞凋亡是细胞主动死亡的过程；细胞凋亡过程中基因进行选择性表达，因此会产生新蛋白质，D错误。

故选C。7、B【分析】【分析】

1；受精过程为：顶体反应→穿越放射冠→穿越透明带（透明带反应）→卵细胞膜反应（卵黄膜封闭作用）→卵子完成减数第二次分裂并释放第二极体→雌雄原核的形成、核膜消失；雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂开始。2、胚胎发育过程：（1）卵裂期：细胞进行有丝分裂，数量增加，胚胎总体积不增加；（2）桑椹胚：32个细胞左右的胚胎（之前所有细胞都能发育成完整胚胎的潜能属全能细胞）；（3）囊胚：细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔；（4）原肠胚：内细胞团表层形成外胚层，下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔。

【详解】

A；刚排出的精子不能立即与卵子结合；必须在雌性动物的生殖道内获能后，才具有与处于MⅡ期的卵母细胞受精的能力，A正确；

B；精子入卵后；卵细胞膜会发生一种称作卵细胞膜反应的生理反应，从而防止其它精子进入卵细胞，B错误；

C；早期胚胎发育的过程是受精卵→桑葚胚→囊胚→原肠胚；即受精卵早期在透明带内进行有丝分裂，进一步发育形成桑葚胚，C正确；

D；胚胎干细胞是一类具有发育的全能性的细胞；可从桑葚胚或囊胚中分离获取，D正确。

故选B。8、A【分析】【分析】

胚胎移植的基本程序：对供体和受体的选择和处理（同期发情处理；超数排卵处理）；配种或进行人工授精、对胚胎的收集检查培养或保存、进行胚胎移植。所以在发情期给良种母牛注射激素，促进母牛多排卵，这种处理属于超数排卵处理。

【详解】

用促性腺激素对良种奶牛进行注射处理；可促使其超数排卵，A正确；进行移植的胚胎是桑椹胚或囊胚，B错误；受体对移植的胚胎几乎不发生免疫排斥反应，因此无需使用免疫抑制剂，C错误；利用胚胎分割技术，同卵双胎较同卵多胎成功率更高，D错误。

【点睛】

解答本题的关键是掌握胚胎移植的详细过程，注意同期发情处理的方法、胚胎移植的时间，明确胚胎分割次数越多，成功的概率越低。二、多选题(共7题，共14分)9、A:B:D【分析】植物组织培养技术是将植物的组织在离体的情况下进行培养的一门技术，在进行组织培养时，细胞经过脱分化形成愈伤组织，愈伤组织是一类高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞，在此过程中，染色体可能发生变异，基因也可能突变，但不会有细胞分化和基因重组，最后经过再分化形成胚状体，形成小植株。例如花药离体培养、从紫草的愈伤组织中提取紫草素、利用细胞工程培养杂交植株等都用到了植物组织培养，但秋水仙素处理萌发的种子或是幼苗并没有采用植物组织培养技术，A、B正确；动物细胞融合一般只能形成杂种细胞，不能形成杂种个体，C错误；单克隆抗体的制备利用到了动物细胞的融合技术和动物细胞的培养技术，D正确；故本题的答案为ABD。10、B:C:D【分析】【分析】

根据植物组织培养的过程：外植体经脱分化形成愈伤组织；经再分化形成根；芽，进一步培育形成新个体。植物细胞全能性是植物组织培养的理论基础。根据植物细胞全能性的概念分析B。根据植物组织培养过程所需的条件分析C。根据酶的专一性分析D。

【详解】

A；细胞的全能性是指已经分化的细胞仍具有发育成完整个体的潜能；图中脱毒苗的获得体现了植物细胞的全能性，愈伤组织和高产细胞系的获得都没有体现植物细胞的全能性，A错误；

B；图中①和②分别表示辣椒组织培养中细胞的脱分化和再分化过程；B正确；

C；再分化过程中需用适宜配比的生长素和细胞分裂素溶液处理；乙诱导细胞分化的方向，C正确；

D；用酶解法将愈伤组织分离成单细胞时；常用的酶是纤维素酶和果胶酶，以分解植物细胞之间的成分，D正确。

故选BCD。11、B:C【分析】【分析】

（1）动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性；细胞的增殖；诱导手段有电激、聚乙二醇、灭活的病毒等，结果产生杂交细胞，主要用于制备单克隆抗体。

