抗菌药物敏感性试验（微生物学检验技术课件）

1.抗菌药物种类及作用学习目标掌握抗菌药物的常见种类及作用临床常用抗菌药物种类喹诺酮类糖肽类氨基糖苷类氯霉素类、磺胺类林可酰胺类及合成抗菌药物四环素类、β-内酰胺类大环内酯类(一)

β－内酰胺类抗生素1.青霉素类抗生素：包括青霉素G、耐青霉素酶青霉素、广谱青霉素(氨苄青霉素、美洛西林、哌拉西林)等。2.头孢菌素类抗生素：第一代(头孢唑林、头孢氨苄、头孢拉定)、第二代(头孢孟多、头孢西汀，头孢呋新，头孢克罗等)、第三代

(头孢哌酮（先锋必）、头孢三嗪（菌必治）、头孢噻肟钠、头孢他啶、头孢唑肟等)

。第四代如头孢地嗪、头孢噻唑肟、头孢吡肟等。适用于多重耐药G-杆菌严重感染，对厌氧菌也有很好的抗菌作用3.其他β－内酰胺类抗生素

(1)单环β－内酰胺类抗生素:主要有氨曲南和卡芦莫南。(2)头霉素类和氧头孢烯类抗生素:主要有头孢西丁、头孢替坦、头孢美唑。（3）碳青霉烯类抗生素:

主要有亚胺培南、米洛培南、必安培南、帕尼培南。（4）β－内酰胺类抑制剂:

主要有克拉维酸、舒巴坦和他唑巴坦。所有β－内酰胺类抗生素都具有β－内酰胺环这一结构，通过抑制细胞壁粘肽合成酶，即青霉素结合蛋白（penicillinbindingproteins，PBPs），从而阻碍细胞壁合成而发挥杀菌作用。（二）氨基糖苷类抗生素可干扰细菌蛋白质合成,主用于对革兰氏阴性菌、绿脓杆菌等感染的治疗，按其来源分为：①由链霉菌属发酵滤液提取获得，有链霉素、卡那霉素、妥布霉素、核糖霉素、巴龙霉素、新霉素；②由小单胞菌属发酵滤液中提取，有庆大霉素、福提霉素；③半合成氨基糖苷类：有阿米卡星、奈替米星、地贝卡星等。（三）喹诺酮类抗生素是一种DNA旋转酶抑制剂，它作用于细菌DNA旋转酶，干扰DNA超螺旋结构的解旋，从而阻碍DNA的复制。第一代为窄谱抗生素，有新恶酸、奈啶酸和恶喹酸。第二代为广谱类抗生素，抗菌强度依次为环丙沙星、氧氟沙星、洛美沙星、氟咯沙星、培氟沙星、诺氟沙星。第三代为超广谱类抗生素，有司帕沙星、妥舒沙星、左氟沙星等。（四）大环内酯类抗生素:

作用于核糖体50S亚基，抑制肽酰基转移酶，阻止转肽作用和mRNA位移，抑制细菌蛋白质的合成。常用的有：红霉素、柱晶白霉素、麦迪霉素、乙酰螺旋霉素。（五）四环素、氯霉素和林可酰胺类抗生素

1.四环素为广谱抗生素，能特异性地与细菌核糖体30S亚基的A位置结合。抗菌活性的顺序：为米诺环素＞多西环素＞美他环素＞地美环素。2.氯霉素类抗生素，包括氯霉素、甲砜霉素。3.林可酰胺类抗生素，主要有盐酸林可霉素、克林霉素。（六）糖肽类抗生素常用的有万古霉素和替卡拉宁。（七）其他合成抗菌药

1.硝基呋喃类用于肠道、尿路感染和外用消毒，有呋喃坦啶和呋喃唑酮。

2.硝基咪唑类对厌氧菌有抗菌作用，对需氧菌无效，有甲硝唑和替硝唑。（八）磺胺类药物及增效剂分三类：①用于全身感染的药物，分为短效、中效、长效三类，有磺胺甲恶唑，磺胺嘧啶、磺胺甲氧吡嗪；②肠道起作用的药物有柳氮磺胺啶银、磺胺二甲氧嘧啶；③局部应用的药物有磺胺米隆、磺胺酰钠。2.常规药敏试验药物选择原则学习目标掌握常规药敏试验药物选择原则常规药敏试验选药原则CLSI试验药物分成A、B、C、U、O五组,A组所列的抗生素为常规、主要试验和常规报告药物,B组

为首选试验药物，但只被选择性报告：①对A组同类抗生素耐药；②特定来源的标本，如三代头孢菌素使用于脑脊液中的肠杆菌，磺胺甲恶唑使用于尿道分离的细菌；③多种微生物感染；④多部位感染；⑤对A组抗生素过敏、耐受或无反应。⑥控制感染为目的。常规药敏试验选药原则C组替代性或补充性药物。①同一单位存在对一种或几种耐药的、广泛流行或局部流行的菌株；②对首选药物过敏；③治疗少见菌感染（氯霉素对沙门菌属肠道外菌株）；④控制感染为目的。U组仅用于或主要用于泌尿道感染的药物。O组为对该组细菌有临床适应证，但一般不允许常规试验并报告的药物。常规药敏试验选药原则我国主要遵循美国临床实验室标准化委员会（CLSI）制定的抗菌药物选择原则。U组：仅用于治疗泌尿道感染的药物。C组：在A、B组药物过敏或耐药时选用；B组：只在A组药物耐药、过敏、无效时选择性报告;A组：包括对特定菌群的常规试验并常规报告的药物；常规药敏试验选药原则选择性报告：——细菌对A组抗菌药物耐药时

——病人对A组抗菌药物过敏/不适

——多部位感染时常规药敏试验选药原则2.稀释法学习目标掌握稀释法的操作及结果判断微寄室方昕MIC（最低抑菌浓度）MBC（最低杀菌浓度）抗菌药物能抑制试验菌生长的最低浓度。

抗菌药物能杀灭试验菌的最低浓度。一、稀释法的概念以一定浓度的抗菌药物与培养基进行一系列不同倍数稀释，经培养后观察被试菌株的最低抑菌浓度，根据CLSI提供的MIC解释标准判断细菌对抗菌药物的敏感程度。稀释法中使用肉汤培养基为肉汤稀释法，使用琼脂培养基为琼脂稀释法。浓度4

8 163264128256μg/ml混

清抗菌药物素倍比稀释，接种菌105CFU/ml，孵育温度35℃，16～20h，判读结果。二、肉汤稀释法结果判别：

无可见细菌生长的药物最低浓度为该试验菌的MIC，从无菌生长的管中取液体菌种于血平板，经适宜条件培养过夜，无菌生长的药物最低浓度即为MBC.

药物浓度16

3264128256

μg/ml制备含对倍抗生素浓度梯度的平板，制备菌悬液，点种菌，