DB52∕T 1254-2017 生物安全柜检测技术规范

DB52DB52/T1254—2017生物安全柜检测技术规范TechnicalPracticeforTestingBiosafetyCabinets2017-10-08发布2017-05-08实施贵州省质量技术监督局发布I 1 1 1 2 2 3 1生物安全柜检测技术规范本标准规定了生物安全柜检测的术语和定义、分级及类型和特点、要求、检测方法、检测记录及报告、检测规则。本标准适用于I级、Ⅱ级生物安全柜安装及维护后的检测。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。YY0569Ⅱ级生物安全柜3术语和定义YY0569界定的以及下列术语和定义适用于本文件。生物安全柜Biologicalsafetycabinet;BSC防止操作着和环境暴露于实验过程中产生的生物气溶胶而设置的负压过滤排风柜。生物安全柜柜体内正常运行状态下含生物气溶胶的悬浮粒子数。从生物安全柜前窗操作口流入的气流。下降气流Downflowair从生物安全柜上方经高效过滤器过滤的垂直向下流向工作区的气流。下降气流Downflowair从生物安全柜上方经高效过滤器过滤的垂直向下流向工作区的气流。2前窗操作口向内吸入的负压气流用以保护人员的安全；气流经高效过滤4.2.2Ⅱ级生物安全柜是有前窗操作口的安全柜，操作者可以通过前窗操作口在安全柜内进行操作。5.1.1应有完整的生物安全标识、名称、型号、出厂编号、制造厂名、制造日期、额定工作3表1技术要求I级一柜)m/s—全柜)m/s一各区域下降的平均流速在其区域下降气流标称值±0.015之间噪声dB(A)≤照度lx≥650(每个测量点不小于430)紫外辐射强度uW/m²≥高效过滤器完整性(漏过率)≤0.01%(可扫描检测)人员保护≤0.005%(不可扫描检测)6检测方法6.1外观及标识目测检查和运行观察检测外观。6.2洁净度6.2.1检测设备尘埃粒子计数器：粒径分辨率为0.5μm起始，流量为28.3L/min或者2/83L/min,经检定校准合6.2.2检测方法6.2.2.1生物安全柜置于正常工作条件下运行30min。6.2.2.2洁净度的测量边界距离内表面或前窗100mm。6.2.2.3操作步骤如下：a)粒子计数器的采样口置于工作台面向上200mm高度位置，每次的采样量不低于1L;b)按图1布置的每个测量点进行测量，记录并计算其平均值。工作面宽度●一测点图1测量点布置图46.3噪音声级计：测量范围为(0～130)dB,精确度±1dB,分辨率为1dB,有“A”计权模6.3.2.1将声级计设置为“A”计权模式。6.3.2.2打开生物安全柜的风机和照明灯，在生物安全柜前壁面中心水平向外300mm,工作台面上方6.3.2.3关闭生物安全柜风机和照明灯，在相同的位置测量背景噪声。当背景噪声大于57dB时，实测值参照仪器操作手册提供的曲线或表进行修正，如果不适用按照噪声测量值修正表表2进行修正。测量噪声与背景噪声的差值(dB)降低背景噪声，重新测试33210照度计：测量范围为(0～20000)lx,精确度为±8%。6.4.2.2在工作台面上，沿工作台面内侧壁中心连线设置照度测量点，测量点之间的距离不超过5300mm,与侧壁最小距离为150mm,检测图见图3。6.4.2.3用照度计检测各测量点，测量点不少于5点，记录各测量点数据并计算照度的算术平均值。QQ图3照度检测图6.5流入气流6.5.1检测设备风速计：测量范围为(0～10)m/s,精确度为±0.15m/s。