（2）单克隆抗体制备的原理包括：①免疫原理：B淋巴细胞能产生特异性抗体；②细胞融合原理：利用病毒对宿主细胞的穿透性使B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合；③动物细胞培养技术：对杂交瘤细胞进行体内；体外培养。

（3）制备单克隆抗体过程中的几种细胞：①免疫B细胞（浆细胞）：能产生单一抗体；但不能无限增殖；②骨髓瘤细胞：能无限增殖，但不能产生抗体；③杂交瘤细胞：既能产生单一抗体，又能在体外培养条件下无限增殖。

【详解】

A；骨髓瘤细胞和免疫B细胞可用灭活的仙台病毒诱导融合；形成杂交瘤细胞，A错误；

B；骨髓瘤细胞虽然能无限增殖；但缺乏次黄嘌呤磷酸核糖转移酶，免疫B细胞虽然有次黄嘌呤磷酸核糖转移酶，但不具有无限增殖的本领，所以在HAT筛选培养液中，两两融合的具有同种核的细胞和骨髓瘤细胞、免疫B细胞都无法生长，只有杂交瘤细胞才能生长，B正确；

C；因每个免疫B细胞只分泌一种特异性抗体；因此在HAT筛选培养液中筛选出来的众多的杂交瘤细胞所分泌的抗体，不一定都是人类所需要的，还需要进一步把能分泌人类所需要抗体的杂交瘤细胞筛选出来，C正确；

D；筛选出的杂交瘤细胞体外培养时需添加抗生素防止细菌污染；D错误。

故选BC。

【点睛】

本题考查单克隆抗体的制备过程，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力；能运用所学知识，准确判断问题的能力。12、A:B:C【分析】【分析】

分析甲图：甲图为牛胚胎移植示意图；胚胎移植的具体过程为：对供；受体的选择和处理；配种或人工授精；对胚胎的收集、检查、培养或保存；胚胎进行移植；移植后的检查；对受体母牛进行是否妊娠的检查。分析乙图：①是滋养层；②是内细胞团；③是囊胚腔。

【详解】

A；冲卵是指把供体母牛子宫内的胚胎冲洗出来；甲图中冲卵的目的是获取早期胚胎，A错误；

B；为使供体和受体处于相同的生理状态；通常需要注射孕激素等激素使其同期发情，B错误；

C；进行性别鉴定需要取囊胚的①滋养层细胞做DNA分析；C错误；

D；受精卵形成乙囊胚的过程中进行卵裂；每个细胞的体积变小，细胞总体积不变或略有减少，D正确。

故选ABC。13、A:D【分析】【分析】

1；胚胎分割的特点：来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质；胚胎分割可以看做动物无性繁殖或克隆的方法之一。

2；胚胎干细胞的特点：具有胚胎细胞的特性；在形态上表现为体积小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。另外，在体外培养的条件下，可以增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，也可进行遗传改造。

