微生物检验技能-细菌的接种与培养

常用培养基制备知道细菌生长繁殖的条件知道细菌生长繁殖的方式和速度知道常用培养基的制备程序知道培养基的种类和用途学会正确制备培养基细菌生长繁殖的条件营养物质氢离子浓度(pH)：大多数病原菌pH7.2～7.6温度：病原菌最适生长温度37℃气体：氧气和CO2

细菌繁殖的方式和速度生长繁殖方式：无性繁殖方式，即二分裂。生长繁殖速度：多数细菌分裂一代需20～30min。结核分枝杆菌需18～20h。培养基培养基是指用人工方法，将细菌等微生物生长繁殖所需要的营养物质按比例混合，调节pH，高压灭菌而成的营养混合物。培养基培养基的用途：分离纯化微生物、扩增微生物、传代与保存微生物、鉴别微生物、研究微生物的生理生化特性、制造疫苗、菌苗或其他微生物制剂。培养基的主要成分及其作用营养物质：蛋白胨、肉浸液及牛肉膏、糖类、血液、鸡蛋与动物血清、无机盐、生长因子水分凝固物质：琼脂、明胶、卵白抑制剂：常用的有胆盐、煌绿等抑制革兰阳性菌生长；亚碲酸盐、四硫磺酸盐及多种抗生素等指示剂：为了观察细菌是否利用分解糖类、氨基酸等物质，常在某些培养基中加入一定种类的指示剂，如酚红、溴甲酚紫、中性蓝等常用酸碱指示剂培养基的分类

按物理性状分类液体培养基固体培养基半固体培养基

按用途分类基础培养基增菌培养基选择培养基鉴别培养基厌氧培养基基础培养基基础培养基含有基础生长所需的基本营养成分，最常用的是肉浸液，俗称肉汤，主要成分含牛肉浸液和蛋白胨。营养培养基最常用的是血琼脂平板、巧克力血平板等选择培养基鉴别培养基鉴别培养基鉴别培养基特殊培养基疱肉培养基、巯基乙醇酸纳培养基培养基的选择根据标本来源和可能存在的病原菌，确定选用各种分离培养基。伊红美蓝/麦康凯用于筛选革兰阴性杆菌。培养基的选择从血液、骨髓中分离病原菌用血液增菌培养基培养基的制备程序制备程序：调配、溶化、矫正pH、过滤澄清、分装、灭菌、鉴定7个主要步骤分装量：琼脂斜面分装量约为试管容量的1/4，斜面长度约为试管长度的2/3；液体培养基和半固体培养基为试管长度的1/3；琼脂平板平皿内径为9cm，倾注培养基13-15ml，若内径为7cm，倾注培养基7-8ml灭菌：高压蒸汽灭菌法最常用原料称量加热溶化水培养基培养基比色管酚红指示剂目视pH矫正pH矫正相同培养基蒸馏水过酸过碱标准比色管待测管培养基蒸馏水标准比色管待测管培养基蒸馏水标准比色管待测管培养基分装培养基的包扎培养基的包扎细菌生长繁殖的条件有哪些？叙述培养基的制备程序。简述培养基的种类及用途。细菌接种技术知道平板划线法、斜面、液体和半固体培养基等各种接种方法知道接种细菌用具、接种细菌的环境要求学会正确选择并使用接种细菌用具的方法明确各种培养基的用途细菌的人工培养无菌技术：是防止微生物进入物品或机体，同时防止被检物中可能存在病原微生物污染周围环境及工作人员的规范操作技术。进行无菌操作时应注意的问题：无菌室、无菌试管、接种环（针）、微生物实验室的管理、个人防护。细菌的接种工具接种与分离技术平板划线分离法：1.分区划线2.连续划线斜面接种法穿刺接种法液体培养基接种法倾注平板法涂布接种法细菌接种目的及方法平板划线接种法：目的：使混合的细菌呈单个分散生长，形成单个菌落，以获得纯菌。方法分区划线法：适用于含菌量较多的标本连续划线法：适用于含菌量较少的标本液体培养基接种法穿刺接种法：用于观察细菌动力斜面接种法倾注培养法：用于细菌计数简述细菌接种的基本方法。简述细菌各种接种方法的意义。如何做到无菌操作？细菌培养技术学会使用不同的方法培养细菌知道接种细菌用具、接种细菌的环境要求学会正确选择并使用接种细菌用具的方法知道细菌在各种培养基上的生长现象细菌培养方法一般培养（需氧培养）培养温度：35℃（采用恒温培养箱）培养时间：18～24h二氧化碳培养法：烛缸法、二氧化碳培养箱厌氧培养法：厌氧培养箱、厌氧袋、厌氧罐、疱肉培养法、硫乙醇酸盐法等恒温孵育箱恒温孵育箱恒温孵育箱二氧化碳培养箱厌氧罐厌氧袋厌氧手套箱细菌在平板上的生长现象菌落定义：指单个细菌在平板培养基上生长繁殖，形成单一肉眼可见的细菌集团。菌落特征：大小、形状、边缘、颜色、表面、透明度、湿润度、黏度、溶血性菌落类型：光滑型（S）、粗糙型（R）、黏液型（M）菌苔：指多个菌落融合在一起形成的细菌堆积物。菌落菌落与菌苔菌落菌落与菌苔菌落(S型)菌落(R型)混浊生长形成沉淀：多见于链状排列的细菌形成菌膜：多见于厌氧菌液体培养基生长现象菌膜对照沉淀浑浊液体培养基生长现象有鞭毛细菌：在培养基中沿穿刺线并向外扩散生长，穿刺线边缘模糊。无鞭毛细菌：只沿穿刺线生长，穿刺线边缘清晰。半固体培养基生长现象半固体培养基生长现象斜面培养基生长现象叙述细菌培养方法有哪些。简述细菌在各种培养基中的生长现象。从哪些方面描述菌落的性状？划线接种法平板划线接种法：目的：使混合的细菌呈单个分散生长，形成单个菌落，以获得纯菌。方法分区划线法：适用于含菌量较多的标本连续划线法：适用于含菌量较少的标本分区划线法分区划线法连续划线法分区划线法与连续划线法分区划线生长现象连