高中生物复习之单克隆抗体

二轮复习微专题单克隆抗体浆细胞抗体：能够与抗原发生特异性结合的免疫球蛋白。必3P37抗体的传统生产方法抗原反复注射动物从动物的血清中分离抗体该法制备抗体的缺点：产量低、纯度低，且抗体的特异性差、灵敏度低。一种抗原表面有多种抗原决定簇，可以与多种抗体特异结合提示1：对B细胞或浆细胞进行细胞培养可行吗？提示2：我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的？问题：如何获得大量纯度高的抗体？请尝试设计一个方案。在体外培养条件下，B淋巴细胞不能无限增殖产生大量浆细胞，不能获得单克隆抗体。瘤细胞抗体无限增殖调控基因

分离导入浆细胞合成方案一方案二浆细胞瘤细胞杂交瘤细胞动物细胞培养技术动物细胞融合技术抗体既能产生特异性抗体，又能大量增殖的细胞1970年，有两位科学家做了一个人—鼠细胞融合的实验，以证明细胞膜的流动性。那么,动、植物细胞融合有什么区别?比较项目细胞融合的原理细胞融合前的处理诱导细胞融合的方法应用植物体细胞杂交细胞膜的流动性纤维素酶、果胶酶去除细胞壁后诱导原生质体融合离心、电激、振动、聚乙二醇克服远源杂交不亲和，获得杂种植株动物细胞融合细胞膜的流动性用胰蛋白酶使细胞分散后诱导细胞融合除上述诱导方法外，还可以用灭活病毒获得杂种细胞制备单克隆抗体单克隆抗体:由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞系所产生的化学性质单一、特异性强的抗体。浆细胞瘤细胞杂交瘤细胞动物细胞培养技术动物细胞融合技术抗体①如何获得浆细胞？②会有几种融合方式？（只考虑两两融合）③是否所有的杂交瘤细胞都能产生专一性抗体？④如何大规模进行培养得到大量的单克隆抗体？注射抗原B淋巴细胞骨髓瘤细胞细胞融合、筛选杂交瘤细胞细胞培养筛选，继续培养足够数量的、能产生特定抗体的细胞群体外培养注射到小鼠腹腔单克隆抗体①该过程中应用到的技术:②原理：细胞膜具有一定的流动性、细胞增殖③给小鼠注射特定抗原目的:④诱导融合的方法:获得能产生相应抗体的B淋巴细胞物理方法：离心、电激、振动化学方法：聚乙二醇生物方法：灭活的病毒⑤为了获得足够数量的能够分泌所需抗体的细胞，对得到的杂交瘤细胞处理方式：⑥第一次筛选的目的：动物细胞融合、动物细胞培养筛选、克隆化培养、抗体检测第一次如何筛选：从多种杂交细胞中筛选出杂交瘤细胞；用特定的选择性培养基进行筛选；第一次筛选的原理：在选择培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长【拓展】HAT选择性培养基H：次黄嘌呤；A：氨基喋呤；T：胸腺嘧啶核苷；（1）淋巴细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能够被氨基蝶呤阻断。但是一般不分裂增殖。（2）骨髓瘤细胞是特殊选择的代谢缺陷型细胞，其DNA合成过程只具有D途径，能被氨基蝶呤阻断。（3）杂交瘤细胞则既可无限增殖，又具备两条DNA合成途径。B淋巴细胞骨髓瘤细胞D途径S途径D途径杂交瘤细胞S途径D途径DNA合成检测方法依据的原理：抗原抗体特异性结合【拓展】专一抗体检验阳性获得足够数量的能分泌所需抗体的杂交瘤细胞⑦选择抗体检测呈

性的杂交瘤细胞，抗体检测的原理：抗原和抗体能够特异性结合阳⑨如何获取单克隆抗体：⑧如何获取大量所需杂交瘤细胞：在体外条件下大规模培养（接种于培养液中）或注射到小鼠腹腔内增殖（1）体外培养___________________________（2）小鼠腹腔内培养_________________________从细胞培养液中获取从小鼠腹水中获取⑩杂交瘤细胞的特点：⑪单克隆抗体的特点：特异性强、灵敏度高、并可大量制备既能无限增殖，又能产生特异性抗体第二次筛选的目的：科学家将鼠源杂交瘤抗体进行改造，生产出效果更好的人-鼠嵌合抗体、人源化抗体、全人源抗体（如下图所示），生产这些抗体属于

（生物工程）的范畴，根据预期的

，设计

，最终必须对

进行操作。与鼠源杂交瘤抗体相比较，突出优点是

。减少对人体的不良反应（或过敏反应等副作用）抗体功能蛋白质工程抗体结构基因人绒毛膜促性腺激素(

HCG)是由受孕妇女体内胎盘产生的一种糖蛋白类激素，在孕妇的尿液中大量存在，而非妊娠孕妇尿液中几乎不含有该激素。胶体金法早早孕检测试纸采用双抗体夹心法原理，以胶体金为指示标记制作而成。①作为诊断试剂：识别作用，具有准确、高效、简易、快速的优点。单克隆抗体的应用单克隆抗体的应用②治疗疾病和运载药物生物导弹：单克隆抗体＋药物优点：位置准确、疗效高、副作用小

1、基因型为Aa与基因型为Bb的动物体细胞混合，用灭活的仙台病毒处理后，不可能获得下列哪种基因型的细胞（不考虑基因突变）()A、AAaaB、AaBbC、AabbD、BBbbC2、下列关于细胞工程的叙述，错误的是()A、电激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合B、去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理C、小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫的小鼠的T淋巴细胞融合可制备单克隆抗体D、单克隆抗体是通过克隆杂交瘤细胞获得的

C3、利用细胞工程方法，以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列相关叙述正确的是()A、用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体B、将等量浆细胞和骨髓瘤细胞混合，经PEG诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞C、体外培养单个浆细胞可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体D、利用该单克隆抗体可与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者D4、单克隆抗体制备过程中使用的骨髓瘤细胞是一种缺陷型细胞，在含有次黄嘌呤、氨基喋呤和胸腺嘧啶的培养基（HAT）中无法生长；而小鼠脾细胞是正常细胞，在HAT培养基上可正常存活。用聚乙二醇诱导细胞融合后，经过数代培养，最终可在HAT培养基上存活的是()A、骨髓瘤细胞之间形成的融合细胞B、脾细胞之间形成的融合细胞C、骨髓瘤细胞与脾细胞之间形成的融合细胞D、脾细胞C5、右图为细胞融合的简略过程，请据图回答：（1）若A、B是植物细胞，在细胞融合之前已用纤维素酶、果胶酶处理，除去了细胞壁；由A、B到细胞C的过程中，常用的化学方法是聚乙二醇。融合完成的标志是再生出细胞壁。形成的D细胞还要应用植物组织培养技术把D培养成植株。（2）若A、B是动物细胞，一般取自幼龄动物的组织或器官，然后用胰蛋白酶使其分散开来；由A、B到C的过程中，常用的不同于植物细胞融合的手段是灭活病毒，A、B融合为C的过程说明了细胞膜具有流动性。（3）若该过程是制备单克隆抗体，在获得A细胞之前，小鼠已经被注射了抗原，注射后小鼠身体发生了相应的免疫反应。在A、B到C的过程中，所形成的C有3种（只考虑两两融合），用来培养的D细胞应该是杂交瘤细胞，其特点是既能无限增殖又能产生单一抗体，获得D细胞后，常用的培养