【详解】

A；精子在获能液中培养的目的是使精子获能；不是获取能量，A错误；

B；注射到囊胚腔中的胚胎干细胞可以分化形成各种组织；因此可以参与个体器官的发育，B正确；

C；小鼠在特定光控周期条件下饲养；注射相关激素（促性腺激素）有促进超数排卵的作用，C正确；

D；分割的胚胎细胞有相同的遗传物质；由于生物体的性状还受环境因素的影响，因此发育成的个体可能会存在形态学差异，D错误。

故选AD。

【点睛】14、B:D【分析】【分析】

生态工程的基本原理：

①物质循环再生原理：物质能在生态系统中循环往复；分层分级利用；

②物种多样性原理：物种繁多复杂的生态系统具有较高的抵抗力稳定性；

③协调与平衡原理：生态系统的生物数量不能超过环境承载力（环境容纳量）的限度；

④整体性原理：生态系统建设要考虑自然；经济、社会的整体影响；

⑤系统学和工程学原理：系统的结构决定功能原理：要通过改善和优化系统结构改善功能；

系统整体性原理：系统各组分间要有适当的比例关系；使得能量；物质、信息等的转换和流通顺利完成，并实现总体功能大于各部分之和的效果，即“1+1＞2”。

【详解】

A；生态系统中的微生物不一定是分解者；如硝化细菌为生产者，A错误；

B；该生态系统中；物质能在生态系统中循环往复，分层分级利用，体现了物质循环再生原理，B正确。

C；植物获得的能量来自太阳光能；C错误；

D；分析图示可知；影响蚯蚓分解处理效率的因素有温度和含水量等，D正确。

故选BD。15、A:C:D【分析】【分析】

治理前的水体不能实现自我净化说明该生态系统抵抗力稳定性弱；治理后生态恢复，生态系统的稳定性越来越高，生态系统的各项功能恢复，其中的物质实现了良性的循环，食物网成功构建使能量流动顺利进行，各种物产相继丰富，如其中的植食性鱼类的产出不仅为人们提供了食物来源，而且还可以创造经济效益，生态环境变得越来越好，经过治理后实现了经济和社会效益的共同提高。

【详解】

A；经治理后水体实现了生态恢复；水中溶解氧含量升高，A正确；

B；生态系统中物质可以良性循环；而能量需要不断输入，B错误；

C；随着生态系统的恢复；生态系统稳定性逐渐提高，C正确；

D；经过治理后的水体；环境优美，物产丰富，其中的植食性鱼类还可食用，实现了经济和社会效益的共同提高，D正确。

故选ACD。三、填空题(共9题，共18分)16、略

【分析】（1）在基因工程的操作中的“分子手术刀”即切割DNA的是限制核酸内切酶简称限制酶；

（2）在基因工程的操作中的“分子缝合针”是DNA连接酶；

（3）基因工程中最常用的运载体是质粒；

（4）人的基因在牛体内能表达；说明人和牛共用一套遗传密码。

【考点定位】基因工程的基本工具【解析】限制酶DNA连接酶质粒共用一套遗传密码17、略

【分析】【分析】

胚胎移植：

1；胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎；或者通过体外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其它雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术，其中提供胚胎的个体称为“供体”，接受胚胎的个体称为“受体”。(供体为优良品种，作为受体的雌性动物应为常见或存量大的品种)，如转基因、核移植，或体外受精等任何一项胚胎工程技术所生产的胚胎，都必须经过胚胎移植技术才能获得后代，是胚胎工程的最后一道“工序”。

2；胚胎移植的意义：大大缩短了供体本身的繁殖周期；充分发挥雌性优良个体的繁殖能力。

【详解】

（1）体外受精前要对精子进行获能处理；使其具有受精能力。

（2）要使动物超数排卵；利用促性腺激素；需将卵子培养到MII中期后进行体外受精。

（3）步骤甲是人工受精；将受精卵移入受体母牛，进行的操作叫做胚胎移植（乙）；胚胎移植之前应鉴定胚胎中与有关的优良基因。

（4）胚胎移植实现的前提是受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生免疫排斥反应。

【点睛】

胚胎移植的实质：早期胚胎在生理状态相同的条件下空间位置的转移。【解析】精子获能促性腺MⅡ中期人工受精胚胎移植优良性状受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生免疫排斥反应。18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】取代修补19、略

【分析】【分析】

1；神经元由细胞体和突起两部分组成；突起又分为树突和轴突，树突短而多，轴突长而少。神经元的轴突末梢经过多次分支，最后每个小枝末端膨大，呈杯状或球状，叫做突触小体。

2；目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

3；人工种子就是以植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料；经过人工薄膜包装得到的种子，在适宜条件下同样能够萌发长成幼苗。

【详解】

（1）神经元由细胞体和突起两部分组成；突起又分为树突和轴突，树突短而多，轴突长而少；轴突末端的多次分支后，每个小枝末端膨大的部分称为突触小体。

（2）抗体可以与病原体结合；从而抑制病原体的繁殖或对人体细胞的黏附。

（3）检测目的基因是否转录出mRNA可采用分子杂交技术。

（4）人工种子就是以植物组织培养得到的胚状体；不定芽、顶芽、腋芽为材料；经过人工包膜包装得到的种子，可以在适宜条件下同样能够萌发长成幼苗．植物体细胞杂交技术的优点就是克服远缘杂交不亲和的障碍，或者是打破了生殖隔离。