6.5.2检测方法6.5.2.1将工作窗开口高度开到指定的操作高度，运行安全柜，待生物安全柜处于稳定状态时。6.5.2.2将风速计在前窗操作开口平面的两排点测量气流流速，第一排在前窗操作开口上沿下约开启高度25%的位置，第上排在前窗操作开口上沿下约开启高度75%的位置，每排测量间距约100mm,距前窗操作口侧边接近但不小于100mm,检测图见图4。6.5.2.3测量点不少于7点，每点测试1min读取风速计数据，记录并计算出流入气流流速的平均值。二25置膏二图4流入气流检测图6风速计：测量范围为(0～10)m/s,精确度为±0.15m/s。a)将工作窗开口高度开到指定的操作高度，运行安全柜，待生物安全柜处于稳b)按下列方式在工作区上方高于前窗操作口上沿100mm的水平面上确定测量点位置，多点测量2)测量点等距分布，形成的正方形栅格不大于(150×150)mm,测试点最少应有3排，每排应有7个测量点；a)将工作窗开口高度开到指定的操作高度，运行安全柜，待生物安全柜处于稳b)在工作区上方高于前窗操作口上沿100mm的水平面上多点测量穿过该平面各区域的气流各区域的测试按照厂商使用说明书明确的各均匀下降气流区的范围进行测量，测量点等距分布，形成的正方形栅格不大于(150×150)mm,测试点最少应有3排，每排应有7个测量点；5算出各区域的下降气体平均值。76.7.2方法选择人员保护测试有碘化钾法和微生物法，仲裁法为微生物法，微生物法见YY0569标准中6.3、6.3.2。6.7.3碘化钾法6.7.3.1基本原理用碘化钾模拟安全柜内所生成的污染气体与逃逸气体，用气雾发生器在生物安全柜里特定位置输送碘化钾溶液产生雾状的碘化钾微小液滴，形成挑战气雾剂，利用向心工作原理采用空气采样器捕捉窗口逃逸的碘化钾气雾，采样结束后，取出采样器内的过滤薄膜，放到装有氯化钯溶液的培养皿中。过滤薄膜上的碘化钾液滴会展开，形成清晰可见的棕色小圆点。通过清点过滤薄膜上圆点的个数，来评价安全柜的防护能力。(安全柜的操作者防护因子在1.5×10⁵以上)6.7.3.2.1碘化钾：15g/L碘化钾乙醇溶液。6.7.3.2.2氯化钯：1.0g/L氯化钯的0.1mol/L盐酸溶液(配置见附录A)。6.7.3.3检测设备6.7.3.3.1生物安全柜质量检测仪：由气溶胶发生器、空气采样器、干扰圆筒组成。6.7.3.3.2气溶胶发生器：转速28000r/min,可以产生气溶胶。6.7.3.3.3空气采样器：流量100L/min,利用负压采集样品。6.7.3.3.4干扰圆筒：直径(60～65)mm,表面光滑。6.7.3.3.5过滤膜：孔径3μm。6.7.3.3.6皮氏培养皿：直径55mm。6.7.3.4检测方法6.7.3.4.1在远离被测试安全柜的地方摆放两只皮氏培养皿。一只培养皿内装入半皿氯化钯溶液，另一只内装入半皿蒸馏水，将盖子盖回到培养皿上。准备两张滤纸，用于干燥过滤膜。6.7.3.4.2将生物安全柜质量检测仪中的干扰圆筒放在安全柜工作区域的侧壁之间的中部，一端伸入到安全柜内部，紧贴安全柜后壁，干扰圆筒下沿距安全柜工作台面65mm~75mm。干扰圆筒的另一端伸出安全柜至少150mm,见图6)。6.7.3.4.3将四只空气采样器(X即左下，X1即左上，Y即右下，Y1即右上)放到安全柜前方中间部位，使采样器的空气进气口距安全柜前部开口平面150mm~160mm。两只采样器(X1即左上，Y1即右上)的进气口与干扰圆筒顶部水平，并在前部开口中线两侧各距中线150mm。