DB12T 1012-2020 食用菌液体菌种生产技术规范

DB12Techniquestandardforliquidspawnproductionofediblemushroom天津市市场监督管理委员会发布I本标准按照GB/T1.1-2009《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写》给出的规本标准主要起草人：罗莹、周永斌、钱磊、刘连强、王文治、李凤美、訾惠君、李淑1食用菌液体菌种生产技术规范NY5099无公害食品食用菌栽培基质安全技术要求NY/T528食用菌菌种生产技术规程24.1生产场地4.1.1基本要求4.1.2环境卫生要求4.2生产设备设施4.2.1厂房设置和布局应符合NY/T528食用菌菌种生产技术规程要求。消毒和干手设施；车间设封闭式废物桶，安装排4.2.4主要仪器设备应配备水处理设备、液体菌种培养器、空气压缩机、空气过滤器、液体菌种接种4.2.5主要生产用具应配备玻璃三角瓶、接种器、试管、量杯量瓶、玻璃漏斗、定量定性滤纸、精密4.3培养基质原材料应符合NY5099无公害食品食用菌栽培基质4.4生产品种4.4.1选用高产、优质、抗逆性强、商品性好的食用菌品种，使用经省级以上农作物品种审定委员会登记的品种，并且从具有相应技术资质的供种单位引4.4.2菌种生产过程应符合NY/T528食用菌菌5.1工艺流程3↓原料→培养基配制→空消→实消→冷却→种子罐→发↑5.2制备母种5.2.1容器使用18mm×180mm或20mm×200mm玻璃试管,试管应保持清洁5.2.2培养基根据不同微生物的营养需要配制不同的培养基，常用的配方参见附5.2.3灭菌5.2.4接种在超净工作台上严格按无菌操作接种。接种完成后，在试管上注明菌种名称、接种时间。5.2.5培养根据食用菌菌种的生长要求，给予其适宜的培养温度22℃~28℃,保持空气相对湿度在65%～75%，菌种应留样备查，留样的数量应以每个批次母种3支～5支。草菇在13℃~16℃贮存，其他种类于4℃~6℃下贮存，贮存至该批菌种出第一潮菇。5.3制备摇瓶液体种5.3.1容器5.3.3培养基5.3.4灭菌5.3.5接种45.3.6培养温度22℃~28℃,保持空气相对湿度在65%～75%，避光培养。频率随具体品种而定。5.4发酵罐检查与清洗5.4.2清洗对罐体内、外和全部阀门用流水进行冲洗，达到无死角、内5.5煮罐和空消棒的培养器加水至容积的80%加热至121℃,灭菌40min。用外源蒸汽灭菌的培养器，蒸汽压力达到0.11Mpa～0.12Mpa、温度121℃~124℃、灭菌40min。5.6液体菌种培养基配方泡剂。用水应符合GB5749生活饮用水卫生标准。常用5.7投料与定容5.8培养器实消和培养基灭菌培养器内蒸汽压力达到0.11Mpa～0.12Mpa，培养基温度达到121℃~124℃、保持时间40min。5.9冷却降温灭菌结束通过冷却系统，使培养基降温至24℃~28℃。保持压力平稳，防止罐压回零。5.10接种菌种罐接种处设置百级层流罩，用带有手柄的内径略大于接种口的铁丝圈缠绕纱布，蘸上95%的酒5.11液体菌种培养条件5.11.1通风量通过进气阀和排气阀将通风量调节至1：0.5V／V～1：1.2V／V(料液体积／空5.11.2罐压55.11.3温度常见品种培养温度调节在24℃~28℃,少数品种根据特殊需求具体设定。5.11.4培养时间5.12.2无菌检测5.12.4菌丝湿重5.12.5镜检5.13液体菌种放罐指标5.13.1经镜检和其它理化指标等方法检验质量合格即可放罐接种。菌液稍粘稠，有大量片状或球状菌丝体悬浮、分布均匀、6>8可见食用菌菌种液体培养中特有的菌丝形态，球状和丛状菌丝体大量分布，菌丝粗壮，菌丝内原生质分布均匀、染有食用菌菌丝生长，划痕处无霉菌、酵母菌、细菌菌落生注明菌种种类、级别、品种、生产单位、接15℃~20℃室温可保存1天～2天。7马铃薯葡萄糖琼脂培养基(简称PDA培养基)马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂(凝固剂)20g，