（5）胰岛素能促进组织细胞加速摄取；利用和储存葡萄糖；从而使血糖水平降低。

【点睛】

本题考查教材基础知识，旨在考查考生的理解、记忆能力，要求考生熟记关键语句，并能运用专业术语准确作答。【解析】突触小体对人体细胞的黏附放射性同位素）标记的目的基因胚状体、不定芽、腋芽、顶芽摄取、利用和储存20、略

【分析】【分析】

分析图1：表示多年前感染EV并已康复的甲；乙两人的血液中抗EV-GP抗体的水平。根据曲线图可知；多年前感染EV并已康复的甲的血液中抗EV-GP抗体水平明显高于乙和对照组。

分析图2：表示单抗与病毒混合后病毒对宿主细胞的感染率。根据柱形图可知；单克隆抗体和病毒混合，加入单抗Ⅲ；Ⅴ后，病毒对宿主细胞的感染率明显低于其他组别。

【详解】

（1）由题意可知；新型冠状病毒表面的S-蛋白作为抗原刺激淋巴细胞，使机体产生特异性免疫反应，人细胞膜上的ACE2的化学本质是蛋白质。

（2）免疫系统对被新冠病毒感染后肺细胞强烈攻击引发肺炎；此时可通过适度使用免疫抑制剂对病人进行治疗，使其免疫功能下降，以避免肺部严重受损。

（3）由图1可知；多年前感染EV并已康复的甲的血液中抗EV-GP抗体水平明显高于乙和对照组，故应选取甲的B细胞用以制备单克隆抗体。

（4）由图2可知；单克隆抗体和病毒混合，加入单抗Ⅲ后，病毒对宿主细胞的感染率较低。因此抑制效果最好的单抗是Ⅲ。

（5）患者康复后一段时间；若再次受到该病毒的攻击，机体内相应的记忆细胞迅速增殖分化，产生大量的浆细胞和细胞毒性T细胞。

【点睛】

本题结合图解，考查病毒、单克隆抗体的制备等，要求考生识记病毒的结构，明确病毒没有细胞结构；识记单克隆抗体的制备过程，掌握其优点及相关应用，能结合图中信息准确答题【解析】①.抗原②.特异③.糖蛋白（或蛋白质）④.免疫抑制剂⑤.甲⑥.Ⅲ⑦.记忆21、略

【分析】【分析】

1；分析题图：①表示染色体复制；②是减数分裂，③是精细胞变形为精子过程，④是受精作用；

2；哺乳动物精子和卵子发生的不同点：（1）精子的减数两次分裂是连续的；场所唯一（MⅠ和MⅡ的场所都是睾丸）；而卵子的两次分裂是不连续的，场所不唯一，（MⅠ场所在卵巢，MⅡ场所在输卵管中）；（2）精子和卵子发生的时间不同：精子的发生是从初情期一直到生殖机能衰退；多数哺乳动物卵子的形成和在卵巢内的贮备是胎儿出生前完成的；MⅠ是在雌性动物排卵前后完成的，MⅡ是在受精过程中完成的。

【详解】

（1）精子变形③过程中精子头部的顶体是由高尔基体发育来的；④过程是受精过程，在输卵管内完成。

（2）在④过程中发生顶体反应；释放顶体酶，溶解卵丘细胞之间的物质和透明带，透明带反应和卵细胞膜反应是阻止多精入卵的两道防线。

（3）雄性动物精子产生的时期是初情期；雌性动物卵泡细胞的形成是在胚胎期性别分化以后完成的，这是精子和卵子在发生上的重要区别。

（4）初级卵母细胞进行减数第一次分裂是在排卵前后时期完成的；减数第二次分裂是在受精作用过程中完成的。

【点睛】

本题考查卵细胞的形成过程和受精作用等相关知识，意在考查学生识记相关细节和解决问题的能力。【解析】高尔基体输卵管透明带反应卵细胞膜反应初情期胚胎期性别分化以后排卵前后受精作用22、略

【分析】【分析】

动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织；将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。植物组织培养又叫离体培养，指从植物体分离出符合需要的组织；器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在无菌条件下接种在含有各种营养物质及植物激素的培养基上进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。