另外两只采样器(X即左下、Y即右下)的进气口与前部开口平面之后100mm。调节发生器高度至涡流盘与前部开口顶沿水平，见图7)。6.7.3.4.4在每只空气采样器上安装一块过滤膜，依照厂家说明书调节每只采样器的压差至可产生100L/min的吸入气流流量。8O0溪流盘96.7.3.5检测步骤6.7.3.5.1启动安全柜，使其运行至正常操作状态。6.7.3.5.2使空气采样器吸气，启动涡流盘。等待15s后，使碘化钾进入涡流盘中部，允许20mL的碘化钾气溶胶化。气溶胶化结束15s后空气采样器停止吸气。等到抽气泵完全停下来后，移去过滤6.7.3.5.3将一只采样器上取下的过滤膜放到盛有氯化钯溶液的皮氏培养皿内，对移去过滤膜的那只采样器进行标记。6.7.3.5.4过滤膜将在30s~50s内被氯化钯饱和，所有碘化钾微粒将变为棕色的可见斑点。将过滤膜放入蒸馏水内浸透3s~4s,然后将过滤膜放在清洁的滤纸上干燥。6.7.3.5.5其他空气采样器上取下来的过滤膜也做相同的处理，将盖子盖回培养皿。6.7.3.5.6用一只10倍的放大镜检查每个过滤膜，对过滤膜上的棕色斑点进行计数。以直径为0.1mm的斑点作为可记录的最小斑点，当斑点直径达到0.2mm时记录为2个斑点，以此类推。6.7.3.5.7每台生物安全柜重复检测3次，分别记录检测仪四个采集器(X即左下，X1即左上，Y即右下，Y1即右上)中滤膜上的棕色斑点数，取每个采集器平均值作为测试结果。比较四个采集器，测试结果最大的为最终结果。6.7.3.6算人员保护并表达测试结果计算释放的碘化钾粒子数N:N=3.1×10⁷×V....................................(1)式中：V———一气溶胶发生器分散的碘化钾溶液的体积，单位为mL;3.1×10⁷——由液滴尺寸、采样流量和涡流盘转速导出的一个常数。计算由每个过滤膜得到的开口防护因子A:A=NF/10⁴n......................................(2)式中：F——采样流量，单位为L/min;N——过滤膜上的斑点数。6.7.4微生物法检测参照YY0569中6.3、6.3.2条款。6.8紫外线辐射6.8.1检测设备紫外照度计：测量波长：254±10nm,准确度为误差小于5%。6.8.2.2在工作台面上，沿工作台面内侧壁中心连线设置照度测量点，测量点标示为100%，能检测0.001%同一气溶胶微粒。气溶胶发生器6.9.4.1运行安全柜的风机和灯，去掉过滤器的散流装置和保护盖（如果有）。将6.9.4.3对含有气溶胶的高效过滤器上游气流进行测试，证实该浓度气溶胶的光散），6.9.4.5对于经管道排气的安全柜，不能进行排气过滤器的扫描检测，过滤器下游7.1检测记录7.1.1检测应按附录A的记录表格，现场填写原始记录。7.1.2检测数据应按规定进行数据处理，修约至规定的位数。7.2检测报告7.2.1检测报告应客观公正、信息齐全、7.2.2检测报告内容至少包括：实验室名称和地址、送检单位的名称和地址、检测日期、检测人员、8检测规则过1年。会省省到A.1.1.1电子天平：最大称量不大于200A.1.3配制方法A.1.3.115g/L碘化钾的乙醇溶液A.1.3.20.1mol/L盐酸溶液A.1.3.31.0g/L氯化钯的0.1mol/L盐酸溶(资料性附录)生物安全柜检测原始记录表表B.1生物安全柜检测原始记录表仪器地点型号规格出厂编号温度：℃型号规格1、洁净度悬浮粒子数右后中点左后2、噪声噪声测量值3、光照度123567890皿