饲料中免疫球蛋白IgG的测定 高效液相色谱法 编制说明

《饲料中免疫球蛋白IgG的测定—高效液相色谱法》（公开征求意见稿）1 2 2 5 7 7 9 9 12 错误！未定义书签。8 18 12 2一、工作简况疫球蛋白IgG的测定——高效液相色谱法》标准修为国粮武汉科学研究设计院有限公司和山东新希望六和集团有限公司。本免疫球蛋白（immunoglobulin，IgG）是一种7S、分子质量160000u的蛋白质，是一类具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白，它普遍存在于哺乳动物的血液、组织液及外分泌液中，在动物体的营养代谢和生疫反应，从而发挥保护作用。当动物再次遇到相同的病原微生物侵袭时，免疫球蛋白能够快速产生，加速病原微生物的清除，从而提供更有效的免这使得免疫球蛋白能够有效地抵抗病原微生物的入侵和侵袭，保护动物免免疫球蛋白的应用范围特别广泛，可以提高畜产品的质量，增加其蛋白质含量和营养价值；可用于预防和治疗多种动物疾病，增强动物对疾病的免疫力，提高动物的抵抗能力；还可以减少动物对抗生素的依赖，有助于减少抗生素在畜牧业生产中的使用，降低抗生素残留对人体健康和环境3的影响，促进畜牧业的可持续发展；同时可以利用免疫球蛋白的特异性识饲料中，最主要的生物学特征就是与相应的抗原特异性结合，还有激活补体，促吞噬作用等功能和特征。免疫球蛋白在动物体内具有重要的免疫和生理调节作用，是动物体内免疫系统最为关键的组成物质之一。对于增强燥血浆蛋白粉免疫球蛋白（IgG）变化较大，从10～23%不等；鸡蛋粉免团有限公司接到国家标准修订任务后，为确保项目的顺利实施，成立标准起草小组，同时对标准起草工作进行分工，明确各自任务和职责，制定工4和文献资料，确立了标准修订的指导思想，形成了报告和标准草案，并修会，会上标准编制组介绍了对国内外相关分析方法的研究，标准修订的技术路线和技术难点，以及拟开展的主要工作等内容。与会专家认为标准安排合理并对具体技术路线提出建议，标准编制组经过充分交流，完善了标术资料的基础上，在参照国际和国外先进标准的基础上，结合目前的实际5准工作组进行了认真研究分析，并得以解决，完善了方法的准确性和可靠并有建议或意见的单位（专家）数份，没有回函的单位（专家）。纳条。根据专家意见对征求意见稿进行进一步修订。标准编制小组开展二、标准编制原则和主要技术内容确定的依据标准》的规定和要求编写标准全文。查阅了国内外相关标准，结合现行标6样品检测情况进行。主要修订包括，适用范围增加宠物饲料；明确流）；）；1No.1“本标准……”——GB/T21033－2007”23料4料5要求重新整理样品制67无238无94Pi――标准工作液峰面积值；Pst——试样峰面积值；w=A×Ps5无1血浆蛋白粉等）中免疫球蛋白IgG含量的测定。mm孔径的分析筛充分混匀,装入密闭容器中2血浆蛋白粉称取试样0.1g（精确至0.0001g）、浓缩乳清蛋白粉称取试样），正己烷的目的在于除去饲料样品中的油脂。本文选取猪浓缩饲料和猫粮料分别加入1mL正己烷和不加正己烷，进行对比实验测量免疫球蛋白IgG的含量，实验发现加入正己烷的待测液较不加入正己烷的待测液更为澄清，123己烷，能使待测液更为澄清，有效的去除饲料中的油脂，且对免疫球蛋白），4为得到最高的检测灵敏度，我们使用二极管阵列检测处进行紫外波段扫描采集三维光谱图（图4），从图4中可看出，IgG在280nm处有较大吸收，因此将紫外检测a）色谱柱：PharmaciaHI-TrapPrmol/L甘氨酸盐酸缓冲液，梯度洗脱条件50000000在上述确定的液相色谱条件下，分别取标准系列工作溶液和试样溶液上机测定。以保留时间定性，以IgG标准溶液的浓度为横坐标，色谱峰面积（响应值）为纵坐标，绘制标准曲线。IgG标准溶液的液相色谱图参见浓度为横坐标绘制标准曲线（如图6求回归方程和相关系数（如表6678选取空白虾饲料、乳猪配合饲料、观赏鱼饲料、猫粮、猫用风味剂和123456料9将12种饲料平行测定6次，完成重复性试验和不同方法测定结果的比较，结果见表8。由表8可知，12种饲料的相对标准差（RSD）为1.53%~4.50%，处于较低的水平，表明方法的重复性较好。考虑到实际检测中两样品名称IgG值（%或mg/kg）RSD(%)绝对偏差(%)123456平均值干燥血浆粉（%）29.3228.9829.5630.3628.3529.8729.412.386.83干燥血浆压片（%）25.8425.1226.4526.3525.4225.1925.732.255.17浓缩乳清蛋白（%）4.564.965.014.674.985.134.894.5011.66加州鲈配合饲料（mg/kg）35.3535.6736.6834.3436.4834.6535.532.665.71观赏鱼饲料（mg/kg）64.3762.9763.7565.6563.2462.9463.824.25虾料（mg/kg）43.1142.5444.6143.2442.4544.3743.392.104.98猫粮料（mg/kg）48.6746.6549.5647.8648.5649.5548.482.286.00猫用风味剂（mg/kg）102.33101.1399.54100.34101.55100.64100.930.972.76狗粮料（mg/kg）57.2355.0256.3557.6358.3256.4456.832.035.81狗用风味剂（mg/kg）83.6784.5682.6583.7885.5784.9684.203.47乳猪配合饲料（%）0.8210.8190.8020.8240.8140.8060.8142.70猪浓缩饲料（%）3.563.543.673.463.653.853.623.7410.77三、试验验证分析报告，技术经济论证，预期的经济效果1．试验验证分析报告2025年1月，标准编制小组委托xx三家单位完成本标准的复核验证法》规定的方法测定饲料中免疫球蛋白IgG准要求，能满足配合饲料、浓缩饲料、宠物饲料和含IgG饲料原料（包括畜牧动物免疫球蛋白具有免疫功能、结构多样性、免疫记忆和选择性吸收等独特特点，并且具有广泛的应用价值。通过应用畜牧动物免疫球蛋白，可以预防和治疗畜牧动物疾病、提高畜产品质量，促进畜牧业可持续发展。在未来，随着科技的进步和研究的深入，畜牧动物免疫球蛋白的应四、与国际、国外同类标准技术内容的对比情况，或者与测试的国外样品、样机的有关数据对比情况比较项目本文件GB/T5009.194-2003(现行有效）HiTrap™ProteinGHPColumns（美国GE）Agilent凝胶过滤色谱法适用范围配合饲料、浓缩饲料、宠物饲料和含IgG饲料原料（包括血浆蛋白粉保健食品血液制品血液制品方法二元梯度洗脱二元梯度洗脱二元梯度洗脱二元梯度洗脱色谱柱免疫亲和柱IgG柱免疫亲和柱IgG柱免疫亲和柱IgG柱ZORBAXGF-250和GF-450凝胶过滤色谱柱特异性IgG二聚体和聚合物五、采标情况，以及是否合规引用或采