【详解】

1；基因工程又称基因拼接技术和DNA重组技术；是以分子遗传学为理论基础，以分子生物学和微生物学的现代方法为手段，将不同来源的基因按预先设计的蓝图，在体外构建杂种DNA分子，然后导入活细胞，以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品的遗传技术。

2；胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎；或者通过体外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其它雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术。

3；动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织；将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖，其原理是细胞增殖。

4；植物组织培养又叫离体培养；指从植物体分离出符合需要的组织、器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在无菌条件下接种在含有各种营养物质及植物激素的培养基上进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性。

【点睛】

本题考查基因工程概念、胚胎移植、动植物细胞培养等相关知识，意在考察考生对知识点的理解掌握程度。【解析】①.又叫基因拼接技术或DNA重组技术②.又称受精卵移植，是指将雌性动物体内的的早期胚胎，或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状况相同的其他雌性动物体内，使之继续发育为新个体的技术③.植物细胞全能性、细胞增殖23、略

【分析】【分析】

胚胎移植：

1；胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎；或者通过体外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其它雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术，其中提供胚胎的个体称为“供体”，接受胚胎的个体称为“受体”。(供体为优良品种，作为受体的雌性动物应为常见或存量大的品种)，如转基因、核移植，或体外受精等任何一项胚胎工程技术所生产的胚胎，都必须经过胚胎移植技术才能获得后代，是胚胎工程的最后一道“工序”。

2；胚胎移植的意义：大大缩短了供体本身的繁殖周期；充分发挥雌性优良个体的繁殖能力。

【详解】

（1）体外受精前要对精子进行获能处理；使其具有受精能力。

（2）要使动物超数排卵；利用促性腺激素；需将卵子培养到MII中期后进行体外受精。

（3）步骤甲是人工受精；将受精卵移入受体母牛，进行的操作叫做胚胎移植（乙）；胚胎移植之前应鉴定胚胎中与有关的优良基因。

（4）胚胎移植实现的前提是受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生免疫排斥反应。

【点睛】

胚胎移植的实质：早期胚胎在生理状态相同的条件下空间位置的转移。【解析】精子获能促性腺MⅡ中期人工受精胚胎移植优良性状受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生免疫排斥反应。四、判断题(共5题，共40分)24、A【分析】【详解】

由于存在防止多精入卵的两道屏障，故一个卵细胞一般只能同一个精子结合，形成受精卵，这句话是正确的。25、A【分析】【详解】

受精过程为：顶体反应→穿越放射冠→穿越透明带（透明带反应）→卵细胞膜反应（卵黄膜封闭作用）→卵子完成减数第二次分裂并释放第二极体→雌雄原核的形成；核膜消失；雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂开始。精子入卵后形成雄原核，同时被激活的卵子完成减数分裂Ⅱ，排出第二极体后，形成雌原核，雄、雌原核充分发育后，相向移动，彼此靠近，核膜消失，形成受精卵，故此说法正确。

故正确。26、B【分析】【详解】

受精包括受精前的准备阶段和受精阶段；在自然状态下，哺乳动物的受精在输卵管内完成。

故错误。27、B【分析】【分析】

据图分析；图中A是桑椹胚，B是囊胚，C是原肠胚。图B中1是滋养层，2是内细胞团，3是透明带，4是囊胚腔；图C中5是外胚层，6是滋养层，7是原肠腔，8是内胚层。

【详解】

（1）从A到C的过程中细胞均需要消耗能量；故胚胎中有机物的含量均减少，（1）正确。

（2）桑椹胚之前所有细胞都具有发育成完整胚胎的潜能；属全能细胞，故A时期胚胎中的细胞都是全能细胞，囊胚期时细胞出现分化，滋养层细胞不是全能细胞，（2）错误。

（3）胚胎移植必须使用处于桑椹胚或囊胚时期的胚胎；处于A或B时期的胚胎，（3）错误。

（4）图示过程细胞通过有丝分裂增殖；有丝分裂过程中可能发生突变，遗传物质可能会发生改变，（4）正确。

故分别为√、×、×、√。28、B【分析】【详解】

生态系统的恢复力稳定性是有一定限度的，导致了生态工程的局限性，使生态工程并不能解决所有的污染、破坏问题，因此不能走“先污染、破坏，后治理”的老路，故错误。五、非选择题(共2题，共16分)29、略

【分析】试题分析：植物组织培养技术的过程：离体的植物组织；器官或细胞（外植体）愈伤组织胚状体→植株（新植体）；原理：植物细胞的全能性；条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度；适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。植物组织培养技术的应用：植物繁殖的新途径（微型繁殖、作物脱毒、人工种子）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。

（1）植物组织培养技术的原理是植物细胞的全能性；植物组织培养过程中；离体的黄连茎切段需经过脱分化和再分化过程，培养出胚芽和胚根进而发育为完整的个体。

（2）卵子在发生过程中；减数第二次分裂是在精子和卵子结合的过程中完成的；获能的精子与卵子相遇时，首先发生顶体反应，使顶体内的酶释放出来。卵子完成受精的标志是在卵细胞膜和透明带的间隙可以观察到两个极体。

（3）基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建；将目的基因导入大肠杆菌细胞内，首先要用Ca2+处理细胞，使之成为感受态细胞，以便目的基因的导入。【解析】植物细胞的全能性脱分化再分化精子和卵子结合顶体在卵细胞膜和透明带的间隙可以观察到两个极体基因表达载体的构建Ca2+30、略

【分析】【分析】

PCR技术扩增目的基因。

（1）原理：DNA双链复制。

（2）过程：第一步：加热至90～95℃DNA解链；第二步：冷却到55～60℃；引物结合到互补DNA链；第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。

【详解】

（1）根据题意可知；可以用PCR技术体外获得大量毒蛋白基因片段，该扩增过程需要2种引物与两条母链配对，并需要热稳定性DNA聚合酶，因为扩增的第三步需要加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。

（2）据图分析；毒蛋白基因两端是NcoI；BamHI作用位点，因此需要NcoI、BamHI将毒蛋白基因和质粒切割，另需要DNA连接酶连接，获得重组质粒l，限制酶作用的对象是切断磷酸二酯键。

（3）在用一种限制酶处理质粒和草丁膦抗性基因时；由于产生的末端相同，有可能发生自身环化（连接），因此重组质粒1的酶切片段再用去磷酸化酶处理，使末端游离的磷酸基团脱离，防止重组质粒1酶切片段自身连接。

（4）将重组质粒2与用钙离子处理处于感受态的白僵菌菌液混合进行转化，重组质粒2在白僵菌细胞内被修复，一段时间后用含有草丁膦的平板培养基进行筛选，获得含有Bar基因的重组白僵菌。

（5）科研人员将重组白僵菌喷涂于植物叶片上；以此饲喂饥饿处理的害虫，记录单位时间内的死亡害虫数，以判断重组白僵菌的杀虫效果。

（6）分析利用基因工程获得的重组白僵菌对生态环境可能造成的影响：

有利：可以减少害虫数量；提供农业产量；减少农药使用量等。

有害：可能扩散到自然界中；破坏生态平衡；也可能造成基因污染；或成为优势物种，威胁生态系统中其他生物的生存等。

【点睛】

本题考查了基因工程的有关知识，具有一定的综合性和难度，要求考生能够掌握基因表达载体构建的过程；识记基因工程的工具酶，并能够根据图示信息进行解题。【解析】两耐高温的DNA聚合酶（Taq酶）NcoI、BamHI磷酸二酯重组质粒1酶切片段自身连接（或“相互连接”）Ca2+(CaCl2)草丁膦死亡害虫数有利：可以减少害虫数量;提供农业产量;减少农药使用量等有害：可能扩散到自然界中,破坏生态平衡;也可能造成基因污染;或成为优势物种,威胁生态系统中其他生物的生存等六、实验题(共4题，共8分)31、略

【分析】【分析】

要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因；这是目的基因能否在真核细胞中稳定遗传的关键。检测的方法是采用DNA分子杂交技术，即将转基因生物的基因组DNA提取出来，在含有目的基因的DNA片段上用放射性同位素作标记，以此作为探针，使探针与基因组DNA杂交，如果显示出杂交带，就表明目的基因已插入染色体DNA中。

【详解】

（1）在利用基因工程大规模生产胰岛素时；将胰岛素合成基因与质粒重组后导入大肠杆菌进行了表达，以上过程除了证明质粒可以作为载体外，还证明了体外重组的质粒可以进入大肠杆菌，真核外源基因可以在原核细胞中表达等。

（2）构建基因表达载体时；常用的工具酶是DNA连接酶和限制性核酸内切酶，他们作用的化学键是磷酸二酯键。基因工程中，不能将胰岛素合成基因直接导入大肠杆菌，其原因是胰岛素合成基因在大肠杆菌细胞中不能稳定遗传和表达。

（3）基因是有遗传效应的DNA片段；检测胰岛素合成基因是否导人受体菌时，常用（放射性物质标记的）胰岛素合成基因（的一条链）作探针。

（4）基因的表达包括基因的转录和翻译；胰岛素合成基因在大肠杆菌细胞内表达时，遗传信息的传递方向是DNA→（m）RNA→蛋白质。经检测，胰岛素合成基因的表达产物未能达到预期的生物活性，导致这种差异的原因可能是表达产物未经内质网；高尔基体的加工。

【点睛】

解答本题的关键是：明确基因工程中载体的种类，大肠杆菌作为受体细胞的原因，以及胰岛素基因在原核细胞中无生物活性的原因，再根据题意作答。【解析】体外重组的质粒可以进入大肠杆菌真核外源基因可以在原核细胞中表达等DNA连接酶和限制性核酸内切酶磷酸二酯键胰岛素合成基因在大肠杆菌细胞中不能稳定遗传和表达(放射性物质标记的)胰岛素合成基因(的一条链)DNA→(m)RNA→蛋白质内质网、高尔基体32、略

【分析】【分析】

1；基因工程的操作过程。

(1)目的基因的获取。

①从基因文库中获取。

基因文库包括：基因组文库和部分基因文库(其中的cDNA文库是利用反转录法获取的)。

②利用PCR技术扩增。

a.变性(90～95℃)：双链DNA模板在热作用下；氢键断裂，形成单链。

b.复性(55～60℃)：引物与DNA模板结合；形成局部双链。

c.延伸(70～75℃)：在Taq酶的作用下；合成与模板互补的子链。

d.循环重复上述过程；n次循环后，目的基因的量将被扩增2n倍。

③利用化学方法人工合成：基因比较小；核苷酸序列已知时，选择该方法。

(2)基因表达载体的构建。

①通常用同一种限制酶切割目的基因和质粒；然后用DNA连接酶将二者连接，改造后成为基因表达载体。

②组成：目的基因；标记基因、启动子、终止子和复制原点。

(3)将目的基因导入受体细胞。

。生物种类。

植物。

动物。

微生物。

常用方法。

农杆菌转化法。

显微注射技术。

感受态细胞法。

受体细胞。

体细胞或受精卵。

受精卵。

原核细胞。

转化过程。

将目的基因插入到Ti质粒的T­DNA上→农杆菌→导入植物细胞→整合到受体细胞染色体的DNA上→表达。

将含有目的基因的表达载体提纯→取卵(受精卵)→显微注射→受精卵发育→获得具有新性状的动物。

Ca2＋处理细胞→感受态细胞→重组表达载体DNA分子与感受态细胞混合→感受态细胞吸收DNA分子。

(4)目的基因的检测与鉴定。

①分子水平的检测。

a．利用DNA分子杂交技术检测目的基因的有无。

b．利用分子杂交技术检测目的基因的转录。

c．利用抗原—抗体杂交技术检测目的基因的翻译。

②个体生物学水平的鉴定；如抗虫；抗病的接种实验等。

【详解】

(1)题干提到“导入并稳定表达M23基因的细胞，其细胞膜上有OAPs形成，而敲除该基因的细胞中未见OAPs的形成”，该结果表明M23可促进细胞膜上OAPs聚集。

(2)由基因工程的操作过程可知：

①提取大鼠脑组织的总RNA，通过逆转录法获得cDNA，并通过PCR技术获得M1基因。

②将M1基因与质粒用限制酶和DNA连接酶构建基因表达载体，导入中国仓鼠卵巢细胞（CHO）中，用抗原—抗体技术检测到受体细胞已成功表达M1蛋白。

③由（1）可知M23可促进细胞膜上OAPs聚集；由此设计实验方案：

。实验分组。

1对照组。

2对照组。

3实验组。

实验处理。

导入M23基因的CHO细胞。

导